乳腺癌中PKCζ、MMP-2、MMP-9的表达及相关性

目的：探讨乳腺癌中蛋白激酶C灼(protein kinase C灼, PKC灼)、基质金属蛋白酶-2( matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)的表达及三者与其侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化PV 9000两步法检测PKC灼、MMP-2、MMP-9在100例乳腺癌组织及对应癌旁正常乳腺组织中的表达,并分析三者表达的相关性。应用RNAi技术将合成的PKC灼-siRNA转染入乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,即siPKC灼/MDA-MB-231细胞组,以转染空载质粒的scr/MDA-MB-231的细胞组作为对照组,应用Transwell侵袭实验检测细胞的体外侵袭能力。利用Western blot法检测转染细胞中PKC灼蛋白的表达。酶联免疫吸附实验( enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测培养基中MMP-2、MMP-9的含量。结果 PKC灼、MMP-2、MMP-9在乳腺浸润性导管癌中的阳性率分别为62.5%、37.5%、32.5%,明显高于乳腺导管内癌和癌旁正常乳腺组织(P均<0.05)。 PKC灼蛋白表达与淋巴结转移、远处转移有关(P均<0.01),与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、ER、PR等无关( P均>0.05);转染 siRNA的 siPKC灼/MDA-MB-231细胞组与 scr/MDA-MB-231组相比,体外侵袭能力以及PKC灼蛋白的表达水平明显下降(P均<0.05),培养基中MMP-2、MMP-9蛋白表达量亦明显下降(P均<0.05)。结论 PKC灼通过影响乳腺癌细胞中MMP-2、MMP-9的分泌来促进乳腺癌的侵袭、转移。     

骨形态发生蛋白9抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭和迁移

目的 探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭、迁移能力的影响.方法 RT-PCR法检测MDA-MB-231细胞系中BMP9的表达;扩增高滴度的BMP9表达腺病毒,感染MDA-MB-231细胞,制备高表达BMP9的重组MDA-MB-231/BMP9细胞,以此作为实验组;同时以含GFP的窄载腺病毒感染该细胞为MDA-MB-231/GFP,联合空白MDA-MB-231共同作为对照组;通过平板集落形成实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测重组MDA-MB-231/BMP9细胞侵袭及迁移能力.结果 与对照组细胞相比,实验组细胞中BMP9 mRNA表达水平明显增高;实验组细胞集落形成率由对照的90.6%±2.5%与85.6%±3.5%显著下降至57.3%±4.5%(P＜0.05);实验组划痕愈合率由对照的95.4%±3.1%与92.5%±2.4%下降至74.0%±3.6%(P＜0.05);实验组穿膜细胞数由对照的(255.3±16.1)个与(267.3±14.9)个下降至(150.3±14.6)个(P＜0.05).结论 BMP9可以在体外抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭与迁移.     

CXCL12/CXCR4/MMP-2信号通路对三阴型乳腺癌生物学行为的影响

目的探讨CXCL12/CXCR4/MMP-2信号通路对三阴型乳腺癌增殖和迁移等生物学行为的影响。方法通过脂质体介导的瞬时转染CXCR4-siRNA和pc DNA3.1-CXCR4,提取MDA-MB-231细胞中RNA和蛋白质,分别用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中CXCR4、CXCL12及MMP-2的mRNA和蛋白质的表达变化,应用MTT实验和划痕实验检测转染后肿瘤细胞的增殖和迁移能力的改变。结果转染CXCR4-siRNA后实验组细胞中CXCR4 mRNA及蛋白表达减少(P0.01),CXCL12mRNA及蛋白表达增加(P0.01),MMP-2 mRNA及蛋白表达减少(P0.01);MTT实验和划痕实验结果显示转染后72 h细胞的增殖能力下降,划痕愈合迟缓;转染pc DNA3.1-CXCR4后实验组细胞中CXCR4 mRNA及蛋白表达上调(P0.01),CXCL12 mRNA及蛋白表达降低(P0.01),MMP-2 mRNA及蛋白表达增加(P0.01),MTT实验和划痕实验结果显示转染后72h细胞的增殖能力增加,划痕愈合加快。结论三阴型乳腺癌MDA-MB-231细胞中存在CXCL12/CXCR4/MMP-2信号通路的激活,抑制CXCR4表达可以抑制肿瘤细胞的增殖和迁移等恶性生物学行为。     

RNA干扰抑制MTA1基因对人乳腺癌细胞ERα表达及浸润能力的影响

目的 通过观察pGenesil-1肿瘤转移相关基因1(MTA1)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7细胞MTA1基因的沉默效应,了解其对ERα表达及浸润能力的影响.方法 设计合成并构建重组质粒pGenesil-1MTA1,将该质粒分别转染MDA-MB-231和MCF-7细胞,荧光显微镜评估转染效率,RT-PCR检测MTA1和基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA表达,免疫细胞化学检测ERα和MMP-9表达,Western blot检测ERα蛋白表达,用Boyden小室体外侵袭实验检测转染前后两株细胞侵袭力的变化.结果 成功构建重组质粒pGenesil-1MTA1,并成功转染入MDA-MB-231和MCF-7细胞(平均转染效率分别为82.5%和78.2%).两株细胞MTA1 mRNA表达均受到不同程度的抑制(分别为80.2%和58.7%).经干扰MTA1基因后MDA-MB-231细胞ERα蛋白表达得到逆转,呈阳性表达;MMP-9 mRNA表达下降;细胞体外侵袭力减弱(侵袭指数为27.2%±2.1%),与干扰前(76.3%±2.4%)相比差异有统计学意义(P＜0.05).而MCF-7细胞转染重组质粒并干扰MTA1基因后,ERα蛋白、MMP-9 mRNA表达和体外侵袭能力变化均无统计学意义(P＞0.05).结论 重组质粒pGenesil-1MTA1能有效抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7细胞MTA1基因表达,ERa在MDA-MB-231细胞得到逆转,表达阳性,其高侵袭能力减弱,使干扰肿瘤转移靶基因成为可能.     

miR-504靶向CHD1L抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制

目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中miR-504的表达量,同时检测miR-504在MDA-MB-231细胞中的转染效率;双荧光素酶实验检测miR-504与CHD1L是否存在结合靶点;qRT-PCR及Western blot法检测CHD1L mRNA和蛋白的表达水平;Transwell侵袭实验检测MDAMB-231细胞的侵袭能力;Western blot法检测p-Akt、MMP-2和MMP-9的表达情况。结果乳腺癌细胞中miR-504的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P 0. 05);miR-504在MDA-MB-231/miR-504组中的表达水平明显增高(P 0. 05);双荧光素酶实验检测显示miR-504能与CHD1L mRNA的3'-UTR结合;此外,过表达miR-504后CHD1L mRNA的表达水平无显著变化,但CHD1L蛋白表达水平显著降低(P 0. 05);与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组侵袭能力明显降低,而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组侵袭能力比MDA-MB-231/miR-504+Con组明显增加;用表皮生长因子分别刺激转染不同质粒的MDA-MB-231细胞,与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P 0. 05),而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与MDA-MB-231/miR-504+Con组相比明显增加(P 0. 05)。结论 miR-504靶向CHD1L通过PI3K/Akt/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭。     

RNA干扰UBQLN1基因表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及机制研究

目的：观察抑制泛素1（UBQLN1）基因表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法： Western blot检测UBQLN1在乳腺癌T47D、BT549、MDA-MB-231、MCF7细胞中相对于正常乳腺上皮细胞MCF-10A的蛋白表达;用Lipofectamine^TM2000将干扰UBQLN1表达的siRNA（UBQLN1-siRNA）转染MDA-MB-231细胞,同时转染阴性对照组（NC组）,并设置空白对照组,收集转染48 h的细胞Western blot检测其UBQLN1的蛋白表达;CCK8法检测UBQLN1-siRNA转染24 h、48 h和72 h的细胞活力;流式细胞仪及Transwell小室分别检测UBQLN1-siRNA转染48 h的细胞凋亡率及侵袭能力;Western blot检测促凋亡蛋白p53和抑凋亡蛋白Survivin、侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）及STAT3和磷酸化的信号转导与转录因子3(p STAT3)的蛋白表达。结果：与MCF-10A细胞比较,UBQLN1在T47D、BT549、MDA-MB-231、MCF7乳腺癌细胞中的表达均显著升高（P<0.01）;与NC组比较,UBQLN1-siRNA组UBQLN1的蛋白表达显著降低,24 h、48 h和72 h的细胞活力均显著降低,细胞凋亡率显著升高,细胞侵袭能力显著降低,Survivin、MMP-2、MMP-9和p-STAT3的蛋白表达均显著降低,p53蛋白表达显著升高（P<0.01）,三组间STAT3的蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论：抑制乳腺癌细胞中UBQLN1基因表达可降低乳腺癌细胞活力和侵袭能力,并诱导细胞凋亡和下调STAT3信号通路。     

锌转运体ZIP10过表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响

目的:将ZIP10基因真核表达载体转染乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7细胞,研究ZIP10过表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响.方法:经双酶切后凝胶电泳鉴定ZIP10基因表达载体pEGFP-N1-ZIP10,利用脂质体转染法将pEGFP-N1-ZIP10及其相应空载体分别转染乳腺癌细胞MDA-MB-231(ER-)及MCF-7(ER+).RT-PCR检测乳腺癌细胞中MMP-2、MMP-9的mRNA水平,Western blot技术检测细胞中ZIP10蛋白质的表达水平,MTT法观察转染pEGFP-N1-ZIP10前后乳腺癌细胞增殖活性,Transwell实验观察转染pEGFP-N1-ZIP10前后乳腺癌细胞侵袭能力的改变.结果:乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞瞬时转染成功后,MMP-2、MMP-9的mRNA 水平没有显著差异,MTT检测结果显示,pEGFP-N1-ZIP10转染乳腺癌细胞后对其增殖活性没有明显影响;Transwell肿瘤细胞侵袭实验显示,ZIP10过表达可显著增加乳腺癌细胞的侵袭能力.结论:ZIP10真核表达载体转染乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231使ZIP10过表达,对细胞增殖活性没有明显影响,但可明显增加肿瘤细胞的侵袭能力.     

虎杖甙对人乳腺细胞系MDA-MB-231 增殖、侵袭和迁移的调节作用

目的:探究虎杖甙(Polydatin)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和迁移的作用。方法:将乳腺癌细胞MDA-MB-231分为MDA-MB-231组、Polydatin(0. 2μmol/L)组、Polydatin(0. 5μmol/L)组和Polydatin(1μmol/L)组,并分别用0、0. 2、0. 5和1μmol/L的虎杖甙处理MDA-MB-231细胞,CCK8检测细胞增殖倍数,Transwell实验检测MDA-MB-231细胞的侵袭能力,划痕实验检测MDA-MB-231细胞的迁移能力,免疫印迹检测细胞增殖及侵袭相关蛋白Ki67、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMP-9)的表达。结果:与MDA-MB-231组比较,Polydatin(0. 2μmol/L)组、Polydatin(0. 5μmol/L)组和Polydatin(1μmol/L)组细胞增殖倍数显著降低,Ki67蛋白表达水平也显著降低,侵袭细胞数量明显减少,划痕闭合率与MDA-MB-231组比较也显著降低; VEGF和MMP-9的蛋白表达水平与MDA-MB-231组比较也显著降低。结论:虎杖甙能抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和迁移。     

Twist对TNF-α作用后乳腺癌细胞侵袭及上皮间质转化的影响

RNA干扰技术抑制Twist在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达,观察其沉默对TNF-α作用后乳腺癌细胞侵袭及上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。以乳腺癌细胞MDA-MB-231为空白对照,shRNA-NC空载体为阴性对照,构建Twist沉默表达载体,转染乳腺癌细胞MDA-MB-231,qRT-PCR和Western blotting检测转染细胞中Twist mRNA及蛋白质表达水平。建立Twist沉默表达的乳腺癌细胞模型后,用TNF-α分别处理对照组及转染后的乳腺癌细胞,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western blotting检测细胞EMT相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、上皮钙黏附素(E-cadherin)和转移相关蛋白基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达。结果显示,下调Twist的乳腺癌细胞经TNF-α处理后,细胞侵袭和迁移能力降低,Vimentin表达减少,E-cadherin表达增加,细胞中MMP-2、MMP-9表达减少,与空白对照及TNF-α作用后的阴性对照相比,差异有统计学意义(P0.05)。因此,下调Twist可降低TNF-α诱导的乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力,抑制其EMT。     

ADAM15、MMP-2和MMP-9在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达差异

目的分析ADAM15、MMP-2和MMP-9在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达,探讨其与乳腺癌细胞转移的相关性。方法 Transwell小室实验检测两种乳腺癌细胞系的转移能力,免疫细胞化学法对ADAM15、MMP-2及MMP-9在两种细胞中的表达进行定性、定位及半定量检测,Western blot对其进行定量检测。结果 MDA-MB-231乳腺癌细胞系的运动和侵袭能力均强于MCF-7乳腺癌细胞系。ADAM15、MMP-2及MMP-9在MDA-MB-231细胞系中的表达分别高于MCF-7细胞系(免疫细胞化学:P0.001,P0.05,P0.001;Western blot:P0.01,P0.05,P0.01),且三者在两系乳腺癌细胞表达的差异中,ADAM15表达的差异性最大,其次为MMP-9,MMP-2的差异性最小。结论 ADAM15、MMP-2及MMP-9均促进乳腺癌转移,且ADAM15与转移相关性最强而可能成为判断乳腺癌恶性生物学行为的指标。     

MMP-2、MMP-9及EMMPRIN在子宫内膜异位症中的表达及临床意义

目的研究基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）在子宫内膜异位症（EMs）的表达和意义。方法应用免疫组化二步法检测EMs患者异位内膜42例、在位内膜42例及正常内膜20例中的MMP-2、MMP-9、EMMPRIN的表达情况,并对它们的EMMPRIN、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平进行相关性分析。结果 MMP-2、MMP-9、EMMPRIN在异位内膜组中阳性表达率分别为95.24%、92.86%和90.48%,显著高于在位内膜组、正常内膜组（P〈0.05）;而在位内膜组和正常内膜组差异无统计学意义（P〉0.05）。异位内膜组中,EMMPRIN分别和MMP-2,MMP-9呈正相关性（P〈0.01）。结论 MMP-2、MMP-9、EMMPRIN共同参与了子宫内膜异位症的发生发展;EMMPRIN可能通过促进MMP-2和MMP-9的合成与分泌发挥其作用。     

基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2在子宫内膜异位症血清中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2在子宫内膜异位症（EMs）血清中的表达及临床意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测55例EMs患者和30例对照组血清中删P-2,MMP-9、TIMP-1和TIMP-2水平。结果BMs组血清中MMP-2和MMP-9水平显著高于对照组,TIMP-1和TIMP-2水平显著低于时照组（P〈0．05）。Ⅲ-Ⅳ期血清MMP-2和MMP-9水平显著高于Ⅰ-Ⅱ期和对照组,TIMP-1和TIMP-2水平显著低于Ⅰ-Ⅱ期和对照组（P〈0．05）。结论MMP-2、MMP-9与Elds发生和发展相关,TIMP-1、TIMP-2对MMP-2、MMP-9水平调节有重要作用。     

RNA干扰下调HE4基因表达对人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖和侵袭的影响

目的应用RNA干扰技术下调人附睾蛋白HE4基因表达水平,观察HE4对人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖和侵袭能力的影响。方法化学合成3对HE4特异性小分子干扰RNA(siRNA),脂质体法转染人卵巢癌细胞系SK-OV-3(HE4-siRNA组),同时以非特异序列siRNA转染的SK-OV-3细胞(阴性对照组)和正常培养的SK-OV-3细胞(正常对照组)为对照,于转染后48 h,采用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)和Western blot方法分别检测HE4 mRNA及蛋白表达水平。采用CCK8试剂盒检测卵巢癌细胞增殖活性的变化,穿膜小室模型测定HE4对细胞侵袭能力的影响。结果与正常对照组相比,HE4-siRNA转染卵巢癌SK-OV-3细胞48 h后,HE4 mRNA的表达水平显著下降,仅为正常对照组的12.7%(P<0.01),与之相应HE4蛋白表达也显著下降,而转染非特异序列的阴性对照组与正常对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。HE4-siRNA下调卵巢癌SK-OV-3细胞HE4表达后,细胞增殖受到明显抑制,细胞增殖活性仅为正常对照组的60%,阴性对照组细胞增殖未见明显变化。体外侵袭实验显示,HE4-siRNA组穿膜细胞数为每视野(21.8±2.86)个,显著低于正常对照组(187.4±11.17)个(P<0.01)和阴性对照组(177.8±9.76)个(P<0.01),而阴性对照组和正常对照组两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HE4特异性siRNA能成功下调SK-OV-3细胞中HE4基因的表达,显著降低卵巢癌细胞增殖和侵袭能力,HE4有可能成为人卵巢癌侵袭转移防治的重要靶点。     

左向右分流型先天性心脏病患儿血清MMP-2和MMP-9变化

目的探讨左向右分流先天性心脏病（CHD）患儿血清基质金属蛋白酶（MMPs）-2、9水平的变化及意义。方法采用ELISA方法检测并比较40例CHD患儿（其中无肺动脉高压组22例、肺动脉高压组18例）和20例健康患儿的血清MMP-2、MMP～9。结果CHD无肺动脉高压组及肺动脉高压组患儿MMP-2（分别为206．14±20．62及258．83±31．44,pg／ml）、MMP-9（分别为207．68±20．77及240．00±31．10pg／m1）与正常对照组相比均有显著性（P均小于0．05）;而肺动脉高压组MMP-2及MMP-9水平明显高于无肺动脉高压组,差异有显著性（P均小于0．01）。CHD患儿血清MMP-2、MMP-9与LVEF、LVFs均无明显相关性（P〉0．05）;CHD患儿血清MMP-2及MMP-9浓度与肺动脉收缩压呈正相关（r分别为0．783及0．635,n=40,P〈0．05）。结论CHD肺动脉高压患儿血清MMP-2、MMP-9浓度升高并与肺动脉收缩压成正相关,提示MMP-2、MMP-9与肺动脉高压的病理生理有关。     

自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达

目的通过检测自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9表达,探讨二者与自然流产发生的关系。方法采用免疫组化SABC法测定30例自然流产与20例同期正常早孕要求行人工流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达。结果流产组蜕膜组织中TNF-α,MMP-9阳性表达率分别为86.7%,83.3%,高于对照组(13.3%,P=0.006;16.7%,P=0.005),两组蜕膜组织中二者的表达有显著性差异,P0.05。结论自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达增高,提示TNF-α,MMP-9在自然流产的发生中起重要作用。     

胸水细胞FAK和MMP-9表达在良恶性胸腔积液鉴别中的意义

目的：探讨胸水细胞黏着斑激酶（focaladhesionkinaseFAK）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）检测对良、恶性胸腔积液的鉴别诊断价值。方法：用荧光实时定量RT—PCR和免疫组化方法检测39例恶性、31例良性胸水细胞FAK和MMP-9基因mRNA和蛋白表达,并与胸水细胞学诊断结果进行比较。结果：恶性胸水组FAK和MMP-9mRNA表达水平较良性胸水组和对照明显增加,较良性胸水组分别增加71．9％（P〈0．01）和67．8％（P〈0．01）。免疫组化检测结果显示39例恶性胸水组中FAK基因表达阳性30例（76．9％）,MMP-9基因表达阳性33例（84．6％）,而31良性胸水组FAK基因表达阳性8例（25．8％）,MMP-9基因表达阳性5例（16．1％）（P〈0．01）。结论：胸水细胞MMP-9和FAK基因检测可作为细胞学检查的辅助手段,提高恶性胸腔积液的诊断率。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和整合素β 3

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和整合素β3（Integrin β3）在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达,并探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系及两者的相关性。方法采用免疫组织化学染色（SP法）分别检测In-tegrinβ3、MMP-9在10例妊娠期高血压疾病患者及10例正常妊娠者胎盘组织中的表达。结果妊娠期高血压疾病组胎盘Integrinβ3表达明显高于正常妊娠组（P〈0.01）。妊娠期高血压疾病组胎盘MMP-9表达明显低于正常妊娠组（P〈0.01）,且随病情的加重MMP-9的表达有下降趋势,有统计学意义（P〈0.05）。结论本研究显示：与正常妊娠组比较妊娠期高血压疾病患者胎盘组织integrinβ3表达明显增加、MMP-9的表达明显减少,且随病情加重有减少趋势。表明integrinβ3、MMP-9可能参与妊娠期高血压疾病的发生和发展。     

小干扰RNA靶向沉默CXCR2基因抑制肝癌细胞的增殖

目的 研究CXCR2-小干扰RNA（siRNA）基因体外抑制肝癌细胞增殖的作用.方法 将CXCR2-siRNA以脂质体转染法转染肝癌细胞hepG2,24h后荧光显微镜观察细胞荧光含量.采用RT-PCR及免疫印迹法分别检测正常肝Chang细胞、未转染肝癌hepG2细胞以及转染CXCR2-siRNA基因后hepG2细胞在转染24、48、72h后的CXCR2 mRNA和蛋白表达水平.以未转染的hepG2细胞为对照,CCK8法检测转染CXCR2-siRNA的hepG-2细胞在转染24、48、72 h后的增殖.以未转染的hepG2细胞为对照,检测转染CXCR2-siRNA 24 h后hepG2细胞与Transwell小室孵育24h时的侵袭能力.结果 CXCR2-siRNA转染hepG2 24 h后镜下可见大量绿色荧光,转染率为80％.hepG2细胞CXCR2mRNA和蛋白表达水平高于Chang细胞（mRNA：1.69±0.22比0.63±0.31,蛋白：1.93±0.25比0.84±0.29,均P＜0.05）.转染CXCR2-siRNA24和48 h后hepG2细胞CXCR2mRNA表达量低于未转染的hepG2细胞（0.75±0.24、0.83±0.21比1.78±0.25,均P＜0.05）,72 h后CXCR2-siRNA虽然仍能抑制hepG2细胞CXCR2mRNA的表达,但与未转染的hepG2细胞相比差异并无统计学意义（1.35±0.18比1.78±0.25,P＞0.05）.转染CXCR2-siRNA24和48 h后的hepG2细胞CXCR2蛋白表达低于未转染的hepG2细胞（0.91±0.25、1.16±0.23比1.98±0.31,均P＜0.05）,转染72 h后蛋白水平有所上升,与对照组相比差异无统计学意义（1.71±0.18比1.98±0.31,P＞0.05）.转染CXCR2-siRNA 24、48、72 h后hepG2细胞mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义.与未转染的hepG2细胞相比,转染CXCR2-siRNA 24、48、72 h后hepG2细胞增殖受到抑制（均P＜0.05）.转染CXCR2-siRNA的hepG2细胞对Transwell小室的侵袭能力明显低于未转染的hepG2细胞[（36±5）个腐倍视野（＆#215;200）比（526±9）个府倍视野（＆#215;200）,P＜0.05].结论 siRNA沉默CXCR2基因体外可有效抑制肝癌细胞的增殖.