三七总皂苷保护PC12细胞对抗过氧化氢损伤的作用

目的:考察三七总皂苷在PC12细胞中对过氧化氢引起损伤的细胞保护作用.方法:采用MTT法考察0.01～100mg·L-1三七总皂苷对正常PC12细胞活力的影响,并在H2O2刺激的PC12细胞中考察0.1～10 mg·L-1的三七总皂苷对细胞活力的影响,通过对细胞活力的考察选择三七总皂苷合适的实验剂量,测定三七总皂苷0.1,1 mg·L-1对H2O2刺激的PC12细胞中活性氧水平、过氧化氢酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响以及对丙二醛(MDA)含量的影响.结果:三七总皂苷在0.1～10 mg·L-1浓度能提高正常PC12细胞活力,并能显著提高H202刺激的PC12细胞活力(P＜0.01).0.1,1mg·L-12个剂量的三七总皂苷均能显著减少H2O2刺激的PC12细胞中活性氧水平,提高SOD活力(P ＜0.001)和GSH-Px活力(P ＜0.001),并减少MDA生成(P ＜0.001).结论:三七总皂苷能通过增强细胞内抗氧化酶活力,保护PC12细胞对抗氧化损伤.     

白芍总苷对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的：研究白芍总苷对过氧化氢(H2O2)诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法取出生3 d的SD乳鼠,分离心肌细胞,培养72 h后分别设模型组,白芍总苷低、中、高剂量组,舒血宁注射液组,空白对照组,每组8个复孔;除空白对照组外,其余各组细胞经H2O2(100μg/ml)处理。白芍总苷低、中、高剂量组分别用含30、60、120μg/ml白芍总苷的培养基培养,舒血宁注射液组给予含100μg/ml舒血宁注射液的培养液,空白对照组和模型组于普通培养基中培养。干预6 h后,通过倒置显微镜观察各组细胞形态学变化;采用MTT法检测各组细胞存活率;检测各组细胞培养液中AST、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;测定各组细胞SOD、GSH-Px、过氧化氢酶(CAT)、MDA水平;通过流式细胞术测定细胞凋亡率。结果与模型组比较,白芍总苷中、高剂量组细胞存活率[(64.1±7.3)%、(81.3±7.8)%比(42.3±6.2)%]升高(P＜0.05或P＜0.01);细胞培养液中AST[(26.72±6.03)U/ml、(23.86±5.38)U/ml 比(34.75±6.91)U/ml]、CPK[(1.96±0.35)U/ml、(1.59±0.32)U/ml 比(2.54±0.40)U/ml]、LDH[(811.55±162.32)U/L、(683.48±134.14)U/L比(936.07±140.94)U/L]含量降低(P＜0.05或 P＜0.01);细胞中 SOD[(85.34±16.87)U/mg、(94.62±17.75)U/mg 比(56.45±13.76)U/mg]、CAT[(22.76±3.38)U/mg、(26.49±3.72)U/mg 比(16.13±3.18)U/mg]活性升高(P＜0.05或 P＜0.01), MDA[(8.74±2.05)nmol/mg、(6.91±1.80)nmol/mg 比(11.56±2.19)nmol/mg]含量降低(P＜0.05或 P＜0.01);细胞凋亡率[(24.2±5.5)%、(13.4±3.9)%比(51.2±9.1)%]降低(P＜0.05或 P＜0.01),且白芍总苷高剂量组GSH-Px[(3.54±0.83)U/mg比(2.50±0.67)U/mg]活性升高(P＜0.05或P＜0.01)。结论白芍总苷对H2O2所致乳鼠心肌细胞损伤具有剂量依赖性的保护作用,其作用机制可能与白芍总苷可有效改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤、降低细胞凋亡率有关。     

金樱子总黄酮对过氧化氢损伤内皮细胞的保护作用

目的 研究金樱子总黄酮对过氧化氢损伤人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cells,HUVEC)的保护作用.方法 体外培养HUVEC,用不同浓度H2O2诱导HUVEC损伤构建内皮细胞氧化损伤模型,采用MTT法测定各组细胞活力;用酶标仪测定各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;Western Blot检测各组细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白Bax的表达情况.结果 MTT观察结果表明600μmol/L H2O2为构建氧化损伤HUVEC模型的合适浓度.与H2O2损伤组比较,不同浓度总黄酮预处理组的细胞活力均显著升高(P＜0.01);不同浓度总黄酮预处理组细胞培养液中的SOD、CAT和GSH-Px活性均明显增加(P＜0.01),且随着总黄酮浓度的增大而升高.与H2O2损伤组比较,0.12 mg/ml处理组Bcl-2蛋白表达无显著升高,0.24 mg/ml和0.48 mg/ml处理组Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05);而各浓度预处理组Bax蛋白表达水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 金樱子总黄酮能保护氧化损伤的HUVEC,其保护机制与提高SOD、CAT、GSH-Px三种抗氧化酶的活性,上调Bcl-2蛋白的表达、下调Bax蛋白的表达来抑制细胞凋亡有关.     

淫羊藿苷抗肝癌细胞HepG2迁移机制的研究

目的 探讨淫羊藿苷抑制肝癌细胞系HepG2粘附和移动的作用及机制.方法 不同浓度淫羊藿苷作用HepG2细胞24 h后,粘附实验检测细胞粘附率,划痕损伤实验检测迁移速度.结果 2,4,8,12和16μg/ml淫羊藿苷处理24 h后,HepG2细胞粘附率分别为77.42%,45.68%,42.39%,40.46%和20.57%,总体呈下降趋势,4 μg/ml组与2μg/ml和16μg/ml组比较差异有显著性(P <0.01);与8 μLg/ml组和12 μg/ml组比较差异无显著性(P > 0.05).4μg/ml淫羊藿苷处理24 h后HepG2细胞迁移速度明显降低(P<0.01).结论 淫羊霍藿苷抑制HepG2细胞粘附和运动,发挥了抑制肿瘤转移作用.     

通络化痰胶囊对H2O2所致的PC12细胞凋亡的保护作用及机制

目的:探讨通络化痰胶囊对过氧化氢(H2O2)所致的大鼠嗜铬瘤细胞(PC12)细胞凋亡的保护作用及机制.方法:PC12细胞常规培养后,首先通过MTT检测细胞存活率的方法进行H2O2损伤模型的摸索和通络化痰胶囊药物浓度的筛选;确定造成PC12细胞损伤的H2O2浓度和通络化痰胶囊的安全作用浓度后,将处于对数生长期的PC12细胞分为对照组、模型组和通络化痰胶囊6.25,12.5,25,50,100mg·L-15个治疗组.用200 μmol· L-1H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞存活率、Hoechst33342荧光核染色观察细胞凋亡形态学改变、流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率、Western blot 方法检测与细胞凋亡线粒体途径密切相关的蛋白细胞色素C(CytC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达的变化.结果:200 μmol· L-1H2O2诱导PC12细胞损伤明显,浓度小于等于100 mg·L-1的通络化痰胶囊浓度对正常PC12细胞的存活率没有抑制作用.与模型组比较,各通络化痰治疗组PC12细胞存活率提高(P＜0.01),凋亡率下降(P＜0.01),Cytc和Caspase-3的表达减少(P＜0.01),其作用与剂量有关.结论:通络化痰胶囊可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制细胞凋亡线粒体途径中凋亡相关CytC和caspase-3的表达有关.     

沉香挥发油对H2O2致PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的 研究沉香挥发油对H2O₂所致鼠肾上腺嗜铬细胞瘤单克隆细胞系(PC12细胞)氧化损伤的保护作用。方法 体外培养PC12细胞,采用H2O₂制备细胞损伤模型,运用乳酸脱氢酶(LDH)和四唑盐(MTT)法检测细胞活力;应用荧光分光光度法测定细胞膜电位(MMP)和细胞内活性氧含量;应用试剂盒-酶标仪法测定细胞内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)的活力。结果 不同浓度H2O₂对PC12细胞生长均有明显的抑制作用,当浓度达到200 μmol·L-1后,对细胞的抑制作用明显减缓;与正常对照组对比较,模型组的细胞存活率较低,ROS、MDA含量较高(P < 0.01),但SOD和GSH-Px含量明显降低(P < 0.01);与模型组比较,沉香挥发油各剂量组的ROS、MDA含量明显降低(P < 0.01),而细胞存活率、SOD和GSH-Px酶活力则显著增强(P < 0.01)。结论 沉香挥发油在一定剂量范围内,对H2O₂致PC12细胞氧化损伤具有保护作用。     

川芎嗪对1,3-丁二烯致PC12细胞损伤的保护作用

目的：研究川芎嗪对由1,3-丁二烯损伤的PC12细胞生物学特性的影响。方法：用MTT法测定川芎嗪对损伤后PC12细胞活力的影响;流式细胞仪检测川芎嗪对损伤后PC12细胞凋亡和增殖的影响。结果：20、30、50μg/ml川芎嗪均能够提高1,3-丁二烯损伤的细胞活力,能使凋亡细胞比例减少,S和G2/M期细胞比例增加,G0/G1期细胞比例减少,其中30μg/ml浓度的川芎嗪作用最强（F=88.14,P〈0.01）;90μg/ml川芎嗪无明显作用。结论：川芎嗪能抑制由1,3-丁二烯引起的PC12细胞损伤,促进PC12增殖。     

七种中药对酒精致PC12细胞损伤保护作用的研究

目的观察赤芍、炒白芍、丹参、三七、地榆、黄芪和白芷七种中药对酒精致损伤的PC12细胞的保护作用。方法用不同浓度的药物分别作用于贴壁的PC12细胞2 h后,加入终浓度达800 mmol/L的酒精,继续作用24 h。采用MTT法检测不同浓度的中药对酒精致损伤的PC12细胞增殖的影响。结果加入赤芍(2.0～10.0 mg/ml)、地榆(0.125～14.0μg/ml)和丹参(8.0～20.0μg/ml)后细胞增殖率显著高于单纯酒精处理的PC12细胞(P<0.01);其中赤芍浓度在10 mg/ml、地榆浓度在2μg/ml、丹参浓度在14μg/ml时对细胞的保护作用最强,其余中药对酒精致损伤的PC12没有明显保护作用。结论赤芍、地榆和丹参能有效的保护酒精所致损伤的PC12细胞。     

三七总皂苷对H2O2诱导BMSCs 凋亡的保护作用及机制研究

目的：体外观察三七总皂苷（tPNS） 对过氧化氢（H2O2） 诱导的骨髓间充质干细胞（BMSCs） 凋亡的影响,并通过ERK1/2 通路初步探讨tPNS 的作用分子机制。方法：全骨髓贴壁法体外分离、培养SD 大鼠BMSCs。不同浓度tPNS （25、50、100 和200 μg/mL） 处理BMSCs 24 h 后,用500 μmol/L H2O2 孵育细胞24 h 诱导凋亡,后行MTT 实验检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期。100 μg/mL tPNS 预处理24 h 后,加ERK1/2 抑制剂PD98059（25 μmol/L） 1 h,后用500 μmol/L H2O2 孵育细胞24 h 诱导凋亡,用Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡率;Western Blot 检测细胞ERK1/2 及其蛋白磷酸化的表达。结果：与对照组比较,其他各组存活率均显著降低（P＜0.01）;与H2O2 组比较,100 μg/mL 和200 μg/mL tPNS 组均能显著提高BMSCs 的存活率（P＜0.01,P＜0.05）,其中100 μg/mL 效果更佳,所以采用最佳浓度组100 μg/mL tPNS 组进行后期研究。BMSCs 经tPNS干预24 h 后,100 μg/mL 和200 μg/mL tPNS 组细胞周期中G2+S 期细胞数的比例较H2O2组明显增加（P＜0.05）,其中100 μg/mLtPNS 组较200 μg/mL tPNS 组更多;其他浓度tPNS 组与H2O2 组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。与对照组比较,其他各组凋亡率均升高（P＜0.01）;与H2O2 组比较,tPNS 组能显著降低BMSCs 的凋亡率（P＜0.01）;与tPNS 组比较,tPNS+PD98059 组能显著升高BMSCs 的凋亡率（P＜0.05）。与对照组比较,H2O2 组、tPNS+PD98059 组能显著下调ERK1/2 蛋白的磷酸化表达（P＜0.01）;与H2O2 组比较,tPNS 组、tPNS+PD98059 组能显著上调ERK1/2 蛋白的磷酸化表达（P＜0.01）;tPNS 组与tPNS+PD98059 组之间并没有显著差异。结论：tPNS 对H2O2 诱导的BMSCs 凋亡有保护作用,其机制可能与促进ERK1/2 蛋白的磷酸化表达有关。     

藏药“松蒂”（篦齿虎耳草）中黄酮类成分对L02 肝细胞氧化损伤的影响

目的观察藏药“松蒂”（篦齿虎耳草）中所含总黄酮及其中5 种黄酮类化合物对H2O2 诱导的人肝系 L02 细胞氧化损伤的影响。方法采用MTT 法检测细胞存活率,筛选H2O2 诱导损伤L02 细胞的浓度、时间, 并确定各干预组分的最佳给药浓度范围。将细胞分为正常对照组、H2O2 损伤模型组、阳性对照组（Trolox 组,50 μmol·L-1）、给药组［包括总黄酮组、金丝桃苷组、山柰酚-3-O-（6′′-乙酰基）-D-半乳糖苷组、2′, 4′,5,7-四羟基-5′-甲氧基黄酮组、槲皮素组、芦丁组］,给药组再分别设置低、中、高3 个剂量组。药物干 预后,采用MTT 法检测细胞存活率;采用速率法检测细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基 转移酶（AST）含量;测定细胞培养液中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二 醛（MDA）含量及血红素加氧酶-1（HO-1）的活性。结果选择100 μmol·L-1 的H2O2 作用8 h为造模条件建立氧 化损伤L02 细胞模型。与模型组比较,篦齿虎耳草总黄酮（200、400、800 μg·mL-1）、金丝桃苷（50、100、 150 μg·mL-1）、槲皮素（50、100、150 μg·mL-1）和芦丁（50、100、150 μg·mL-1）预处理后,细胞存活率明显升 高（P＜0.05,P＜0.01）,AST、ALT 水平明显降低（P＜0.05,P＜0.01）,SOD、GSH-Px 及HO-1 活力明显升 高（P＜0.05,P＜0.01）,MDA 含量明显降低（P＜0.05,P＜0.01）,且在一定程度上呈剂量依赖性。结论篦齿 虎耳草总黄酮及金丝桃苷、槲皮素和芦丁对H2O2 致L02 肝细胞氧化损伤具有保护作用,金丝桃苷、槲皮素和 芦丁可能是篦齿虎耳草黄酮类成分保肝物质中的潜在活性化合物。     

氨基葡萄糖与铜钴镍三种金属离子的配位性能研究

目的 研究氨基葡萄糖的质子化和与Cu2 ,Co2 ,Ni2 的配位性能.方法 用pH电位滴定法测定(298±0.1)K,I=0.10 mol/LKNO3条件下氨基葡萄糖的质子化常数及与Cu2 ,Co2 ,Ni2 的二元配合物的生成常数.结果 氨基葡萄糖pKa为7.78,配合物生成常数的对数分别为Cu2 ,5.22(110),9.38(120);Co2 ,3.19(110),5.99(120);Ni2 ,3.40(110),6.31(120).结论 氨基葡萄糖与Cu2 ,Co2 ,Ni2 配位时不解离出醇羟基质子,不同金属离子配合物生成常数的大小符合Irving-William序列.     

关于PD2、PA2、PD2＇计算方法的探讨

目的：叙述近年来关于PD2、PA2、PD2’各自含义、计算方法，以阐明其研究意义。方法：通过对药理实验方法学中有关内容的阐述，以及对近10年来相关文章的对比分析和总结，得到一些对今后的药物研究有帮助的参考性知识。结论：PD2、PA2、PD2’的测定基本上是首先通过某一药物的动物或计算机虚拟实验，然后用图解法、计算方法（包括软件计算）或者二者联用的方法三种思路求得各自具体数值。     

补骨脂乙素诱导HepG2细胞凋亡及对Bcl-2家族表达的影响

目的:观察补骨脂乙素对人肝癌细胞HepG2凋亡及其相关蛋白的影响。方法:用不同浓度补骨脂乙素(3、4、5、6和7mg/ml)处理HepG2细胞24h后,MTT法检测药物对细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:补骨脂乙素4mg/ml即能抑制HepG2细胞的增殖并诱导其凋亡,7mg/ml时凋亡率可达94.57%,在浓度4～7 mg/ml之间有良好的量效关系。补骨脂乙素浓度为7mg/ml时促凋亡蛋白Bax、Bid表达明显增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。结论:补骨脂乙素4mg/ml能诱导HepG2细胞凋亡,可能与其影响Bcl-2家族蛋白的表达有关。     

Manuscript Preparation-Part 2

正1.Main Text The preferred length of an original article is no more than 8000 words,and review no more than 10000 words.Text is usuallybut not necessarily-divided into the Introduction,Methods,Results,and Discussion sections.Headings and subheadings may be used to clarify their content,especially in the Methods,Results,and Discussion(including conclusion).Every reference,figure