人骨髓间质干细胞体外培养诱导成为心肌样细胞的实验研究

目的 研究人骨髓间质干细胞的体外培养及向心肌样细胞转化的条件。方法 取成人髂骨骨髓，分离出骨髓间质干细胞进行培养、传代。观察在培养液中添加诱导剂5-氮胞苷(5-aza)条件下骨髓间质干细胞的生长和分化。结果 成人骨髓间质干细胞贴壁呈集落生长，有成纤维细胞样外观。5-aza诱导人骨髓间质干细胞转化为心肌样细胞。结论 人骨髓间质干细胞能够在体外被诱导分化为心肌样细胞，是心肌组织工程良好的细胞来源。     

骨髓间充质干细胞体外扩增和向心肌细胞分化的实验研究

①目的 探讨兔骨髓间充质干细胞的体外分离纯化、培养扩增和向心肌细胞诱导分化的条件。②方法 取兔股骨骨髓。利用密度为1．073s／mL的Percoll分离骨髓细胞，以含10％胎牛血清的低糖DMEM培养基培养与扩增骨髓间质干细胞。取第二代和第三代的骨髓间质干细胞，以含有不同浓度的5-氮杂胞苷诱导培养基向心肌细胞诱导分化。③结果 诱导后的细胞呈现典型的心肌细胞样改变，免疫组化染色显示其α-横纹肌动蛋白阳性。④结论骨髓间质干细胞在体外具有向心肌细胞分化的潜能。     

QY1骨髓多能间质干细胞系向心肌细胞和血管内皮细胞分化

目的:探索QY1骨髓多能间质干细胞系在体外向心肌细胞、血管内皮细胞分化的能力;优化骨髓多能间质干细胞向心肌细胞分化的体外适宜诱导条件;并初步探讨骨髓间质干细胞向成心肌成血管细胞分化的能力.方法:分别用5-氮胞苷、血管内皮生长因子对QY1骨髓多能间质干细胞进行定向诱导分化.利用免疫组化、RT-PCR鉴定分化后的细胞.结果:在传代培养至72 h时,加入10 μmol/L5-氮胞苷诱导24 h后换液培养,以后每7 d换液1次,培养14 d进行再次诱导的条件下,细胞能出现自发性搏动的心肌细胞和肌管样结构,诱导率达(39.47±0.56)%.心肌特异性的表面抗体α-横纹肌肌动蛋白、心肌连接蛋白-43表达阳性,RT-PCR检测有心肌特异性因子α-肌球蛋白重链表达.在用血管内皮生长因子诱导48 h后,出现呈直线排列的血管内皮细胞;7 d后,有部分区域细胞相互连接呈血管内皮细胞网状;14 d时免疫组化检测,发现诱导后的细胞血管内皮特异性表面抗体CD31和Ⅷ因子表达阳性.结论:QY1骨髓多能间质干细胞系细胞在体外特定条件下具有分化为心肌细胞和血管内皮细胞的能力.     

干细胞向心肌细胞分化的研究进展

干细胞具有多向分化产生不同组织细胞的能力，在一定的条件下可以诱导分化为心肌细胞，这对临床治疗心肌梗死以及心血管组织工程领域特别是心肌组织工程的研究具有非常重要的意义。本文就目前干细胞向心肌细胞分化的研究进展作一综述，着重探讨一下胚胎干细胞、骨髓来源的干细胞、心脏干细胞的体外分化，以及如何提高心肌细胞的分化效率，更好地应用于临床。     

干细胞移植治疗心肌梗死的研究进展

干细胞具有多向分化潜能,能分化成许多种类的细胞,包括心肌细胞。近年来,骨髓干细胞已被用于心肌再生。心肌梗死动物模型的实验研究表明,骨髓干细胞移植改善了梗死心肌的功能。移植的时机是骨髓干细胞能否分化成心肌细胞的关键。     

骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞的实验研究

目的采用骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞,为心衰的干细胞移植治疗提供新的细胞材料.方法抽取贵州香猪骨髓液3ml,按照Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞,经5-氮胞苷刺激24h后,进行结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ、连接蛋白-43免疫组化,电镜鉴定.结果骨髓间质干细胞经5-氮胞苷刺激后,部分细胞呈梭形,结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ、连接蛋白-43免疫组化阳性,电镜示梭形细胞有明显的肌丝,细胞核呈单椭圆形,位于细胞中央.结论骨髓间质干细胞可在体外的环境下向心肌细胞转化,有望成为心衰干细胞移植治疗的理想细胞材料.     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨髓间质干细胞诱导分化为心肌细胞的影响

[目的]探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在体外诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用.[方法]取大鼠股骨骨髓,采用直接贴壁法分离、培养骨髓间质干细胞;取P3代骨髓间质干细胞,分别以5-氮胞苷、5-氮胞苷联合bFGF诱导.30 d后用免疫组化法检测细胞的心肌肌钙蛋白,RT-PCR法检测心肌细胞转录因子GATA-4、结蛋白(desmin),并用倒置显微镜在镜下观察细胞的跳动情况.[结果]大鼠骨髓间质干细胞经5-氮胞苷或5-氮胞苷 bFGF诱导30 d后,均呈现心肌肌钙蛋白表达阳性和GATA-4、desmin表达阳性.镜下观察单用5-氮胞苷诱导组未见细胞跳动;联合bFGF诱导组则可见所诱导的细胞呈心肌细胞样跳动.[结论]骨髓间质干细胞在体外能被5-氮胞苷诱导分化为心肌细胞,但单用5-氮胞苷诱导比不上联用bFGF诱导的效果好.bFGF在体外有促进大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用.     

心肌干细胞研究现状及展望

心肌干细胞是一类具有分化为心肌细胞潜能的干细胞，其来源有：胚胎干细胞、骨髓干细胞、胚胎的心肌细胞以及脐带血干细胞。本文就心肌干细胞的研究现状、表面标记物、体外分化及诱导方法、心肌干细胞分化前后电生理特点、存在的问题及展望作一综述。     

犬骨髓间质干细胞体外定向诱导分化心肌细胞的实验研究

目的建立骨髓间质干细胞体外诱导分化心肌细胞的方法。方法犬骨髓液10ml通过密度梯度离心法分离出间质干细胞,间质干细胞用5-氮胞苷诱导培养3～4周,进行心肌细胞特异性标志物测定及细胞超微结构的观察。结果犬骨髓间质干细胞经5-氮胞苷诱导培养3～4周后,免疫组化显示肌细胞特异性蛋白α-actin、Myosin、TropninⅠ阳性,心肌特异性肌钙蛋白I阳性。电镜观察细胞呈梭形,可见细胞肌丝与房性颗粒。结论密度梯度分离法分离出骨髓间质干细胞,用5-氮胞苷诱导后可分化为心肌细胞。此可为心肌梗死、心力衰竭与心律失常的移植及修复治疗提供理想的细胞材料。     

骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞的实验研究

目的：采用骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞，为心衰的干细胞移植治疗提供新的细胞材料。方法：抽取贵州香猪骨髓液3ml，按照Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞，经5-氮胞苷刺激24h后，进行结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白I、连接蛋白-43免疫组化，电镜鉴定。结果：骨髓间质干细胞经5-氮胞苷刺激后，部分细胞呈梭形，结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白I、连接蛋白-43免疫组化阳性，电镜示梭形细胞有明显的肌丝，细胞核呈单椭圆形，位于细胞中央。结论：骨髓间质干细胞可在体外的环境下向心肌细胞转化，有望成为心衰干细胞移植治疗的理想细胞材料。