放射免疫电泳自显影法测定乙型肝炎表面抗原(HBsAg)

<正> 最近国内报道放射免疫电泳自显影法(RIA—CEP)测定HBsAg,认为特异性强,灵敏度高,可在农村推广。为了评价RIA—CEP法,而与反向被动血凝法(RPHA),对流电泳(CEP)作了对比。     

国外医药参政资料

目前,检测肝炎相关抗原(HAA)最常用的方法有:琼脂凝胶扩散(AGD)、对流电泳(CEP)以及补体结合(CF)等试验,其中CF试验被认为是最敏感的方法,但完成这个试验比较复杂和麻烦,需要6～18小时,CEP方法一般需要1～3小时,其敏感性接近于CF试验,AGD法较其他方法最为不敏感,试验前检体往往需要浓缩。 Van Oss及Bronson描述一种免疫扩散方法称     

酶联免疫吸附测定法检测乙型肝炎表面抗原

以双抗体夹心型酶联免疫吸附测定法(ELISA)、对流电泳(CEP)和反向被动血凝法(RPHA),检测271例肝炎病人血清标本中的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。HBsAg 的阳性率 CEP 为18.5%(50侧)、RPHA 为29%(79例)、ELISA 为31%(84例),ELISA 和 RPHA 两法的符合率是97.4%。检测纯化 HBsAg 时,ELISA 的检出下限<50ng/ml,较 CEP 高200倍,为 RPHA 的2.5倍。ELISA 检测 HBsAg的平均回收为95.92±12%,多孔复测和多次复测的变异系数分别为6.6%和6.5%;假阳性率为28%,但血清中的类风湿因子并不影响检测结果。表明 ELISA 检测 HBsAg 是敏感、特异的方法,重复性也好。     

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)两种检测法的对照与肝功能改变的关系

乙型肝炎是乙型肝炎病毒引起的以肝脏为主要病变并可引起多种器管损害的一种传染病,它主要侵犯儿童及青壮年。少数患者可转化为肝硬变及肝癌,因此本病已成为威胁人类健康较大的传染病。随着乙型肝炎表面抗原(HBsAg)研究工作的深入开展,迫切要求灵敏度高,特异性强,操作方便,简单快速,不需要特殊设备的诊断方法,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测方法较多,目前普遍应用推广的有琼脂扩散(AGD)对流免疫电泳(CEP)反向血凝试验(RPHA),     

乙型肝炎e抗原系统的检测与影响因素的探讨

<正> 乙型肝炎e抗原系统(HBeAg及抗-HBe)检测的方法有琼脂扩散(A G D)、对流电泳(CEP)、血凝(R—PHA PHA)、放射免疫(AIR)等数种。AGD法敏感性较差,但简便易行、特异性强,仍为目前首选方法。笔者在探讨AGD法影响因素的基础上,选择最适条件进行实际检测,得到较为满意的结果。下面将实验方法与结果加以介绍。     

检测HBsAg四种方法的比较——兼述乙肝患者HBsAg滴度与e抗原的关系及HBsAg ELISA与抗-HBc检出的关系

本文报导了检测HBsAg四种方法的敏感性。其顺序依次为ELISA>RPHA>CIEP>AGD。作者建议使用ELISA作为常规方法,如因条件限制暂不能开展ELISA及RPHA的单位,建议采用不连续CIEP以提高检测HBsAg的阳性率。应用RPHA法检测HBsAg,滴度在1:64或以上时,大多数可检出e抗原,故以滴度来估计HBsAg携带者的传染性似有实际意义。乙肝核心抗体(抗-HBc)的测定能发现仅检测HBsAg所不能发现的HBV感染。     

HBsAg携带者在家庭内的传播

为了对HBsAg携带者加强管理,控制其在家庭内的传播,先要查清其传播因素。为此,我们于1980年11月对1974年8月检出的88户HBsAg携带者的全体家庭成员再次进行了调查。材料与方法 1974年8月,我站在乙型肝炎普查中,经对流电泳法(CEP)检出88户HBsAg携带者,其家庭全体成员共379人,按户逐个询问病史、体检和进行超声波检查;用CEP和反向被动血凝法(RPHA)检测HBsAg,用间接血凝法(PHA)检测抗—     

四种方法检测HBsAg的效果比较

同时用放射免疫法(RIA)、反向间接血凝法(RPHA)、普通对流免疫电泳(CIE)及放射免疫自显影四种方法检测340份血清的HBsAg。结果表明:自显影法与CIE敏感度相近,RPHA优于前面两种方法,虽不及RIA敏感度高,但操作简便,故仍然是适用于大规模血清流行病学研究的检测方法。     

鼠疫反向被动血凝试验阳性判断标准的探讨

目的　验证反向被动血凝试验 (RPHA)原判断标准 (≥ 1:10 0 )的制定准确与否。方法　分别在陕、宁、蒙、青等省 (区 )采集人和鼠疫宿主动物 (沙鼠、黄鼠、喜马拉雅旱獭 )健康脏器标本 ,对标本进行RPHA检测 ,并对检测结果进行统计学分析处理。结果　 978份健康脏器标本的RPHA结果中 ,出现 32份非特异性反应 ,其反应值均在 1:10及 1:10以下。 33份阳性标本滴度在1:2 0～ 1:5 12 0之间。经统计学百分位数法求得RPHA的阈值为≈ 1:10 (P99) ,从而把≥ 1:2 0稀释度定为RPHA的阳性判断标准。结论　≥ 1:10 0RPHA阳性判断标准定得过高 ,而以≥ 1:2 0稀释度为RPHA的阳性判断标准较为准确     

小鼠抗—HB_S单克隆抗体XM—B_5在免疫诊断中的初步应用

小鼠杂交瘤 XM—B_5 细胞培养上清液和小鼠腹水均含高滴度抗—HBs 抗体。经稀释后两者可直接用于免疫扩散法(ID)检测 HBsAg。上清液和腹水之抗—HBs 经纯化,可用于:1、致敏血球建立反白血凝法(RPHA),2、结合辣根过氧化物酶建立酶连免疫法(ELISA)。用三种方法(ID、RPHA、ELISA)检测132份血清标本,HBsAg 阳性率分别为46.21%,64.4%和70.4%。同时用市售北京生物研究所马抗—HBs2和 RPHA 检测时血球阳性率为37.9%和75%。     

ELISA法检测血清HBsAg前带现象的探讨

HBV表面抗原免疫检测的方法主要有凝聚试验、放射免疫测定(RIA)、酶联免疫测定(ELA)、免疫层析测定以及化学发光免疫测定(TRFLA)等,国内检测HBV血清学指标的方法大多是ELISA法[1]。ELISA和RPHA是HBsAg筛选常用的方法,ELISA法具有灵敏度较高的优点,被普遍应用于临床及预防等领域[2];RPHA法检测血清HBsAg作为一种较传统和经济的方法,在本市一些单位一直延用,在检测工作中,常出现病人不知以何家结果为准的困惑。为了解两法在检出率、特异性、假阳性、假阴性方面的差异,本实验室对809例血清标本分别用ELISA法和RPHA法进行…     

固相放射免疫法和反向被动血凝法检测乙型肝炎表面抗原的比较

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检测方法很多。当前普遍推广的是反向被动血凝法(RPHA),而固相放射免疫法(SPRIA)具有灵敏性高、特异性强等优点,且国内已有检测HBsAg的SP-RIA药盒供应,故应用此法日趋普遍。我室于1985年1月～2月和6月用SP-RIA对159份血清标本进行了检测,并与RPHA结果进行比较,以期推广SP-RIA检测技术。材料和方法一、SP-RIA法:两批药盒均为北京275信箱32分箱生产,失效期分别为85年2     

用反向间接血凝法检测乙型肝炎e抗原

1972年 Magnius 等用琼脂双向扩散法(下称 ID法)从 HBsAg 阳性血液中发现HBeAg,其后 ID 法是检测 HBeAg 和抗-HBe的主要方法。我们在用反向间接血凝法(简称RPHA 法)检测 HBsAg 的基础上建立检测HBeAg 的方法。材料和方法一、材料抗-HBe 阳性血清:经国家标准品测定,ID 法滴度1:32。     

西宁地区1984～1987年部分食品从业人员体检情况分析(摘要)

自《食品卫生法》试行以来,我站对西宁地区省级单位的食品、炊管从业人员12565人进行了体格检查:一、材料与方法(一)标本:1984～1987年食品从业人员体检的血清、粪便。(二)方法:1、血清 HBsAg 的检测用 RPHA 法,过筛阳性者进行中和试验,滴度1∶8以上者确定为阳性。     

HBsAg阳性和阴性人群中HBV血清免疫学指标检测的研究

为了研究乙型肝炎在甘肃省的感染情况,从而采取措施进行预防。我们选择了我院医疗系1984年入学新生244各(来自全省各地),作了乙型肝炎感染的调查,对其中HBsAg阳性者检测了HBV感染的血清免疫学指标及DNA多聚酶(DNAP)活力测定。同时随机抽样100例HBsAg阴性者也作了HBV感染指标的检测。材料和方法一、HBsAg及抗—HBs:采用反向被动血凝(RPHA)法检测HBsAg,用被动血凝(PHA)法俭测抗—HBs。二种醛化血球均系北京医学院附属人民医院肝病研究室提供,批号:8405。二、HBeAg及抗—HBe和抗—HBc:     

肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65与低密度脂蛋白受体相关蛋白关联蛋白的结合

目的:寻找与肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65(cancer and embryo expression protein 65,CEP65)相互结合的蛋白分子,为研究CEP65在肿瘤发生中的作用机制提供线索.方法:以CEP65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交方法,筛选人胚胎组织cDNA表达文库.将获得的阳性克隆cDNA片段分别克隆到原核和哺乳细胞表达质粒,通过GST pull-down和免疫共沉淀对相互作用蛋白作进一步验证.结果:筛选到能与CEP65相互结合的低密度脂蛋白受体相关蛋白产关联蛋白(low density lipoprotein receptor-related protein-associated protein 1,RAP).将分别在原核和哺乳细胞中表达的RAP与CEP65进行GST pull-down实验,结果显示,原核表达的GST-RAP可以与His-CEP65相互结合,而在哺乳细胞共表达的GST-CEP65和Myc-RAP也能相互结合.结论:RAP可以和CEP65相结合,CEP65有可能通过与RAP相互作用,在肿瘤的浸润、转移及增生中发挥其功能.     

固相放射免疫法检测乙型肝炎表面抗原

检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的免疫方法甚多。目前国内普遍采用对流免疫电泳法(CIEP)和反向被动血凝法(RPHA),但这两种方法不很灵敏。鉴于固相放射免疫法(RIA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)灵敏度高、特异性强,我们建立了这一检测系统。对试验的影响因素、结果判定作了初步探索,并对广州地区正常人群及乙型肝炎患者进行了大系列检测,旨在提高检测质量,并为今后制备RIA检测HBsAg药盒提供一些参考数据。     

用酶免疫测定法检测HBsAg

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)测定方法,现在使用较多的是反向被动血凝法(RPHA)和放射免疫自显影法(RIA)。其中,RPHA法虽然使用简便,敏感性较高,但特异性欠佳。而RIA法虽感性很高,但需要完善的设备,     

乙型病毒性肝炎抗原,抗体的调查(Ⅱ、抗核心抗原、抗体)

1982年我们对311例各型肝病病人和200名供血员进行了抗-HBc、HBsAg、抗-HBs的检测,报告如下一、方法与标准 1.检测方法抗-HBc、HBsAg、抗-HBs的检测分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA),反相被动血凝(RPHA)及被动血凝(PH4)法。 2.阳性标准抗-HBc稀释度≥1:100者判定为阳性,HBsAg及抗-HBs稀释度≥1:8及血凝试验集终点超过中和试验二孔以上者判定为阳性。     

乙型肝炎患者乙肝病毒(HBV)抗核心抗原抗体(抗-HBc)的检测及其意义

本文就311例各型肝病患者的抗-HBc、HBsAg、抗-HBs等三项血清学指标检测结果报告如下: 一、方法与标准 1.检测方法:抗-HBc、HBsAg、抗-HBs的检测,分别采用酶联免疫吸附(ELISA)、反相被动血凝(RPHA)、被动血凝(PHA)法。 2.阳性标准:抗-HBc稀释度≥1: