牛蒡苷元氨解衍生物的合成及其抗肿瘤活性研究

目的：牛蒡苷元属于木脂素类化合物,水溶性差,故以牛蒡苷元为先导化合物进行结构修饰,改善其水溶性,进而提高生物度,方便制剂、扩大牛蒡苷元的临床应用范围。方法：采用丙胺与牛蒡苷元在室温下发生氨解反应,通过重结晶方法制备氨解衍生物。采用5种人癌细胞株对氨解衍生物进行抗肿瘤活性研究。结果：合成得到牛蒡苷元氨解衍生物,操作简单,后处理容易,收率较高,并且衍生物的溶解性高于牛蒡苷元。对牛蒡苷元与氨解衍生物进行抗肿瘤活性研究表明氨解衍生物的活性低于牛蒡苷元。结论：牛蒡苷元氨解衍生物的最佳合成条件为：牛蒡苷元与丙胺的质量体积比为1∶0.05,室温反应24 h,收率为64%。经活性研究表明牛蒡苷元的内酯环是抗肿瘤活性关键基团。     

α-甘露糖苷酶研究进展

N-糖基化是机体蛋白质翻译后的一种重要的修饰过程。蛋白质N-糖基化生物过程和相关的许多酶主要定位于胞浆内质网和高尔基体。α-甘露糖苷酶是一种参与糖蛋白合成和代谢的重要蛋白酶，它的功能是修剪N-聚糖中的甘露糖。本文重点介绍α-甘露糖苷酶的分类、在体内参与糖蛋白的成熟和降解过程，以及α-甘露糖苷酶基因突变可导致的相关疾病。     

小鼠3种α1,2岩藻糖转移酶的底物特异性

目的对比小鼠3种GDP岩藻糖:β半乳糖苷α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-FT)的底物特异性.方法利用RT-PCR方法克隆小鼠3种α1,2-FT基因编码区MFUT-Ⅰ、MFUT-Ⅱ、MFUT-Ⅲ,测序后分别将其插入表达载体pcDNA3.1的多克隆位点,构建表达载体pcDNA3.1-MFUT-Ⅰ、pcDNA3.1-MFUT-Ⅱ及pcDNA3.1-MFUT-Ⅲ;采用磷酸钙法将其转染于COS-7细胞进行表达,通过检测3种酶对不同种底物特性比较酶的特异性.结果小鼠基因MFUT-Ⅰ、MFUT-Ⅱ、MFUT-Ⅲ分别与人类H基因(77%)、Se基因(79%)和Sec1基因(75%)具有序列同源性.MFUT-Ⅰ和MFUT-Ⅱ基因转染后的COS-7细胞均具有α1,2-FT活性,而MFUT-Ⅲ基因转染的COS-7细胞无此活性.MFUT-Ⅱ同时对底物缺乏唾液酸的神经节苷脂(GA1)及单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)存在活性,分别生成产物岩藻糖基化GA1(FGA1)及岩藻糖基化神经节苷脂GM1(FGM1);而MFUT-Ⅰ仅对底物GA1存在活性.MFUT-Ⅱ对GA1的比活性约为MFUT-Ⅰ的80～90倍.MFUT-Ⅱ对GA1的比活性为GM1的10～20倍.MFUT-Ⅱ不仅具有合成Ⅳ型H抗原FGA1及FGM1活性,同时具有对乳丁糖神经酰胺(Lc4Cer)及异乳丁糖神经酰胺(nLc4Cer)的活性,可合成Ⅰ型及Ⅱ型H抗原.结论MFUT-Ⅱ是小鼠的主要α1,2-FT,具有合成Ⅳ型H抗原FGA1及FGM1的功能;MFUT-Ⅰ仅有合成Ⅳ型H抗原FGA1的功能;MFUT-Ⅲ无α1,2-FT活性.     

大鼠乳腺癌的神经节苷脂谱及唾液酸转移酶活性

用半微量法分析了N-亚硝基-N-甲基脲素诱发的大鼠乳腺癌(含有Ha-ras-1癌基因)的神经节苷脂谱及其唾液酸转移酶活性。与正常大鼠乳腺组织比较,该乳腺癌组织的神经节苷脂谱有明显改变,并伴有GD_3合成酶活性的增高。作者对可能引起这一改变的乳腺癌基因背景进行了讨论。     

黄芩苷、二甲双胍和氨基胍对D-半乳糖诱导大鼠体内蛋白非酶糖基化-氧化应激、醛糖还原酶活性及胰岛素抵抗作用

目的：观察黄芩苷、二甲双胍和氨基胍对D-半乳糖诱导大鼠体内蛋白非酶糖基化-氧化应激、醛糖还原酶活性及胰岛素抵抗作用。方法：清洁级健康SD大鼠90只,完全随机分为6组正常对照组、模型对照组、氨基胍组、二甲双胍组、黄芩苷高剂量和黄芩苷低剂量组,每组各15只。除空白对照组外,其余组大鼠均采用腹腔注射D-gal,灌胃;结束时观察各组大鼠晚期糖基化终末产物、糖化血红蛋白、胰岛素等,并计算胰岛素敏感指数,醛糖还原酶和超氧化物歧化酶的活性。结果：D-gal处理大鼠出现血糖升高、糖耐量减退、糖基化产物及胰岛素含量增高,SOD活性降低及红细胞内AR活性增强;Met,AG以及Bai高和低剂量均能改善D-gal诱导大鼠IGT和降低糖基化产物和胰岛素含量。结论：D-gal诱导能使大鼠体内糖基化反应、胰岛素抵抗和醛糖还原酶活性增强;Bai,Met和AG能抑制蛋白非酶糖基化反应和醛糖还原酶活性,改善高胰岛素血症。     

新木脂素的酶法糖基化及抗肿瘤活性

目的以厚朴酚与和厚朴酚为底物,进行酶法糖基化修饰以及检测其抗肿瘤活性,提高新木脂素类化合物（厚朴酚与和厚
朴酚）的水溶性和生物活性,。方法利用来源于Bacillus的糖基转移酶（YjiC）,通过酶法糖基化制备厚朴酚与和厚朴酚糖基化
产物;经高效液相色谱（HPLC）、液相串联质谱（LC-MS）、核磁共振（NMR）检测分析鉴定其结构;通过MTT法检测药物对多种
肿瘤细胞的增殖抑制效应。结果利用酶法糖基化反应制备了2个新木脂素（厚朴酚与和厚朴酚）糖基化产物,并显著提高了其
水溶性;糖基化产物分别鉴定为magnolol-2-O- β-D-glucopyranoside（1）和honokiol-4’-O-β-D-glucopyranoside（2）;MTT结果
显示,厚朴酚与和厚朴酚及其糖基化产物对4种肿瘤细胞均表现出较强的抑制细胞增殖的作用,且呈现浓度依赖性,其IC50范围
为9.41~111.21 μmol/L。结论厚朴酚与和厚朴酚糖基化产物显著提高水溶性以及增加了药物对SMMC7721细胞的敏感性,并
具有良好的应用前景。
     

朝鲜淫羊藿中的木脂素类化合物及其对大鼠骨肉瘤细胞UMR106增殖及分化的影响

目的研究朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum中具有抗骨质疏松活性的成分,考察化合物对大鼠骨肉瘤细胞UMR106的增殖和分化的影响。方法以大鼠骨肉瘤细胞UMR106的增殖作为活性追踪指标,运用各种现代分离手段对朝鲜淫羊藿的水提取物进行活性成分的追踪分离,用光谱学方法对得到的化合物进行结构鉴定,同时检测化合物的活性。结果分离得到5个木脂素类化合物,分别鉴定为:9′-(α-吡喃鼠李糖基)-3,5′-二甲氧基-3′:7,4′:8-二环氧新木脂素-4,9-二醇(Ⅰ)、柏木苷A(Ⅱ)、( )-环合橄榄树脂素(Ⅲ)、( )-南烛木树脂酚(Ⅳ)、( )-异落叶松树脂醇(Ⅴ)。检测了化合物Ⅰ～Ⅴ对UMR106细胞增殖和分化的影响。结论化合物Ⅰ为新化合物,命名为柏木苷C;化合物Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ均为首次从该属植物中分离得到。化合物Ⅱ～Ⅴ对UMR106细胞的增殖及碱性磷酸酶的活性都呈现一定程度的促进作用,化合物Ⅰ只促进细胞的增殖。     

不同产地甘草的聚类分析

目的对不同产地甘草Glycyrrhizauralensis的HPLC指纹图谱进行研究,并对HPLC指纹图谱结果进行聚类分析,以探讨产地对甘草药材活性成分积累的影响。方法以甘草药材所含活性成分为分析对象,选择适宜的HPLC条件,建立了甘草指纹图谱分析方法,并对该方法进行了考察。以甘草酸、甘草苷、甘草素、异甘草苷、异甘草素5个活性成分峰面积的标准化结果对17批样品进行了聚类分析。结果方法学考察结果表明,本研究建立的分析方法有较好的重现性,不同产地甘草中甘草酸和甘草黄酮的量存在较大差别。结论甘草活性成分的积累与产地有一定的相关性。     

绿原酸抑制低密度脂蛋白非酶糖基化和氧化修饰研究

目的: 研究绿原酸对人体低密度脂蛋白（LDL）非酶糖基化和氧化修饰的抑制作用。方法: 建立LDL非酶糖基化孵育体系,采用紫外-可见分光光度法测定糖基化早期产物（Amodori产物）和中期产物（二羰基化合物）的含量,荧光分光光度计测定糖基化末期产物的含量;建立LDL氧化孵育体系,采用紫外-可见分光光度法测定硫代巴比妥酸反应物（TBARS）和共轭二烯的含量,荧光分光光度法测定色氨酸荧光淬灭强度以及脂褐素、总荧光产物、活性醛和丙二醛的含量,并进一步通过三维荧光等高线特征谱验证。结果: 在LDL糖基化修饰模型中,150 μg/mL和300 μg/mL的绿原酸均能够抑制Amodori产物、二羰基化合物和糖基化末期产物的生成;在LDL氧化修饰模型中,15 μg/mL和25 μg/mL的绿原酸均能够抑制TBARS的生成;5 μg/mL和10 μg/mL的绿原酸对色氨酸荧光淬灭,以及对活性醛、丙二醛、总荧光产物、脂褐素和共轭二烯的生成均有抑制作用。三维荧光等高线特征谱结果与前一致。结论: 绿原酸能够抑制LDL非酶糖基化和氧化修饰。     

云南红豆杉心木的化学成分研究

目的进一步了解云南红豆杉心木部位的化学成分。方法云南红豆杉心木的乙醇提取物,经用萃取、硅胶柱色谱、凝胶柱色谱等方法分离,从其氯仿萃取部位分离鉴定得18个化合物,采用波谱解析(UV、IR、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR)等方法确定其结构。结果这18个化合物分别为12个紫杉烷:2α,5α,7β,9α,10β,13α-六乙酰氧基-4(20),11-紫杉二烯(Ⅰ)、紫杉素(Ⅱ)、紫杉-4(20),11-二烯-2A,5A,10β-三乙酰氧基-14β,2-甲基丁基(Ⅲ)、10B-羟基-2A,5A,14β-三乙酰氧基-4(20),11-紫杉二烯(Ⅳ)、1-去羟基巴卡亭Ⅳ(Ⅴ)、巴卡亭Ⅳ(Ⅵ)、巴卡亭Ⅵ(Ⅶ)、7,9-去乙酰基巴卡亭Ⅵ(Ⅷ)、10-去乙酰基云南红豆杉素(Ⅸ)、1B-乙酰氧-5-去乙酰基巴卡亭Ⅰ(Ⅹ)、巴卡亭Ⅰ(Ⅺ)、taxuchinA(ⅩⅡ);4个木脂素:开环异落叶松树脂素(ⅩⅢ)、A-conidendrin(ⅩⅣ)、异紫杉脂素(ⅩⅤ)、落叶松脂醇(ⅩⅥ);2个其它化合物:肌醇甲醚(ⅩⅦ)、β-谷甾醇(ⅩⅧ)。其中化合物Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅺ、ⅩⅡ、ⅩⅥ为心木部位首次分得的成分。结论云南红豆杉心木部位的化学成分同云南红豆杉其他部位有一定的差异,但就红豆杉属而言没有什么差异。