糖皮质激素对哮喘豚鼠气道高反应性的作用

糖皮质激素（以下简称“激素”）具有广泛的抗炎作用。激素应用后能显著降低哮喘外周血的EOS数量。仅激素对哮喘肺内低密度嗜酸性细胞（HE）作用的观察甚少。本文观察了地塞米松7I豚鼠哮喘模型气道反应性的影响与肺内HE的关联。方法：实验用24只健康豚鼠（重量350～4009），随机分为以下三组。1．哮端组：用卵蛋白（OA）处理豚鼠制作哮喘模型。2．正常对照组：用生理盐水取代OA进行。3．激素治疗。组：用05mg小g－’．day’地塞米松i．P．处理哮喘豚鼠。测定豚鼠对组胺的气道反应后，处死动物，用Hanks液smlX8进行灌洗。回收率应大于5…     

地塞米松对哮喘豚鼠气道壁厚度的影响

目的:探讨哮喘时气道壁厚度变化及地塞米松对气道壁厚度的影响。方法:豚鼠30只,随机分为对照组、哮喘组和地塞米松干预组各10只。以腹腔注射10%卵蛋白和1%卵蛋白雾化吸入复制慢性哮喘模型。治疗组在每次激发前给予地塞米松干预。对右肺行支气管肺泡灌洗后分离固定,石蜡切片,行HE染色,用Luzex-F图像分析系统,测量小气道内周长和厚度,计算厚度百分比。结果:哮喘组支气管肺泡灌洗液的细胞总数多于对照组(P<0.05),哮喘组气道壁厚度%[(11.21±3.11)%]显著大于对照组[(5.82±1.29)%](P<0.05);地塞米松干预组的支气管肺泡灌洗液细胞总数、嗜酸性粒细胞%和气道壁厚度%均明显低于哮喘组,有显著差异(P<0.05)。结论:慢性哮喘时气道壁厚度增加,结构重建;早期地塞米松治疗可减轻厚度的增加。     

Rho激酶与哮喘气道高反应性

炎症细胞和结构细胞促进哮喘患者支气管的急性收缩和慢性气道重建。当前哮喘的治疗不能有效地抑制气道高反应性和气道重建。近来发现Rho激酶在哮喘的发病中起重要作用，而Rho激酶抑制剂可抑制气道平滑肌收缩、调节气道平滑肌特异性的基因转录、减轻气道壁增厚和气道炎症，从而减轻急性和慢性气道高反应性。     

比较地塞米松和色甘酸钠对哮喘豚鼠气道重建的作用

观察地塞米松及色甘酸钠对哮喘豚鼠气道重建的干预作用。 2 7只豚鼠随机分为 3组 :(1)哮喘组 :卵清蛋白致敏、激发 8周 ;(2 )激素组和 (3)色甘酸钠组 :分别于实验第 5至 8周给予地塞米松和色甘酸钠。肺功能仪测量肺功能 ,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中转化生长因子 β1及表皮生长因子的含量 ,图像分析系统对豚鼠气道进行形态学测量 ,计数气道壁嗜酸细胞数目。结果显示激素组及色甘酸钠组大气道纤维组织厚度分别为 (9 16± 1 17μm和 8 12± 0 94 μm) ,显著低于哮喘组 (17 0 3± 3 0 7μm) (p <0 0 0 1)。两组的FEV0 3 /FVC分别为 (80 86± 3 14和79 12± 2 93) ,显著高于哮喘组 (73 2 2± 4 5 6 ) (p <0 0 5 )。地塞米松及色甘酸钠均可抑制哮喘豚鼠气道壁纤维组织增生 ,改善肺功能 ,但对平滑肌的肥厚均无明显抑制作用。     

HSP70/CD80嵌合DNA疫苗对哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的作用

目的 研究HSP70/CD80嵌合DNA质粒对哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的作用,为安全可靠的新型免疫调节性疫苗奠定基础.方法 将40只雌性健康BALB/c小鼠随机分为4组:对照组、哮喘组、pcDNA3.1载体组、HSP70/CD80嵌合DNA疫苗组,每组10只.用HSP70/CD80嵌合疫苗免疫小鼠后,建立鸡卵清蛋白致敏的小鼠哮喘模型,观察其气道阻力变化,支气管肺泡灌洗液中IL-13、IFN-γ含量的变化.取肺组织进行病理组织学分析,观察肺内炎症情况.结果 HSP70/CD80嵌合DNA疫苗免疫小鼠后,能有效减轻气道炎症(P＜0.05),降低气道阻力(P＜0.05),肺泡灌洗液中IFNl的分泌增加(P＜0.05),IL-13降低.结论 HSP70/CD80嵌合DNA疫苗可促进免疫反应向Th1偏移并增加IFN-γ的生成,减轻气道炎症,降低气道阻力,这为过敏性哮喘新型免疫调节性疫苗的机制及应用研究提供了实验资料.     

LAG-3-Ig对过敏性哮喘小鼠的Th1/Th2型细胞因子水平和气道反应性的影响

目的:研究淋巴细胞活化基因-3-Ig(LAG-3-Ig)对哮喘小鼠Th1和Th2型细胞因子的比例和气道反应性的影响,为防治哮喘提供实验依据。方法:经卵蛋白(OVA)致敏的雌性BALB/c小鼠于激发前腹腔注射LAG-3-Ig50g,末次激发24h后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),以ELISA法测定BALF中IL-4、IL-5和IFN-γ水平。同时观察哮喘小鼠气道反应性的变化。结果:与治疗前比较,经LAG-3-Ig治疗后,哮喘小鼠BALF中IL-4和IL-5的水平显著降低(分别减少了27.9%和29.6%);而IFN-γ的水平显著增高(增加30.8%,P<0.01)。LAG-3-Ig治疗组小鼠气道螺旋条对组织胺的反应性降低,各个密度的组织胺所诱导的气管螺旋条收缩张力显著低于哮喘对照组(P<0.05)。结论:LAG-3-Ig可抑制哮喘小鼠IL-4和IL-5的分泌并能降低小鼠气道的反应性,对哮喘的治疗具有临床意义。     

无创及有创方法在哮喘小鼠气道反应性检测中的应用

目的：观察无创和有创方法在检测哮喘小鼠气道高反应性（AHR）中的应用。方法: 以卵白蛋白激发制备C57 BL/6小鼠哮喘模型,分为哮喘组、生理盐水对照组及地塞米松（DXM）处理组,均以有创和无创方法测定气道反应性（AHR）,无创方法采用Buxco系统,测量指标为Penh;有创方法选取气管插管,以肺阻力为测量指标。同时收集肺泡灌洗液（BALF）做炎症细胞分类计数,肺组织做病理切片染色进行图像分析。结果:（1）和生理盐水对照组相比,OVA激发后BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞数均明显升高,DXM处理后可显著降低;（2）OVA组支气管/血管周围炎症细胞浸润程度明显高于生理盐水对照组,DXM处理后炎症细胞浸润程度可以明显减轻;（3）Penh和肺阻力测量结果,经重复测量及方差分析后显示无论在不同激发药物之间,还是不同组间,其主效应均存在显著差异（P<0.01）。在25 g/L和50 g/L乙甲酰胆碱（Mch）激发时,OVA组的Penh比值显著高于NS组,而DXM组显著低于OVA组。结论: 肺阻力和Penh有很好的相关性,可以用于评价哮喘小鼠模型的AHR水平。     

抗SH2-Bβ抗体可减轻哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性

目的:研究SH2-Bβ在支气管哮喘发病中的作用.方法:SH2-Bβ被阻断后,观察哮喘小鼠肺泡灌洗液中细胞数、应用酶联免疫吸附实验肺泡灌洗液、血清及脾细胞培养液中IgE、IL-4含量变化.应用小鼠肺功能仪检测气道阻力的变化.结果:同哮喘组比,anti-SH2-Bβ组:1)气道阻力明显降低(P＜0.01);2)肺泡灌洗液中细胞总数及嗜酸细胞数明显降低(P＜0.01);3)血清IgE及脾细胞培养液中IgE、IL-4含量明显降低(P＜0.01).结论:SH2-Bβ参与哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的发病机制.阻断SH2-Bβ可能成为治疗过敏性哮喘的有效新方法.     

广州市儿童个人过敏原与哮喘症状及气道高反应性的相关性研究

目的 探讨广州在校儿童中个人过敏原与哮喘症状及气道高反应性(BHR)间的关系，明确个人过敏原在儿童哮喘进展中的作用．方法 采用整群抽样的方法，对广州市l0岁在校学龄儿童应用ISAAC(the Intemational Study of Asthma and Allergies of Childhood)第二阶段研究方案进行研究，内容包括家长书面问卷(n=3565)，皮肤过敏原点刺试验(n=1094)及乙酰甲胆碱支气管激发试验(n=177)．结果 问卷调查近期喘息率为3．4％，特应性阳性率为30．8％。过敏原阳性率以尘螨最高，其次为蟑螂。第三为猫毛．多因素logistic回归分析显示。特应性(即≥1种过敏原阳性)不是儿童近期喘息及(BHR)独立的危险因素，屋尘螨、粉尘螨与近期喘息及(BHR)显著相关，猫毛与近期喘息也有显著的关联性，蟑螂过敏与近期喘息及(BHR)均无关．结论 广州市儿童特应性并非哮喘症状及BHR独立的危险因素，尘螨仍是当前广州市儿童哮喘的主要病因之一．     

外源性H2S干预对O3致哮喘小鼠气道反应性和气道重塑的影响

 目的: 探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H₂S)对臭氧(ozone,O₃)致哮喘小鼠气道反应性和气道重塑的影响。方法: 将15只SPF级C57BL/6雌性小鼠随机分为对照组、O₃组和NaHS+O₃组,每组5只。O₃处理前0.5 h,对照组和O₃组腹腔注射生理盐水,NaHS+O₃组腹腔注射NaHS(H₂S的供体);O₃组和NaHS+O₃组隔天用O₃处理,对照组则呼吸清洁空气。持续4周后无创测定小鼠的气道反应性,随后进行气管环张力测定,通过肺组织HE染色测定支气管基底膜周径(Pbm)和管壁总面积(Wat)并标准化衡量气道重塑程度,并行AB-PAS染色测定肺组织中杯状上皮细胞的变化情况以进一步评价气道重塑程度。结果: 与对照组相比,O₃组小鼠的气道反应性显著增高;NaHS+O₃组明显低于O₃组,但与对照组相比差异无统计学显著性。与对照组相比,O₃组小鼠在乙酰甲胆碱刺激时的气管收缩力显著加大;NaHS+O₃组明显小于O₃组。与对照组相比,O₃组小鼠的支气管壁厚度明显加大;NaHS+O₃组显著小于O₃组但仍大于对照组。与对照组相比,O₃组小鼠肺组织中杯状上皮细胞占气道上皮细胞总面积的百分比显著上升;NaHS+O₃组显著低于O₃组但仍高于对照组。结论: 外源性H₂S对O₃所致哮喘的气道高反应性和气道重塑有缓解与保护作用,有望为临床药物治疗哮喘提供新靶点。     

5-羟色胺与电解质在支气管哮喘豚鼠气道重塑中的作用

目的： 探讨5-羟色胺和电解质在支气管哮喘豚鼠气道重塑中的作用。 方法： 70只雄性豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、哮喘模型延续组、5-羟色胺组、5-羟色胺拮抗剂组、高镁组和低镁组。用卵清蛋白（OVA）复制支气管哮喘气道重塑模型。观察指标：血清5-羟色胺浓度，血清钠、钾、氯、钙、镁、磷离子浓度以及气道壁各层厚度。 结果： ①哮喘模型组血清5-羟色胺浓度与气道壁各层厚度明显大于正常对照组（P＜0.05，P＜0.01）；血清镁离子浓度低于正常对照组（P＜0.05）。②哮喘模型延续组血清5-羟色胺浓度与气道壁各层厚度明显大于哮喘模型组（P＜0.05，P＜0.01）。③5-羟色胺组豚鼠气道壁各层厚度大于哮喘模型延续组（P＜0.05）。④5-羟色胺拮抗剂组豚鼠气道壁各层厚度小于哮喘模型延续组 （P＜0.05）。⑤高镁组豚鼠气道壁各层厚度小于哮喘模型延续组（P＜0.05）。⑥低镁组小气道平滑肌厚度大于哮喘模型延续组（P＜0.05）。⑦随气道重塑加重或减轻，血清钙离子浓度升高或下降；血清磷离子浓度下降或升高。⑧在哮喘气道重塑中，各组血清钾、钠、氯离子浓度变化无显著差异。⑨在哮喘气道重塑中，血清5-羟色胺浓度与血清钙离子浓度呈正相关（r=0.348, P＜0.05）。 结论： ①5-羟色胺在哮喘豚鼠气道重塑中起介导作用。②镁离子在哮喘豚鼠气道重塑中可能起调节作用。③血清钙离子浓度升高与血清磷离子浓度降低在哮喘豚鼠气道重塑中可能起促进作用。④血清钠、钾、氯离子在哮喘豚鼠气道重塑中可能不起作用。⑤在哮喘豚鼠气道重塑中，血清5-羟色胺浓度与血清钙离子浓度呈正相关。     

氟伐他汀对哮喘气道重塑的抑制作用及机制研究

目的:探讨氟伐他汀对哮喘气道重塑过程的影响及分子机制。方法:以卵蛋白致敏的豚鼠哮喘模型为对象,观察正常对照组、哮喘组及氟伐他汀+哮喘组之间气道平滑肌肌层厚度的差异。氟伐他汀+哮喘组即每次激发哮喘前30min吸入浓度为05g/L的氟伐他汀2mL。同时采用Dot-blot分子杂交法、免疫组化SABC法检测各组气道ras基因的mRNA和蛋白水平变化。结果:哮喘组气道平滑肌层平均厚度为(7427±330)μm,显著高于正常对照组(3857±337)μm(P<001);氟伐他汀+哮喘组的平滑肌层厚度为(5170±413)μm,明显低于哮喘组(P<005)。哮喘组平滑肌细胞的ras基因表达水平明显高于正常对照组,但氟伐他汀+哮喘组未出现该基因的高表达。结论:氟伐他汀在一定程度上能抑制哮喘气道重塑的病理过程,其发挥效应的机制之一是阻断平滑肌细胞rasp21信号转导途径。     

IL-27对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的研究IL-27对卵白蛋白(OVA)激发哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 24只雌性BALB/c小鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及IL-27组,每组8只。应用OVA建立哮喘模型,IL-27组小鼠应用1μgIL-27(溶于50μlPBS中)滴鼻给药,观察3组小鼠肺组织病理改变,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞;ELISA法测定小鼠BALF中IL-4和IFN-γ浓度,RT-PCR测定肺组织T-bet mRNA的表达量。结果 IL-27组小鼠肺组织炎症反应明显轻于哮喘组小鼠;IL-27组小鼠BALF中嗜酸性粒细胞计数为(2.21±0.33)×107/L明显低于哮喘组的(12.82±2.17)×107/L(P0.01);IL-27组小鼠BALF中IL-4浓度为(20.4±3.2)μg/L,明显低于哮喘组的(61.3±13.1)μg/L(P0.05);IL-27组小鼠BALF中IFN-γ浓度为(50.3±6.3)μg/L,明显高于哮喘组的(11.1±3.3)μg/L(P0.05);IL-27组小鼠肺组织T-bet mRNA表达量(吸光度积分比值)为(0.268±0.048),明显高于哮喘组的(0.130±0.012)(P0.05)。结论 IL-27可能通过增强T-bet mRNA的表达增强Th1反应,减少BALF中嗜酸性粒细胞数量,进而减轻了哮喘小鼠肺组织炎症反应。     

Regulation of airway inflammation and remodeling in asthmatic mice by TLR3/TRIF signal pathway

This paper aims to investigate the effect of Toll-like receptors 3 (TLR3)/TIR-domain-containing adapter-inducing interferon-β (TRIF) signal pathway on the airway inflammation and remodeling in asthmatic mice. C57BL/6 and TLR3^−/− mice were randomly divided into three groups (10 mice per group), including Control group (mice inhaled phosphate buffer saline (PBS)), Asthma group (mice inhaled ovalbumin (OVA)) and polyriboinosinic-ribocytidylic acid (poly (I: C)) group (asthmatic mice were injected intraperitoneally with TLR3 agonist poly (I: C)). Hematoxylin-eosin (HE) staining, Wright-Giemsa staining, Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), Immunohistochemistry, Hydroxyproline assay, quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) and Western blot were used to assess for the indices of airway inflammation and remodeling. In terms of WT mice, all asthma groups with or without the addition of poly (I: C) showed exaggerated inflammation and remodeling in the airways as compared to Control group, which were more seriously in poly (I: C) group than Asthma group. Furthermore, we observed the significant inhibition of airway inflammation and remodeling in the TLR3^−/− mice in both Asthma no matter with or without addition of poly (I: C) than the WT mice. TLR3 knockout could obviously relieve the airway inflammation and remodeling in asthma through inhibiting TLR3/TRIF signaling pathway.     

Ultrastructural changes in rat airway epithelium in asthmatic airway remodeling

ObjectivesTo explore asthmatic rat airway epithelial cells mitochondrial ultrastructure changes.MethodsSix female Wistar rats of the same weight (60–80 g) were randomly divided into two groups: the asthmatic group and the control group. According to the OVA inhaled method, the asthmatic airway remodeling rat model was established. Epithelial tissue of the rat trachea was taken from the two groups for transmission electron microscopy (TEM); we counted the number of mitochondria and observed the airway ciliated epithelium, intercellular collagen deposition in the two rat groups and mitochondrial ultrastructure change.ResultsAirway multilayer ciliated epithelium develops, with cilia fallen off; goblet cells increased and irregular, mitochondrial basement membrane density is decreased, mitochondrial crista is reduced, and the nucleus has more incisures and irregular shape in asthmatic rats; airway epithelial cell matrix collagen deposition increased; and lamellar body and mitochondrial cavity formation.ConclusionsIn the asthmatic rat airway, epithelial cells undergo apoptosis and the numbers of mitochondria increased compared with the ones in normal rat airway but lose normal structure.     

小鼠哮喘气道重构模型的建立及组织形态计量学定位定量初步研究

目的：建立BALB/c小鼠哮喘气道重构模型,确立该模型的肺组织形态计量学定位定量指标。方法：(1)使用自凝造牙粉和自凝牙托水制作BALB/c小鼠的支气管树树脂铸型,确定肺组织形态学测量的具体部位。(2)30只BALB/c小鼠随机分为正常组、对照组和模型组,每组10只。观察3组小鼠一般整体改变、支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞(EOS)计数和肺组织切片HE染色光镜下大体病理改变,确定模型是否成功;同时对肺组织切片进行阿利辛蓝-过碘酸雪夫（AB-PAS）染色,以Image-Pro Plus 6.0图像分析软件在确定的目标部位测量上皮层厚度、平滑肌层厚度、杯状细胞计数和杯状细胞面积占上皮层面积百分比,确定正常参考值。结果：（1）成功建立BALB/c小鼠支气管树树脂铸型。（2）模型组小鼠的整体改变、BALF 中嗜酸性粒细胞计数以及HE染色光镜下肺组织病理学改变均证实成功建立了哮喘气道重构模型。（3）AB-PAS染色结果显示模型组目标气道上皮层厚度、平滑肌层厚度、杯状细胞计数和杯状细胞面积占上皮层面积百分比测量值均显著高于正常组和空白对照组（P<0.01）。结论：通过支气管树树脂铸型确定的目标支气管能够作为哮喘气道重构形态计量学分析的有效部位。     

The different functions of short and long thymic stromal lymphopoietin isoforms in autophagy-mediated asthmatic airway inflammation and remodeling

Asthma is a chronic respiratory disease characterized by airway inflammation and remodeling as well as hyper-responsiveness. Thymic stromal lymphopoietin (TSLP), which is a crucial inflammatory cytokine in immune homeostasis, consists of two isoforms, the long isoform lfTSLP and short isoform sfTSLP. The lfTSLP promotes inflammation and plays a pivotal role in asthma pathogenesis, while sfTSLP had been reported to have anti-asthma effects. Experiments have shown that lfTSLP could induce autophagy in hepatocytes. It is unknown whether lfTSLP or sfTSLP could influence autophagy and affect the progression of asthma. Using house dust mite (HDM)-stimulated airway smooth muscle cells as an in vitro model and HDM-induced asthma mice as in vivo model, we found that lfTSLP could induce autophagy and remodeling, while sfTSLP has the reverse effect. Strikingly, sfTSLP treatment in vivo reversed HDM-mediated activation of inflammation and airway remodeling, partly determined by autophagy change. These findings may help us understand the function of TSLP isoforms in the pathogenesis of asthma, and they support the use of drugs targeting sfTSLP and TSLP for asthma treatment.     

吸入一氧化氮对豚鼠气道阻力的影响

目的:观察持续吸入两种不同浓度NO对豚鼠气道阻力的影响。方法:健康雄性豚鼠36只,随机分为对照组、异丙肾上腺素组、20×10^-6和60×10^-6NO吸入组。用肺功能检测微机处理系统记录各组的基础呼气阻力(R_E)和动态顺应性(C_dyn),以及每次静脉给予组胺后R_E和C_dyn的改变。结果:①静脉给予80、120及160μg/kg组胺后,20×10^-6及60×10^-6NO吸入组的R_E值明显低于对照组;给予较低浓度组胺(20、40μg/kg)后,吸入NO两浓度组的R_E值也低于对照组,但无显著差异。②给予80、120、160μg/kg组胺后,NO吸入组的C_dyn明显高于对照组;在较低浓度组胺激发后,吸入NO两组的C_dyn改变与对照相比亦无明显差异。③在给予80、120及160μg/kg组胺后,吸入NO两组的R_E值显著高于异丙肾组,而C_dyn值则显著低于异丙肾组。④各个阶段吸入NO两浓度组的R_E及C_dyn值均无明显差别。结论:在高浓度组胺激发后,吸入NO对组胺的拮抗作用较为显著,但与异丙肾相比较弱,20×10^-6和60×10^-6NO的拮抗作用没有强度上的差别。