皮肤组织工程的现状与展望

目的 了解皮肤组织工程的现状.方法 参阅国内外相关文献,就组织工程化皮肤的分类及研究现状、存在问题和发展的方向做一综述.结果 组织工程化皮肤在治疗烧伤和慢性溃疡上取得了一定成效,但目前仅能作为暂时性的皮肤组织替代物使用,其外形、韧性和机械性能以及皮肤屏障功能、免疫功能、物质交换和能量交换等方面仍距正常皮肤有较大的差距.结论 支架材料的研制是皮肤组织工程研究的难点和关键,组织工程化皮肤是解决大面积皮肤缺损的根本方法,组织工程化皮肤有着广阔的研究和临床应用前景.     

组织工程皮肤的临床研究进展

组织工程皮肤是通过在体外培养扩增大量的功能细胞,复合到支架材料,通过细胞与支架的相互作用,诱导、生长形成三维的有活性的皮肤替代物.组织工程皮肤在一定程度上克服了原有的皮肤供区不足、免疫排斥、传播疾病等各种问题,为急性或慢性皮肤损伤提供了全新的治疗理念,具有远大的开发前景.本文就组织工程皮肤的分类及其临床应用作一综述.     

组织工程化皮肤的研究现状与展望

通过查阅近年来国内外组织工程化皮肤相关的研究,综述组织工程化皮肤研究领域中的现状与进展。广泛查阅国内外有关组织工程化皮肤研究的文献,着重阐述表皮替代物、真皮替代物及表皮真皮复合皮片的研究现状和进展。组织工程是再生医学研究的热点,组织工程化皮肤是组织工程迄今为止最成功的产品之一,现已广泛应用于临床。这篇文章从表皮替代物、真皮替代物及含有表皮和真皮复合皮片结构的皮肤替代物等方面对该领域的最新研究现状和进展进行综述,并探讨了组织工程化皮肤的应用情况,分析了组织工程化皮肤目前存在的问题及未来的发展方向。组织工程化皮肤及其在患者身上的应用已经成为现实,随着组织工程技术的快速发展,我们可以获得与正常皮肤功能特征相似的理想的组织工程化皮肤。     

ES细胞源表皮样干细胞与胶原海绵体外构建组织工程化皮肤

【目的】 探讨以ES细胞源表皮样干细胞构建组织工程皮肤的方法，为构建新的组织工程皮肤奠定基础。【方法】 先把成纤维细胞放置于胶原海绵真皮支架内，体外培养2d，再放置ES细胞源表皮样干细胞，体外培养3d，观察其形态和进行免疫组化检测。【结果】 成纤维细胞与ES细胞源表皮样干细胞均在真皮支架内黏附，免疫组化表明ES细胞源表皮样干细胞仍呈Bl整合素强阳性和CK15、CK19阳性。【结论】 结果提示ES细胞源表皮样干细胞在体外构建的组织工程化皮肤内仍维持未分化状态。     

ES细胞源表皮样干细胞与胶原海绵体外构建组织工程化皮肤

 【目的】 探讨以ES细胞源表皮样干细胞构建组织工程皮肤的方法，为构建新的组织工程皮肤奠定基础。【方法】 先把成纤维细胞放置于胶原海绵真皮支架内，体外培养2d，再放置ES细胞源表皮样干细胞，体外培养3d，观察其形态和进行免疫组化检测。【结果】 成纤维细胞与ES细胞源表皮样干细胞均在真皮支架内黏附，免疫组化表明ES细胞源表皮样干细胞仍呈Bl整合素强阳性和CK15、CK19阳性。【结论】 结果提示ES细胞源表皮样干细胞在体外构建的组织工程化皮肤内仍维持未分化状态。     

组织工程化血管支架材料的研究进展

体外组织工程的主要限制是缺乏足够的血管系统,探索组织工程化血管支架材料,为新生血管细胞的生长提供支持和3D生长空间成为构建组织工程化血管研究的关键。组织工程化血管支架材料分为天然生物支架材料,人工合成高分子材料,复合材料和纳米材料等。其中天然生物材料与细胞的相容性强,但存在一定的免疫反应,合成高分子材料生物力学性能好,但与细胞的相容性差。利用纳米技术将多种材料交联,构建混合基质血管支架材料,即血管复合支架材料的研究成为热点。     

人工皮肤的临床治疗研究进展

近 2 0年来随着组织工程学的建立和形成 ,组织工程的研究正成为生命科学研究领域的焦点之一 ,而组织工程皮肤产品开发的成功 ,使人工皮肤的研究实现了质的飞跃 ,它是由活性细胞接种在支架材料上形成的组织工程化皮肤 ,有真皮层或同时具有表皮层和真皮层 ,因此是一种活性生物敷料[1] 。在国外人工皮肤的研究较多 ,部分已形成产品应用于临床 ,现就其临床应用情况综述如下。1　Ａｐｌｉｇｒａｆ它是由Ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ公司生产的第一个商品化的真正的组织工程产品 ,为具有表皮层及真皮层双层结构的皮肤替代物 ,开始称为 ｇｒａｆｔｓ…     

同种异体骨髓基质细胞移植修复兔膝关节骨软骨缺损

目的 探讨同种异体骨髓基质细胞(BMSCs)作为种子细胞在软骨组织工程中的应用.方法 同种异体BMSCs与丝素蛋白-异体松质骨共培养构建组织工程化骨软骨复合体,移植修复兔膝关节骨软骨缺损,术后2、4、12周取材,行组织学观察及Ⅱ型胶原、Brdu免疫组化染色.结果 BMSCs能在丝素蛋白和松质骨支架上较好的黏附、生长,共培养后成功地构建了组织工程化骨软骨复合体;体内移植后生成透明软骨样组织并修复了骨软骨缺损.结论 同种异体BMSCs可作为软骨组织工程的种子细胞,丝素蛋白-松质骨双相支架负载同种异体BMSCs可用于骨软骨缺损的修复.     

以临床应用为目标加强软骨与骨组织工程基本问题研究

组织工程学近年来有很大的进展。目前 ,应用组织工程技术已成功地培育出人耳廓、人工肌腱及具有人指 (趾 )骨及指(趾 )间关节结构与外形的复合组织等 ,为组织工程化产品的临床应用展示了良好的前景[1,2 ] 。组织工程学的研究主要包括种子细胞、支架材料、细胞 支架复合体体外构建与培育三个方面。种子细胞研究涉及来源的选择、体外大量扩增、表型诱导与维持及移植免疫等。支架材料研究则是根据不同组织和器官组织工程制备技术的需要 ,进行其三维支架的制备工艺设计及结构与性能优化。细胞 支架复合体体外构建与培育是组织工程研究的核心内…     

人工生物可降解支架聚乳酸-聚乙醇酸种植人食管上皮细胞的实验研究

目的研究人食管上皮细胞在聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)三维支架上的贴附和生长情况,利用组织工程技术培养工程化人工食管.方法制作PLGA三维细胞支架;分离培养成人食管上皮细胞,体外扩增后种植到PLGA支架上.在体外和裸鼠体内分别培养食管上皮细胞-支架复合物,分期终止培养,进行组织学染色、扫描电镜、细胞角蛋白免疫组织化学检测.结果体外培养发现,人食管上皮细胞在支架材料上贴附生长良好,长期培养仍保持食管上皮细胞特性,裸鼠体内培养4周后可形成食管黏膜样组织.结论 PLGA支架适合食管上皮细胞黏附生长,可作为食管组织工程的细胞载体.利用组织工程的方法可获得适于移植的工程化人工い食管.     

灌注速率对成纤维细胞在三维支架中生长和胶原合成的影响

为了降低工程化组织体外构建过程中的传质限制,采用自行研制的灌注生物反应器系统,以人皮肤成纤维细胞为模型细胞,以PET(Poly(ethylene terephthalate))为三维支架,构建工程化真皮组织,考察灌注速率对成纤维细胞生长和胞外基质合成的影响。将人皮肤成纤维细胞灌注接种于PET支架,分别以0.02、0.2、0.8 cm/min的灌注速率培养18 d。结果表明,灌注培养能促进细胞增殖,提高细胞在3D支架中均匀分布;与静态培养和0.02 cm/min的灌注速率相比,在0.2 cm/min和0.8 cm/min的灌注速率下进行培养,提高了细胞的葡萄糖比消耗速率,刺激细胞合成和分泌更多的胶原基质,但增加了流失到培养液中胶原的比例,灌注培养是体外构建工程化真皮组织的有效方法。     

利用PLGA细胞支架再生人关节软骨的实验研究

目的：研究人关节软骨细胞在PLCA三维支架上的贴附和生长情况，利用组织工程技术培养工程化关节软骨。方法：制作PLGA三维细胞支架。分离培养成人关节软骨细胞，体外扩增后种植到PLGA支架中。在体外和裸鼠体内分别培养软骨细胞一支架复合物，分期终止培养，进行组织学染色、扫描电镜、Ⅱ型胶原免疫组织化学及cDNA探针原位杂交检测。结果：体外培养发现，软骨细胞支架材料内贴附生长良好，长期培养仍保持软骨细胞特性，棵鼠体内培养8周后可形成软骨样组织。结论：PLGA三维支架适合软骨细胞贴附生长和分泌软骨外基质，可作为软骨组织工程的细胞载体。利用组织工程的方法可获得适于移植的工程化关节软骨。     

肌腱修复的组织工程研究进展

对于肌腱缺损,传统的手术方法虽然可以减轻患者的痛苦,但是其功能重建并不乐观。随着肌腱组织工程的发展,用工程化肌腱来修复肌腱缺损正在成为一个新兴的治疗方法。目前,组织工程肌腱的研究涉及种子细胞、支架、生长因子和改进策略等各方面。组织工程化肌腱临床应用的关键是如何模拟体内环境,在体外成功构建肌腱组织。因此,在体外模拟体内环境进行组织工程的构建是未来的研究方向之一。     

医用聚氨酯多孔支架的制备及其与细胞共培养的研究

随着组织工程和再生医学的日益发展,工程化组织和器官的构建越来越受到关注.构建具有良好生物学性能的组织工程支架是此领域研究中的难点.聚氨酯(polyurethane,PU)具有优良的韧性、弹性、热稳定性和低毒性等,近60年来已被广泛应用于医学领域,如人工心脏瓣膜、人工皮肤、烧伤敷料、缝线、各种夹板、人工血管、牙科材料以及计划生育用品等[1].随着现代科技的不断进步和医用材料的逐渐开发,组织工程的目标也从单纯的缺损替代发展到组织结构与功能的双重修复,因此,具有合适的内部孔隙结构、能诱导细胞和组织生长和功能分化的PU多孔支架得到了更广泛的关注.本文就PU多孔支架的制备方法及其在细胞培养和组织修复中的应用作一概述.     

以表皮细胞及脱细胞真皮构建组织工程皮肤

目的 体外扩增培养表皮细胞，复合脱细胞真皮构建组织工程皮肤，以促进其进一步临床应用。方法 将人表皮细胞进行体外培养扩增后，以生长良好的表皮细胞接种于制备好的异种（猪）无细胞真皮支架上，行气液界面联合体外培养，构建组织工程皮肤。观察细胞生长情况及复合皮结构。结果 培养的表皮细胞扩增良好，脱细胞真皮支架去细胞完全，表皮细胞在脱细胞真皮上可以生长，可体外构建复合皮肤。结论 利用体外扩增的表皮细胞及制备的脱细胞真皮可体外联合构建具有复层结构的组织工程皮肤。     

黑色素细胞与骨髓间充质干细胞复合构建组织工程化皮肤

目的 探讨构建含有黑色素细胞组织工程化皮肤的方法.方法 从人包皮组织中获取黑色素细胞,从人骨髓中获取骨髓间充质干细胞(BMSCs),以二者为种子细胞,按照1:10的比例混和培养,并与I型胶原膜复合体外构建组织工程化皮肤,对裸鼠创面进行修复.通过大体标本观察、4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)体内示踪标记、HE染色、免疫组织化学检测及透射电镜观察等方法,观察组织工程化皮肤修复裸鼠皮肤创面缺损及黑色素细胞的分布情况.结果 裸鼠创面皮肤生长良好,DAPI体内示踪标记、免疫组织化学检测S-100蛋白及透射电镜观察可以发现黑色素细胞以正常的组织结构形式分布于创面皮肤.结论 黑色素细胞与BMSCs通过适当的比例及体外条件培养,与I型胶原膜复合可以在体外构建出具有黑色素细胞的组织工程化皮肤.     

组织工程技术在泌尿道修复重建中的研究应用

各种疾病导致的泌尿道组织器官结构或功能的丧失是泌尿外科常见的问题,其治疗一直是泌尿外科的难题。组织工程技术的兴起给泌尿道组织器官的修复与重建带来了新的希望,其技术路线包括支架材料的研制、种子细胞的培养、细胞与支架材料的相互作用以及工程化泌尿道组织的构建等。本文就组织工程技术在泌尿道修复重建中的研究与应用作一综述。     

整合素与表皮干细胞

皮肤是人体最大的器官 ,表皮位于皮肤最外层 ,是能够自我更新的组织 (约每个月更新 1次 ) [1 ] 。基底层的表皮干细胞(keratinocytestemcell ,KSC)作为组织特异性干细胞 ,具有强大的增殖能力 ,是表皮中各类细胞的起源。近年来 ,由于组织工程化皮肤、皮肤遗传性疾病病因及肿瘤的     

肌腱组织工程的研究进展

由于肌腱的特殊结构与功能,使得肌腱缺损后的治疗成为困扰临床医师的一大难题。近年来,组织工程的迅速发展让学者们找到了新的研究方向。随着种子细胞、支架材料、力学特性研究逐步深入,组织工程化肌腱的体外构建及体内应用亦随之日趋成熟,使其有望成为临床肌腱缺损修复最为理想的替代物。     

应用胶原蛋白构建组织工程皮肤的实验研究

目的 探讨以胶原蛋白为支架构建组织工程皮肤的体外培养理想方法.方法 体外分离、培养、鉴定角朊细胞和成纤维细胞;利用本室自制胶原蛋白,制备胶原凝胶和胶原海绵两种组织工程支架;在成功构建人工真皮的基础上,种植角朊细胞,构建人工复合皮肤,并进行组织学及免疫组化检查.结果 制备的胶原海绵孔径平均100～150μm,孔隙率89%,组织相容性良好;两种皮肤替代物免疫组化染色显示Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白(FN)和层粘连蛋白(Laminin)阳性,HE染色可见均具有表皮和真皮双层结构,厚度约3mm,在形态结构上与正常皮肤相似.结论 培养的人角朊细胞和成纤维细胞种植于胶原蛋白支架上气-液界面培养可构建出具有类似天然皮肤结构的组织工程皮肤.