寻常性银屑病患者皮损中Caspase-3和bcl-xL的表达

目的 探讨Caspase-3和bcl-xL在银屑病皮损中的表达及意义。方法 采用免疫组化法对26例寻常性银屑病患者的皮损及其周边外观正常皮肤和10例正常人对照皮肤中Caspase-3和bcl-xL的表达进行了检测。结果 正常人对照皮肤、银屑病皮损及其周边外观正常皮肤的表皮均表达Caspase-3,其中皮损处的表达明显增强(P<0.0001);除皮损表皮中散在表达bcl-xL外,正常人对照皮肤、银屑病皮损周边外观正常皮肤的表皮中不表达bcl-xL。结论 Caspase-3和bcl-xL可能通过诱导银屑病皮损角质形成细胞的凋亡而参与了银屑病的发病。     

蛋白激酶Cζ在银屑病发病中的意义

目的 探讨蛋白激酶Cζ在银屑病发病中的作用.方法 通过原位杂交和免疫组化的方法,研究了12例寻常型银屑病患者皮损区、非皮损区和5例正常人表皮中蛋白激酶Cζ的mRNA和蛋白的表达及分布特点.结果 银屑病皮损区表皮中PKCζ的mRNA和蛋白表达均较非皮损区和正常表皮中的表达明显增强,正常人表皮中PKCζ的mRNA表达分布于表皮上层,而银屑病皮损区PKCζ的mRNA表达几乎分布于表皮全层.结论 PKCζ在银屑病表皮中的过表达提示,PKCζ可能与银屑病表皮细胞的过度增殖相关.     

银屑病患者皮损表皮细胞促凋亡分子PDCD5表达的研究

目的 探讨银屑病患者表皮细胞过度增殖与细胞凋亡分化调节异常的关系.方法 寻常性银屑病患者30例,正常人对照28例.采用直接免疫荧光观察促凋亡分子PDCD5的表达状态,流式细胞仪和计算机CELL Quest软件定量分析表皮单细胞表达PDCD5的平均荧光强度和阳性率,逆转录聚合酶链反应方法检测表皮细胞表达PDCD5 mRNA的变化.结果 银屑病患者皮损增生的表皮组织细胞内PDCD5蛋白的表达明显降低,表皮单细胞表达PDCD5促凋亡分子的平均荧光强度和阳性率较正常人显著降低(P<0.01),皮损组织细胞表达PDCD5 mRNA显著低于正常人.结论 银屑病患者局部皮损表皮细胞的过度增殖与促凋亡分子PDCD5表达的下调有关,与表皮细胞的凋亡及终末分化过程的调节异常密切相关.     

银屑病患者皮损中磷脂酰肌醇3激酶过表达

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3激酶)与银屑病发病的相关性。方法 应用点杂交、原位杂交和免疫组化的方法,分析了12例寻常型银屑病患者皮损区和5例正常人表皮中PI3激酶表达分布特点。结果 银屑病皮损中PI3激酶mRNA和蛋白的表达较正常人皮肤明显增强,银屑病患者与正常人皮肤中PI3激酶基因与蛋白的表达一致。结论 银屑病皮损中PI3激酶过表达可能与银屑病角质形成细胞的过度增殖相关。     

寻常型银屑病患者皮肤中诱生型一氧化氮合酶、核因子-κBp65表达及其临床意义

目的 研究诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA、iNOS和核因子(NF)-κBp65蛋白在寻常型银屑病患者皮肤中的表达。方法 用原位杂交和免疫组化的方法检测了20例寻常型银屑病患者皮损区、非皮损区和12例正常人表皮中iNOSmRNA、iNOS和NF-κBp65蛋白的表达和分布;用银屑病面积和严重程度指数计分法评定患者的临床病情程度。结果 ①寻常型银屑病患者皮损区表皮中iNOSmRNA和iNOS蛋白表达均较非皮损区和正常人表皮中的表达明显增强(P<0.01),正常人表皮中仅少部分基底层有微弱表达,而寻常型银屑病患者皮损区的表达为基底层全层和棘层局灶性表达。②寻常型银屑病患者皮损中有一致性的iNOS和NF-κBp65高表达,两者表达水平呈显著正相关(P<0.01)。③寻常型银屑病患者皮损中iNOSmRNA的表达水平与相应患者的PASI计分呈显著正相关(P<0.01)。结论 ①寻常型银屑病患者皮损中有iNOS和NF-κBp65的高水平表达。②活化的NF-κB可能参与了寻常型银屑病的病理过程,高水平的iNOS表达可能导致了NF-κB的活化。③寻常型银屑病患者皮损中iNOS的表达水平与临床病情呈正相关。     

Ⅰ型转谷酰胺酶在银屑病皮损中的检测

目的 应用免疫组化技术原位检测型转谷酰胺酶在正常人及银屑病患者皮损内的分布,以期对本病角朊细胞的异常增殖有进一步的了解。方法 取银屑病患者遮盖部位皮损与正常人同部位皮肤作冰冻切片,以鼠抗人型转谷酰胺酶单克隆抗体为一抗,过氧化物酶标记的羊抗鼠抗体为二抗,AEC为反应底物。结果 正常人阳性区仅见于表皮角朊细胞颗粒层细胞间。银屑病皮损分布于除基底层外的表皮全层,着色程度以颗粒层最强,向棘层扩散但强度渐弱。与正常对照有显著性差异(P<0.01)。结论 型转谷酰胺酶在银屑病皮损中过早、过度表达。维A酸对该酶表达的抑制可能是其治疗银屑病的可能机理之一。     

角质形成细胞生长因子及神经细胞生长因子在银屑病患者皮损中的表达

目的 探讨角质形成细胞生长因子(KGF)及神经细胞生长因子(NGF)与银屑病的关系及银屑病皮损中间质细胞与角质形成细胞的相互作用。方法 应用免疫组化技术分别检测33例银屑病患者皮损、8例非皮损和13例正常人皮肤中KGF、KGF受体、NGF、NGF受体的表达。结果 KGF、KGF受体在银屑病患者基底层和棘细胞下层有极强的表达,与非皮损组及正常对照组间差异有显着性(P<0.05),而非皮损组与正常对照组间差异无显着性(P>0.05).KGF、KGF受体在真皮层未见表达。NGF、NGF受体则主要表达在颗粒层和棘细胞上层,皮损组与非皮损组之间及非皮损组与正常组之间均差异有显着性(P<0.05)。结论 银屑病患者皮损中KGF及NGF可能介导了角质形成细胞的增殖与分化不全;银屑病皮损中存在着间质细胞和角质形成细胞相互作用的紊乱。     

寻常性银屑病患者皮损中维A酸受体αmRNA的表达

目的 探讨维A酸受体αmRNA在寻常性银屑病皮损中的表达状况。方法 应用RT-PCR方法检测20例寻常性银屑病患者皮损部位和10例正常人表皮中维A酸受体αmRNA的表达情况。结果 维A酸受体αmRNA的表达在寻常性银屑病表皮中较正常人低,且差异有显著性(P<0.01)。结论 维A酸受体αmRNA的表达降低可能和银屑病发病有关。     

寻常性银屑病皮损中神经生长因子受体P75NTR和TrkA的表达

目的 探讨神经生长因子受体P75^NTR和TrkA在寻常性银屑病发病机制中的作用。方法 应用原位杂交和免疫组化技术对38例寻常性银屑病患者(进行期21例,静止期17例)皮损区、非皮损区及10例正常人皮肤组织中P75^NTR和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平进行检测。结果 与正常人比较,寻常性银屑病皮损及非皮损区P75^NTR和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平明显上调,且皮损中的表达明显高于非皮损区(P<0.01);进行期患者皮损与非皮损区P75^NTR和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平分别高于静止期(P<0.01)。结论 神经生长因子受体P75^NTR和TrkA mRNA及蛋白水平在进行期、静止期寻常性银屑病皮损及非皮损区的不同表达,提示神经生长因子可能参与了银屑病的发病。     

CD28/B7在银屑病皮损及外周血淋巴细胞中的表达

目的 探讨CD28/B7共同刺激分子在银屑病发病中的作用。方法 采用免疫组化ABC法检测22例银屑病皮损、流式细胞仪检测17例银屑病外周血淋巴细胞CD28、CD80、CD86的表达水平。15例整形外科手术患者的皮肤和外周血作为正常人对照。结果 免疫组化结果显示银屑病组皮损中CD28、CD80、CD86的表达明显增多,与正常人对照组相比差异均有显著性(P<0.01);进行期皮损中的表达显著高于静止期,差异均有显著性(P<0.05)。流式细胞仪检测显示CD28、CD80、CD86在银屑病组外周血淋巴细胞中的表达明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01);进行期组与静止期组相比,CD28差异无显著性(P>0.05),CD80与CD86差异有显著性(P₁<0.01,P₂<0.05)。结论 CD28、CD80、CD86在银屑病发展过程中起一定作用。     

Vitamin D analog calcipotriol suppresses the Th17 cytokine-induced proinflammatory S100 "alarmins" psoriasin (S100A7) and koebnerisin (S100A15) in psoriasis

The antimicrobial peptides (AMP) psoriasin (S100A7) and koebnerisin (S100A15) are differently induced in psoriatic skin. They act synergistically as chemoattractants and "alarmins" to amplify inflammation in psoriasis. Th17 cytokines are key players in psoriasis pathogenesis and vitamin D analogs feature anti-psoriatic effects; both of these activities could be mediated through epidermal AMP regulation. We show that supernatants of cultured psoriatic T cells induce and release psoriasin and koebnerisin from keratinocytes and the Th17 cytokines IL-17A, tumor necrosis factor-α, and IL-22 differently regulate psoriasin and koebnerisin reflecting their distinct expression pattern in normal and psoriatic skin. IL-17A is the principal inducer of both S100 and their expression is further amplified by cooperating Th17 cytokines in the micromilieu of psoriatic skin. Increased extracellular psoriasin and koebnerisin also synergize as "alarmins" to prime epidermal keratinocytes for production of immunotropic cytokines that further amplify the inflammatory response. Treatment of psoriatic plaques with the vitamin D analog calcipotriol interferes with the S100-mediated positive feedback loop by suppressing the increased production of psoriasin and koebnerisin in psoriatic skin and their Th17-mediated regulation in epidermal keratinocytes. Thus, targeting the S100-amplification loop could be a beneficial anti-inflammatory approach in psoriasis and other inflammatory skin diseases.     

Detection of psoriasin/S100A7 in the sera of patients with psoriasis

Background  Psoriasis is a disease of dysregulated inflammation and epithelial hyperproliferation in the skin, involving both the innate and adaptive immune system. Psoriatic keratinocytes express high levels of psoriasin (S100A7), a small calcium-binding protein.
Objectives  To determine if patients with active psoriasis have elevated serum levels of psoriasin and psoriasin-specific autoantibodies.
Methods  Blood was collected from 14 patients with psoriasis vulgaris at the start of narrowband ultraviolet (UV) B therapy and from 11 of these patients every 2 weeks during the course of the UVB treatment. Patient and control sera were tested for psoriasin antigen levels by sandwich enzyme-linked immunosorbent assay, and for psoriasin autoantibody titres using recombinant purified psoriasin and overlapping peptides.
Results  We confirmed strong and specific expression of psoriasin in psoriatic epidermis by immunohistochemistry. Systemic psoriasin antigen levels tended to be lower in patients (mean 213 ng mL⁻¹) than in controls (mean 331 ng mL⁻¹, P  =   0·308) and decreased with increasing disease severity. Psoriasin-specific autoantibodies were detected in a subset of patients with psoriasis and healthy normal donors (mean 0·347 vs. 0·255 units, P  =   0·246). The epitopes recognized by the autoantibodies were mapped to an external loop domain of the molecule but did not show corresponding T-cell immunogenicity.
Conclusions  Although psoriasin is overexpressed in psoriatic skin lesions, systemic levels of psoriasin tended to be lower with increasing disease severity, which may be due to the presence of psoriasin-specific autoantibodies. Neither psoriasin nor psoriasin-specific autoantibodies appear to be promising serum biomarkers for clinical psoriasis.     

银屑病患者皮损中转化生长因子-β1及受体基因表达的研究

目的 研究银屑病患者皮损及非皮损处转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子β受体(TGF-βRⅡ)及CD105的基因(mRNA)表达,并初步探讨其临床意义。方法 采用异硫氰酸胍法抽提皮肤组织中的RNA;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测皮肤组织中mRNA的表达。结果 银屑病患者皮损组织TGF-β1及TGF-βRⅡmRNA的表达均低于非皮损组织及正常人(P<0.05);非皮损组织及正常人皮肤组织中mRNA的表达量差异无显著性(P>0.05)。而银屑病皮损组织CD105的mRNA表达量高于非皮损组及正常人(P<0.05);非皮损组织和正常人皮肤组织比较P>0.05。结论 银屑病皮损中TGF-β1及TGF-βRⅡ表达降低和CD105的表达上调可能与银屑病的表皮过度增殖及真皮炎症细胞浸润有关。     

银屑病患者角质形成细胞凋亡以及维A酸与榄香烯的影响

目的 探讨银屑病患者角质形成细胞凋亡以及维A酸与榄香烯对体外培养的角质形成细胞凋亡的影响.方法 用TUNEL法测定28例银屑病患者角质形成细胞凋亡;流式细胞仪和DNA片段化观察维A酸与榄香烯对体外培养的角质形成细胞凋亡的影响.结果 28例银屑病患者中19例有大量凋亡细胞分布于表皮各层,另9例较少,分布于棘细胞层和颗粒层.浓度为1、5、10、20μg/mL的维A酸和浓度为20、40、60、80μg/mL的榄香烯可促进人角质形成细胞株Colo16细胞凋亡.结论 银屑病患者角质形成细胞凋亡异常增多,一定浓度的维A酸与榄香烯可在实验室内促进人角质形成细胞株Colo-16细胞凋亡.     

银屑病皮损内酪氨酸蛋白激酶活性的初步研究

目的 探讨酪氨酸蛋白激酶(TPK)在银屑病表皮异常增生中的作用。方法 通过外源性底物磷酸化的方法,测定银屑病进行期皮损角质形成细胞的TPK活性。结果 ①银屑病进行期皮损角质形成细胞基础TPK活性显著增高,且对于转化生长因子-α的刺激,反应性明显增强;②增高的基础TPK活性与角质形成细胞膜表皮生长因子受体的表达量呈明显正相关;同时银屑病角质形成细胞表皮生长因子受体的自磷酸化水平亦显著增高。结论 TPK活性增高,以及对有丝分裂信号刺激的反应增强,可能在表皮的增生中起到重要作用,TPK活性的改变可能主要是由于表皮生长因子受体的表达异常所致,表皮生长因子受体可能在银屑病表皮的异常增生中发挥着重要作用。     

周期蛋白依赖激酶抑制因子p21WAF1/CIP1在银屑病表皮中高表达

目的 探讨p21^WAF1/CIP1与银屑病发病的关系.方法 通过核酸杂交和免疫组织化学的方法检测了12例斑块型银屑病和5例正常人表皮中p21^WAF1/CIP1的表达.结果 银屑病表皮中p21^WAF1/CIP1的表达位于表皮全层, 较正常表皮明显增强, 正常人表皮中其表达位于表皮上部.结论 p21^WAF1/CIP1可能与正常表皮细胞的分化关系更密切, 在银屑病表皮细胞的异常分化调节中可能发挥作用.     

Examination of Bcl-2, Bcl-X and bax protein expression in psoriasis

BACKGROUND: Psoriasis is an inflammatory skin disease characterized by epidermal hyperplasia and greatly accelerated epidermal turnover. The blockage of normal apoptotic process in the epidermis is one of the factors implicated in the pathogenesis of psoriasis. OBJECTIVE: The purpose of the present study was to elucidate whether bcl-family proteins are significantly involved in the hypothetical antiapoptotic cascade in lesional psoriatic epidermis. METHODS: Twenty-six lesional biopsy samples of 26 patients with psoriasis and five control specimens from normal skin were studied by immunohistochemical method for the differential expression of pro-apoptotic bax and antiapoptotic bcl-2 and bcl-x proteins. RESULTS: Compared with the normal epidermis, bcl-2 expression was significantly reduced, whereas bax and bcl-x were significantly overexpressed in the psoriatic epidermis. The localization of bcl-2/bax/bcl-x proteins in the psoriatic epidermis did not show a significant deviation from that in the normal epidermis. CONCLUSION: These findings indicate a discordant expression of bcl-2 and bax/bcl-x in psoriatic epidermis. Increased bcl-x expression might contribute to the antiapoptotic response in psoriatic keratinocytes. The presence of strong bax expression with a concomitant decrease in bcl-2 expression suggests either a functional defect in bax protein or an inherent/acquired resistance to bax-mediated apoptosis in psoriatic keratinocytes.     

Patched-1和Gli-1在银屑病皮损中的表达

目的 探讨Patched-1、Gli-1在银屑病皮损中的表达。方法 应用免疫组化和原位杂交的方法,检测银屑病皮损及正常人皮肤中Patched-1、Gli-1的表达和分布情况。结果 在银屑病皮损中Patched-1表达高于正常人皮肤(免疫组化χ²=6.53,P<0.05;原位杂交χ²=7.93,P<0.05),Gli-1表达显著高于正常人皮肤(免疫组化χ²=19.21,P<0.01;原位杂交χ²=14.34,P<0.01),主要分布于表皮细胞胞浆中,在毛囊、浸润的炎细胞及血管内皮细胞中也有阳性表达。结论 银屑病皮损表皮中Patched-1和Gli-1均处于高表达状态,Hedgehog信号转导通路可能在银屑病发病中起一定作用。