ZNF750在结直肠癌细胞增殖中的作用和分子机制研究

目的 探讨锌指蛋白750(ZNF750)在结直肠癌细胞增殖中的作用和分子机制。方法 用干扰siRNA转染结直肠癌细胞株SW620和LoVo,沉默ZNF750的表达;运用MTT实验和平板克隆实验检测ZNF750沉默成功的实验组细胞和对照组细胞增殖能力的差别;运用荧光定量PCR检测实验组细胞株中Kruppel样因子4(KLF4)的表达水平与对照组的差异。结果 MTT实验和平板克隆实验显示ZNF750沉默后,结直肠癌细胞的增殖能力较对照组明显增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。荧光定量PCR显示结直肠癌细胞株ZNF750沉默后,KLF4的表达水平下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 ZNF750抑制结直肠癌细胞的增殖,可能通过调控KLF4的表达参与结直肠癌的发生发展。     

分泌蛋白CRLF1表达对结直肠癌细胞增殖和细胞克隆能力的影响

目的:深入研究细胞因子受体样因子1(CRLF1)表达对结直肠癌细胞增殖和细胞克隆能力的影响.方法:酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中CRLF1表达水平,提取新鲜肿瘤及癌旁组织样本RNA,测定CRLF1的相对表达量.培养人结直肠癌细胞株HCT116和SW620,合成si-NC和si-CRLF1小干扰RNA,对HCT1...     

POT1-AS1在胃腺癌组织中的表达及其对细胞增殖的影响

目的 探讨POT1-AS1在胃腺癌(GAC)组织中的表达及其对细胞增殖的影响.方法 收集2016年6月至2018年12月在西安交通大学第一附属医院普通外科手术切除的80对GAC组织及其癌旁正常组织标本(所有患者术前未接受过放、化疗等辅助治疗)、正常人胃黏膜上皮细胞(GES-1)和GAC细胞株(BGC-823、MGC-8...     

Gli1和OPN在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨脑胶质瘤相关癌基因（glioma-associated oncogene 1,Gli1）和骨桥蛋白（osteopontin,OPN）在结直肠癌组织中的表达情况及临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测Gli1和OPN蛋白在76例结直肠癌组织,23例正常结直肠组织中的表达情况,分析Gli1和OPN与结直肠癌患者的临床病理因素之间的关系以及二者之间表达的相关性.结果 （1）Gli1在结直肠癌组织和正常结肠组织中表达的阳性率分别为43.4％ （33/76）和13.0％ （3/23）,两者差异具有统计学意义（P ＜0.05）;OPN在结直肠癌组织和正常结肠组织中表达的阳性率分别为51.3％ （39/76）和17.4％ （4/23）,差异有统计学意义（P＜0.05）.（2）Spearman等级相关分析提示,Gli1和OPN在结直肠癌组织间的表达呈正相关（r=0.312,P＜0.01）.结论 Gli1和OPN参与了结直肠癌的发生发展过程,二者之间可能起协同作用,联合检测Gli1和OPN对于评估结直肠癌的生物学特性和判断预后具有一定价值.     

PD-L1在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的：观察程序性死亡配体-1（PD-L1）在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达,探索其与患者临床病理特征之间的相关性,并探讨PD-L1表达水平在结直肠癌中的临床意义。方法：选取2016年1月至2017年1月温州医科大学附属第一医院50例结直肠癌患者,手术中获取癌组织及癌旁组织,采用PCR及Western blot检测结直肠癌及癌旁组织中PD-L1 mRNA及蛋白水平,并分析其与临床病理特征之间的相关性。结果：与癌旁组织相比,结直肠癌组织中PD-L1基因及蛋白表达量均显著升高（P＜0.05）。癌组织中PD-L1蛋白阳性率与癌组织分化程度和淋巴转移相关（P＜0.05）。结论：PD-L1在结直肠癌组织中表达增高,并与结直肠癌患者的临床病理特征密切相关。     

RBM25在结直肠癌中的表达及其对细胞增殖的影响

目的 探究RNA结合基序蛋白25(RBM25)在结直肠癌组织中的表达及对结直肠癌细胞功能的影响.方法 利用TCGA数据库分析RBM25在结直肠癌和正常结肠组织中的表达差异及RBM25表达水平与患者预后之间的关系;分别采用qRT-PCR和Western blot检测结直肠癌组织中RBM25在mRNA和蛋白水平的表达情况.将RBM25-siR-NAs转染结直肠癌细胞系HCT 116,采用CCK-8实验、克隆形成实验检测RBM25敲低对结直肠癌细胞生长、增殖的影响;利用TCGA数据库分析RBM25 mRNA表达水平与结直肠癌患者预后之间的相关性.结果 对TCGA数据库分析显示,RBM25 mRNA在结直肠癌与正常组织的表达差异无统计学意义(P＞0.05),但RBM25 mRNA水平与患者的预后呈负相关(P＜0.05);qRT-PCR结果显示RBM25 mRNA在结直肠癌患者癌组织中高表达,但差异无统计学意义(P＞0.05),Western blot结果显示RBM25蛋白在结直肠癌组织中高表达(P＜0.05);RBM25-siRNAs敲低导致HCT 116细胞生长、增殖能力下降(P＜0.05).结论 RBM25蛋白在结直肠癌组织中高表达,并促进结肠癌细胞的生长、增殖,提示RBM25可能与结直肠癌的发生、发展相关.     

Dnmt1、Caveolin-1在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨Dnmt1和Caveolin-1在结直肠癌中的表达及其临床病理意义。方法应用免疫组化PV-9000二步法检测84例结直肠癌组织及20例癌旁正常组织中Dnmt1、Caveolin-1蛋白的表达情况,分析二者与其临床病理特征的关系。结果 Dnmt1蛋白在结直肠癌中的阳性表达率(72.62%)显著高于癌旁正常组织(25.00%)(P<0.05);Caveolin-1蛋白在结直肠癌中的阳性表达率(32.14%)显著低于癌旁正常组织表达率(75.00%)(P<0.05);二者表达与肿瘤的组织学分化程度、Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移等组间差异性有显著性意义(P<0.05);Dnmt1和Caveolin-1蛋白的表达呈负相关关系(r=-0.304,P=0.000)。结论 Dnmt1和Caveolin-1的表达与结直肠癌的发生、发展密切相关。     

左旋含羞草碱通过调控LATS1表达对结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响

【摘要】目的 探讨左旋含羞草碱对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响及分子机制。方法 结直肠癌细胞SW480分为对照组、左旋含羞草碱低、中、高浓度组、pcDNA组、pcDNA LATS1组、左旋含羞草碱+si NC组、左旋含羞草碱+si LATS1组。四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞增殖抑制率;蛋白质印迹（Western blot）法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A（p21）、B细胞淋巴瘤/白血病 2（Bcl 2）、Bcl 2相关X（Bax）、大肿瘤抑制基因1（LATS1）蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR（RT qPCR）检测LATS1 mRNA表达水平。结果 左旋含羞草碱低、中、高浓度处理的结直肠癌细胞SW480细胞增殖抑制率升高,细胞凋亡率升高,LATS1表达水平升高,且呈浓度依赖性（P＜005）。过表达LATS1抑制结直肠癌细胞增殖,并促进细胞凋亡。抑制LATS1表达逆转了左旋含羞草碱对结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的作用。结论 左旋含羞草碱可能通过上调LATS1表达抑制结直肠癌细胞增殖,并促进细胞凋亡。     

RASGRF1在结直肠癌组织中高表达对肿瘤转移和不良预后的影响

【目的】探讨RASGRF1在结直肠癌组织中表达及临床意义以及下调结肠癌细胞株RASGRF1表达,检测对细胞增殖、细胞周期、迁移的影响。【方法】免疫组化法检测35例结直肠癌组织、35例癌旁正常结肠组织、35例结直肠腺瘤组织RASGRF1表达水平,并分析RASGRF1表达与结直肠癌病人临床病理参数的关系;采用RNAi技术下调结肠癌细胞株HCT116中RASGRF1表达,CCK8法、流式细胞术检测对细胞增殖、细胞周期影响。【结果】结直肠癌组织中RASGRF1表达高于癌旁正常组织及结直肠腺瘤组织;RASGRF1蛋白表达与结直肠癌病人性别(P=0.021)、组织分型(P=0.009)、有无远处转移(P=0.019)及Dukes分期(P=0.001)相关。女性病人RASGRF1表达水平高于男性病人;RASGRF1在黏液腺癌、印戒细胞癌中表达水平显著高于腺癌;伴有远处转移者高于无远处转移;Dukes C、D期高于Dukes A、B期;与年龄、肿瘤部位、肿瘤最大径、分化不相关(P>0.05)。下调HCT116细胞中RASGRF1表达可抑制其增殖、迁移及影响细胞周期。【结论】RASGRF1可能作为促癌因子参与结直肠癌的发生发展,进一步研究有望将作为结直肠癌患者独立预后分子标志物和新的治疗靶点。     

ERK1蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨结直肠癌组织中ERK1的表达。方法：用免疫组化快捷法检测检测40例结直肠癌组织、18例结直肠腺瘤、13例结直肠正常黏膜组织中ERK1的表达,并分析与临床病理特征,侵袭性的关系。结果：结直肠癌组织ERK1蛋白表达的阳性率（70.0%）明显高于正常结直肠黏膜组（23.1%）及腺瘤组（61.1%）,组间比较差异有显著性（P〈0.05）,其表达随结直肠癌侵润深度增加、淋巴结转移、Duke分期的进展而增高。结论：ERK1的表达一定程度上反映结直肠癌侵袭性强弱。     

ATBF1在结直肠癌中的表达及其与转移相关性研究

目的 探讨ATBF1在结直肠癌中的表达,分析其与结直肠癌转移相关性.方法 通过激光共聚焦检测ATBF1蛋白在转移性较强的LOVO细胞株及转移性相对较弱的SW480中的表达情况.同时用采用免疫组织化学方法检测146例结直肠癌和癌旁组织中ATBF1的表达,分析ATBF1蛋白在转移和非转移组中的表达情况.结果 LOVO细胞株中的ATBF1蛋白表达量明显低于SW480细胞株中ATBF1蛋白表达量.癌组织中的ATBF1的阳性率为52.16％明显低于癌旁组织中的ATBF1阳性表达率82.88％.转移组中ATBF1蛋白表达率为50％,而非转移组中ATBF1蛋白表达率为67.86％.结论 ATBF1在结直肠癌组织中呈低表达,表现为抑癌基因,与结直肠癌的转移相关.     

WNK1在结直肠癌中的表达情况及对预后的影响

目的探讨WNK1在结直肠癌(CRC)中的表达情况及对预后的影响。方法采用免疫组织化学方法检测68例CRC患者中WNK1基因的表达水平。采用log-rank检验和Kaplan-Meier生存曲线分析WNK1表达水平与总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的关系。采用蛋白免疫印迹法对细胞的上皮和间质标志物进行分析,通过Transwell分析与划痕实验验证WNK1基因对CRC细胞迁移能力的影响。结果 CRC组织WNK1的表达阳性率[(55.9%(38/68)]高于癌旁组织[14.7%(10/68)],差异有统计学意义(P<0.05)。WNK1的表达与淋巴结转移和TNM分期相关(均P<0.05)。WNK1高表达CRC患者OS率和PFS率均低于WNK1低表达患者(均P<0.05)。经蛋白免疫印迹法证实WNK1在HCT116和HCT15细胞系中的表达均下调,HCT116细胞中灰度降低72%,HCT15细胞中灰度降低85%。在HCT116和HCT15细胞中,WNK1的下调可恢复上皮标志物钙黏附蛋白E的表达,并伴随间质标记物波形蛋白的丢失。Transwell结果显示,采用siRNA抑制WNK1基因后HCT116细胞中通过滤膜迁移至下室的细胞(57.00±4.36)少于转染空载体对照组(230.00±8.89),差异有统计学意义(P<0.05);HCT15细胞中通过滤膜迁移至下室的细胞(61.00±3.61)少于转染空载体对照组(241.00±5.52),差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验结果显示,在HCT116中下调WNK1基因后细胞48 h划痕愈合率(10.7%)低于转染空载体对照组(60.3%),差异有统计学意义(P<0.05);在HCT15中下调WNK1基因后细胞48 h划痕愈合率(7.8%)低于转染空载体对照组(45.8%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 WNK1在CRC中的表达显著高于正常结直肠组织,且WNK1高表达与CRC TNM分期及复发转移相关。抑制WNK1基因可抑制上皮细胞-间充质转换(EMT)和CRC细胞的迁移能力。     

ADAMDEC1在人结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨ADAMDEC1(A disintegrin and ametalloprotease domain-like decysin 1)在人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织及癌旁组织中的表达及其与临床病理特征的关联性.方法 选取江门市中心医院100例CRC患者手术中获取的组织标本,采用免...     

BRCA1、EGFR蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨乳腺癌易感基因1(BRCA1)、表皮生长因子(EGFR)蛋白在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其临床意义。方法选取2016年5月至2018年5月新密市第一人民医院收集的90例CRC组织标本作为B组,25例腺瘤标本作为C组,同期选取25例健康人正常黏膜作为A组。采用免疫组化法检测各组BRCA1和EGFR蛋白的表达情况。结果 A组、B组、C组的BRCA1、EGFR蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。有淋巴转移的BRCA1阳性表达率低于无淋巴结转移,差异有统计学意义(P<0.05);临床分期、分化程度不同的患者BRCA1阳性表达率比较,差异无统计学意义(均P>0.05);不同细胞分化程度、Duke分期和有无淋巴结转移中,CRC患者EGFR蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 BRCA1、EGFR蛋白与肿瘤的发生、发展有密切联系,有望成为CRC治疗的新方向和新靶点,将对肿瘤的生长调节和临床诊断治疗有重要的意义。     

MMP-11及TIMP-1在结直肠癌组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-11（MMP-11）和基质金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）在结直肠癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测MMP-11及TIMP-1在结直肠癌和正常结直肠黏膜组织中的表达。结果结直肠癌组织中MMP-11和TIMP-1的表达与正常结直肠黏膜组织比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。MMP-11的表达与浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期有关（P〈0.05）;TIMP-1的表达与淋巴结转移、Dukes分期有关（P〈0.05）。MMP-11表达与TIMP-1表达呈正相关关系（P〈0.05）。结论 MMP-11和TIMP-1参与了结直肠癌的发生、发展,可以作为预测结直肠癌浸润和转移的指标。     

RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及其对癌细胞生物学行为的影响

目的 探究RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及对癌细胞生物学功能的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测不同结直肠癌细胞系DiFi、SNU175、HT-29、HCT-15细胞中RasGRF1mRNA;体外培养人结肠癌细胞,随机分为si-RasGRF1-NC组（阴性对照）、si-RasGRF1组（沉默RasGRF1表达）、NG组（空白对照）。采用qRT-PCR检测各组RasGRF1 mRNA,CCK-8法检测细胞存活情况,AnnexinV/PITC双染法检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞PI3K/Akt通路蛋白。结果 DiFi细胞中RasGRF1 mRNA相对表达量最高（P <0.05）,选择DiFi细胞进行后续实验。si-RasGRF1组光密度值低于NG组、si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组细胞凋亡率高于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量低于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <...     

MMP-11及TIMP-1在结直肠癌组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-11(MMP-11)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)在结直肠癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测MMP-11及TIMP-1在结直肠癌和正常结直肠黏膜组织中的表达。结果结直肠癌组织中MMP-11和TIMP-1的表达与正常结直肠黏膜组织比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。MMP-11的表达与浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期有关(P<0.05);TIMP-1的表达与淋巴结转移、Dukes分期有关(P<0.05)。MMP-11表达与TIMP-1表达呈正相关关系(P<0.05)。结论 MMP-11和TIMP-1参与了结直肠癌的发生、发展,可以作为预测结直肠癌浸润和转移的指标。     

EZH2和Bmi-1基因在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的：研究EZH2和Bmi-1基因在结直肠癌组织中的表达,探讨其与结直肠癌临床病理因素的关系及两者间的联系.方法：收集黑龙江省医院病理科2009～2012年结直肠癌存档蜡块45例,另取正常组织20例,应用免疫组织化学SP法结合图像分析软件检测45例结直肠癌、癌旁组织及20例正常对照组织中EZH2和Bmi-1基因的表达及半定量测定,采用SPSS13.0统计软件对所得数据进行x2检验及Sperman秩检验做相关性分析.结果：EZH2基因和Bmi-1基因在结直肠癌组织中高表达,在癌旁及正常组织中低表达或无表达.差异有显著性（P＜0.05）.两者的表达与性别、年龄、肿瘤大小未见相关（P＞0.05）,与转移及浸润密切相关（P＜0.05）.两者间在组织中表达呈正相关（P＜0.05）.结论：EZH2基因和Bmi-1基因的表达与结直肠癌的发生发展可能密切相关,在结直肠癌的发生发展中发挥着重要作用.