输精管结扎对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

为探讨输精管结扎对睾丸曲精管生精细胞凋亡程度的影响，应用流式细胞仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记技术，检测大鼠输精管结扎和假手术后２－１２周睾丸生精细胞的凋亡情况。     

输精管阻断对大鼠生精细胞增殖和生精过程的影响

为了解输精管阻断对大鼠生精细胞增殖和生精过程的影响,应用流式细胞技术,对输精管阻断４周和８周组大鼠的生精细胞ＤＮＡ含量进行了分析。结果显示：输精管阻断４周和８周,实验组的精子细胞和精子比例明显少于相应的对照组（Ｐ〈０．０５）;而精原细胞和次级精母细胞比例则明显高于相应的对照组（Ｐ〈０．０５）;同时,输精管阻断后生精细胞的增殖指数（ＰＩ）值明显降低（Ｐ〈０．０５）,且细胞多处于Ｇ０／Ｇ１期,其中８周     

输精管阻断对大鼠生精细胞增殖和生精过程的影响

为了解输精管阻断对大鼠生精细胞增殖和生精过程的影响,应用流式细胞技术,对输精管阻断４周和８ 周组大鼠的生精细胞ＤＮＡ 含量进行了分析。结果显示：输精管阻断４ 周和８ 周,实验组的精子细胞和精子比例明显少于相应的对照组（Ｐ＜ ０．０５）;而精原细胞和次级精母细胞比例则明显高于相应的对照组（Ｐ＜ ０．０５）;同时,输精管阻断后生精细胞增殖指数（ＰＩ）值明显降低（Ｐ＜ ０．０５）,且细胞多处于Ｇ０ ／Ｇ１ 期,其中８ 周组的Ｓ期细胞比例明显地少于４ 周组（Ｐ＜ ０．０５）。提示：输精管阻断可以影响生精过程的多个阶段,使生精细胞的增殖延缓。     

愤怒应激对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的:探讨愤怒应激对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响.方法:20只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组与愤怒组.愤怒组大鼠采用“夹尾激怒法”刺激大鼠,每次夹尾30 min,间隔3h再刺激1次,每天2次,连续14 d.对照组不予夹尾激怒,余同愤怒组.14 d后,HE染色法、TUNEL法分别检测观察睾丸组织病理学改变,生精细胞凋亡情况.结果:①与对照组相比,愤怒组大鼠睾丸生精小管生精上皮层数减少,各级生精细胞及支持细胞排列松散、不规则,生精细胞与支持细胞核浓缩凝集,生精细胞脱落明显,管腔内精子数量减少;②两组大鼠睾丸存在生精细胞凋亡,与对照组相比,愤怒组大鼠生精细胞凋亡显著增高(P＜0.05).结论:愤怒应激导致大鼠睾丸生精细胞凋亡增加,可导致愤怒应激大鼠睾丸生精细胞数量减少.     

邻苯二甲酸二丁酯对大鼠生精细胞凋亡的影响

目的：观察不同剂量的邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对成年大鼠生精细胞凋亡的影响。方法：32只健康雄性sD大鼠随机分成4组,分别为每天250mg／kg、500mg／kg、1000mg／kg3个染毒组和对照组,灌胃法连续给药4周后对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数,并计算每日精子生成量（DSP）。采用TUNEL原位细胞杂交方法检测大鼠生精细胞凋亡情况。结果：①中剂量组（500mg／kg）和高剂量组（1000mg／kg）睾丸精子头计数和DSP均低于对照组（P〈0．05）;②与对照组相比,中剂量组和高剂量组生精细胞凋亡指数（AI）均显著升高（P〈0．01）;③生精细胞凋亡指数与每日精子生成量呈负相关（r=-0．542,P〈0．01）。结论：一定剂量的DBP可通过促进生精细胞凋亡而导致精子生成量的减少,产生生殖毒性。     

弓形虫对小鼠睾丸各级生精细胞凋亡的影响

目的探讨弓形虫感染后对小鼠睾丸各级生精细胞(单倍体、二倍体、四倍体)凋亡的影响程度,进一步阐明弓形虫致雄性不育的机制。方法选用9～10周龄雄性BALB/c小鼠60只,随机分为正常对照组、弓形虫感染组(2.5×103、5×103、1×104、2×104)及阳性对照组(环磷酰胺)。采用腹腔注射法,建立弓形虫感染致小鼠睾丸损伤的模型,病理切片观察和流式细胞术检测各组小鼠睾丸各级生精细胞的凋亡情况,以及生精细胞单倍体、二倍体、四倍体三个细胞群的比例变化。结果正常对照组未出现明显的凋亡峰,处理组的单倍体、二倍体均出现明显的细胞凋亡,尤以二倍体明显,同时四倍体细胞明显减少。结论弓形虫可致睾丸各级生精细胞凋亡,对二倍体细胞的影响尤为明显;四倍体细胞显著减少。推测二倍体、四倍体细胞的凋亡及发育受阻是导致雄性生殖障碍的主要原因,导致睾丸生精细胞的损伤、精子形成障碍、少精、无精,最终导致雄性不育。     

局部热激对大鼠睾丸生精细胞凋亡与增殖的影响

目的 研究局部热激对大鼠睾丸生精细胞凋亡和增殖的动态变化及二者相关性的影响,以探索生精细胞凋亡与增殖的关系。方法 36只60天龄雄性Wistar大鼠随机分为对照组(22℃,20min)与热激组(43℃,20min),热激组按睾丸局部处理后1、2、3、4、5天分成5个亚组;采用HE染色分析各组大鼠曲细精管的形态变化;采用TUNEL法检测各组生精细胞凋亡情况;采用免疫组织化学方法(以下简称免疫组化)分析各组大鼠曲细精管Ki-67表达与分布的变化。结果 HE染色显示,热激后生精细胞逐渐脱落、缺失,至第4天最为严重,而第5天生精细胞有所恢复;TUNEL法检测显示,热激后各组的TUNEL凋亡信号显著增加(P<0.01),热激2天组达到高峰,热激3~5天组凋亡信号逐渐降低;免疫组化结果显示,热激后各组的Ki67表达显著下降(P<0.01),热激1天组很少见到Ki67表达,热激2~5天组Ki67表达逐渐增加;比较各组Ki67与TUNEL的比值,发现热激1~2天组二者比值小于1,热激3天组二者比值几乎等于1,热激4天组二者比值大于1。结论 睾丸局部热激可导致生精细胞凋亡,生精细胞增殖抑制,热激后早期凋亡过程胜于增殖,热激后期增殖强于凋亡过程,表明凋亡过程的可逆可能在于增殖活性增强。     

生精细胞的凋亡研究进展

<正>凋亡(apoptosis)是由澳大利亚病理学家Johnkerr于1972年提出的,指细胞由基因控制的主动死亡过程。形态上表现为核固缩、染色质浓集、细胞膜皱折、胞体变小,细胞成断片后,最后成为被膜包绕的凋亡小体而被邻近的细胞吞噬与降解。组织学表现为单个细胞缺失,周围没有炎症反应。生物化学表现为活化Ca~(2+)依赖的核酸内切酶,在核小体连接处将染色质DNA降解成单或寡核苷酸小体,其大小均为长度180～200bp的倍数。凋亡可以是一种生理现象,也可以是病理现象。它与因缺血、缺氧而引起的病理性细胞坏死明显不同,后者细胞器和细胞膜出现肿胀、溶解、破裂,细胞内含物释放到细胞间隙可引起炎症反应。     

输精管结扎对前列腺细胞与Bcl-2,Bax影响的实验研究

目的观察输精管结扎对SD大鼠前列腺细胞的Bcl-2及Bax表达的影响。方法建立SD大鼠输精管结扎模型,并将大鼠随机分为A输精管结扎组,B睾酮组及C生理盐水组,采用免疫组织化学法检测Bcl-2及Bax表达。结果Bcl-2在3组前列腺组织上皮和间质中均可见阳性着色,以上皮细胞为主,主要分布在胞浆中,极少数见于核膜和胞核,间质中偶见阳性着色,程度较弱,其各组间Bcl-2蛋白表达有显著性差异(P<0.05);Bax在3组前列腺的上皮细胞和间质细胞中均可见阳性着色,以上皮细胞为主,分布主要在胞浆中,少数见于细胞核中,间质中偶见阳性着色,各组间Bax蛋白表达有显著性差异(P<0.05)。结论输精管结扎可以调节前列腺细胞的凋亡。Bcl-2与细胞凋亡呈负相关,Bax与细胞凋亡无相关性,进一步提示Bax在调节细胞凋亡中与Bcl-2起协调作用。     

输精管复通对生精细胞中Bcl-2及Bax基因蛋白表达的影响

为了解Bcl-2及Bax基因在输精管复通后大鼠生精细胞中的表达情况，作者建立了大鼠输精管结扎和复通模型，应用免疫组化法观察Bcl-2及Bax基因在大鼠输精管复通后生精细胞中的表达变化。结果显示：输精管复通组Bcl-2基因表达逐渐增强，复通后8周显著地强于输精管结扎组，到12周同假手术组；而输精管复通组的Bax基因表达无改变，与输精管结扎组无差异，都显著地强于假手术组。Bcl-2基因蛋白表达的变化说明在输精管结扎后，以及输精管复通后均发挥了抗凋亡的作用，而Bax基因蛋白表达在输精管复通前后的一致性，说明其对生精细胞凋亡作用有待进一步研究。     

缺锌对大鼠睾丸细胞凋亡的影响

目的:了解缺锌对海马发育影响的机制,通过原位缺口平移(ISNT)标记,观察缺锌对睾丸生精细胞凋亡的影响。方法:选用Wistar雄性大鼠16只,均分为对照组(ZC)和缺锌组(ZD)。喂养四周后,采用原子吸收分光光度法,测定血清和睾丸锌的含量;采用原位缺口平移技术观察睾丸曲细精管中细胞凋亡数目的变化。结果:在ZD组大鼠血清锌明显降低的情况下,ZD大鼠睾丸内锌含量明显降低,睾丸曲细精管生精细胞凋亡的数目明显增多。结论:锌是睾丸发育所必需的营养素,缺锌可诱发睾丸生精细胞凋亡。     

精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的 研究精索静脉曲张(VC)对青春期大鼠睾丸生精细胞凋亡相关基因Bcl-2／Bax表达的影响,探索精索静脉曲张致不育的机理。方法 通过部分结扎左肾静脉建立青春期大鼠实验性精索静脉曲张模型,分别于术后2周、4周、8周取双侧睾丸,用免疫组化SABC法检测Bcl-2／Bax基因表达。结果 随着精索静脉曲张时间的延长,Bcl-2表达呈下降趋势,曲张组比对照组低,左侧睾丸比右侧睾丸低;而Bax表达呈增加趋势,曲张组比对照组高,左侧睾丸比右侧睾丸高。结论 实验性精索静脉曲张可明显改变青春期大鼠睾丸组织生精细胞凋亡相关基因与Bcl-2／Bax表达。     

通精灵对实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡的影响

目的探讨通精灵对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能的保护作用。方法将50只成年清洁级雄性Wistar大鼠分为假手术组(10只)、模型组(10只)、通精灵低剂量组(10只)、通精灵中剂量组(10只)和通精灵高剂量组(10只),按Sapyol法制作左精索静脉曲张大鼠模型。造模1个月后,不同浓度通精灵水煎剂灌胃,每日1次,连续60d。采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测睾丸生精细胞凋亡,比较各组左睾丸凋亡指数(AI)。结果模型组左睾丸AI明显高于假手术组及通精灵各组(<0.01),通精灵各组左睾丸AI低于模型组(<0.05)。结论通精灵能降低实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡,对睾丸生精功能有保护作用。     

KM小鼠睾丸各级生精细胞的组织化学研究

观察了KM小鼠睾丸曲细精管中各级生精细胞的形态大小,并采用显微放射自显影和组织化学方法,定性检测了各级生精细胞中DNA、RNA和糖元的含量与分布,为小鼠生殖生理学研究提供了基础资料。     

燃煤型氟中毒对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的：观察燃煤型氟中毒对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法：5月龄SD雄性大鼠18只,按体质量随机分为染氟组、染氟＋大豆组和对照组,各组大鼠自由饮用自来水（含氟〈0.5 mg/L）;各染氟组采用含氟量为69.33 mg/kg的煤烘玉米饲食,染氟＋大豆组的大豆重量比为20%,对照组采用含氟为9.37 mg/kg的常食玉米饲食,实验期间动物自由进食、进水;染氟第90天,处死大鼠,使用H-E染色法和TUNEL方法对大鼠睾丸切片进行染色,观察细胞凋亡情况,结果：染氟组生精细胞凋亡个数高于对照组[（278.17±25.47）个,（129±21.02）个,P〈0.05];染氟＋大豆组生精细胞凋亡个数高于对照组[（141.5±5.24）个,（129±21.02）个,P〈0.05];染氟＋大豆组生精细胞凋亡数低于染氟组[（141.5±5.24）个,（278.17±25.47）个],P〈0.05。结论：燃煤型氟中毒可造成大鼠生精细胞凋亡增加,增加营养后可有效减少氟中毒造成的生精细胞的凋亡。     

Study on the Regulation of Bcl-2 Gene on Rat Spermatogenic Cells Apoptosis in Transcription Level

Apoptosis is regarded as a natural phenomenon accompanying the whole periodof spermatogenesis.Therefore,the number of mature sperm was only5 0 % to75 %of the estimated number.Some interventions,such as vasoligation,could promoteapoptosis.Bcl-2 gene,known as an anti-apoptosis gene,plays a very importantrolein spermatogenic cells apoptosis in rats with vasoligation and vasostomy[1 ] ,but thestudies on this key gene have been almostlimited atprotein level so far[2～ 4] .We de-signed this experime…     

外源性褪黑激素对小鼠生精细胞凋亡的影响

目的 观察褪黑激素对生精细胞凋亡的影响。方法 HE染色、TUNEL测定(核快红复染)。结果 HE染色下睾丸间质细胞的面积随褪黑激素的增多而减小,与睾酮的浓度变化相一致。TUNEL阳性细胞随褪黑激素的增加有增多的趋势,但超过一定量后(100ug),不再增多。20～30d的处理组呈现与30～40d的处理组不同的结果。结论 外源性褪黑激素具有促进生精细胞凋亡的作用。这种作用与其对睾酮的抑制作用不相一致。