黄连素诱导体外培养的肺腺癌A549细胞凋亡

目的 研究黄连素对体外培养的A549增殖和凋亡作用.方法 利用MTT法观察黄连素对A549的增殖影响;荧光显微镜观察细胞形态的改变;琼脂糖凝胶电泳检测DNA的损伤;半定量RT-PCR法分析Bcl-2,Bax,p53mRNA的表达情况;流式细胞仪测定细胞周期的阻滞情况;血清药理学观察大鼠含药血清对A549的作用.结果 黄连素能显著抑制A549增殖,并呈一定的量效和时效关系;细胞的形态发生明显改变,出现凋亡小体;DNA琼脂糖凝胶电泳出现典型的梯状条带;黄连素能够上调Bax、p53,下调Bcl-2的mRNA的表达;大鼠含药血清能显著抑制细胞生长.结论 黄连素能够抑制A549细胞生长 ,诱导凋亡.     

清毒栓含药血清对宫颈癌SiHa细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨清毒栓含药血清对人宫颈癌SiHa细胞的诱导凋亡作用及其对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.方法 以不同浓度清毒栓含药血清分别处理SiHa细胞24～72 h后,MTT法检测细胞的生长活性,显微镜观察细胞形态,Western Blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达.结果 显微镜下观察到细胞圆缩、染色体凝聚等凋亡细胞的形念学改变,随着清毒栓含药血清浓度的增加,Bax蛋白的表达增加而Bcl-2的表达减少.结论 清毒栓含药血清对宫颈癌SiHa细胞的生长具有抑制作用,可诱导SiHa细胞发生凋亡,Bcl-2蛋白表达减少与Bax蛋白表达增多可能是SiHa细胞凋亡的机制之一.     

清毒栓含药血清对宫颈癌SiHa细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨清毒栓含药血清对人宫颈癌SiHa细胞的诱导凋亡作用及其对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。方法以不同浓度清毒栓含药血清分别处理SiHa细胞24～72h后,MTT法检测细胞的生长活性,显微镜观察细胞形态,Western Blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果显微镜下观察到细胞圆缩、染色体凝聚等凋亡细胞的形态学改变,随着清毒栓含药血清浓度的增加,Bax蛋白的表达增加而Bcl-2的表达减少。结论清毒栓含药血清对宫颈癌SiHa细胞的生长具有抑制作用,可诱导SiHa细胞发生凋亡,Bcl-2蛋白表达减少与Bax蛋白表达增多可能是SiHa细胞凋亡的机制之一。     

血三七醋酸乙酯提取物促进肺癌细胞凋亡的调控机制研究

目的研究血三七Polygonum amplexicaule var. sinense醋酸乙酯提取物(EAEP)对人肺癌A549和H1299细胞凋亡的影响及其机制。方法通过CCK-8细胞增殖检测试剂盒及流式细胞术检测EAEP对A549和H1299细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Westernblotting法检测EAEP对A549和H1299细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2和Caspase-3 mRNA及蛋白表达的影响。结果 EAEP能显著促进A549和H1299细胞凋亡;显著提高促凋亡因子Bax、Caspase-3 mRNA表达水平,降低抗凋亡因子Bcl-2 mRNA的表达水平;显著提高Bax蛋白表达水平,降低Bcl-2蛋白表达水平。结论 EAEP能通过促进Bax的表达和抑制Bcl-2的表达诱导肺癌细胞凋亡。     

芪玉三龙汤药物血清对肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的观察芪玉三龙汤药物血清对人肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法制备芪玉三龙汤药物血清,体外培养A549细胞。将A549细胞分为正常血清组、5%药物血清组、10%药物血清组和20%药物血清组。CCK-8法和集落形成实验检测A549细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、cleaved Caspase-3、Bcl-2表达。结果与正常血清组比较,不同浓度芪玉三龙汤药物血清组A549细胞活力明显降低(P<0.001),细胞凋亡率明显升高(P<0.001),10%药物血清组和20%药物血清组A549细胞Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.001)。结论芪玉三龙汤可能通过上调A549细胞Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达,进而诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。     

石蒜碱诱导肺癌A549细胞凋亡作用研究

为探讨石蒜碱诱导肺癌A549细胞的凋亡作用及其机制。该研究以肺癌A549细胞为实验对象,通过不同浓度的石蒜碱(0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 μmol·L^-1) 处理A549细胞,MTT观察细胞增殖情况;AnnexinV-FITC/PI双标法检测细胞的凋亡率;酶标仪检测凋亡因子Bcl-2,Bax,p53的活性;流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位变化;Real-time PCR检测凋亡相关基因Bcl-2,Bax,p53和Survivin的表达。研究结果表明:石蒜碱可显著抑制A549细胞增殖(P<0.05)、诱导A549细胞凋亡(P<0.05)。同时增强Bax和p53的活性,降低Bcl-2活性和线粒体膜电位,显著改变Bcl-2,Bax,p53和Survivin的基因表达(P<0.05)。综上表明石蒜碱可诱导A549细胞凋亡,具有治疗肺癌的应用前景,其机制可能与其调节Bcl-2信号通路中相关因子活性有关。     

灵芪胶囊对人肺腺癌A549细胞株凋亡基因Bcl-2表达的影响

目的:研究灵芪胶囊含药血清对A549细胞(人肺腺癌细胞)凋亡诱导作用及凋亡相关基因(Bcl-2)表达的影响。方法:采用RT-PCR法检测灵芪胶囊对A549细胞相关凋亡基因(Bcl-2)表达的影响。结果:灵芪胶囊含药血清对A549细胞具有凋亡诱导的作用,可下调Bcl-2基因表达,从而诱导细胞凋亡和细胞的分化。结论:灵芪胶囊能够明显抑制A549细胞的增殖,与通过影响凋亡相关的基因表达有直接的关系。     

番茄红素对人肺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:探讨番茄红素对人非小细胞肺癌细胞A549凋亡及对细胞周期的影响。方法:体外培养并取处于对数生长期的A549细胞进行分组,分别给予培养液(空白对照组)、不同浓度番茄红素(20、10、5μg/mL)及顺铂(40μg/m L)进行干预,每组10个复孔。药物干预48小时后,噻唑蓝(MTT)比色法测定各组细胞增值抑制率;流式细胞术(FCM)检测各组细胞周期、观察细胞凋亡状况并计算凋亡率;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞凋亡相关基因Bcl-2 mRNA、Bax m RNA表达;蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞周期蛋白(cyclin B1、cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶(CDK1、CDK2)表达。结果:与空白对照组比较,番茄红素各剂量组和顺铂组A549细胞增值抑制率提高,番茄红素(20、10μg/mL)组细胞处于G2-M期的比例提高、凋亡率显著升高,Bcl-2 mRNA表达下调且Bax mRNA表达上调,Bax/Bcl-2值显著提高,cyclin B1蛋白和CDK1蛋白表达上调,cyclin D1蛋白和CDK2蛋白表达下调,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:番茄红素具有促进人非小细胞肺癌A549细胞凋亡,阻滞其有丝分裂,从而抑制其增殖的作用,可能与番茄红素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关。     

白露汤含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及周期的影响

目的:研究白露汤含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及生长周期的影响。方法:将人肺癌A549细胞培养至对数生长期,分别加入白露汤低、中、高剂量含药血清,空白对照组加入含10%胎牛血清的RPMI1640培养液,采用CCK-8法检测细胞活力;Western-blot法测定人肺腺癌A549凋亡细胞Bax、Bcl-2、C-caspase、HIF-1α及β-actin蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期。结果:与空白对照组比较,白露汤各给药组的A549细胞活力在24、48、72 h均明显降低(P0.05),且呈剂量依赖性。作用24、48、72 h后,白露汤各给药组均出现不同程度的细胞凋亡。流式细胞术检测显示,白露汤作用后,可使人肺腺癌A549细胞其发生早期凋亡(P0.05)。结论:白露汤可抑制人肺癌A549细胞活力、诱导细胞凋亡、延缓细胞周期进程,这可能与下调GLUT1、HK2、PKM2、LDH-A、HIF-1α和β-actin等表达有关。     

西黄丸含药血清对人结直肠癌细胞SW480凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:研究西黄丸对人结直肠癌细胞SW480凋亡的影响及其作用机制的初步探讨。方法:以人结直肠癌细胞SW480为研究对象,MTT法检测不同剂量西黄丸含药血清对SW480细胞活性的影响,并用流式细胞术检测西黄丸含药血清引起的细胞凋亡率改变;用Western blot的方法检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平,初步探讨其凋亡机制。结果:西黄丸含药血清可浓度依赖性降低SW480的细胞活力并增加细胞凋亡率,Western blot结果显示西黄丸含药血清增加了Bax蛋白表达,抑制Bcl-2蛋白表达。结论:西黄丸含药血清可抑制SW480细胞活力、诱导细胞凋亡并减小Bcl-2、Bax蛋白表达比例,其机制可能与以线粒体为核心的凋亡途径有关。     

动脉粥样硬化与细胞凋亡

动脉粥样硬化(AS)的发病机理尚未清晰。传统的观点有三大假说。脂质假说、血栓源假说和损伤反应假说。但近年来。人们认为细胞凋亡与AS的形成有密切的关系。以下就细胞凋亡与动脉硬化的关系，动脉粥样硬化细胞凋亡的细胞外调节以及细胞内调节作一综述。     

The cephalostatin way of apoptosis

The cephalostatins, bis-steroidal natural products from the marine tube worm Cephalodiscus gilchristi, were isolated by Dr. G. R. Pettit and his group. These compounds show a unique cytotoxicity profile in the in vitro screen of the National Cancer Institute, suggesting a novel mechanism of action. Indeed, cephalostatin 1 ( 1) is an extremely powerful agent that acts via an unusual apoptosis pathway. It induces selective Smac/DIABLO, but no cytochrome c release from mitochondria. Nevertheless, caspase-9 is required for apoptosis induction. Interestingly, caspase-9 is activated without the participation of the apoptosome, leading to the question of its mechanism of activation. We found that endoplasmic reticulum stress-associated caspase-4 contributes to nonclassical cephalostatin-mediated caspase-9 activation, additionally pointing out the unusual pathway used by this substance. Cephalostatin 1 ( 1), therefore, provides a very good tool to discover novel apoptotic pathways, which might be important in the understanding and treatment of chemo-resistant cancer.     

青蒿素对肿瘤细胞凋亡相关基因的调控

青蒿素(artemisinin)及其衍生物是一类传统抗疟药.近年来有研究表明:青蒿素可通过抑制增殖、诱导凋亡、抗血管生成等发挥抗肿瘤作用.而其诱导凋亡作用是近期学者研究的重点,多数学者认为其主要通过上调促凋亡基因(Bax)、下调抗凋亡基因(Survivin、Bcl-2)、协调双向调节基因(Bid、Bim)抗肿瘤,最终引起特征性的形态学改变.     

腺嘌呤对电离辐射诱发AHH-1细胞凋亡的保护作用

目的：观察腺嘌呤对淋巴母细胞AHH-1辐射损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法：照射前12h给予不同浓度的腺嘌呤,再经4．O Gy 60Coy射线照射诱发细胞凋亡,采用MTS法计算细胞存活率;Annexin V-FITC／PI双染法、Caspase3／7发光法检测细胞凋亡率;DNA Ladder法观察凋亡断裂条带;RT-PCR分析细胞Caspase-9、Bax、Bcl-2mRNA表达的变化。结果：与正常组比较,电离辐射后细胞存活率79．4％显著下降（P〈0．01,加入0．001,0．01,0．1μmol·L^-1。腺嘌呤细胞存活率分别为85．4％,89．6％,92.2％明显升高（P〈0．01）,且随作用浓度的增加而增大,DNA断裂片段也减少,细胞中Caspase-9、Bax表达明显减少,Bcl-2表达明显增加,凋亡的各项指标均明显改善。结论：腺嘌呤对电离辐射诱发的细胞凋亡有保护作用,并且对细胞凋亡的抑制呈剂号依赖正相关美系．     

癌细胞诱导分化、凋亡的新途径

“古今中外第一针”是《中药事业报》１９９７年９月５日报道癌灵１号注射液（亚砷酸注射液）治疗急性早幼粒细胞白血病时用的标题。看似吹嘘，实际不然，经过国内外检索证实我们是有史以来第一家将砒霜注入到人的血管与椎管的人。并且使急性早幼粒细胞白血病得到了痊愈，...     

复方海蛇胶囊抗PC-12细胞凋亡研究

目的:研究复方海蛇胶囊对β-淀粉样蛋白(Aβ_1~42)诱导的PC-12细胞凋亡的影响,探讨复方海蛇胶囊应用于痴呆的治疗机制。方法:采用四氮唑蓝比色法(MTT法)确定复方海蛇胶囊对神经生长因子(NGF)诱导培养PC-12细胞的安全剂量后,加或不加Aβ,分别用MTT法、流式细胞术(FCM术)检测不同质量浓度的复方海蛇胶囊(0.01,0.1,1,5 mg.mL^-1)对PC-12细胞凋亡的影响;用蛋白免疫印迹(Western-blot)法分别检测凋亡执行酶caspase-9与caspase-3的活性。结果:复方海蛇胶囊对NGF诱导培养的PC-12细胞的安全剂量为小于10 mg.mL^-1。复方海蛇胶囊各剂量组对Aβ诱导的PC-12细胞的凋亡具有明显的抑制作用。各组数据(A)分别为:1.75±0.12,0.73±0.35,0.79±0.11,0.83±0.07,1.31±0.07和1.80±0.38,与空白组比较P<0.01,流式细胞检测中凋亡细胞的百分率降低(1.93±0.41)%,(46.17±4.08)%,(35.35±4.63)%,(28.62±3.81)%,(15.13±3.15)%,(7.84±1.76)%,与空白组比较P<0.01。另外,复方海蛇胶囊抑制了Aβ诱导PC-12细胞的caspase-9和caspase-3活性的增高。结论:复方海蛇胶囊可显著抑制Aβ诱导PC-12细胞的凋亡,其机制可能通过抑制凋亡执行酶caspase-9,caspase-3的活性实现。     

Clematis mandshurica protected to apoptosis of rat chondrocytes

OBJECTIVE: To investigate the effect of SKI 306X, a purified extract from the mixture of three herbs, i.e. Clematis mandshurica, Trichosanthes kirilowii and Prunella vulgaris, on apoptosis in chondrocytes. DESIGN: Rat chondrocyte cell line RCJ3.1C.18 cells were incubated with 1 microM staurosporin and SKI 306X or each of its components. Cell viability was determined by trypan blue exclusion assay. Induction of apoptosis was determined by nuclear condensation or fragmentation after Hoechst staining. Amount of apoptosis was quantified both by nuclear morphology and flow cytometry. Expression level of Bcl-2, and caspase-3 and PARP activations were assayed by Western blot. RESULTS: SKI 306X significantly prevented staurosporin-induced apoptosis. Among its three components, only Clematis mandshurica significantly decreased the amount of staurosporin-induced apoptosis. Although the level of Bcl-2 expression was decreased after staurosporin treatment, it was sustained after the combination treatment with Clematis mandshurica. Whereas staurosporin induced the degradation of 32 kDa caspase-3 precursor and the production of 85-kDa cleavage products of PARP in a time-dependent fashion, Clematis mandshurica treatment prevented those manifestations. CONCLUSIONS: Pharmacological efficacy of SKI 306X protecting osteoarthritis in part may result from the inhibition of apoptosis in chondrocytes by Clematis mandshurica.     

中药诱导白血病细胞凋亡的实验研究进展

综述了现代医学用观测细胞凋亡的方法来研究中药对白血病细胞的作用，观察发现很多中药提取物或单体有明显的体外促进白血病细胞凋亡的作用。     

去甲斑蝥素诱导肿瘤干细胞凋亡作用研究

目的探究去甲斑蝥素(NCTD)对肿瘤干细胞促凋亡作用。方法分别以UMUC-3膀胱癌和Hep G2肝癌细胞为研究对象,通过无血清、低吸附、单克隆的方法筛选肿瘤干细胞(CSC),实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测CSC干性标志物表达变化,MTS法检测NCTD及紫杉醇(PTX)对CSC的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 2种细胞经筛选获得成球生长细胞克隆,其干性基因NANOG、OCT4、ABCG2、CD133、CD34表达明显升高,释放入含血清培养基后干性基因表达下调。经筛选所得的CSC对PTX高度耐药,但对NCTD耐药性低。NCTD可诱导CSC凋亡,但对干性基因表达没有显著影响。结论 NCTD诱导凋亡杀伤CSC,但对CSC分化没有显著影响。     

木香内酯诱导人脑星形胶质母细胞瘤细胞凋亡

[目的] 探究木香内酯诱导人脑星形胶质母细胞瘤细胞凋亡的作用机制。[方法] 通过 CCK8 法检测木香内酯对 U87 细胞增殖作用的影响; 采用 Annexin V-FITC/PI 双染法检测木香内酯对 U87 细胞凋亡率的影响, 采用 JC-1染色法检测木香内酯对 U87 细胞线粒体膜电位的影响; 采用 DCFH-DA 探针检测木香内酯对 U87 细胞中 ROS 含量的影响;采用生化法检测木香内酯对 U87 细胞氧化应激指标丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、微量还原型谷胱甘肽（GSH）和一氧化氮（NO）含量的影响; 采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测木香内酯对U87 细胞 Caspase-3、Bax、Bcl-2 的 mRNA 表达水平的影响; 采用分子对接寻找木香内酯与 Caspase-3、Bax、Bcl-2 的具体结合位点。[结果] 木香内酯呈剂量依赖性抑制 U87 细胞的生长, 细胞半抑制浓度 IC₅₀ 为 11.27 μmol/L;细胞凋亡水平检测结果显示木香内酯 20 μmol/L 组 U87 细胞凋亡率增加, 差异具有统计学意义（P<0.001）; 线粒体膜电位水平检测结果显示木香内酯 5 μmol/L 组、10 μmol/L 组、20 μmol/L 组 U87 细胞线粒体膜电位降低, 差异具有统计学意义（P<0.001）;氧化应激检测水平显示, 木香内酯呈剂量依赖性上调 U87 细胞中 ROS、MDA、NO 水平; 下调 SOD、GSH 水平, 差异具有统计学意义（P<0.05）; 木香内酯 20 μmol/L 组 U87 细胞 Caspase-3、Bax mRNA 表达水平均上调, 差异具有统计学意义（P<0.01）, 而 Bcl-2 mRNA 表达水平下调, 差异具有统计学意义（P<0.05）。分子对接结果显示木香内酯分别与 Caspase-3、Bcl-2、Bax 氨基酸残基 ARG-164, LEU-168, ARG-66 形成稳定的结合能。[结论] 木香内酯能明显抑制 U87 细胞生长和介导细胞高氧化应激水平, 降低线粒体膜电位并促进细胞凋亡。