替芬泰对HepG2-2.2.15细胞HBV-DNA的抑制作用

目的探讨替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞HBV-DNA的抑制作用。方法以Hep G2-2.2.15细胞作为实验模型,通过MTT法检测替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞的毒性,确定替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞的半数中毒浓度(TC50)。在替芬泰浓度为50μg·ml-1时未见明显的细胞毒性,所以设替芬泰3个剂量组为50、25、12.5μg·ml-1,拉米夫定50μg·ml-1作为阳性对照药,收集给药3、6 d的细胞。用实时荧光定量PCR法检测DNA载量。结果替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞的TC50为180.70μg·ml-1。随着替芬泰药物浓度的增加,Hep G2-2.2.15细胞内的HBV-DNA拷贝数相应减少,并有明显的浓度依赖性。结论替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞内HBV-DNA有显著的抑制作用,有效浓度为12.5μg·ml-1,最佳浓度为50μg·ml-1。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对肝癌细胞增殖的抑制作用研究

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法 采用不同浓度(0、25、50、100、200、400mg/L)EGCG作用于HepG2细胞,于24、48h后采用MTT方法检测细胞增殖抑制率.以不同浓度(0、50、100、200mg/L)EGCG作用于HepG2细胞,24h后采用流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期、细胞分裂周期蛋白25A(CDC25A)及Smad3蛋白的表达,RT-PCR检测CDC25A和Smad3 mRNA的表达.结果 MTT检测结果显示,不同浓度EGCG对HepG2细胞均有生长抑制作用,且具有时间和剂量依赖性(P＜0.01).随着EGCG浓度升高,细胞增殖指数(PI)明显降低(P＜0.01),细胞凋亡率明显增高(p＜0.01),CDC25A蛋白和mRNA表达水平下降(p＜0.05),Smad3蛋白和mRNA表达水平上升(p＜0.05).结论 EGCG可能通过下调CDC25A、上调Smad3的表达,抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,从而对肝癌细胞起到生长抑制作用.     

美味猕猴桃根乙酸乙酯提取物部分对肝癌HepG2细胞增殖影响及机制研究

目的探讨美味猕猴桃根乙酸乙酯提取物部分(EE-ADP)对肝癌HepG2细胞增殖的影响及其机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测EE-ADP对肝癌HepG2细胞增殖的作用; Hochest33258染色及流式细胞技术检测其凋亡作用;蛋白免疫印迹法检测EE-ADP对抗原呈递细胞(APC)蛋白及β连环蛋白(β-catenin)的影响及可能影响细胞增殖的机制。结果 MTT染色法提示,不同浓度的EE-ADP干预肝癌HepG2细胞能一定程度上抑制肝癌细胞的增殖,且存在时间-浓度依赖性。40μg/ml组的凋亡率为17. 70%,与完全培养基组的4. 80%比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。60μg/ml组及80μg/ml组凋亡率分别为50. 75%、64. 30%,与完全培养基组比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。蛋白免疫印迹法结果显示,随着加药浓度的增加,APC基因蛋白表达量增加,β-catenin基因表达量减少。结论 EE-ADP可以抑制肝癌HepG2细胞的增值,其机制可能为降低β-catenin而上调APC的表达,阻断Wnt/β-catenin信号通路。     

131Ⅰ-抗-c-erbB-2单抗对卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用

目的观察^131Ⅰ标记针对癌蛋白p185为靶点的单克隆抗体在体外对卵巢癌细胞的抑制作用。方法用氯胺T法^131Ⅰ标记抗-c-erbB-2单克隆抗体(anti-c-erbB-2-McAb)，取不同浓度的^131Ⅰ-anti-c-erbB-2-McAb与SKOV3细胞共同培养，以流式细胞术检测其对SKOV3细胞生长的抑制作用。结果^131Ⅰ-anti-c-erbB-2-McAb在体外可明显抑制SKOV3细胞，^131Ⅰ-rmIgG的抑制作用较弱，未标记的anti-c-erbB-2-McAb对SKOV3细胞的生长几乎没有抑制作用：结论^131Ⅰ-anti-c-erbB-2-McAb能有效抑制肿瘤细胞生长，有可能用于卵巢癌的免疫导向治疗。     

活血化瘀药物对肝癌细胞HepG2的抑制作用及机制

目的观察活血化瘀中药在体外实验条件下对人肝癌细胞HepG2细胞增殖、迁移的影响,对纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）表达的影响,探讨活血化瘀药物对人肝癌细胞HepG2细胞的抑制作用与分子机制。方法培养HepG2细胞,将中药黄芪、复方当归、复方丹参、川芎嗪分别加入体外培养的肝癌细胞株HepG2细胞,应用MTS法检测其对人肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响;应用细胞迁移实验观察其对HepG2细胞迁移的影响;应用RT—PCR方法检测对HepG2细胞PAI-1mRNA表达的影响,ELISA法检测对PAI-1表达的影响。结果活血化瘀中药黄芪、当归、丹参、川芎嗪可不同程度地抑制HepG2细胞增殖与迁移,降低HepG2细胞PAI-1mRNA表达、抗原水平,以复方丹参、川芎嗪组作用更为明显。结论活血化瘀中药可有效抑制人肝癌细胞HepG2细胞增殖与迁移,同时抑制PAI-1表达,这可能是其具有抗肿瘤作用的分子机制之一。     

医用臭氧对宫颈癌细胞增殖和迁移抑制作用的初步研究

【摘要】 目的 探讨医用臭氧是否通过核因子（NF）-κB信号通路调控上皮-间质细胞转化（EMT）相关蛋白表达抑制宫颈癌细胞增殖和迁移。 方法 选用人宫颈癌Hela细胞,分别设空白组、N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）处理组、NAC和臭氧共处理组、臭氧组。细胞在臭氧处理前以60 mmol/mL NAC溶液预处理20 min,随后将细胞悬液与等体积半最大效应浓度（EC50）臭氧混合15 min。细胞计数试剂盒（CCK）-8和细胞集落实验检测细胞增殖抑制。二氯二乙酸酯（DCFH-DA）探针通过流式细胞术检测活性氧（ROS）水平。划痕实验和Transwell实验验检测臭氧处理后Hela细胞迁移能力。蛋白质印迹法检测NF-κB和EMT相关蛋白表达水平。 结果 臭氧处理后Hela细胞增殖能力下降,臭氧EC50为10 mg/mL,同时其迁移能力也下降。臭氧处理后,Hela细胞NF-κB和κB抑制性蛋白激酶（IKK）α表达及其磷酸化水平均降低,同时EMT相关波形蛋白（vimentin）和β-连环蛋白（β-catenin）表达水平降低,而NAC预处理可逆转臭氧的作用。 结论 医用臭氧可能通过抑制NF-κB信号通路下调vimentin、β-catenin抑制宫颈癌Hela细胞增殖和迁移,ROS在其中发挥重要作用,表明医用臭氧有望成为宫颈癌新的辅助治疗手段。     

甘遂提取物对肿瘤瘤株Hep、S180的抑制作用观察

目的观察甘遂提取物作用于小鼠移植瘤细胞Hep、S180后的抑制作用。方法模型组、5-Fu组、甘遂提取物组（E）、5-Fu＋E组,每组10只小鼠分别于右前肢腋皮下接种瘤中注射Tween80溶液、5-Fu、甘遂提取物、甘遂提取物＋5-Fu。免疫组化检测Bcl-2表达。体外培养S180细胞,加入药物浓度为50μg/ml、10μg/ml、1μg/ml,培养48h,流式细胞仪测细胞凋亡率。结果模型组与各实验组移植癌和移植癌组织与药物注射引起肿瘤坏死的Bcl-2蛋白表达,在统计学上有显著差别（P〈0.05）。加入药物浓度为50μg/ml、10μg/ml、1μg/ml,流式细胞仪测定凋亡率分别为33.9%、28.8%和23.3%。结论中药甘遂对Hep、S180有明显的抑制作用。     

HIPK2对肝癌细胞HepG2生物学表型的调控机制研究

目的:研究外源同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)基因表达对人肝癌细胞系HepG2裸鼠成瘤性的影响及机制.方法:将人HIPK2基因的全长cDNA序列克隆至腺病毒载体(pAdeno-HIPK2),制备Adeno-HIPK2重组腺病毒.以50 pfu/细胞的Adeno-HIPK2感染HepG2细胞作为实验组,Adeno-lacZ感染作为阴性对照,未感染细胞作为空白对照,观察各组细胞的裸鼠成瘤性和细胞凋亡情况,并绘制细胞生长曲线.第6周取材,检测各组样品中HIPK2、JNK1、JNK2、P53、mdm2的水平和JNK激酶活性.结果:实验组细胞的裸鼠成瘤性明显降低,细胞凋亡率有所上升.实验组的P53和mdm2的蛋白表达分别是对照组的3倍和15%,JNK1和JNK2基本不变,但JNK激酶活性则升至对照组的5倍. 结论:HIPK2高表达可以激活JNK激酶途径,并有效提高细胞内P53水平,使HepG2细胞的裸鼠成瘤性下降,是肝癌生物治疗中重要目的基因.     

水芹总酚酸对2．2．15细胞分泌HBsAg与HBeAg的抑制作用

目的观察水芹总酚酸对2．2．15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用。方法以2．2．15细胞为研究对象,通过细胞毒性实验确定水芹总酚酸对细胞的最大无毒浓度（TC0）,在最大无毒浓度以下将药物用培养液对倍稀释成500、250、125μg·mL^-1加入2．2．15细胞进行培养,每4d换同浓度药物培养液;分别收集第4、8天以及停药后4d的培养液,酶联免疫法（ELISA）测定HBsAg、HBeAg含量。结果水芹总酚酸最大无毒浓度为500μg·mL^-1,在最大无毒浓度时对HBsAg、HBeAg具有明显的抑制作用,第8天时的抑制率分别为59．33％和90％,半数抑制浓度（IC50）分别为484．17、379．89μg·mL^-1,治疗指数（TI）分别为3．158、4．025,其中对HBeAg的抑制作用优于HBsAg。结论水芹总酚酸对2．2．15细胞分泌的HBsAg、HBeAg有显著的抑制作用。     

塞来昔布对VX2兔肾癌的抑制作用

目的探讨选择性环氧合酶2（COX-2）抑制剂塞来昔布（celebrex）对VX2兔肾癌模型肿瘤生长的影响,为celebrex的临床应用提供依据.方法构建VX2兔肾癌模型,并用celebrex进行干预,观察celebrex对肿瘤生长的影响.结果与对照组相比,celebrex治疗2周和3周后VX2兔肾癌模型肿瘤生长明显受抑,两组间差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 COX-2可能参与了VX2兔肾癌模型肿瘤生长的过程,选择性COX-2抑制剂celebrex则具有抑制其生长的作用.     

索拉非尼联合奥沙利铂对肝癌HepG2细胞的抑制作用

目的 探讨索拉非尼联合奥沙利铂(L-OHP)对肝癌细胞HepG2的抑制作用及其可能的分子机制.方法 索拉非尼和L-OHP单独及联合给药后以CCK8法测定HepG2细胞的增殖,用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,用Western blot观察ERK及pERK蛋白的表达.结果 索拉非尼及L-OHP单药对HepG2均有抑制作用,...     

Ad—HGF转染对HepG2细胞的生长抑制作用

目的：探讨Ad—HGF转染对HepG2生长抑制作用的影响。方法：用Ad—HGF转染HepG2细胞，检测HGF蛋白表达及对细胞凋亡的影响；并用裸鼠致瘤试验体内观察Ad—HGF对HepG2细胞致癌的影响。结果：转染后24hHGF即有表达，48h达高峰。并观察到Ad—HGF可促进HepG2凋亡，体内Ad—HGF可抑制HepG2细胞生长成瘤。结论：Ad—HGF在体外可抑制HepG2细胞增殖、促进其凋亡，体内抑制其致癌作用。     

不同缺氧模型对HepG2细胞中miR-210表达的影响

目的探讨不同缺氧条件对HepG2细胞中miR-210表达水平的影响。方法采用CoCl2、物理缺氧以及Na2SO3 3种不同的缺氧条件诱导HepG2细胞,利用实时定量PCR技术检测不同缺氧模式诱导前后HepG2细胞miR-210等表达变化。结果 3种缺氧模式均可以诱导HepG2细胞miR-210表达上调,其表达与CoCl2及Na2SO3的浓度有剂量依赖关系。结论 CoCl2、物理缺氧以及Na2SO3 3种不同的缺氧条件均可以有效诱导HepG2细胞中miR-210的表达上调,3种模型均可用于缺氧诱导miRNA研究,同时进一步证明miR-210表达上调是由于细胞缺氧所致。     

塞来昔布对非小细胞肺癌细胞增殖的抑制作用

目的研究塞来昔布对非小细胞肺癌（NSCLC）的抑制作用及机制. 方法应用MTT法检测塞来昔布对NSCLC细胞株的体外抑制作用,应用流式细胞学、透射电镜研究塞来昔布对NSCLC细胞株的细胞周期阻滞和诱导凋亡的作用,应用RT-PCR检测P27^KIP1、XIAP的表达,以研究细胞周期阻滞和诱导凋亡的机制. 结果 MTT比色试验表明,塞来昔布对NSCLC有明显的抑制作用,且表现为剂量依赖性和时间依赖性;而且,在相同条件下塞来昔布对NCI-H520的抑制率明显高于对A549的抑制率.流式细胞学试验证明,塞来昔布作用后G0/G1细胞比例上升,细胞阻滞于G0/G1期.流式细胞学、透射电镜证实了凋亡的存在,而且凋亡率随剂量的增加而增加.RT-PCR证实塞来昔布作用后P27^KIP1 mRNA表达增加,XIAP mRNA表达减少.结论塞来昔布在体外对NSCLC有明显的抑制增殖作用,其机制涉及细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡两个方面.     

fat-1基因对结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用

目的 探讨fat-1基因在结肠癌HT-29细胞凋亡、增殖以及细胞周期中所起的作用.方法 构建真核表达载体(pEGFP -fat-1),用脂质体介导的方法转染到结肠癌HT-29细胞,通过荧光显微镜观察及RT-PCR检测fat-1基因的表达,气相色谱分析检测fat-1基因对HT-29细胞n-6/n-3多聚不饱和脂肪酸(PUFAs)比例的影响,MTT法分析fat-1基因对HT-29细胞增殖的影响,流式细胞术检测fat-1基因对HT-29细胞凋亡和细胞周期的影响.结果 成功构建了真核表达载体pEGFP -fat-1,并在HT-29细胞内有效表达.fat-1基因通过降低HT-29细胞内n-6/n-3 PUFAs的比例抑制HT-29细胞的增殖,促进其凋亡,细胞增殖主要被阻滞在S期.结论 fat-1基因改变HT-29细胞n-6/n-3 PUFAs比例后,通过一定的信号转导途径促进大部分HT-29细胞在S期凋亡,抑制了其增殖.     

东北红豆杉中19种单体化合物对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

 目的 考察东北红豆杉中19种紫杉烷类(taxnae)化合物对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定东北红豆杉中19种紫杉烷类化合物对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.结果 处理HeLa细胞48h后,化合物5、7、16在10-4mol/L浓度对HeLa细胞的增殖有明显的抑制作用(P＜0.01),存活率依次为26.93%、20.79%和32.82%;在10-6～10-4mol/L浓度范围内,化合物3、14呈现一定的剂量依赖关系.结论 5种紫杉烷类化合物对宫颈癌HeLa细胞增殖有不同程度的抑制作用.     

洛铂抑制胃癌SGC-7901细胞增殖及其机制的初步研究

目的观察洛铂对胃癌细胞SGC-7901细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法将对数生长期的SGC-7901细胞分阴性对照组（不加药物）和实验组（加入不同浓度洛铂）,采用倒置显微镜观察不同浓度下细胞生长状态;MTT法观察对细胞的增殖抑制;Western印迹方法分析不同浓度洛铂对SGC-7901细胞内Bcl-2蛋白表达水平的影响。结果倒置显微镜下观察,洛铂能抑制细胞增殖,出现明显的凋亡学形态特征。MTT法显示洛铂能抑制细胞增殖,并呈浓度及时间依赖关系。Western印迹结果显示洛铂能使SGC-7901细胞Bcl-2蛋白表达水平下降。结论洛铂能明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,诱导凋亡,可能与调节SGC-7901细胞Bcl-2蛋白表达水平相关。     

U-74389G对大鼠脑创伤后细胞凋亡及bcl-2表达的影响

目的探讨脂质过氧化反应与脑损伤后细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系。方法在大鼠液压颅脑损伤模型中,观察其运动神经功能;脑创伤后细胞凋亡的形态和生化特征;伤后bcl-2基因表达情况;比较伤前给予U-74389G对上述指标的影响。结果治疗组的颅脑伤大鼠伤后行走功能、平衡功能障碍程度明显低于未治疗组（P<0.01）。治疗组大鼠不同脑区各个时间点凋亡细胞数均显著减少,DNA电泳未见凋亡带谱。Bcl-2免疫反应阳性细胞主要位于伤侧大脑半球皮质、皮层下白质、海马及齿状回的神经细胞。表达Bcl-2蛋白的神经细胞很少见到凋亡或坏死的形态特征。Bcl-2早期改变出现在伤后6h,比细胞凋亡出现早。注射U-74389G能阻止bcl-2蛋白下调。结论U-74389G能阻止大鼠液压脑损伤后bcl-2基因表达下调,抑制脑创伤所致细胞凋亡,具有明显的神经保护作用。     

黄芪甲苷Ⅳ对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨从黄芪提取物黄芪甲苷Ⅳ对异常血管平滑肌细胞增殖的抑制作用.方法 离体培养大鼠主动脉平滑肌细胞,分别测定黄芪甲苷Ⅳ作用前后异常血管平滑肌细胞的增殖、凋亡、细胞一氧化氮(NO)和钙离子浓度的变化.用WST法测定细胞的增殖;细胞凋亡通过annexin Ⅴ标记法用流式细胞仪测定;细胞内NO和钙离子用荧光素DAF-2和...