Runx3、Smad4、Cdk2、p21在胃癌中的表达及其临床意义

背景:近年来,组织芯片技术已越来越多地应用于恶性肿瘤相关研究。TGF-β信号通路在恶性肿瘤的发生、发展中起重要作用。目的:应用组织芯片技术研究TGF-β信号通路相关分子Runx3、Smad4、Cdk2、p21在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理特征和预后的关系。方法:收集130例行胃癌根治术患者的癌组织(n=130)癌旁组织(n=248)标本石蜡块,制成组织芯片,以免疫组化方法检测Runx3、Smad4、Cdk2、p21表达。结果:胃癌组织Runx3、Smad4、Cdk2、p21异常表达率分别为67.7%、35.4%、63.8%和70.0%,分别显著高于癌旁组织的14.1%、12.5%、18.1%和37.1%(P0.05)。Runx3异常表达与胃癌组织学分型和淋巴结转移有关(P0.05),Smad4和p21异常表达仅与胃癌组织学分型有关(P0.05),Cdk2异常表达与胃癌组织学分型、淋巴结转移和TNM分期有关(P0.05)。除Cdk2仅与Runx3相关外,Runx3、Smad4、p21在胃癌中的异常表达两两相关。Kaplan-Meier生存分析显示,Runx3、Smad4、p21异常表达组5年生存率分别显著低于相应正常表达组(P0.05);Cox比例风险模型显示Runx3和Smad4为胃癌患者的独立预后因素。结论:Runx3、Smad4、Cdk2、p21可能在胃癌的发生、发展中起一定作用。由于四者间存在相互影响,Runx3和Smad4能否作为判断胃癌预后的指标尚待进一步研究。     

Runx3与Smad4在食管鳞癌中表达和临床意义

目的研究Runx3与Smad4在食管鳞癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测Runx3、Smad4蛋白在60例食管鳞癌组织,40例癌旁组织及40例正常食管鳞状上皮组织中的表达。结果食管鳞癌组织、癌旁组织及正常组织中Runx3阳性表达率,Smad4阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05)。Runx3和Smad4在食管鳞癌中的表达与浸润深度、淋巴结转移及临床分期(TNM)相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小及组织分化程度无关(P>0.05)。Runx3和Smad4在食管鳞癌组织中的表达呈正相关(r=0.760,P<0.05)。结论 Runx3和Smad4蛋白在食管鳞癌组织中低表达,与食管鳞癌的发生发展、侵袭转移及预后有关,可能成为食管磷癌预后不良的生物学指标之一。     

原发性肝细胞癌组织Smad4、p21蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨原发性肝细胞癌组织Smad4和p21蛋白表达及其相关性.方法 采用免疫组化法检测60例原发性肝细胞癌组织及20例癌旁组织中Smad4、p21蛋白的表达,同时结合临床资料进行分析.结果 癌及癌旁组织中Smad4蛋白阳性表达率分别为36.7%、80.0%,p21蛋白阳性表达率分别为41.7%、70.0%,两种组织Smad4和p21蛋白表达差异均有统计学意义(P＜0.01,＜0.05).癌组织中Smad4蛋白表达与组织分级、肿瘤转移有关(P＜0.05).Smad4与p21蛋白的表达呈正相关(r=0.69,P＜0,01).结论 Smad4及p21蛋白在原发性肝细胞癌组织中表达均显著下降,并与肝癌生物学行为关系密切.     

胃腺癌中β-连环蛋白、c-myc表达及其临床意义

目的研究胃腺癌和癌旁组织中β-连环蛋白和c-myc的表达及其临床意义。方法收集102例胃腺癌患者的手术切除标本共297份，其中取自癌组织102份，癌旁组织195份（肿瘤边缘2cm以内97份，5cm以外98份）。将标本分别制成282点、156点和156点三块组织芯片，采用免疫组织化学法检测胃组织芯片中β-连环蛋白和c-myc的表达。结果β-连环蛋白和c-myc基因表达在胃黏膜癌变过程中呈上升趋势，从肠上皮化生开始即有明显增高，在胃癌显著高于肠上皮化生（P〈0．05，P〈0．001）。肛连环蛋白的异常表达与胃腺癌的分化程度及浸润深度有关（P〈0．05），c-myc表达与胃腺癌的分化程度有关（P〈0．05）。胃腺癌中β-连环蛋白和c-myc表达呈明显正相关（P〈0．05）。结论β-连环蛋白异常表达可能激活靶基因c-myc的表达，并在胃腺癌发生发展中起重要作用。     

Smad4、Caveolin-1在肺腺癌中的表达及与预后的关系

目的 探讨Smad4、Caveolin-1蛋白在肺腺癌中的表达,分析它们与临床病理因素间的关系及对预后的影响,为分子诊断、预后评估及临床治疗积累数据。方法 采用免疫组织化学SP法分别检测130例肺腺癌及癌周正常肺组织中Smad4、Caveolin-1蛋白的表达。结果 (1)Smad4、Caveolin-1蛋白在癌周正常肺组织中的表达率分别为90.77%、96.15%,显著高于癌组织中66.15%、41.54%,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)腺癌组织中Smad4、Caveolin-1蛋白的表达均与患者性别、年龄、肿块发生部位、有无吸烟及肿块大小无关(P均>0.05),但是与有无淋巴结转移、肿瘤分化程度及TNM分期相关(P均<0.05)。(3)Smad4、Caveolin-1两蛋白在腺癌组织中的表达呈正相关(P<0.05)。(4)Smad4阳性表达组的术后生存时间显著高于阴性表达组,差异有统计学意义(P<0.05),与之相反Caveolin-1阴性表达组的术后生存时间显著高于阳性表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Smad4、Cav...     

胃癌癌变过程中Smad4表达的变化及其与临床病理特征的关系

目的:探讨胃癌癌变过程中Smad4蛋白的表达变化及其与临床病理特征的关系.方法:利用组织病理学和免疫组织化学的方法,对103例胃癌患者(早期16例,进展期87例)的石蜡标本进行了病理学分类,并检测各级病变中Smad4蛋白的表达情况.结果:其中在28例标本中同时检出肠上皮化生,在13例标本中检出不典型增生,有2例标本同时检出肠上皮化生和不典型增生.癌旁的正常胃黏膜细胞均有Smad4蛋白表达,在肠上皮化生和不典型增生中表达阳性率分别为89.3%和76.9%.在癌细胞中则为54.4%,其中早期癌为62.5%,进展期癌为52.9%.随着恶变程度的增加,Smad4蛋白表达下降的频率显著升高(P<0.05).Smad4蛋白表达与癌细胞的分化程度密切相关(P<0.01),低分化癌细胞中Smad4蛋白表达下降的频率更高,为63.0%,而高分化癌细胞中Smad4蛋白表达下降的频率仅为31.6%.贲门部癌Smad4蛋白的表达阳性率明显高于其他部位(P<0.05),为75%.胃底、胃体和胃窦部癌的表达阳性率基本相似,分别为50%,53.6%和46.7%.Smad4蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、浸润深度未见明显相关性.结论:Smad4蛋白表达下降是胃癌癌变过程中频发的分子事件,并且与细胞恶变的进展程度和分化程度密切相关,但在贲门部癌中表达下降的频率较低.     

Runx3、Sp1、Bcl-2在胃腺癌中的表达及对预后的影响

目的探讨Runx3、Sp1、Bcl-2在胃腺癌中的表达,为评估患者预后提供实验依据。方法采用免疫组织化学SP法检测Runx3、Sp1、Bcl-2蛋白在63例胃腺癌、19例低级别上皮内瘤变及10例正常胃黏膜组织中的表达。结果胃腺癌组织中Runx3表达降低,Sp1和Bcl-2蛋白表达增高。Runx3低表达与肿瘤细胞的分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）;Sp1高表达与肿瘤细胞浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关（P〈0.05）;Bcl-2高表达与肿瘤细胞分化程度有关（P〈0.05）。胃腺癌组织中Runx3与Bcl-2阳性表达呈负相关（P〈0.01）;Sp1与Bcl-2阳性表达呈正相关（P〈0.01）;Runx3与Sp1的表达无明显相关性。Runx3及Sp1阳性表达率与患者总生存率关系密切。结论 Runx3蛋白低表达及Sp1蛋白高表达与胃腺癌的发生、发展及预后密切相关。     

甲状腺癌中Smad4的表达及其与DNA倍体相关性研究

采用免疫组化ABC法检测甲状腺癌组织、癌旁正常甲状腺组织中的Smad4;采用流式细胞术(FCM)对甲状腺癌组织进行DNA倍体检测.结果:Smad4在甲状腺癌、癌旁正常甲状腺组织中的表达率分别为47.1%、87.5%,P<0.05;Smad4的阳性表达率与甲状腺癌的组织学类型、淋巴结转移有关,(P<0.05);DNA异倍体率与Smad4阳性表达呈明显负相关(r8=-0.426,P<0.05).认为Smad4表达缺失及DNA异倍体与甲状腺癌的生物学行为有关,可作为预测甲状腺癌的发展及预后的重要生物学标志.     

血红素氧合酶-1在胃癌腹膜转移中的表达及意义

目的 探讨血红素氧合酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)在胃腺癌及腹膜转移灶、细胞系及耐药细胞系中的表达及意义.方法 用免疫组化法检测68例胄腺癌组织及其腹膜转移灶、转移灶旁无瘤腹膜组织中HO-1的表达,以及46例无腹膜转移的胃腺癌组织中HO-1的表达.Western印迹法检测胃腺癌腹膜转移组织及耐药细胞系HO-1的表达.结果 胃腺癌及其腹膜转移灶HO-1的阳性表达率分别为39.7%(27/68)和41.2%(28/68),显著高于癌旁无瘤腹膜组织[0%(0/68),P<0.01],亦显著高于无腹膜转移胃癌组织[21.7%(10/46),P<0.05].低分化转移灶HO-1表达水平显著高于中、高分化转移灶(P<0.05).Western印迹法检测胃癌腹膜转移患者的转移灶HO-1表达水平显著高于其癌旁无瘤腹膜组织(P<0.05).HO-1在耐药细胞系GC9811-P的表达水平较其亲本细胞系明显上调(P<0.05).结论 HO-1在胃腺癌腹膜转移过程中表达增高,HO-1可能参与胃癌腹膜转移发生.高表达HO-1与胃癌腹膜转移组织的恶性程度有关,其信号转导通路可能存在于组织的上皮细胞,并可能与多药耐药有关.     

胃癌组织FAT10与突变型p53表达及其相互关系

目的 检测FAT10与突变型p53在胃癌组织中的表达情况及相互间关系.方法 采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测FAT10和突变型p53在62例胃癌患者的胃癌组织、癌旁组织(距癌边缘2～5 cm)及正常胃组织(距癌边缘>5 cm)中的表达水平,统计分析两者表达间的关联性及FAT10与胃癌预后之间的关系.结果 FAT10蛋白和突变型p53蛋白在胃癌组织中的表达阳性率分别为51.61%(32/62)和45.16%(28/62),显著高于癌旁组织[12.90%(8/62)和14.51%(9/62),χ2值分别=21.26和20.69,P值均<0.01]及正常胃组织[6.45%(4/62)和9.68%(6/62),χ2值分别=13.91和19.61,P值均<0.01].胃癌FAT10蛋白及mRNA的表达上升主要与胃癌的淋巴转移及TNM分期密切相关(P值均<0.05).胃癌组织中FAT10表达在蛋白及基因水平均与突变型p53表达呈正相关性(r值分别=0.865和0.761,P值分别<0.05和0.01).FAT10蛋白阳性表达或mRNA表达水平高者,其累计生存时间显著低于FAT10阴性者(P值均<0.05).结论 FAT10与突变型p53在胃癌组织中表达上调且呈正相关性,两者可能共同参与胃癌的形成与发展,FAT10对评价胃癌的预后可能有较好的价值.     

Smad 4和Galectin-3在胃癌中的表达及其临床意义

目的　研究黏附分子Galectin 3和抑癌基因Smad4在正常组织和胃癌中的表达及其临床意义。方法　采用S P免疫组化法检测Galectin 3和Smad4在胃癌及其邻近正常组织中的表达。所有标本都使用武汉同济千屏HPIAS 2000图像分析软件进行定量分析。结果　Galectin 3在胃癌中的阳性表达率为 85 9%,约有 46%表现出核染色。Galectin 3阳性表达以及染色强度与胃癌的分化程度密切相关(P<0 001),分化越低,染色强度越深,在淋巴结转移的癌组织中表达更明显 (P=0 001),与正常组织比较,具有显著的差异性(P<0 001)。Smad4主要在正常组织细胞浆中表达,在胃癌组织中阳性表达率为 59 36%,随着分化程度降低,表达逐渐减少,染色强度也逐渐减弱,尤其在低分化胃癌中更为明显(P<0 001)。与正常组织相比,Smad4减弱具有明显差异性(P<0 01)。结论Galectin 3表达增强与Smad4蛋白表达减弱都与胃癌的分化程度以及淋巴结转移有关,同时检测,能提高预测胃癌进展程度的准确性,是判断胃癌患者淋巴结转移和预后较好的方法。     

胃癌组织中肿瘤相关基因甲基化及其表达与叶酸和代谢酶MTHFR基因多态性的关系

目的:探讨人胃癌组织中癌基c-myc,抑癌基因p16INK4A,p21WAF1,错配修复基NhMLH1和hM2SH2的甲基化状态及其表达与叶酸、MTHFR基因多态性的关系．方法:胃癌38例手术切除标本的癌区、癌旁和外周正常黏膜组织,运用FOL ACS:180自动化学发光系统测定叶酸含量,PCR-RFLP技术检测MTHFR基因677(C→T)和1298(A→C)两个常见多态,并分别以Real—time RT-PCR和甲基化特异性PCR (MSP)技术检测肿瘤相关基因的表达和甲基化状态．结果:c-myc表达升高,p16INK4A,hMLH1和hMSH2表达降低的胃癌黏膜组织其基因启动子区异常甲基化．p21WAF1,hMSH2表达降低, p16INK4A高甲基化者叶酸水平明显降低,c-myc低甲基化和表达升高者中均存在低叶酸水平．MTHFR 677CC基因型的胃癌黏膜组织p16INK4A甲基化升高且表达降低,而其余肿瘤相关基因的甲基化及其表达与MTHFR两个常见多态均无明显相关性．结论:DNA甲基化在胃癌的发生、发展中具有重要作用,叶酸水平和MTHFR基因多态性通过影响部分肿瘤相关基因的甲基化状态而调控其表达．     

DNA甲基转移酶1蛋白在人胃癌黏膜组织中的表达及其临床意义

背景：肿瘤组织存在DNA甲基化紊乱．包括与细胞增殖周期密切相关的癌基因低甲基化和抑癌基因高甲基化等。DNA甲基转移酶（Dnmt）参与甲基化的形成（主要是Dnmt3a和Dnmt3b）和维持（主要是Dnmt1），但目前对胃癌Dnmt蛋白的表达情况仍知之甚少，更缺乏其与肿瘤生物学行为和临床参数关系的研究。目的：探讨癌区、癌旁和外周正常黏膜组织中Dnmt1蛋白表达的差异及其临床意义。方法：收集38例胃癌患者标本，取癌区、癌旁和外周正常黏膜组织各1．2块，应用免疫组化SP法分析各黏膜组织中Dnmt1蛋白的表达．并探讨其与胃癌浸润和转移的关系。结果：在38例胃癌黏膜组织中，Dnmt1蛋白的表达阳性率为81．6％，显著高于相应癌旁（39．5％）和正常黏膜组织（10．5％）（P〈0．001）。阳性切片中可见Dnmt1蛋白表达弥散分布于肿瘤或腺体的细胞质和细胞核，染色较均匀。Dnmt1蛋白表达与胃癌患者的年龄、肿瘤分化程度和有无淋巴结转移无明显相关性（P〉0．05），与性别呈一定的相关性（P=0．007）。结论：Dnmtl蛋白过表达在人胃癌的发生和发展中起一定作用。     

组织芯片检测β-连环蛋白、c-erbB2在胃腺癌中的表达及其临床意义

近年来组织芯片已越来越多地应用于恶性肿瘤的相关研究,但用于胃癌研究的报道较少。目的：探讨胃腺癌、癌旁组织和外周正常黏膜组织中β-连环蛋白和c—erbB2的表达及其临床意义。方法：取102例胃腺癌、97例癌旁组织和98例外周正常黏膜组织分别制成含282点、156点和156点的3块组织芯片。以免疫组化法检测组织芯片中β-连环蛋白和c—erbB2的表达,并分析其与胃腺癌临床病理特征的关系。结果：胃腺癌组织中β-连环蛋白和c—erbB2阳性表达率显著高于癌旁组织和外周正常黏膜组织（57．0％对22．1％和7．3％,P=0．000;29．0％对5．3％和0％,P=0．000）。β-连环蛋白和c-erbB2异常表达与胃腺癌的分化程度（P=0．027,P=0．001）和浸润深度（P=0．033,P=0．011）有关,与其他临床病理特征无关。胃腺癌中β-连环蛋白表达与c—erbB2表达呈明显正相关（P〈0．05）。结论：c-erbB2异常表达可能导致靶基因β-连环蛋白异常表达,从而在胃腺癌的发生、发展中起重要作用。     

胃癌TIMP3基因启动子甲基化及其蛋白表达的研究

目的:探讨组织金属蛋白酶抑制因子-3(tissue inhibitor of metalloproteinase 3,TIMP3)基因启动子甲基化与其蛋白表达的相关性,并分析 TIMP3基因CpG岛异常甲基化与胃腺癌及其临床病理特征的关联性．方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)技术和免疫组织化学方法分别检测78例患者的胃正常黏膜组织、胃癌组织及转移淋巴结中,TIMP3 基因启动子甲基化和蛋白表达情况．结果:胃正常黏膜组织、早期、进展期胃癌组织和转移淋巴结中TIMP3基因启动子均有甲基化修饰,其阳性率分别为35．9％(28／78); 85．0％(17／20),89．7％(52／58);转移淋巴结 100％(78／78)．胃癌组TIMP3基因启动子甲基化率明显高于胃正常黏膜组(尸<0．05)．胃正常黏膜组织TIMP3蛋白表达全部为阳性(100％), 20例早期胃癌中,6例阳性(30％),58例进展期胃癌中,2例阳性(3．4％),在转移淋巴结中全部不表达(0％)．胃癌70例蛋白表达阴性的标本中,64例TIMP3基因启动子甲基化阳性 (91．4％),TIMP3蛋白表达与启动子甲基化呈明显负相关(P<0．01)．结论:启动子区CpG岛高甲基化是胃癌组织中TIMP3基因表达失活的主要机制,可能成为胃癌分子诊断与病期评估的标志之一．