10例大肠癌患者外周血中CK20mRNA检测

目的：检测大肠癌患者外周血中的癌细胞，以确定其肿瘤是否有微转移发生。方法：应用逆转录酶链反应(RT-PCR)，检测10例大肠癌患者癌组织和外周血中CK20mRNA的表达。结果：10例大肠癌患者中有5例外周血检测出CK20mRNA，阳性率为50％。结论：外周血中CK20mRNA检测可作为大肠癌病人肿瘤微转移的参考指标，有助于肠癌转移的早期发现和选择更好的化疗方案。     

大肠癌患者外周血中细胞角蛋白19和癌胚抗原的表达及临床意义

目的:应用巢式逆转录聚合酶链反应（nested RT-PCR）技术检测大肠癌患者外周血中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达及临床意义,探讨其作为大肠癌微转移检测分子标记物的可能性。方法:应用巢式RT-PCR技术检测20例健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果:大肠癌组CK19 mRNA和CEA mRNA表达的阳性率为58.89%（53/90）和53.33%（48/90）;20例健康人外周血中无CK19 mRNA和CEA mRNA的表达; 20例大肠腺瘤疾病患者有1例CK19 mRNA的表达,阳性率为5.00%（1/20）,无CEA mRNA的表达。大肠癌患者中CK19 mRNA、CEA mRNA的阳性率与肿瘤分期及肿瘤转移有显著相关性（P＜0.05)。结论:CK19 mRNA和CEA mRNA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标记物具有良好的敏感度和特异性,同时可作为判断大肠癌患者的预后指标。     

10例大肠癌患者外周血中CK20mRNA检测

目的:检测大肠癌患者外周血中的癌细胞,以确定其肿瘤是否有微转移发生.方法:应用逆转录酶链反应(RT-PCR),检测10例大肠癌患者癌组织和外周血中CK20mRNA的表达.结果:10例大肠癌患者中有5例外周血检测出CK20mRNA,阳性率为50%.结论:外周血中CK20mRNA检测可作为大肠癌病人肿瘤微转移的参考指标,有助于肠癌转移的早期发现和选择更好的化疗方案.     

肺癌患者外周血CK19-mRNA的测定及其临床意义

目的：建立一种敏感的方法来检测肺癌患者外周血循环癌细胞,并探讨其临床应用的意义。方法：采用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测肺癌患者患者外周血CK19－mRNA的表达情况。结果：40例肺癌外周血标本中16例（40％）CK19－mRNA阳性,15例肺良性病变中1例＊（6．6％）阳性,5例正常人为阴性,10例有转移的肺癌患者,其外周血CK19－mRNA均为阳性（100％）,30例检测时尚我转移证据者,有6例阳性（20％）,经过半定量分析,两组CK19－mRNA在量上判别有显著性,结论：CK19－mRNA可作为一个标志物来检测肺癌患者外周血微转移,定量检测外周血CK19－mRNA有助于诊断肺癌的血行转移,定期检测外周血CK19－mRNA,尚可作为疗效的观察指标。     

胃肠恶性肿瘤外周血微转移的检测及其临床意义

目的研究胃癌、大肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR方法检测47例胃癌患者、58例大肠癌患者和6例非恶性病手术志愿者骨髓、门静脉和外周血CK20 mRNA的表达,并随访1年。结果6例健康志愿者无CK20 mRNA阳性表达;47例胃癌患者骨髓、门静脉血CK20 mRNA阳性表达率分别为87.2％(41/47)和85.1％(40/47);58例大肠癌患者骨髓、门静脉血阳性表达率分别为77.6％(45/58)和74.1％(43/58)。单次外周血采样CK20 mRNA阳性表达率胃癌患者为42.6％(20/47),大肠癌患者为44.8％(26/58);两次采样总阳性率胃癌患者为74.5％(35/47),大肠癌患者为69.0％(40/58)。外周血总阳性率略低于骨髓和门静脉血(P>0.05),外周血重复采样阳性率高于单次采样(P<0.05)。Duke C期患者CK20 mRNA阳性表达率高于DukeA、B期(P<0.05)。1年局部或远处复发率CK20 mRNA外周血阳性表达患者高于阴性者(P<0.05)。结论胃肠癌患者外周血CK20 mRNA RT-PCR检测有与骨髓、门静脉血相似的敏感性和特异性,可以作为检测胃肠癌微转移的指标并指导其治疗和预后。     

K19mRNA表达及其在诊断直肠癌淋巴结微转移中的意义

目的：研究角蛋白19（K19）mRNA在直肠癌区域淋巴结微转移中的表达及其临床意义。方法：通过病理组织学及逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）扩增K19mRNA对19例直肠癌患者的癌组织标本和51个淋巴结进行检测。结果：19例直肠癌患者癌组织均有K19mRNA表达；51个淋巴结中组织学阳性16个（31．4％），而RT—PCR阳性21个（41．2％），RT—PCR扩增K19mRNA及内参照β-actin后，所有癌组织及转移淋巴结显示221bp和461bp的扩增片断，而非肿瘤患者的8个淋巴结仅显示221bp扩增片断。结论：K19可作为检测直肠癌患者淋巴结微转移的分子标志物，RT—PCR扩增K19mRNA检测直肠癌区域淋巴结微转移可能是一种敏感、特异的检测方法，是对常规病理组织学方法的补充。     

宫颈癌患者外周血中CK19 mRNA和HPV16 mRNA基因的检测及其意义

目的：检测宫颈癌患者外周血标本中的组织特异性标志物(CK19 mRNA)与宫颈癌相对特异性标志物(HPV16 mRNA)的表达。方法：采用RT-PCR技术检测了Ⅰb～Ⅱb期宫颈癌患者的外周血标本30例。远处转移宫颈癌患者8例，妇科良性疾病患者16例，健康人9例：结果：30例外周血标本中3例扩增出CK19的特异性条带，检出率为10．0％(3／30)。远处转移患者CK19检出率为8／8，良性病变患者为0／16，健康者为0／9。30例宫颈癌患者中有10例患者术后宫颈癌标本的免疫组化HPV E6和(或)原位杂交为阳性，均未检测到HPV16 mRNA(0／10)；8例远处转移患者的检出率为12．5％(1／8)，妇科良性病变患者和健康者的检出率分别为0／16和0／9。结论：CK19 mRNA作为宫颈癌患者外周血的检测标志物显示了较好的敏感性和特异性。HPV16 mRNA的检出率较低，临床价值有待进一步研究。     

联合检测端粒酶和CK20诊断大肠癌外周血微转移的研究

目的：联合检测细胞角蛋白20（cytokeratin 20，CK20）表达和端粒酶的活性，初步探讨它们在检测大肠癌微转移中的意义。方法：用RT-PCR法，检测52例大肠癌患者术前和术后不同时间外周血中的CK20的表达。用端粒重复片段扩增方法检测相应患者外周血中的端粒酶的活性。结果：52例患者外周血中检出CK20表达及端粒酶活性检测阳性率按不同时间段分别为61．9％与57．7％（术前），69．1％与72．1％（术后24h），34．6％与30．9％（术后早期化疗结束后）。两者的阳性表达均与患者Duke’S分期存在显著性相关。结论：端粒酶和CK20均可作为标志物来检测大肠癌患者外周血中微转移。     

大肠癌患者外周血癌细胞CK20检测及其意义

目的:探讨大肠癌患者外周血癌细胞角蛋白20(cytokeratin,CK20)检测与转移复发的关系。方法:以非同位 素RT-PCR方法,检测30例大肠癌患者术前和术后外周血中大肠癌细胞的标志物CK20,同时检测20例健康者外周血作对 照。结果:30例患者外周血中查出CK20阳性表达23例,阳性率76.67%,20例健康者外周血均无CK20表达。CK20阳性检 出与Dukes分期、淋巴结转移和肝转移存在显著性差异(P<0.05),术后3天内外周血CK20阳性检出较术前多出2例。随访 发现,外周血CK20扩增阳性者,术后发生肝转移的机会增加(33.3%)。结论:检测大肠癌患者外周血微转移癌细胞CK20可 提高大肠癌临床分期的准确性,帮助综合判断患者的预后,且可能有助于早期诊断大肠癌肝脏微小转移。     

荧光定量聚合酶链反应检测大肠癌患者外周血癌细胞角蛋白20 mRNA

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测大肠癌患者外周血癌细胞角蛋白20 mRNA(CK20 mRNA)的表达水平及临床价值。方法采用FQ-PCR法测定136例结直肠癌及其肝脏转移患者外周血癌细胞CK20 mRNA的表达水平,系统研究了FQ-PCR法测定CK20 mRNA的重复性、定量范围和扩增效率,分析比较其与传统RT-PCR、免疫组化法检测结果的一致性。结果FQ- PCR法测定CK20 mRNA的批内CV为3.6%,批间CV为5.3%,定量范围为10~3～10~8 copies/ml,扩增效率为87.4%。与传统RT-PCR和免疫组化法相比较,Kappa值分别为0.87和0.83。结直肠癌患者外周血癌细胞CK20 mRNA的表达水平为(3.52×10~4±1.47×10~4)copies/ml,表达阳性率为48.5%;75例对照者均无CK20 mRNA表达。Dukes A、B、C、D期大肠癌患者外周血癌细胞CK20 mRNA的阳性率分别为9.5%、25.0%、48.8%和87.5%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。肝脏转移者CK20 mRNA阳性率为87.5%,显著高于肝脏无转移者(32.3%,P<0.05)。35例结直肠癌患者术后1、3、5周内CK20 mRNA表达水平呈下降趋势,但术后1、3周与术前比较,差异无统计学意义(P>0.05),术后5周显著低于术前(P<0.05)。结论FQ-PCR是较灵敏的快速定量检测CK20 mRNA的方法。大肠癌患者外周血癌细胞CK20 mRNA的表达与肿瘤的复发和转移有关,CK20 mRNA检测将有助于大肠癌血源性播散的监测。     

RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的:检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的表达情况,探讨其表达的临床意义.方法:采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,分别检测非小细胞肺癌患者和对照组患者外周血中CK19 mRNA的表达.结果:43例非小细胞肺癌患者外周血中CK19 mRNA表达阳性率为56%,对照组阳性率为5%,两组外周血CK19 mRNA阳性率比较有显著性差异(P＜0.01);外周血CK19 mRNA阳性率与病理类型无相关性;淋巴结转移阳性和阴性患者的外周血中CK19 mRNA阳性率分别为66%(21/32)和18%(2/11),二者差异显著(x2=6.65,P＜0.05).随TNM分期上升,CK19mRNA阳性率增加(x2=18.03,P＜0.01).结论:CK19 mRNA可作为RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的分子标志物,该方法敏感性高,有助于早期诊断肺癌血行转移,指导临床分期和治疗.     

胃肠癌患者外周血组织特异性mRNA的检测及其临床意义

目的 研究77例胃肠癌患者外周血中组织特异性mRNA（CK20、CK19及CEA）的表达,并探讨其意义.方法 RT-PCR技术检测77例胃肠癌患者术前外周血中CK20、CK19、CEA mRNA的表达.结果 77例胃肠癌患者外周血中,CK20、CK19及CEA的阳性表达率分别为44.2%、35.1%及54.5%;三基因同时检测时,至少一个基因检测结果为阳性的表达率为74.0%,与肿瘤的组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及复发具有相关性.结论 分子生物学技术联合检测多种标志物检测肿瘤细胞的外周血微转移,可提高检测的敏感性及准确性,有助于指导临床治疗及预后判断.     

大肠癌外周血CEAmRNA的表达及临床意义

目的 :探讨大肠癌外周血中CEAmRNA的表达及临床意义。方法 :以CEAmRNA为靶基因 ,运用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 4 2例大肠癌术前、术后外周血中CEAmRNA的表达。结果 :2 0例正常人外周血中均无CEAmRNA表达。 2 0例大肠癌组织标本均有CEAmRNA表达。术后外周血中CEAmRNA的阳性率与大肠癌的Dukes分期密切相关 ,术后外周血中CEAmRNA呈阳性的大肠癌日后发生肝转移的概率高于CEAmRNA呈阴性的。结论 :大肠癌外周血CEAmRNA的检测可能成为判断大肠癌恶性程度、转移、复发以及疗效监测的重要指标     

胃肠道癌外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

背景与目的:检测上皮组织特异性标志物,如CK19、CK20、多形上皮粘蛋白的核心蛋白(MUC1)及CEA等,在外周血、淋巴结及骨髓中的表达,是诊断早期胃肠道癌微转移的重要手段之一。本研究通过检测手术前、后胃肠道癌患者外周血细胞角蛋白20信使核糖核酸(CK20mRNA)的表达,了解胃肠道癌血行播散转移情况及在围手术期综合治疗中的意义。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链式反应(Nest-RT-PCR)检测62例胃肠道癌患者手术前后外周血CK20mRNA的表达状况。结果:62例样本中,34例(54.3%)术前CK20mRNA检测为阳性,31例(50.0%)术后CK20mRNA检测为阳性,对照组10例正常人及12例良性胃肠病患者CK20mRNA测定均为阴性。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CK20mRNA阳性率依次为37.5%、36.3%、66.7%、100.0%。Ⅰ、Ⅱ期患者与Ⅲ、Ⅳ期患者比较,两者间CK20mRNA的阳性率(分别为36.9%和83.3%)有显著性差异(P<0.05)。胃肠道癌的分化程度及癌栓的形成与外周血CK20mRNA的表达无关。有局部淋巴结转移患者与无淋巴结转移患者的阳性表达率有显著性差异(P<0.01)。手术前后外周血CK20mRNA阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论:外周血CK20mRNA检测可作为胃肠道癌微转移的判断指标之一,对临床正确分期及治疗起指导作用。