输精管结扎对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

为探讨输精管结扎对睾丸曲精管生精细胞凋亡程度的影响，应用流式细胞仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记技术，检测大鼠输精管结扎和假手术后２－１２周睾丸生精细胞的凋亡情况。     

输精管阻断对大鼠生精细胞增殖和生精过程的影响

为了解输精管阻断对大鼠生精细胞增殖和生精过程的影响,应用流式细胞技术,对输精管阻断４周和８ 周组大鼠的生精细胞ＤＮＡ 含量进行了分析。结果显示：输精管阻断４ 周和８ 周,实验组的精子细胞和精子比例明显少于相应的对照组（Ｐ＜ ０．０５）;而精原细胞和次级精母细胞比例则明显高于相应的对照组（Ｐ＜ ０．０５）;同时,输精管阻断后生精细胞增殖指数（ＰＩ）值明显降低（Ｐ＜ ０．０５）,且细胞多处于Ｇ０ ／Ｇ１ 期,其中８ 周组的Ｓ期细胞比例明显地少于４ 周组（Ｐ＜ ０．０５）。提示：输精管阻断可以影响生精过程的多个阶段,使生精细胞的增殖延缓。     

输精管阻断对大鼠生精细胞增殖和生精过程的影响

为了解输精管阻断对大鼠生精细胞增殖和生精过程的影响,应用流式细胞技术,对输精管阻断４周和８周组大鼠的生精细胞ＤＮＡ含量进行了分析。结果显示：输精管阻断４周和８周,实验组的精子细胞和精子比例明显少于相应的对照组（Ｐ〈０．０５）;而精原细胞和次级精母细胞比例则明显高于相应的对照组（Ｐ〈０．０５）;同时,输精管阻断后生精细胞的增殖指数（ＰＩ）值明显降低（Ｐ〈０．０５）,且细胞多处于Ｇ０／Ｇ１期,其中８周     

两种鬼臼脂素衍生物的2DNMR研究

观察睾丸炎期间生精细胞凋亡的情况。方法：Ｇｉｅｍｓａ染色、ＴＵＮＥＬ及流式细胞术测定。结果：经Ｇｉｅｍｓａ染色可见一些生精细胞及巨大核细胞的细胞核染色致密,形状不规则。流式细胞仪测定发现正常小鼠睾丸内亚单倍体很少,模型小鼠睾丸内亚单倍体增多。ＴＵＮＥＬ阳性细胞在模型小鼠睾丸内增多,主要为精原细胞。精母细胞及管腔中的巨大核细胞。结论：正常小鼠睾丸中可见少量凋亡的生精细胞。睾丸炎期间凋亡的生精细胞增多。此时出现的一些巨大核细胞也是凋亡中的细胞。     

小鼠实验性睾丸炎期间生精细胞凋亡的观察

目的：观察睾丸炎期间生精细胞凋亡的情况。方法：Ｇｉｅｍｓａ染色,ＴＵＮＥＬ及流式细胞术测定。结果;经Ｇｉｅｍｓａ染色可见一些生精细胞２及巨大核细胞的核染色致密,形状不规则。流式细胞仪测定发现正常小鼠睾丸内亚单倍体很少,模型小鼠睾丸内亚单倍体增多。ＴＵＮＥＬ阳性细胞在模型小鼠睾丸内增多,主要为精原细胞,精母细胞及管腔中的巨大核细胞。     

输精管结扎不同月份大鼠睾丸cAMP的动态变化

本研究将５６只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为输精管结扎３月组及对照组，输精管结扎８月组及对照组，输精管结扎１５月组及对照组。分别检测各组的睾丸环－一磷酸腺苷、睾丸睾酮、睾丸血管紧张素转换酶。结果显示，ＲＶ－３组、ＲＶ－８组的睾丸ｃＡＭＰ明显低于ＲＣ－３组和ＲＣ－８组（Ｐ＜０．０５），而ＲＶ－１５组与ＲＣ－１５组睾丸ｃＡＭＰ则无差异（Ｐ＞０．０５）。睾丸睾酮，除ＲＶ－１５组较ＲＣ－１５组升高外（Ｐ＜０．０     

激活核因子Ｅ２相关因子２信号通路减轻高糖诱导足细胞的凋亡

【目的】 探讨激活核因子Ｅ２相关因子２（Ｎｒｆ２）通路能否减轻高糖诱导足细胞的凋亡。【方法】体外培养小鼠足细胞,分为５组：对照组、高渗组、高糖组、高糖＋叔丁基对苯二酚（ ｔＢＨＱ）,高糖＋Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）。流式细胞仪检测细胞内活性氧和凋亡;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 及ｒｅａｌ ｔｉｍｅ－ ＰＣＲ检测Ｎｒｆ２、醌氧化还原酶１（ＮＱＯ１）,血红素加氧酶（ＨＯ－１）的表达;检测足细胞丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）及过氧化氢酶（ＣＡＴ）。【结果】 高糖组足细胞凋亡率、活性氧及细胞ＭＤＡ高于对照组（Ｐ ＜ ０．０５）,而该组足细胞ＳＯＤ、ＧＳＨ及ＣＡＴ低于对照组（Ｐ ＜ ０．０５）;高糖＋ＮＡＣ组的足细胞凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）;高糖＋ｔＢＨＱ组足细胞的总Ｎｒｆ２及核Ｎｒｆ２、 ＨＯ－１、ＮＱＯ１的表达高于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）,细胞内ＳＯＤ、ＧＳＨ及ＣＡＴ高于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）,高糖＋ｔＢＨＱ组足细胞的凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 激活 Ｎｒｆ２通路降低高糖诱导足细胞的氧化应激,减轻足细胞凋亡。     

输精管结扎三个月大鼠垂体和睾丸激素的变化及睾丸雄激素受体的基因表达

本实验检测了输精管结扎３月组（ＶＧ）及对照组（ＣＧ）大鼠的血清黄体生成素（ＬＨ）、卵泡刺激素（ＦＳＨ）、睾酮（Ｔ）、睾丸组织雄激素结合蛋白（ＡＢＰ）、核雄激素受体（ＮＡＲ）含量及睾丸雄激素色体的基因表达。结果发现，①血清ＬＨ结扎组较对照组明显增高（Ｐ＜０．０５），血清ＦＳＨ，两组无差异；②结扎组血清Ｔ较对照组降低；③结扎组睾丸组织ＡＢＰ及ＮＡＲ含量均高于对照组；④用α－３２Ｐ标记的雄激素受体ｃＤＮＡ与睾丸组织ＲＮＡ的斑点杂交，显示结扎组表达增强。提示，输精管结扎后，机体发生了适应性的改变。     

谷氨酸单钠对大鼠睾丸的影响

给新生期Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下注射１０％谷氨酸单钠（ＭＳＧ），观察其青春期（５２日龄）及成年期（１００日龄）的睾丸。结果：各期给药组睾丸质量均显著低于对照组（Ｐ＜０．０１），血清睾酮（Ｔ）浓度给药组各期均显著低于对照组（Ｐ＜０．０１）。各期给药组睾丸发育停滞，生精细胞停留于精原细胞、精母细胞阶段、曲细精管内未见精子细胞，无精子形成。结果表明：新生期注射ＭＳＧ的大鼠睾丸的生精过程受到阻滞。     

直立倾斜试验中血压,心率及血浆去甲肾上腺素水平的变化

对３５例不明原因晕厥病人及１５例正常人行直立倾斜试验（ＨＵＴ）检查，观察血压、心率及血浆去甲肾上腺素（ＮＥ）浓度的变化。结果示平卧位阳性（Ⅰ组）、阴性（Ⅱ组）及对照（Ⅲ组）病例无显著差异（Ｐ＞０．０５）。倾斜后５分钟，３组心率、舒张压、ＮＥ均较平卧位有所上升（Ｐ＜０．０５），但３组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ＨＵＴ结束时，心率、舒张压Ⅰ组表现为较前明显下降（Ｐ＜０．０５），而Ⅱ、Ⅲ组较前又有所上升（Ｐ＜０．０５），Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ组间差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。血中ＮＥ浓度３组均较前又有所增加（Ｐ＜０．０５），３组间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。说明ＨＵＴ中，不能仅依据血中ＮＥ水平来判断体内交感神经张力的高低。     

补肾活血方对精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡的影响

目的探讨补肾活血方对精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡及各级生精细胞数的影响。方法将50只3月龄雄性SD大鼠先随机抽出10只为假手术组，其余40只大鼠采用肾静脉缩窄法建立精索静脉曲张病理模型，造模完成后再随机均分为模型组，补肾活血方低剂量组、中剂量组、高剂量组。造模后48d开始给药，连续给药60d，用流式细胞仪检测各纽大鼠睾丸生精细胞凋亡数、凋亡率及各级生精细胞数。结果假手术组未出现明显的凋亡峰，模型组与各治疗组均出现明显的凋亡峰，且模型组大鼠睾丸生精细胞凋亡率显著高于各治疗组（P〈0．01）。各级生精细胞数比较，1C细胞（精子细胞与精予）数模型组与各治疗组比较有显著性差异（P〈0．05）；2C细胞（次级精母细胞）数各组间比较无显著性差异；4C细胞数（初级精母细胞）模型组与治疗组比较有非常显著性差异（P〈0．01）。结论生精细胞大量凋亡是精索静脉曲张导致不育的重要病理机制，补肾活血方能降低生精细胞凋亡率，提高模型动物各级生精细胞数量。     

脊髓损伤对生精细胞bcl-2和Bax基因表达的影响

目的 :探讨脊髓损伤后生精细胞减少的原因。方法 :应用链霉菌抗生物素蛋白 过氧化酶 (S P)免疫组织化学法检测脊髓损伤大鼠术后第 2周、第 4周睾丸生精细胞bcl 2 ,Bax蛋白表达的情况。结果 :术后第 2周 ,手术组大鼠睾丸生精细胞bcl 2 ,Bax基因蛋白表达与假手术组比较差异无显著性意义。术后第 4周 ,手术组大鼠与假手术组比较 ,睾丸生精细胞bcl 2基因蛋白表达显著性减少 (P <0 0 5 ) ,Bax基因蛋白表达则显著性增高 (P <0 0 5 )。结论 :bcl 2及Bax基因蛋白表达的改变是脊髓损伤后睾丸生精细胞显著减少的原因之一。     

热休克蛋白60在高脂及高脂高糖大鼠睾丸中的表达及对生精细胞凋亡的影响

目的 探讨热休克蛋白60(Hsp60)在高脂及高脂高糖SD大鼠睾丸组织中的表达情况及对生精细胞凋亡的影响.方法 将雄性SD大鼠60只随机分成对照组15例、高脂组15例及高脂高糖组30例,对照组给予普通饲料喂养,高脂组给予高脂饲料喂养,24周后加入含0.2%丙硫氧嘧啶继续喂养;高脂高糖组给予高脂饲料喂养,24周后腹腔注射链脲佐菌素,所有大鼠均喂养36周.造模成功后取睾丸组织,用免疫组化法和免疫印迹试验分析检测大鼠睾丸组织中Hsp60表达情况,并检测组织中细胞凋亡情况.结果 对照组生精细胞数量多且按序逐层排列,管腔中央可见大量精子细胞,HSP60少量表达于次级精母细胞;高脂组及高脂高糖组生精细胞数量减少且排列紊乱,部分切片可观察到生精细胞脱落.免疫组化及免疫印迹试验结果均显示,高脂组及高脂高糖组Hsp60蛋白表达量高于对照组(P<0.05),而高脂组与高脂高糖组间比较差异无统计学意义(P>0.05).高脂组及高脂高糖组的生精细胞凋亡数量明显多于对照组,且高脂高糖组生精细胞凋亡数量多于高脂组(P<0.05).结论 高脂及高脂高糖大鼠睾丸生精细胞凋亡的发生可能与Hsp60密切相关.     

牛磺酸对肾性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响

探讨牛磺酸对高血压大鼠左室心肌细胞凋亡的影响。方法：建立肾血管性高血压大鼠模型,心肌细胞凋亡检测采用ＴｄＴ介导的原位末端缺口标记法,ＡｎｇⅡ测定采用放免法。结果与相应假手术组相比,两级模型组（４周、１２周）心肌ＡｎｇⅡ含量增多,收肌细胞凋亡增多;与１２周模型组相比,给药组左收室／体重比和心肌ＡｎｇⅡ含心肌细胞凋亡减少,与正常组相近。结论高血压大鼠心肌细胞凋亡增多,牛磺酸高血压心肌细胞凋亡有抑制作用     

微创血肿抽吸术后大鼠脑出血周围组织细胞凋亡的研究

目的探讨脑出血周围组织神经细胞凋亡相关基因热休克蛋白70(HSP70)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的变化规律及微创血肿抽吸干预治疗对神经细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠75只分为假手术组、脑出血组、血肿抽吸组,各组又分为12 h、1 d、2 d、3 d、7 d 5个时间点。假手术组注入尾状核2μL生理盐水,脑出血组注入大鼠尾状核2μLⅣ胶原酶。血肿抽吸组是在脑出血模型制作6 h后进行血肿抽吸。各组分别于各时间点处死大鼠取脑组织,采用免疫组织化学染色测定各组大鼠脑出血周围HSP70、Caspase-3蛋白的表达并进行统计学处理。结果 HSP70、Caspase-3含量脑出血组较血肿抽吸组及假手术组均明显增高(P<0.05),血肿抽吸组比假手术组明显增高(P<0.05)。HSP70表达在12 h出现,3 d达高峰,随后表达逐渐减少。Caspase-3蛋白的表达在12 h出现,在3 d时达高峰,第7天表达明显减少。结论 Caspase-3蛋白高表达说明在脑出血第3天神经细胞凋亡和损害达到高峰,随后逐渐降低,HSP70高表达对出血脑组织具有明显的保护效应,且对Caspase-3蛋白的表达具有抑制作用,而且在早期对脑出血进行微创血肿抽吸干预治疗可以减少脑出血后神经细胞的凋亡。     

丙酮酸乙酯对小鼠缺血再灌注肾脏细胞凋亡的影响

目的研究丙酮酸乙酯（EP）对小鼠缺血再灌注（I／R）肾脏组织凋亡相关基因表达及细胞凋亡的影响。方法8周龄雄性BABL／c小鼠52只,随机分为假手术组（n=10）、I／R组（建立I／R模型,n=10）、EP处理组（n=32）;EP处理组再分为EP预处理组（建模前30min给药）和I／R后4、6、12hEP处理组（分别于建模后4、6、12h给药）,每组8只动物。TUNEL染色分析和比较各组凋亡细胞数量的变化;Real—timePCR检测肾脏组织凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspas-3mRNA表达。结果TUNEL染色分析显示,与假手术组比较,I／R组凋亡细胞数量明显增多（P〈0．05）;EP预处理组凋亡细胞数量明显少于I／R组（P〈0．05）。Real-timePCR检测结果显示,与假手术组相比,I／R组Bax和Caspase-3mRNA表达显著升高,Bcl-2mRNA表达明显降低（P〈0．05）;与I／R组比较,EP预处理组和I／R后6hEP处理组的Bcl-2mRNA表达显著升高（P〈0．05）,EP预处理组和I／R后各时间点EP处理组的Bax和Caspase-3mRNA表达明显降低（P〈0．05）。结论EP能有效抑制BABL／c小鼠肾脏I／R过程中的细胞凋亡,可能与其调控肾脏组织凋亡相关基因的表达有关。