扶正补血食疗方含药血清干预Notch通路调控骨髓造血干细胞化疗后损伤的机制研究

目的:通过扶正补血食疗方含药血清干预5-FU损伤小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)和造血干细胞(HSCs)体外共培养模型,探讨补血食疗方对化疗后模拟"造血龛"中小鼠HSCs增殖、凋亡以及Notch信号通路的影响.方法:建立小鼠BMSCs和HSCs的共培养模型.共培养细胞随机分为空白组、5-FU组和扶正补血食疗方含药血清...     

大鼠骨髓间充质干细胞培养鉴定及复方扶芳藤合剂含药血清对细胞增殖的影响

目的:建立SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养方法,观察不同浓度的复方扶芳藤合剂大鼠含药血清对大鼠BMSCs增殖的影响。方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化BMSCs,对其进行细胞形态学观察,将BMSCs进行成骨、成脂定向诱导分化,采用流式细胞仪检测其表面标志物,分析其细胞周期,进行BMSCs鉴定;采用不同浓度(20%、10%和5%)的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续7 d对大鼠BM SCs进行干预,以CCK-8法检测其吸光度值,对比各组细胞生长情况。结果:BMSCs具有典型的成纤维样细胞形态,集落生长呈漩涡状。BMSCs成脂、成骨诱导后,油红O染色和茜素红染色均呈阳性。第3代BMSCs表型CD29、CD44、CD34、CD44表达分别为99.645%、99.677%、0.016%、0.133%;不同浓度的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续干预7 d后,CCK-8法检测显示:20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清组,其1~7 d的吸光度均值均高于20%浓度的空白血清组(P<0.05);10%的含药血清组的吸光度均值在3~7 d,高于10%的空白血清组(P<0.05);5%的含药血清组与5%的空白血清组比较无明显差异(P>0.05)。结论:全骨髓贴壁法分离、培养BM SCs,操作简单,方法稳定,可大量扩增BMSCs。扩增后的BMSCs具有间充质干细胞的生物学特性,具有多向分化潜能。复方扶芳藤合剂含药血清干预后的BMSCs增殖能力增强,其中20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清在本实验中为最佳干预浓度。     

复方扶芳藤合剂含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞Notch信号通路的影响

目的:观察复方扶芳藤合剂含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) Notch信号通路的影响.方法:采用全骨髓贴壁法分离纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞;制备复方扶芳藤合剂含药血清,将30只SD大鼠随机分为2组,每组随机15只,分别为ig复方扶芳藤合剂2 g·kg-1 ·d-1 ig的药物干预组和生理盐水2 mL·kg-1·d-1ig的阴性对照组.取10％的含药血清及阴性对照组血清分别干预大鼠BMSCs,采用RT-PCR方法检测Notch1,Jagged1,Hes1 mRNA表达变化;采用免疫细胞化学法检测Notch1,Jagged1表达变化.结果:RT-PCR显示药物干预组Notch1,Jagged1,Hes1的mRNA表达水平均高于阴性对照组(P＜0.05),免疫细胞化学显示药物干预组Notch1,Jagged1蛋白表达均高于阴性对照组(P＜0.05),差异有统计学意义.结论:复方扶芳藤合剂含药血清可以引起大鼠BMSCs Notch信号通路上的关键基因和蛋白表达上调,激活Notch信号通路.     

右归丸含药血清诱导骨髓基质干细胞分化的最佳浓度探索

目的:探讨右归丸含药血清体外诱导大鼠骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞的最佳浓度。方法:用DMEM/F-12培养液培养Wistar大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs),采用不同浓度右归丸含药血清对其进行体外诱导,并用MTT法检测各组细胞生长情况,用免疫细胞荧光方法计算各组神经元样细胞阳性数加以比较。结果:BMSCs在2.5%含药血清培养液中活力最好。结论:2.5%右归丸含药血清培养液是诱导BMSCs分化实验的最佳浓度。     

半夏泻心汤对正常骨髓间充质干细胞摄取胃癌细胞来源外泌体的干预作用

目的：观察胃癌细胞来源外泌体能否靶向骨髓间充质干细胞（BMSCs）并被摄取及半夏泻心汤的干预效应。方法：分离大鼠BMSCs,倒置显微镜及免疫荧光染色法对其进行鉴定;制备半夏泻心汤含药血清,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测半夏泻心汤含药血清对BMSCs存活率的影响,筛选最佳实验浓度;提取人胃癌BGC-823细胞来源的外泌体,采用透射电镜观察及Western Blot法对其进行鉴定,并用荧光染料Dil标记,分为空白组,模型组,中药高、中、低剂量组及阳性药组,各组上室均加入BMSCs悬液,下室均加入无外泌体血清的培养基。模型组,中药高、中、低剂量组及阳性药组下室加入胃癌外泌体。模型组及空白组上室加入含10%正常对照血清,中药高、中、低剂量组上室内相应加入含10%中药高、中、低剂量含药血清;阳性药组上室加入含10μmoL/L氯丙嗪的10%正常对照血清。24、48、72 h时用激光共聚焦显微镜观察各组BMSCs对胃癌细胞来源外泌体的摄取情况。结果：MTT法筛选半夏泻心汤含药血清的最佳实验浓度为10%。免疫荧光结果显示：共培养24 h内各组未发现BMSCs内红色荧光标记,48 h后发现BMSCs内红...     

经当归补血汤干预的肌源性干细胞Wnt信号相关基因表达分析

目的:探讨在体外造血微环境中肌源性干细胞Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达情况及当归补血汤(DBD)载药血清的干预作用。方法:将分离纯化并经流式细胞仪鉴定的MDSCs与BMSCs体外培养,根据实验需要随机分为6组进行药物干预,即空白对照组、共培养Wnt激动剂组、共培养Wnt抑制剂组、DBD+共培养组、DBD+共培养激动剂组及DBD+共培养抑制剂组。Real-time PCR检测各实验组MDSCs Wnt通路上下游节点基因Wnt3、Wnt3a、β-catenin及MDSCs增殖分化相关基因Cyclin D1、C-myc、CD34 mRNA的表达变化。结果:流式细胞仪检测结果显示MDSCs CD34、Sca-1阳性。倒置显微镜下观察:共培养Wnt激动剂组、DBD+共培养组、DBD+共培养激动剂组MDSCs较空白对照组生长密集且生长速度快,激动剂组聚团明显,共培养Wnt抑制剂组MDSCs增殖明显受到抑制。Real-time PCR检测结果显示:DBD+共培养激动剂组的Wnt3、Cyclin D1、CD34 mRNA表达水平最高,共培养激动剂组与DBD共培养组其次,空白对照组最低。结论:当归补血汤载药血清作用于共培养体系下的肌源性干细胞,Wnt信号通路持续激活后,体外造血微环境中的MDSCs更易增殖并分化。     

半夏泻心汤含药血清对胃癌微环境中BMSCs生长增殖的影响

目的:观察半夏泻心汤及不同配伍药组含药血清对胃癌微环境中骨髓间充质干细胞(BMSCs)生长增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:设BMSCs常规培养为空白组;模型组采用transwell小室将人胃癌BCG-823细胞与大鼠BMSCs非接触共培养建立胃癌微环境;半夏泻心汤及不同配伍含药血清组(全方组、辛开组、苦降组、甘补组)在上室内加入体积浓度为10%的相应配伍药含药血清。倒置显微镜观察BMSCs细胞形态、噻唑蓝(MTT)比色法观察BMSCs的增殖率,流式细胞术(FCM)检测BMSCs的细胞周期,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测原癌基因(c-Myc)和端粒酶逆转录酶(TERT)蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测c-Myc和TERT mRNA的表达。结果:全方组、辛开组、苦降组、甘补组含药血清在4,5,6,7 d对BMSCs的增殖有明显抑制作用,全方组明显优于甘补组(P0.05);第7天的检测结果显示全方组、辛开组、苦降组、甘补组含药血清均可降低c-Myc和TERT表达水平,升高G1期细胞比例,降低S期细胞比例,全方组明显优于甘补组(P0.05)。结论:半夏泻心汤及不同配伍药组含药血可抑制胃癌微环境中BMSCs的异常增殖,半夏泻心汤全方为最佳配伍。     

双合汤含药血清促进BMSCs体外增殖的研究

目的观察双合汤含药血清对SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖的影响。方法采用全骨髓贴壁方法提取BMSCs,显微镜观察形态,流式细胞仪检测其表面标记物,计数法绘制其生长曲线,分别用低剂量、中剂量、高剂量10%双合汤含药血清代替胎牛血清(FBS)进行药物干预。结果培养的细胞以梭形为主,呈漩涡状生长;流式细胞仪检测CD34阳性率为0.96%,CD90阳性率为93.51%;生长曲线似倒S型;给药组的BMSCs增值速度比空白对照组均快,其中高剂量组增值速度最快。结论双合汤含药血清能促进BMSCs体外的增值速度,且高剂量双合汤含药血清促进BMSCs的增值速度最为明显。     

益气活血方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响

目的：探讨益气与活血中药含药血清对骨髓间充质干细胞（ bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs ）增殖能力的影响。方法全细胞贴壁培养法获取、纯化BMSCs,体外培养,建立大鼠骨髓间充质干细胞的培养体系,采集空白对照大鼠、益气药、活血药、益气活血中药灌胃大鼠含药血清,用10%浓度以上不同含药血清培养第三代BMSCs,置于37℃,5% CO2培养箱中孵育。用流式细胞术鉴定BMSCs。噻唑基四唑比色法（ methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）测细胞活性,绘制生长曲线,观察10%益气、活血、益气活血中药含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响。结果采用全骨髓贴壁法获取的BMSCs,经流式细胞术检测,CD44、CD106呈阳性表达,基本不表达CD45、CD34;MTT法检测结果显示,培养第2、4、5天细胞快速增长,均较前一天增长明显（ P 〈0．05）,第6天时活血方血清组与益气活血方血清组细胞增长已呈下降趋势,而其它三组在第6天细胞增长达最大,与前一天比较仍有差异（ P〈0．05）,到第7天呈下降趋势。 BMSCs去除基线增殖率组间比较,培养第2天时,各组间比较虽无差异,但活血方血清组达最大（71．39±177;4．98%）;第4、6天时,益气活血方组达最大（66．40±177;1．47%）,与其它三组比较P〈0．01,活血方血清组次之;培养第6天时,益气方血清组较其它三组大,益气活血方血清组次之,活血方血清组最低。结论全细胞贴壁培养的大鼠骨髓间充质干细胞在细胞形态与表形表达上均具备BMSCs特征;益气活血中药含药血清对培养BMSCs增殖影响最大,活血方含药血清对细胞增殖影响出现最早、益气方含药血清对细胞增殖影响时间最长。     

加味丹参饮含药血清诱导BMSCs移植IRI大鼠对心肌bFGF的影响

目的:观察加味丹参饮(JWDSY)含药血清诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs),移植于心肌缺血再灌注损伤(IRI)大鼠梗死心肌边缘后,对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的影响.方法:全骨髓贴壁法培养BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD90,CD34,CD45.传至P3代时,用JWDSY含药血清诱导3d.建立大鼠心肌IRI造模,在心肌梗死区边缘移植血清诱导的细胞悬液.3,7,14 d后,取心肌组织用免疫组化法检测心肌细胞bFGF表达.结果:JWDSY血清组bFGF的积分吸光度(IA)在3,7,14d后分别升高至5 758.18±465.17,6 589.61±432.89,8 015.62±366.34;与模型组差异有统计学意义(P＜0.05),且随时间逐渐升高,比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:JWDSY血清诱导的BMSCs移植于IRI大鼠心梗区边缘后,可以改善心肌组织的病理学形态,增加心肌细胞bFGF蛋白表达,提示JWDSY含药血清诱导的BMSCs对IRI大鼠的心肌细胞有一定的保护作用.     

扶正抑瘤方对胶质瘤微环境下BMSC端粒酶及P53表达的影响

目的:观察扶正抑瘤方对胶质瘤(C6)微环境下骨髓间充质干细胞(BMSCs)的影响及作用机制。方法:扶正抑瘤方连续灌胃大鼠并提取大鼠含药血清,利用Transwell小室建立C6与BMSCs共培养环境,BMSCs分成4组进行干预。第1组:BMSCs空白对照组;第2组:BMSCs+扶正抑瘤方含药血清;第3组:BMSCs+C6细胞;第4组:BMSCs+C6细胞+扶正抑瘤方含药血清。通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测BMSCs的增殖情况,PCR法检测BMSCs的端粒酶活性,蛋白免疫印迹(Western blot)检测BMSCs中P53蛋白表达。结果:共培养第4组BMSCs的增殖和端粒酶活性比第3组受到较强的抑制(P0.05);但第4组BMSCs的P53蛋白表达比第3组增高(P0.05);第1组和第2组BMSCs的增殖、端粒酶活性和P53蛋白的表达均无明显差异(P0.05)。结论:扶正抑瘤方含药血清对胶质瘤环境下的BMSCs增殖具有抑制作用,其机制可能与抑制BMSCs的端粒酶活性并增加P53表达有关,对BMSCs本身没有影响。     

复方参鹿颗粒含药血清对较低危骨髓增生异常综合征p38MAPK磷酸化的抑制作用

目的观察复方参鹿颗粒(CSG)含药血清对较低危骨髓增生异常综合征(lower-risk MDS)骨髓单个核细胞(BMMNC)p38MAPK磷酸化、CD34~+细胞凋亡和正常造血干/祖细胞集落(CFU-HSPC)形成的影响。方法 16只清洁级Wistar大鼠,随机分为空白血清组、CSG组,每组8只,制备空白血清和CSG含药血清。体外骨髓细胞培养分为空白血清组、CSG组、SB203580组和SB202474组。分离lower-risk MDS患者BMMNC,与10%各组血清或p38抑制剂共培养,Annexin V/PI双染流式细胞术检测CD34~+细胞凋亡率, Western Blot检测p38、p-p38蛋白表达。MACS分离骨髓CD34~+细胞,用半固体甲基纤维素与10%各组血清或p38抑制剂共培养,观察CFU-HSPC形成,FISH检测集落中异常克隆细胞群体的比例。结果与空白血清和SB202474组比较,CSG、SB203580组的凋亡率、p-p38蛋白表达减少(P0.05);CFU-HSPC形成数增加(P0.01);形成的集落中异常克隆细胞比例降低(P0.05)。CSG和SB203580组的p-p38蛋白表达和异常克隆细胞比例呈正相关(P0.01)。结论 CSG含药血清能改善lower-risk MDS骨髓无效造血,其机制可能与抑制p38蛋白磷酸化,减少骨髓CD34~+细胞凋亡,并恢复骨髓正常造血细胞的优势生长有关。     

方参鹿颗粒含药血清对较低危骨髓增生异常综合征p38MAPK磷酸化的抑制作用

目的 观察复方参鹿颗粒（CSG）含药血清对较低危骨髓增生异常综合征（lower-risk MDS）骨髓单个核细胞（BMMNC）p38MAPK磷酸化、CD34+细胞凋亡和正常造血干/祖细胞集落（CFU-HSPC）形成的影响。方法 16只清洁级Wistar大鼠,随机分为空白血清组、CSG组,每组8只,制备空白血清和CSG含药血清。体外骨髓细胞培养分为空白血清组、CSG组、SB203580组和SB202474组。分离lower-risk MDS患者BMMNC,与10%各组血清或p38抑制剂共培养,Annexin V/PI双染流式细胞术检测CD34+细胞凋亡率, Western Blot检测p38、p-p38蛋白表达。MACS分离骨髓CD34+细胞,用半固体甲基纤维素与10%各组血清或p38抑制剂共培养,观察CFU-HSPC形成,FISH检测集落中异常克隆细胞群体的比例。结果 与空白血清和SB202474组比较,CSG、SB203580组的凋亡率、p-p38蛋白表达减少 （P<0.05）;CFU-HSPC形成数增加（P<0.01）;形成的集落中异常克隆细胞比例降低（P<0.05）。CSG和SB203580组的p-p38蛋白表达和异常克隆细胞比例呈正相关（P<0.01）。结论 CSG含药血清能改善lower-risk MDS骨髓无效造血,其机制可能与抑制p38蛋白磷酸化,减少骨髓CD34+细胞凋亡,并恢复骨髓正常造血细胞的优势生长有关。     

制何首乌对大鼠造血祖细胞增殖及骨髓细胞黏附分子表达的影响

目的探讨制何首乌含药血清对造血祖细胞CFU-GM增殖的影响及制首乌对贫血大鼠骨髓细胞黏附分子表达的影响。方法制备制何首乌大鼠含药血清,体外半固体培养骨髓CFU-GM细胞;建立大鼠血虚动物模型,用流式细胞仪检测给药后大鼠骨髓单个核细胞CD44、CD54的表达水平。结果含药血清组大鼠骨髓CFU-GM集落数明显增多,与空白血清组比较差异显著(P<0.05);给药组CD44的表达与模型组无明显差异(P>0.05),但给药组CD54的表达显著低于模型组(P<0.05),且接近正常。结论制何首乌能促进造血祖细胞CFU-GM的增殖,并可改善贫血大鼠骨髓细胞黏附分于CD54的表达水平。     

CCK-8法检测牛膝醇提物体外诱导兔BMSCs增殖活性的研究

目的:研究牛膝醇提物含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖的影响。方法:采用高、中、低剂量牛膝醇提物以及等体积生理盐水对SD级新西兰大白兔进行灌胃,从中提取含药血清,同时采用贴壁筛选法培养兔骨髓间充质干细胞,并以4种不同浓度的含药血清及胎牛血清分别干预第三代骨髓间充质干细胞。于干预后第3、6、9天分别3次采用CCK-8法测定细胞光密度值(OD),比较各组间的差异。结果:高剂量组牛膝醇提物含药血清刺激骨髓间充质干细胞增殖,并促进细胞分化,其OD均值与其他组相比较最高,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:牛膝醇提物含药血清具有促进BMSCs增殖作用,其中高剂量作用最强。     

含药血清对骨髓间充质干细胞体外增殖的影响

方法：对大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）体外培养、纯化，运用CD34、CD44、c—Kit进行免疫细胞化学法鉴定，并测定生长曲线，观察含药血清（木豆叶）对离体骨髓间充质干细胞（MSC）生长作用的影响。结果：所培养的细胞在表型表达和细胞形态上初步具备MSC特征，木豆叶血清组增长速度比空白对照组明显加快，并与剂量呈正比；证明含药血清能促进干细胞在体外增殖。结论：木豆叶含药血清对MSC有促进生长作用。     

龙鳖胶囊含药血清通过调控Hippo-YAP信号通路促进骨髓间充质干细胞迁移研究

目的探索龙鳖胶囊含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)迁移和Hippo-Yes相关蛋白(Yes-associatedprotein,YAP)信号通路的影响。方法通过全骨髓贴壁法提取大鼠原代BMSCs,取第3代细胞,采用流式细胞术检测CD29、CD44、CD45和CD90的表达情况;利用成脂和成骨分化诱导剂对BMSCs进行诱导,成骨分化后采用茜素红染色观察形成矿化结节的情况,成脂分化后采用油红O染色观察脂滴的形成情况。SD大鼠ig龙鳖胶囊(0.625g/kg),2次/d,连续7d,腹主动脉取血,制备含药血清;使用YAP抑制剂Verteporfin(2、5μmol/L)或5.0%含药血清处理BMSCs,采用划痕实验和Transwell迁移实验检测24 h后细胞的迁移情况。给予2.5%、5.0%含药血清处理BMSCs 24 h,采用Western blotting法检测Hippo-YAP信号通路相关蛋白的表达情况。结果 BMSCs分离培养后正常贴壁生长,呈长梭形;经成骨诱导茜素红染色后,可见大量被染成红色的矿化结节;经成脂诱导油红O染色后,可见大量被染成橘红色的脂滴;流式结果显示,表达CD29的阳性率为99.68%,表达CD44的阳性率为99.03%,表达CD45的阳性率为0.14%,CD90的阳性率为95.38%,符合BMSCs的特征。与对照组比较,Verteporfin显著抑制BMSCs迁移(P0.05、0.01、0.001),5.0%含药血清显著促进BMSCs迁移(P0.05);与等剂量的Verteporfin组比较,5.0%含药血清+Verteporfin组BMSCs迁移率明显上升(P0.01、0.001)。2.5%、5.0%含药血清均显著下调大型肿瘤抑制因子2(large tumor suppressor homolog 2,LATS2)蛋白表达水平(P0.05),上调YAP及其下游蛋白结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达水平(P0.01)。结论龙鳖胶囊含药血清具有促进BMSCs迁移的作用,其作用机制可能与调控Hippo-YAP信号通路相关。     

温阳补肾药对骨髓间充质干细胞促增殖的实验研究

目的：观察、比较巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）促增殖的影响,探讨其作用机理。方法：建立SD大鼠BMSCs体外培养体系,倒置显微镜、苏木精-伊红染色进行形态学观察;流式细胞仪（FCM）进行BMSCs细胞周期分析;MTT法检测BMSCs生长曲线;4味温阳补肾药含药血清配制,确定其最佳药物浓度和最佳血清浓度对BMSCs促增殖的影响。结果：体外培养大鼠BMSCs经倒置显微镜、苏木精-伊红染色的形态学观察均符合BMSCs的形态及生长特点。高、中、低剂量的四味中药含药血清对F3BMSCs 24、48、72h的增殖效应显示,以中剂量组20%含药血清对F3BMSCs 48h后促增殖最明显,其组间比较结果为淫羊藿〉骨碎补〉鹿角胶〉巴戟天。结论：巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补四味温阳补肾药均有促BMSCs增殖作用。淫羊藿促BMSCs增殖效果最佳,其组间比较结果为淫羊藿〉骨碎补〉鹿角胶〉巴戟天。     

六味地黄丸对老年小鼠造血干细胞影响的实验研究

目的观察六味地黄丸对老年小鼠骨髓造血干细胞的数量、表型、细胞周期和集落形成能力的影响.方法老年昆明种小鼠随机分为生理盐水对照组及六味地黄丸高、中、低剂量组,灌胃给药7 d后,分离骨髓造血干细胞,进行细胞计数;流式细胞仪检测细胞表型和细胞周期;并采用甲基半固体培养基检测集落的形成.结果各组小鼠骨髓单核细胞和悬浮细胞数量以及集落产率无显著差异,但低、中剂量组Sca-1和CD34的表达提高,说明较低剂量的药物能提高骨髓中造血干细胞的数量,而且药物还具有提高细胞增殖能力的作用.结论六味地黄丸激活造血干细胞,通过升高骨髓中造血干细胞的数量和增殖能力提高造血机能,以达到提高免疫功能的作用.     

补肾活血汤对骨髓间充质干细胞迁移及趋化因子受体4,趋化因子13表达的影响

目的:探讨补肾活血汤及其拆方对骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移及趋化因子(CXCL)13及趋化因子受体(CXCR)4表达的影响。方法:以大鼠BMSCs为研究对象,制备含药血清,采用全骨髓贴壁法培养BMSCs。通过Transwell实验观察补肾活血汤(全方组)及其拆方(补肾组、活血组)含药血清干预BMSCs体外迁移的能力,采用PCR法检测CXCL13及CXCR4RNA表达水平,采用WesternBlot法检测CXCR4蛋白表达水平。结果:通过培养获得高纯度的BMSCs.Transwell实验显示:全方含药血清干预的大鼠BMSCs,其迁移能力显著增强,与其它4组对比差异均有统计学意义(P0.05)。PCR结果显示:补肾活血汤全方含药血清能显著上调大鼠BMSCs的CXCL13及CXCR4RNA表达水平,与其它4组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。Western Blot结果显示:补肾活血汤全方含药血清能显著上调大鼠BMSCs的CXCR4蛋白表达水平,与其它4组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:全方组含药血清促BMSCs体外迁移的影响较显著,结合其影响CXCL13和CXCR4的表达水平,较其单纯的活血或补肾组效果更显著,其促进BMSCs体外迁移机制可能与同时上调CXCL13及CXCR4表达,从而激活CXCL13/CXCR5信号轴及SDF-1/CXCR4信号轴有关。合理配伍促进了补肾活血汤促BMSCs体外迁移的能力。