新鲜羊膜移植术治疗早期碱烧伤对角膜新生血管和上皮愈合的影响

探讨新鲜羊膜移植术在早期角膜碱烧伤治疗中对角膜新生血管和上皮愈合作用的影响 ,并与保存羊膜作比较。方法 :以 48只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤模型 ,烧伤后 48小时设立新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植组和对照组。术后每日观察角膜新生血管和上皮愈合情况。并于术后 14天、 30天以计算机图像分析系统定量测定新生血管和上皮愈合面积。结果 :新鲜羊膜移植组角膜新生血管面积小于保存羊膜移植组 ,两者均小于对照组 (P <0 0 1)。术后 14天新鲜羊膜移植组角膜上皮愈合面积较保存羊膜移植组大 ,两者均较对照组愈合快 (P <0 0 1)。结论 :在角膜碱烧伤早期治疗中 ,新鲜羊膜移植可抑制角膜新生血管和促进角膜上皮愈合 ,其效果优于保存羊膜移植。     

角膜碱烧伤新鲜羊膜移植治疗对自由基反应的影响

目的 探讨新鲜羊膜移植在早期角膜碱烧伤治疗中与自由基反应的关系。方法 48只兔制作角膜碱烧伤模型,分为新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植及对照组,烧伤后24小时分别实施手术。术后14天及30天处死实验兔取材房水及角膜组织,检测其超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量。结果 新鲜羊膜移植组及保存羊膜移植组的丙二醛含量均低于对照组,超氧化物歧化酶活力均高于对照组。术后14天新鲜羊膜移植组角膜超氧化物歧化酶活力高于保存羊膜组。术后30天新鲜羊膜组角膜及房水丙二醛含量均低于保存羊膜组。结论 新鲜羊膜移植在早期角膜碱烧伤治疗中能减轻自由基质应对照组织的损伤,其效果优于保存羊膜移植。     

羊膜移植治疗急性角膜碱烧伤的实验研究--基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的测定

目的 探讨新鲜羊膜移植术在早期角膜碱烧伤治疗中的作用机制。方法36只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤模型，分为新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植组和对照组。术后每日观察新生血管生长情况，并于术后7天、14天应用计算机图像分析系统对角膜表达基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)进行半定量测定。结果术后新鲜羊膜移植组角膜新生血管发展缓慢，MMFs角膜表达降低而TIMP-1表达升高。结论羊膜移植可通过提高角膜表达基质金属蛋白酶抑制剂-1的水平来抑制基质金属蛋白酶的活性，从而在早期角膜碱烧伤的治疗中起抑制角膜溃疡和新生血管形成的作用，且这一作用新鲜羊膜要明显优于保存羊膜。     

新鲜羊膜移植术治疗急性期角膜碱烧伤的组织病理与超微结构观察

目的　了解新鲜羊膜移植在早期角膜碱烧伤治疗中抑制炎症和促上皮愈合的作用,并与保存羊膜作比较。方法　以48只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤模型,24h后设立新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植组和对照组。术后14、30d取材角膜进行组织病理学检查,以计算机图像分析系统测量其多形核白细胞含量,扫描电镜和透射电镜观察角膜超微结构改变。结果　新鲜羊膜移植组角膜组织中多形核白细胞含量低于保存羊膜移植组,二者均低于对照组（P＜0.01）。组织病理及超微结构观察显示,在角膜上皮细胞排列、细胞表面及细胞内结构方面,新鲜羊膜移植组优于保存羊膜移植组,二者均较对照组好。结论　在角膜碱烧伤急性期治疗中新鲜羊膜移植较保存羊膜移植具有较强的抑制炎症及促上皮愈合作用。 ［眼科新进展2001;21(1)∶15-17］     

新鲜羊膜移植对角膜急性炎症抑制作用的实验研究

目的探讨新鲜羊膜移植在角膜急性炎症治疗中的抑制多形核白细胞作用,并与保存羊膜移植作比较.方法以48只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤实验模型,24小时后设立新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植组和对照组.术后14天、30天取材角膜进行组织病理学检查,以计算机图像分析系统测量其多形核白细胞含量.结果新鲜羊膜移植组角膜组织中多形核白细胞含量低于保存羊膜移植组,两者均低于对照组(P＜0.01).结论在角膜急性炎症期治疗中,新鲜羊膜移植能够抑制多形核白细胞浸润,其抑制炎症作用较保存羊膜移植强.     

兔眼碱烧伤行羊膜移植术后转归的实验研究

目的探讨兔眼碱烧伤行羊膜移植术后在眼表大体结构、病理组织学和超微结构三个方面的转归状况。设计随机对照实验性研究。研究对象60只新西兰白兔(120眼),按照伤后不同时间手术随机分为5组,包括保存羊膜移植组(A1组、A2组)、新鲜羊膜移植组(B1组、B2组)和对照组。每组12只兔(24眼)。方法分别应用保存羊膜和新鲜羊膜,在兔眼碱烧伤后第1天和第15天行羊膜移植术,裂隙灯检查术后第1、3、7、10、15、30天时羊膜在位情况,术后第3、7、15、30天作病理学和透射电子显微镜检查。主要指标裂隙灯显微镜观察角膜透明度、新生血管及球结膜充血情况;病理学检查和透射电子显微镜观察羊膜移植术后羊膜的动态变化。结果羊膜移植术后第30天,羊膜移植组兔眼的新生血管程度减轻,角膜透明度有不同程度的恢复,与对照组差异有显著统计学意义(P<0.001),早期羊膜移植组(A2组、B2组)的疗效明显优于晚期移植组(A1组、B1组)(P<0.001)。新鲜羊膜移植组(B2组)疗效优于保存羊膜移植组(A2组)(P<0.05)。病理学结果:术后第30天,角膜各层结构恢复完整,可见少量嗜酸性粒细胞和少量残存的新生血管。透射电镜检查:新鲜羊膜组术后第15天,羊膜上皮完整,基底层变薄,羊膜和角膜组织间形成连接,羊膜基底层面与角膜表面融合。30天后,角膜表面可见一层羊膜上皮细胞,羊膜基底层消失。结论碱烧伤早期羊膜移植对抑制角膜新生血管形成、减轻炎症和恢复角膜透明度有较好的治疗效果,新鲜羊膜优于保存羊膜。     

新鲜羊膜移植术对角膜新生血管抑制作用的实验研究

目的探讨新鲜羊膜移植术对角膜碱烧伤后角膜新生血管和上皮愈合作用的影响,并与保存羊膜作比较.方法用48只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤模型,烧伤后48h设立新鲜羊膜移植组(fAMT)、保存羊膜移植组(pAMT)和对照组(C).术后每日观察角膜新生血管和上皮愈合情况.并于术后14、30d以计算机图像分析系统定量测定新生血管和上皮愈合面积.结果术后30dfAMT组、pAMT组、C组角膜新生血管面积分别为87.87mm2±3.57mm2、96.66mm2±12.00mm2、105.13mm2±6.70mm2.统计分析显示,fAMT组角膜新生血管面积小于pAMT组(P＜0.05),上述2组均小于C组(P＜0.05).结论新鲜羊膜移植术可抑制碱烧伤后角膜新生血管生长,其作用优于保存羊膜移植术.     

新鲜羊膜移植对大鼠角膜碱烧伤后玫炎性细胞因子表达的影响

目的对SD大鼠角膜碱烧伤后行羊膜移植，分别检测碱烧伤及羊膜移植术后角膜上致炎性细胞因子的表达水平，探讨角膜碱烧伤的损伤机制及羊膜的抗炎和免疫调节机制。方法70只SD大鼠，以0．5mol／L的氢氧化钠碱烧伤右眼制作成碱烧伤模型，随机分组，A组（n=32只）为碱烧伤后未行羊膜移植的烧伤对照组，B组为烧伤后立即施行羊膜移植的羊膜移植组（n=32只），另有6只大鼠作为正常对照组即C组（n=6只），术后第1、4、7、10天处死动物，分别在裂隙灯显微镜下对角膜混浊度、角膜新生血管及角膜上皮缺损进行临床评分，取下角膜，酶联免疫吸附实验（ELISA）定量检测致炎性细胞因子IL-1d（interleukin-1α）、IL-6（interleukin-6）和IL-8（in—terleukin-8）的表达水平。结果羊膜移植组角膜上皮缺损、新生血管及角膜混浊度评分第4、7、10天明显低于对照组，在正常角膜中有IL-1α和IL-8的表达，而没有发现IL-6的表达，碱烧伤后IL-1d，IL-6和IL-8均显著表达，IL-1α于烧伤后第4天达到高峰，IL-6和IL-8于第7天达到高峰。羊膜移植组与烧伤对照组比较，羊膜移植组于术后第1、4天能显著降低IL-1α（P〈0．01）的表达水平，第4、7天能显著降低IL-6及IL-8的表达水平（P〈0．01）。结论角膜碱烧伤后早期致炎性细胞因子的过量表达直接关系到急性期角膜炎症，并可能通过激活免疫系统，参与随后的免疫反应，介导免疫损伤。新鲜羊膜移植可以抑制碱烧伤后角膜致炎性细胞因子的过量表达，可能通过调节致炎性细胞1子的表达而发挥抗炎和免疫调节机制。     

新鲜羊膜移植对大鼠角膜碱烧伤后致炎性细胞因子表达的影响

目的对SD大鼠角膜碱烧伤后行羊膜移植，分别检测碱烧伤及羊膜移植术后角膜上致炎性细胞因子的表达水平，探讨角膜碱烧伤的损伤机制及羊膜的抗炎和免疫调节机制。方法70只SD大鼠，以0．5mol／L的氢氧化钠碱烧伤右眼制作成碱烧伤模型，随机分组，A组（n=32只）为碱烧伤后未行羊膜移植的烧伤对照组，B组为烧伤后立即施行羊膜移植的羊膜移植组（n=32只），另有6只大鼠作为正常对照组即C组（n=6只），术后第1、4、7、10天处死动物，分别在裂隙灯显微镜下对角膜混浊度、角膜新生血管及角膜上皮缺损进行临床评分，取下角膜，酶联免疫吸附实验（ELISA）定量检测致炎性细胞因子IL-1d（interleukin-1α）、IL-6（interleukin-6）和IL-8（in—terleukin-8）的表达水平。结果羊膜移植组角膜上皮缺损、新生血管及角膜混浊度评分第4、7、10天明显低于对照组，在正常角膜中有IL-1α和IL-8的表达，而没有发现IL-6的表达，碱烧伤后IL-1d，IL-6和IL-8均显著表达，IL-1α于烧伤后第4天达到高峰，IL-6和IL-8于第7天达到高峰。羊膜移植组与烧伤对照组比较，羊膜移植组于术后第1、4天能显著降低IL-1α（P〈0．01）的表达水平，第4、7天能显著降低IL-6及IL-8的表达水平（P〈0．01）。结论角膜碱烧伤后早期致炎性细胞因子的过量表达直接关系到急性期角膜炎症，并可能通过激活免疫系统，参与随后的免疫反应，介导免疫损伤。新鲜羊膜移植可以抑制碱烧伤后角膜致炎性细胞因子的过量表达，可能通过调节致炎性细胞1子的表达而发挥抗炎和免疫调节机制。     

TNF-α和VEGF在羊膜移植治疗兔眼碱烧伤中的表达

目的研究羊膜移植术在不同手术时期用不同的羊膜治疗兔眼表碱烧伤过程中肿瘤坏死因子（TNF-α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达形式。方法建立32只健康实验兔碱烧伤模型,随机分急性期新鲜羊膜移植组、急性期保存羊膜移植组、恢复期新鲜羊膜移植组和恢复期保存羊膜移植组,各组在术后4w取出眼房水、角膜,做肿瘤坏死因子（TNF-α）和血管生长因子（VEGF）的测定。结果TNF-α和VEGF在新鲜羊膜移植组的表达明显低于保存羊膜移植组,急性期手术组的表达也低于恢复期手术。结论新鲜羊膜具有抑制角膜肿瘤坏死因子（TNF-α）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达。碱烧伤急性期较恢复期行羊膜移植有效。     

羊膜移植抑制兔角膜碱烧伤后新生血管增殖的研究

目的　比较采用保存羊膜和新鲜羊膜移植抑制角膜碱烧伤后新生血管增殖的效果 ;探讨应用保存人羊膜移植防治角膜碱烧伤后新生血管的手术时机。方法　制备角膜碱烧伤后新生血管增殖的动物模型 ;2 2只家兔 ( 2 2眼 )随机分为4组 :A组 ( 4眼 )作为对照组 ;B组 ( 6眼 )在碱烧伤的急性期行新鲜羊膜移植 ;C组 ( 6眼 )在急性期行保存人羊膜移植 ;D组 ( 6眼 )在瘢痕期行保存人羊膜移植。应用计算机彩色图像处理系统测定角膜新生血管面积。结果　 3个移植组和对照组比较 ,角膜新生血管面积的差异均有显著性意义 (P <0 0 1) ;B组与C组比较无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;C组的新生血管面积明显少于D组 (P <0 0 1)。结论　保存羊膜和新鲜羊膜移植均能有效地抑制角膜碱烧伤后新生血管的增殖 ,治疗效果无显著性差异 ;在角膜碱烧伤的急性期施行羊膜移植防治新生血管增殖的效果要优于在瘢痕期手术。     

新鲜羊膜移植治疗兔角膜碱烧伤的光镜和电镜观察

目的观察新鲜羊膜移植治疗兔角膜碱烧伤的组织学变化。方法21只（42眼）新西兰大白兔制作角膜碱烧伤模型；15只（30眼）为实验组，6只（12眼）为对照组；实验组行新鲜羊膜移植术，对照组不处理。分别取术后第1周、第2周、第4周的角膜进行光镜及电镜观察。结果术后第1周、第2周及第4周观察发现，对照组眼表面及角膜基质中有较多的炎性细胞浸润，上皮形状不规则，排列不整齐，第4周表现最明显；实验组炎性细胞浸润较少，上皮排列较整齐，显示新鲜羊膜有较强的抑制炎症并促进上皮生长的作用。通过透射电镜观察，发现新鲜羊膜移植组角膜上皮生长良好、表面有丰富的微绒毛、胶原纤维排列整齐，细胞间桥粒连接较多；对照组无上皮生长，胶原纤维排列紊乱。结论新鲜羊膜移植术在角膜碱烧伤治疗中有抑制炎症反应、促进上皮生长的作用，能够有效地促进角膜上皮的愈合及细胞之间的紧密连接。     

小鼠角膜碱烧伤行羊膜移植对MMP-9、TIMP-1在新生血管形成中的影响

目的探讨小鼠角膜碱烧伤行羊膜移植对基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinase9,MMP9)、金属蛋白酶组织抑制剂1(tissueinhibitorofmetalloproteinase1,TIMP1)在新生血管形成中的影响以及MMP9及TIMP1在角膜新生血管形成中的作用。方法昆明小鼠40只,随机分为实验组和对照组,每只鼠均取右眼为实验眼。采用1mol·L-1NaOH溶液烧伤小鼠角膜,建立炎症性角膜碱烧伤动物模型。对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植,对照组不行羊膜移植。分别在羊膜移植后的0d、2d、7d、14d处死2组小鼠,摘除右眼球,行免疫组织化学染色并用计算机图像分析系统检测2组小鼠MMP9及TIMP1在角膜中的分布及其平均吸光度值的变化。结果免疫组化结果:对照组碱烧伤角膜后第2d,可见MMP9出现表达,第7dMMP9的染色较第2d增强,基质层可见大量新生血管,且血管内皮细胞可见表达,14d达高峰;TIMP1开始表达不明显,第7d出现表达,14d达高峰。羊膜移植组各时间点MMP9表达低于对照组,而TIMP1表达高于对照组。结论碱烧伤后小鼠角膜中MMP9表达增加,在新生血管形成的过程中起一定作用。羊膜可能具有抑制MMP9在碱烧伤小鼠角膜中表达的作用,而且羊膜同时促使TIMP1在后期表达水平升高,从而抑制MMP9的活性,抑制和减缓碱烧伤后角膜新生血管的发生和发展。     

羊膜移植术在碱烧伤急性期重建结膜表面的实验研究

目的:(1)研究羊膜移植在治疗兔眼大面积结膜碱烧伤,重建健康结膜表面中的作用.(2)探讨碱烧伤急性期施行羊膜移植术的可行性.方法:选用30只家兔,制作角膜缘上方球结膜至穹隆部的碱烧伤的动物模型.实验组于碱烧伤后1wk时(急性期)行保存的人羊膜移植术及穹隆成形术.术后1,2,3,4,8,12wk时做光镜观察移植部位的结膜上皮生长情况,并于术后1,4,8wk时取移植区结膜做电镜观察其超微结构,同时与碱烧伤后行结膜下注射维生素C及应用抗生素眼药水点眼治疗的对照组结膜作对照观察.并在上述相应时期摄眼外观像、做上角膜缘至上方穹隆部宽度的测量.结果:(1)羊膜移植术后1wk时,光镜、电镜可见羊膜上有结膜上皮细胞长入,4wk时,含有杯状细胞的结膜上皮完全覆盖羊膜,接近于正常的结膜组织,12wk时,羊膜上结膜上皮细胞排列整齐,穹隆部结膜上皮下纤维结缔组织较为疏松,无增生.而对照组1wk时见结膜上皮细胞坏死脱落,未见有含杯状细胞的结膜上皮长入,4～8 wk时所见为大量纤维结缔组织增生,伴炎性细胞浸润.12wk时,穹隆部纤维结缔组织增生明显,未见有正常结膜上皮覆盖.(2)外观眼表可见,12wk时实验组移植区结膜光滑无瘢痕,上穹隆形成良好,穹隆深达7.6～8.2 mm,接近正常穹隆深度8.0～8.5 mm.而对照组结膜表面不光滑,有结膜肉芽肿形成,瘢痕增生明显,上方穹隆明显变浅,穹隆深度为1.0～4.5 mm.结论:以甘油保存的羊膜可作为一种底物载体,提供健康的基底膜,有利于周围正常结膜上皮的粘附、移行和分化,进而重建正常结膜表面.结膜碱烧伤后早期行羊膜移植可重建正常结膜表面,有效地防止睑球粘连的发生.     

新鲜羊膜移植术治疗角膜溃疡的临床探讨

目的：探讨新鲜羊膜移植术治疗角膜溃疡的可行性、手术方法和临床效果。方法：采用新鲜羊膜移植治疗角膜溃疡16眼，其中细菌性角膜溃疡6眼，病毒性角膜溃疡3眼，复发性蚕蚀性角膜溃疡2眼，大泡性角膜病变2眼，持续性角膜上皮缺损3眼。手术方法有：单层羊膜移植6眼，多层羊膜移植7眼，羊膜移植联合带活性角膜缘的板层角膜移植3眼。术后随访6－19月。结果：术后均未见新鲜羊膜移植片急性排斥反应，16眼中14眼治愈。术后3－15天，炎症控制，疼痛消失。术后3－5周角膜溃疡愈合，12眼视力不同程度提高。1眼复发，1眼早期羊膜溶解。结论：新鲜羊膜移植是治疗角膜溃疡的有效方法。     

TNF-α和PDGF在保存羊膜移植治疗兔角膜急性碱烧伤中的作用

目的:观察保存羊膜移植治疗兔角膜急性碱烧伤眼的组织学变化并探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)的作用。方法:建立兔急性角膜碱烧伤模型,并于24h内行保存羊膜移植术(右眼,12眼/组),设左眼为对照组。术后观察双眼形态及角膜新生血管变化,并检测房水中TNF-α含量及角膜组织PDGF-BB的表达情况。结果:与对照组比较,治疗组炎症反应轻,角膜溃疡范围小,上皮再生速度快,新生血管长度短(P<0.05)。7,28d治疗组房水TNF-α含量分别为315.5±19.8ng/L和140.6±11.5ng/L,明显低于对照眼的363.0±28.5ng/L和283.5±19.9ng/L(P<0.05)。与对照组比较,治疗组PDGF蛋白表达升高(P<0.05)。结论:角膜急性碱烧伤后早期行保存羊膜移植术,能抑制眼内炎症,促进角膜修复,其作用与抑制TNF-α,促进PDGF表达有关。