小菜蛾抗菌肽对HepG2细胞增殖抑制作用的初步探讨

目的探讨小菜蛾抗菌肽对人肝癌细胞株Hep G2增殖的抑制活性,合理制定小菜蛾的用量范围。方法建立小菜蛾抗菌肽系列样品溶液的HPLC指纹图谱,MTT比色法观察样品溶液对Hep G2细胞增殖的影响,绘制小菜蛾抗菌肽系列样品浓度C(mg·ml-1)与抑制率(%)之间的"量-效"曲线。结果 HPLC指纹图谱结果显示,不同浓度梯度的小菜蛾抗菌肽样品溶液的相似度良好;确定小菜蛾抗菌肽的最小有效用量30μg·ml-1,最大有效用量400μg·ml-1。结论小菜蛾抗菌肽对Hep G2细胞增殖抑制作用的合理用量范围为35.93μg~479.04μg。     

彩虹明樱蛤多糖对转染HBV的HepG2细胞表达功能的影响

目的研究彩虹明樱蛤多糖(MIP)对转染HBV的HepG2细胞表达功能的影响。方法以不同浓度(10-2~104μg/ml)MIP作用于体外培养的HepG2.2.15细胞,采用MTT法、时间分辨免疫分析法(TRFIA)和ELISA法检测MIP对HepG2.2.15细胞的毒性作用及HBsAg、HBeAg、Pre-S1Ag表达的影响,采用FQ PCR检测MIP对HBV DNA复制的抑制作用。结果 MIP在10-2~102μg/ml浓度范围内对HepG2.2.15细胞无毒性作用,TC50为4633μg/ml。MIP在10-2~102μg/ml浓度范围内,对HBsAg、HBeAg、Pre-S1Ag以及HBV DNA均有一定抑制作用,相应的治疗指数分别为129、28、20和83。结论 MIP具有一定的抗HBV活性。     

Study of the effects of Moerella iridescens polysaccharide on hepatitis B virus transfected HepG2 cells

目的 研究彩虹明樱蛤多糖(MIP)对转染HBV的HepG2细胞表达功能的影响.方法 以不同浓度( 10-2～ 104μg/ml) MIP作用于体外培养的HepG2.2.15细胞,采用MTT法、时间分辨免疫分析法(TRHA)和ELISA法检测MIP对HepG2.2.15细胞的毒性作用及HBsAg、HBeAg、Pre-S1Ag表达的影响,采用FQPCR检测MIP对HBV DNA复制的抑制作用.结果 MIP在10-2～102μg/ml浓度范围内对HepG2.2.15细胞无毒性作用,TC50为4633μg/ml.MIP在10-2～102μg/ml浓度范围内,对HBsAg、HBeAg、Pre-S1Ag以及HBV DNA均有一定抑制作用,相应的治疗指数分别为129、28、20和83.结论 MIP具有一定的抗HBV活性.     

苯丙氨酸二肽类化合物073对2．2．15细胞分泌HBsAg和HBeAg的影响

目的观察苯丙氨酸二肽类化合物073对2．2．15细胞分泌HBsAg、HBeAg的影响。方法以2．2．15细胞为研究对象,通过细胞毒性实验确定苯丙氨酸二肽类化合物073对细胞的最大无毒浓度（TC0）,在最大无毒浓度以下将药物用培养液对倍稀释成50、25、12．5μg·mL^-1加入2．2．15细胞进行培养,每4d换同浓度药物培养液;分别收集第4、8天以及停药后4天的培养液上清,酶联免疫法（ELISA）测定HBsAg、HBeAg含量。结果苯丙氨酸二肽类化合物073最大无毒浓度为50μg·mL^-1,在最大无毒浓度时对HBsAg有明显的抑制作用,第8天时的抑制率为59．3％,半数抑制浓度（IC50）为22．9μg·mL^-1,治疗指数（TI）为3．1;但对HBeAg无明显抑制作用,第8天时的抑制率仅为25．5％。结论苯丙氨酸二肽类化合物073对2．2．15细胞HBsAg有显著的抑制作用。     

绿原酸对抗乙肝病毒-HBsAg和HBeAg的抑制作用

目的观察绿原酸对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用。方法以2.2.15细胞为研究对象,通过细胞毒性实验确定绿原酸对细胞的最大无毒浓度,在最大无毒浓度以下将药物用培养液对倍稀释成250、125、62.5μg/ml,加入2.2.15细胞进行培养,每4d换同浓度药物培养液,分别收集第4、8天的培养液,酶联免疫法测定HBsAg、HBeAg含量。结果绿原酸对2.2.15细胞最大无毒浓度为250μg/ml。在最大无毒浓度（250μg/ml）时,两批试验对HBsAg、HBeAg均具有明显的抑制作用。第4、8天时对HBeAg的平均抑制率分别为89.45%、82.00%,对HBsAg的抑制率分别为86.54%、88.00%。结论绿原酸对2.2.15细胞分泌的HBsAg、HBeAg有显著的抑制作用。     

水芹总酚酸对2．2．15细胞分泌HBsAg与HBeAg的抑制作用

目的观察水芹总酚酸对2．2．15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用。方法以2．2．15细胞为研究对象,通过细胞毒性实验确定水芹总酚酸对细胞的最大无毒浓度（TC0）,在最大无毒浓度以下将药物用培养液对倍稀释成500、250、125μg·mL^-1加入2．2．15细胞进行培养,每4d换同浓度药物培养液;分别收集第4、8天以及停药后4d的培养液,酶联免疫法（ELISA）测定HBsAg、HBeAg含量。结果水芹总酚酸最大无毒浓度为500μg·mL^-1,在最大无毒浓度时对HBsAg、HBeAg具有明显的抑制作用,第8天时的抑制率分别为59．33％和90％,半数抑制浓度（IC50）分别为484．17、379．89μg·mL^-1,治疗指数（TI）分别为3．158、4．025,其中对HBeAg的抑制作用优于HBsAg。结论水芹总酚酸对2．2．15细胞分泌的HBsAg、HBeAg有显著的抑制作用。     

新型特异性环氧合酶-2抑制剂对胎鼠中脑细胞增殖和分化的影响

目的早期评价新型环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）抑制剂Ia-10及Ib-10潜在的生殖毒性。方法原代微团培养法培养大鼠胚胎中脑神经细胞,采用中性红吸收法和微团集落计数法,分别观察化合物Ia-10、Ib-10、已上市COX-2抑制剂赛来昔布以及生殖毒性阳性对照药羟基脲暴露后对细胞增殖和分化的影响,计算受试物对中脑神经细胞微团的半数增殖抑制浓度（50％ inhibition of cell viability,IV50）和半数分化抑制浓度（50％ inhibition of cells differentiation,ID50）,并根据IV50与ID50的比值R来评价化合物的潜在生殖毒性（R〉2．0,化合物具有潜在生殖毒性;R〈2．0,化合物无潜在生殖毒性）。结果化合物Ia-10对中脑神经细胞微团的IV50为31．48μg·mL^-1,ID50为8．76μg·mL^-1（R=3．59）;化合物Ib-10的Ⅳ50为35．46μg·mL^-1,ID50为23．55μg·mL^-1（R=1．51）;赛来昔布的IV50为28．89μg·mL^-1,ID50为36．55μg·mL^-1（R=0．79）;阳性药羟基脲的IV50为6．64μg·mL^-1,ID加为2．52μg·mL^-1（R=2．63）。结论根据R值进行判断,阳性药物羟基脲具有生殖毒性,赛来昔布无潜在的生殖毒性;化合物Ia-10具有潜在的生殖毒性,而化合物Ib-10无潜在生殖毒性,提示具有良好的市场开发前景。     

红景天中苷及其醇类化合物抗辐射有效活性成分体外筛选研究

目的比较研究红景天中6种苷及醇类化合物红景天苷、异槲皮苷、酪醇、洛塞琳、熊果苷、络塞维的体外抗辐射活性。方法给予人淋巴细胞10 Gy60Coγ射线一次性照射,构建辐射防护模型。以MTS法检测6种苷及醇类化合物对辐射损伤人淋巴细胞增殖的保护作用。结果与正常组比较,4、6、8、10 Gy60Coγ模型组人淋巴细胞存活率显著降低,其中10Gy60Coγ模型组存活率为（55.43±4.69）%。与模型组比较,异槲皮苷（12.5μg.ml-1）、红景天苷（12.5μg.ml-1）、络塞维（12.5μg.ml-1）、洛塞琳（25μg.ml-1）、熊果苷（12.5μg.ml-1）、酪醇（50μg.ml-1）给药组均能够显著提高辐射损伤人淋巴细胞的增殖活性。结论红景天中苷及醇类成分对60Coγ射线照射所致人淋巴细胞损伤具有一定的保护作用,其中浓度为25μg.ml-1的络塞维抗辐射作用最强。     

甘遂提取物对肿瘤瘤株Hep、S180的抑制作用观察

目的观察甘遂提取物作用于小鼠移植瘤细胞Hep、S180后的抑制作用。方法模型组、5-Fu组、甘遂提取物组（E）、5-Fu＋E组,每组10只小鼠分别于右前肢腋皮下接种瘤中注射Tween80溶液、5-Fu、甘遂提取物、甘遂提取物＋5-Fu。免疫组化检测Bcl-2表达。体外培养S180细胞,加入药物浓度为50μg/ml、10μg/ml、1μg/ml,培养48h,流式细胞仪测细胞凋亡率。结果模型组与各实验组移植癌和移植癌组织与药物注射引起肿瘤坏死的Bcl-2蛋白表达,在统计学上有显著差别（P〈0.05）。加入药物浓度为50μg/ml、10μg/ml、1μg/ml,流式细胞仪测定凋亡率分别为33.9%、28.8%和23.3%。结论中药甘遂对Hep、S180有明显的抑制作用。     

阿比多尔抗SARS病毒的体外实验研究

目的　观察抗流感病毒药物阿比多尔 (arbidole)体外抗SARS -CoV作用。方法　以利巴韦林作为阳性对照药 ,采用MTT法和细胞病变 (CPE)法 ,观察阿比多尔对SARS -CoV的抑制作用。结果　MTT法测得阿比多尔对细胞的最大无毒浓度为10 μg·ml-1,对SARS -CoV的IC50 为 7.14 μg·ml-1,治疗指数TI为 1.77。阳性对照药利巴韦林的IC50 为 6 6 .1μg·ml-1,治疗指数TI>6 .1。结论　阿比多尔在体外对SARS -CoV有抑制作用。     

野菊花提取物抑制呼吸道合胞病毒作用的体外实验研究

目的评价野菊花提取物体外抑制呼吸道合胞病毒的效果方法采用MTT和空斑减数实验法,以病毒唑为阳性对照,测定野菊花提取物对呼吸道合胞病毒的抑制作用,并就野菊花提取物对呼吸道合胞病毒抑制的作用机制进行了初步研究结果药物的半数有效剂量(EC50)为(60.9±2.41)μg·ml-1,MTT法测定其半数中毒浓度(CC50)为(2.03±0.08)mg·ml-1,选择指数(SI)>33,有意义,在不同时间给药,对病毒的抑制实验中发现呼吸道合胞病毒感染HEp-2细胞后2、4、6、8h给野菊花提取物均有抑制作用(P<0.01),穿入和吸附抑制实验表明其对病毒穿入过程和吸附过程同样均有明显的抑制作用(P<0.01),野菊花提取物对RSV病毒有直接的杀伤作用结论野菊花提取物在体外实验中对呼吸道合胞病毒有一定抑制作用     

尼美舒利颗粒剂的人体生物等效性及相对生物利用度研究

目的建立人血浆中尼美舒利的固相萃取结合HPLC-UV测定法,研究两种尼美舒利颗粒的生物等效性。方法采用XB-Phenyl柱（250mm×4.6mm,5μm）,柱温为40℃,流动相为乙腈-30mM乙酸铵（44：56,v/v）,流速为1.0ml·min-1,检测波长为350nm。18例男性健康志愿者自身对照随机交叉给药,分别单次口服不同厂家尼美舒利颗粒剂200mg,不同时间点取血,比较两药主要药动学参数的差异和相对生物利用度。结果尼美舒利与血浆中内源性杂质分离完全,尼美舒利在0.092~15.300μg·ml-1内与峰面积比线性良好,血浆中尼美舒利最低定量浓度为0.092μg·ml-1。方法的回收率为92.2%~102.2%,日内、日间精密度（RSD）均〈8.0%。单剂量口服尼美舒利200mg后,两种制剂的AUC0→t为（83.51±23.34）μg·h-1·ml-1和（86.54±27.92）μg·h-1·ml-1;AUC0→∞为（87.00±26.23）μg·h-1·ml-1和（91.04±32.57）μg·h-1·ml-1;Cmax为（10.18±1.76）μg·ml-1和（10.60±1.62）μg·ml-1;tmax为（2.1±0.7）h和（2.0±0.8）h。结论该方法简单快速,灵敏度高,可用于尼美舒利的体内过程研究。方差分析表明,两制剂之间药动学参数无显著差异,试验制剂与参比制剂为生物等效制剂。     

天麻素注射液人体药动学的研究

目的研究单剂量静脉注射天麻素600mg在健康受试者体内的药动学。方法采用HPLC测定血药浓度,检测波长220nm。结果天麻素注射液主要人体药动学参数Cmax为(94.66±23.52)μg·ml-1,Tmax(1.0±0.0)h,T1/2(4.16±0.82)h,AUC0~t(383.97±78.07)μg·ml-·1h。结论天麻素注射液的人体药动学符合药动学二室模型。     

更昔洛韦对肾小管上皮细胞生长和能量代谢的影响

目的:观察更昔洛韦对人肾小管上皮细胞生长及能量代谢的影响。方法:分别以3种不同浓度的更昔洛韦(1μg.ml-1,10μg.ml-1,100μg.ml-1)作用人肾小管上皮细胞HKCs细胞,应用MTT比色法作生长曲线,观察更昔洛韦对肾小管上皮细胞增殖的影响。同时,应用反相高效液相色谱法检测不同浓度药物作用24 h和48 h时各组细胞内ATP含量的变化。结果:实验组与对照组比较,不同浓度更昔洛韦对肾小管上皮细胞生长无明显影响(P>0.05)。药物浓度为100μg.ml-1实验组作用48 h后,细胞ATP含量比对照组低(P<0.05),其余与对照组无显著差异(P>0.05)。结论:更昔洛韦在治疗浓度范围内,对肾小管上皮细胞生长及能量代谢无明显影响,只有达较高浓度时对细胞能量代谢才有抑制作用,可能是临床上引起肾功改变的原因之一。     

广藿香醇对β-淀粉样蛋白神经毒性的抑制作用

目的研究雌激素受体卢亚型（estrogen receptor β,ERβ）选择性激动剂广藿香醇（patchouli alcohol,PA）对β-淀粉样蛋白（β-amyloidpe ptide,Aβ）片段神经毒性的体外抑制作用。方法Aβ25-35位氨基酸片段（Aβ25-35）作用于人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）之前不同浓度PA预防给药,荧光探针法检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平和细胞内钙离子浓度（[Ca^2＋];）,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果PA（0．05、0．5、5μg·ml^-1）能够抑制Aβ25-35引起的细胞内ROS水平和[Ca^2＋];升高,使细胞凋亡减少。结论PA对Aβ25-35的神经毒性具有抑制作用。     

头孢克洛片在健康受试者体内的药代动力学和生物等效性

目的研究头孢克洛片在健康人体内的相对生物利用度和生物等效性。方法20名健康受试者随机双交叉试验方法,单计量口服受试及参比制剂500mg,用HPLC法测定给药后不同时间的血药浓度,计算主要药代动力学参数。结果受试制剂头孢克洛片t1/2(0.931±0.247)h、Cmax(6.654±1.378)μg·ml-1、Tmax(0.775±0.138)h、AUC0-t(10.038±2.074)μg·h·ml-1;参比制剂头孢克洛片t1/2(0.888±0.218)h、Cmax(6.895±1.326)μg·ml-1、Tmax(0.725±0.138)h、AUC0-t(10.175±2.544)μg·h·ml-1。以AUC0-t计算,受试制剂的平均相对生物利用度为(100.3±9.5)%。结论两制剂生物等效。     

HPLC法测定排毒清脂片中蒽醌类成分的含量

目的采用HPLC法测定排毒清脂片中蒽醌类成分的含量。方法 Phenomenex C18柱;以甲醇-0.1%磷酸溶液（75∶25）为流动相,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为254 nm。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚线性浓度范围分别为0.5040～50.40μg·ml-1,r=1.000;0.5090～50.90μg·ml-1,r=0.9998;0.5290～52.90μg·ml-1,r=1.000;0.8320～83.20μg·ml-1,r=1.000;0.4590～45.90μg·ml-1,r=0.9997;回收率分别为100.9%、100.3%、98.74%、100.1%和101.5%,RSD分别为1.68%、1.62%、0.72%、0.88%和1.28%。结论本方法操作简便,专属性强,可作为排毒清脂片中大黄成分的质量控制方法。     

泛昔洛韦等3种药物抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

 目的评价泛昔洛韦、膦甲酸钠及氧化苦参碱的体外抗HBV作用.方法采用MTT法检测3种药物对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC5o),并在此基础上观察不同浓度药物作用于HepG2.2.15细胞后第3、5、7和9天培养上清中HBsAg、HBeAg及HBV DNA含量的变化,比较不同药物抗HBV的效果.结果泛昔洛韦和氧化苦参碱对HepG2.2.15细胞有明显的抗HBV活性,在实验浓度范围内,随着药物浓度增加和作用时间延长,其抗HBV活性增强;膦甲酸钠对HBV无明显抑制作用.结论泛昔洛韦和氧化苦参碱具有明显体外抗HBV活性,而膦甲酸钠体外对HBV无明显抑制作用.     

吉西他滨与埃罗替尼联用对人胰腺癌细胞生长的影响

目的 探讨吉西他滨与埃罗替尼不同用药次序联合应用对人胰腺癌细胞BXPC-3及PANC-1生长的影响及其可能的机制.方法 RT-PCR法和Western blotting法分别检测表皮生长因子受体(EGFR)mRNA及蛋白表达.MTT法检测吉西他滨(3×10-11～3×10-2mol/L)与埃罗替尼(10-8～10-4mol/L)单药对细胞生长的影响,并计算IG60浓度;观察吉西他滨(IC50浓度)与埃罗替尼(10-5mol/L)单药、同时或续贯应用(间隔24h或72h)对细胞生长的影响.流式细胞术检测细胞周期.结果 BXPC-3及PANC-1细胞内均有EGFR mRNA及蛋白表达.吉西他滨(3×10-10～3×10-2mol/L)和埃罗替尼(10-6～10-4mol/L)呈时间和浓度依赖性地抑制细胞生长.两药联用对细胞的影响与给药次序有关:与单药组比较,同时给埃罗替尼和吉西他滨(P=0.034,P=0.049)或先用埃罗替尼后用吉西他滨(P=0.001,P=0.025)对2种细胞的抑制作用显著增强;先用吉西他滨后用埃罗替尼对细胞的抑制作用与单用吉西他滨相比无明显变化(P=0.499,P=0.824);同时给予埃罗替尼和吉西他滨与先用埃罗替尼后用吉西他滨相比对细胞的抑制作用无显著差异(P=0.199,P=0.767).各用药组均将EXPC-3细胞周期阻断在G1期.结论 吉西他滨与埃罗替尼均能抑制人胰腺癌细胞的生长,两者联合同时给药或先用埃罗替尼后用吉西他滨的作用强于吉西他滨单独用药,这种作用与药物对细胞周期的影响无关.     

更昔洛韦分散片在健康人体的相对生物利用度与生物等效性

目的 建立测定血浆更昔洛韦浓度的HPLC-UV法并研究更昔洛韦分散片的相对生物利用度及其生物等效性.方法 按两制剂双周期自身对照交叉试验设计,20名男性健康志愿者分别单剂量口服更昔洛韦分散片(受试制剂)和更昔洛韦胶囊(丽科乐,参比制剂),用HPLC法测定血药浓度,计算药代动力学参数,并评价两制剂的生物等效性.结果 口服更昔洛韦分散片和更昔洛韦胶囊1g后的主要药代动力学参数:受试制剂更昔洛韦分散片的T1/2(6.33±1.84)h、Cmax(0.53±0.06)μg·ml-1、Tmax(1.53±0.12)h、AUC0-t(3.57±0.64)μg·h·ml-1;参比制剂更昔洛韦胶囊T 1/2(7.28±2.36)h、Cmax(0.50±0.04)μg·ml-1、Tmax(1.92±0.35)h、AUC0-t(3.52±0.65)μg·h·ml-1.以AUC0-t计算,与参比制剂相比受试制剂中更昔洛韦的平均相对生物利用度为(102.3±8.2)%.结论 更昔洛韦分散片和更昔洛韦胶囊具有生物等效性.