中药鸦胆子在豚鼠异体肌腱移植中抗排异作用的实验研究

目的探讨中药鸦胆子的抗排异作用.方法对照冷冻肌腱与未处理的肌腱和中药鸦胆子浸泡液处理过的豚鼠异体肌腱,观察术后第1周和第18周形态学、组织学、再生能力、免疫水平和力学变化.结果移植后,鸦胆子组肌腱在形态学、组织学、力学和免疫水平测定的结果优于经深低温处理组,且肌腱功能正常.结论中药鸦胆子有明显降低肌腱组织抗原性,保留肌腱的基本结构作用.     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对鞘内肌腱愈合和粘连的影响

背景：碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）能促进体外腱细胞的增殖及胶原分泌，并促进鞘外肌腱的愈合，但其对鞘内肌腱的作用的资料较少。目的：探讨外源性bFGF对鞘内肌腱愈合和粘连形成的作用。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2004—05／200502在上海市第六人民医院实验动物中心实验室完成。材料：成年雄性来亭鸡90只制备鸡右爪第3趾趾深屈肌腱横断模型，随机均分为3组，每组30只。方法：对照组：肌腱横行切断后原位修复。纤维蛋白封闭剂组：在肌腱断端使用纤维蛋白封闭剂0．6uL后，原位修复肌腱。bFGF组：在断端使用bFGF和内含bFGF500ng的纤维蛋白封闭剂混合物0．6μL，原位修复叽腱。主要观察指标：术后1，2，4，8周，每组各取6只鸡进行大体、组织学检测：术后8周每组再取6只鸡进行生物力学测定。结果：对照组与纤维蛋白封闭剂组间各项观测指标比较均无显著性差别，与对照组和纤维蛋白封闭剂组相比，bFGF组修复部位腱鞘、腱外膜及腱实质的新生血管形成、成纤维细胞增殖较好，胶原的分泌出现早，数量也较多；肌腱滑动距离较短，屈曲功和肌腱最大抗拉力较大。结论：在肌腱断端使用外源性bFGF能促进鞘内肌腱的愈合，但也加重了肌腱的粘连。     

关节滑液对兔前交叉韧带重建后腱骨愈合生物力学和组织学的影响

背景:目前前交叉韧带重建后关节滑液对移植物强度以及腱骨愈合的影响尚无定论。目的:观察兔前交叉韧带重建后腱骨愈合过程中,关节滑液对移植肌腱生物力学及组织学的影响。方法:取新西兰大白兔下肢半腱肌腱,以同侧肢体半腱肌腱重建前交叉韧带模拟关节滑液影响模型,并同时取对侧肢体半腱肌行股骨髁上"U"形肌腱埋植避免关节滑液的影响。重建4周,取股骨-韧带-胫骨复合体,行生物力学测定和组织学观察。结果与结论:重建后4周,生物力学测定时发现"U"字形埋植肌腱断裂时平均载荷明显大于前交叉韧带重建后处于关节内的肌腱(P<0.01)。组织学观察发现,骨隧道内坏死的腱组织已被纤维组织、新生骨组织替代,腱骨交界面形成Sharpey纤维连接和纤维软骨,优于关节内肌腱;"U"字形埋植肌腱腱骨交界面成骨细胞数目明显多于前交叉韧带重建肌腱(P<0.01)。结果证实"U"字形埋植肌腱的生物力学及腱骨愈合均优于处于关节内肌腱,提示关节滑液对前交叉韧带重建后韧带的强度以及腱骨愈合有不利影响。     

持续被动活动对兔重建前交叉韧带组织学研究的影响

目的：通过兔半腱肌腱腱后固定方法重建前交叉韧带（ACL）实验动物模型，研究持续被动活动方式对关节腔内移植物组织学变化，探讨膝关节持续被动活动（CPM）在ACL重建术后早期康复中的作用。方法：对24只8月龄雄性新西兰大白兔右侧后肢膝关节行自体双股半腱肌腱移植重建前交叉韧带手术。术后随机分为2组：CPM组术后第2天开始早期关节全活动范围康复6周；非CPM组仅笼养。分别于术后第6、12、24周取材，取4只行组织学观察。结果：与非CPM组相比，CPM组的大部分标本两束融合成一体。术后第6周，CPM组的关节腔内重建韧带的新生组织替代过程加快，增生的细胞数目较多；术后第12周，CPM组的细胞形状较统一，胶原纤维纵向排列更为有序，呈波状，较广泛的组织呈Ⅰ型胶原阳性，组织内部Ⅲ型胶原更为均匀；术后第24周，CPM组胶原排列更为有序，成纤维细胞梭形的细胞核也逐渐变为标志成熟韧带的长形，Ⅰ型胶原染色更为均匀散在分布，Ⅲ型胶原明显减少。结论：半腱肌腱重建前交叉韧带术后早期CPM促进移植物韧带化。     

链霉素缓释复合降解膜植入损伤肌腱局部腱周结缔组织的变化

背景：国内外学者曾用生物、非生物及药物等方法,诸如生物膜、透明质酸钠、纤维素密封胶等材料进行大量肌腱修复防粘连研究,但到目前为止尚未取得突破性进展。目的：观察肌腱损伤局部植入链霉素复合降解膜后腱周结缔组织的增生。方法：切断SD大鼠跟腱后,随机数字表法分为3组,分别在肌腱断端缝合处植入链霉素复合缓释降解膜、维生素C复合缓释降解膜、空白缓释降解膜。术后90d行肌腱损伤局部组织学观察、羟脯氨酸含量和生物力学指标检测。结果与结论：链霉素复合缓释降解膜组肌腱缝合处内部的成纤维细胞、胶原纤维均较其腱周围、维生素C复合缓释降解膜组、空白缓释降解膜组多;腱缝合处肌腱周围多为正常结构的疏松结缔组织,很少有增生的结缔组织长入肌腱内部;肌腱与周围组织分界清晰,最大抗拉强度、羟脯氨酸含量明显优于其他两组。表明链霉素复合缓释降解膜通过抑制腱周结缔组织增生,防止腱周结缔组织增生长入腱内,从而减轻或防止粘连形成。     

腱周组织及骨膜对骨-肌腱结合部位早期愈合质量的影响

背景：骨腱结合部组织结构复杂,损伤愈合过程相对缓慢,其愈合过程中的关键在于促进特征性结构纤维软骨移行带的修复。目的：通过组织学方法对腱骨结合部愈合进行评估。方法：18周龄新西兰大白兔随机分为两组。骨膜组将骨膜游离并植入兔髌骨部分切除模型中骨-肌腱结点中,对照组不植入骨膜。术后4,8,12周行组织学染色观察,对比Safranin’O染色阳性染色的积分吸光度值。结果与结论：组织学检查显示骨膜组术后4,8周骨-肌腱结合部组织愈合明显,以从松质骨再生和骨-肌腱愈合接点纤维软骨带的再生为特征,较对照组迅速,提示早期骨膜组恢复较对照组迅速。说明骨膜可以促进骨-肌腱结合部位细胞增生,增加细胞基质合成,促进新生骨和纤维软骨移行带形成,促进其愈合。同时,组织学检测可以很好地判断腱骨结合部的愈合。     

聚乳酸凝胶预防肌腱吻合术后粘连的实验研究

背景：肌腱吻合术后易粘连而影响功能恢复，近年来多采用固态物质为隔膜以利于肌腱滑动，但效果不理想。目的：观察聚乳酸凝胶(PLA-G)预防肌腱吻合部粘连作用。设计：随机自身对照实验研究。地点和对象：实验在四川大学华西医院动物实验外科完成，对象为16只日本大耳白兔，雌雄不限(由该科室提供)。干预：将16只兔左后肢比目鱼肌腱切断一半后吻合，鞘内涂PLA-G为实验组；兔的右后肢同样操作，不涂PLA-G为对照组。术后2，4，6,10周观察结果。主要观察指标：手术段肌腱和鞘管作大体、组织学及超微结构观察。结果：①大体观察：实验组2周时PLA-G隔离好无粘连；4周开始降解，肌腱滑动良好；6，10周瘢痕小，吻合口生长及滑动良好。对照组瘢痕大、广泛粘连。②组织学观察：实验组纤维排列由不规则向规则变化，成纤维细胞少。对照组腱与鞘无分界，成纤维细胞增生、胶原分泌活跃。③超微结构：实验组成纤维细胞粗面内质网较对照组明显稀疏、胶原纤维少。结论：PLA-G具有防粘连作用，不影响肌腱愈合。     

鸡趾屈肌腱鞘内损伤修复后的愈合和bFGF的表达

目的：了解鸡趾屈肌腱鞘内损伤修复后碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达及其与肌腱愈合的关系。方法：将36只来亨鸡的右足第3趾趾屈长肌腱切断后缝合并重新覆以腱鞘，于术后不同时间点切取标本（每个时间点6只），另取6只未行手术处理鸡的肌腱标本作为对照。将标本行组织学检查，并用RT—PCR和免疫组化方法测定肌腱bFGF的表达。结果：肌腱修复后断端先出现炎细胞浸润。接着成纤维细胞聚集并分泌胶原，最后胶原纤维重新塑形。这些细胞活动在腱实质比腱鞘、腱外膜出现迟且弱。bFGF在对照组肌腱仅出现低水平表达．而在实验组肌腱各个时间点均明显上调；腱鞘、腱外膜的表达明显高于腱实质。结论：bFGF参与了鸡趾屈肌腱损伤修复的愈合过程。     

间歇性负压干预前交叉韧带重建后的腱一骨愈合

背景;间歇性负压被证实可以促进软组织修复及骨愈合,但其对交叉韧带重建后腱一骨愈合的影响尚未见报道。目的：观察间歇性负压对兔前交叉韧带重建后腱一骨愈合及肌腱移植物生物力学的影响。方法：取24只新西兰大白兔制各自体半腱肌前交叉韧带重建模型,随机取一侧后腿作为负压侧,负压侧关节通过引流管接微型负压吸引器,并维持低强度、间歇性负压;对侧后腿作为对照,接普通引流管。5d后两侧同时拔除吸引管。造模后6周,取关节液检测白细胞介素113的表达水平;取股骨一韧带一胫骨复合体行肌腱移植物拉力测定和腱一骨界面组织学观察。结果与结论：1只兔关节感染,最终23只兔进入结果分析。拉力测定结果显示,负压组完全断裂所需拉力显著大于对照组（P〈0．05）。组织学观察结果发现,负压组成骨细胞数目显著多于对照组,差异有显著性意义（P〈0．01）。关节液检测结果提示负压组关节滑液中自细胞介素113含量低于对照组,差异有显著性意义（P〈0．01）。提示间歇性负压可能在前交叉韧带重建后腱一骨愈合、肌腱移植物的塑性过程中扮演着积极作用。     

不同区域的肌腱组成细胞的增殖能力及其行为差异

背景：目前已经证实肌腱具有内在愈合的潜能，但不同区域的肌腱组成细胞在修复过程中的增殖能力及行为差异还有待进一步研究。目的：研究不同区域的肌腱组成细胞在体外培养过程中的增殖能力及行为学差异。设计：重复测量设计。地点和对象：南通医学院第二附属医院骨科。白色纯种Leghorn鸡15只，雌雄不拘，体质量约400g，购自南通医学院动物中心。方法：将鸡Ⅱ区趾深屈肌腱立体分割成4区：腱外膜组织、外膜下腱组织、亚中心腱组织、中心腱组织。两相同区域肌腱组织按间隔0．5，1，2mm 3种排列方式培养于24孔培养板中，每种排列方式培养5孔。完整肌腱段组织也以相同方式培养作为对照。每天计数每种排列方式细胞游出数目、方向及来源，培养第9天作组织学检查。主要观察指标：①不同区域的肌腱组织细胞增殖能力及其行为。②立体分割的肌腱段组织体外培养后的组织学变化。结果：细胞游出最早、数目最多的组织为腱外膜组织，其他依次为亚中心腱组织、中心腱组织、外膜下腱组织。两腱外膜组织间距越小细胞游出越早，而其他区域的肌腱组织则相反。组织学检查显示培养第9天的完整肌腱段组织，表面腱外膜细胞明显增殖；外膜下腱组织、亚中心腱组织内的腱内膜细胞与培养前相比，差异无显著性意义(t=2．31，P&;gt;0．05)；中心腱组织的腱内膜细胞(84&;#177;3)较培养前(167&;#177;5)减少，两者间差异有非常显著性意义(t=58．08，P&;lt;0．01)。培养第9天的中心腱组织，其腱内膜细胞(237&;#177;3)比培养前(167&;#177;5)增多，两者差异有非常显著性意义(t=33．73，P&;lt;0．01)。结论：不同区域的肌腱组成细胞在体外培养过程中的增殖能力及行为存在差异。     

关节镜下腘绳肌腱重建前交叉韧带术后的康复实践

目的探讨术前、术后适宜的康复训练和护理方法,对预防关节镜下腘绳肌腱重建前交叉韧带术后并发症、促进关节功能恢复的作用。方法对22例关节镜下腘绳肌腱重建前交叉韧带术患者手术前后的临床康复、护理方法进行总结。主要内容包括：术前心理准备、功能康复示范及术后五步渐进式康复训练法。结果全部病例均获随访,随访时间4～12月,平均7月。采用Lysholm膝关节功能标准评分,术前平均分61分,终末随访平均分93分,关节功能恢复良好。结论腘绳肌腱重建前交叉韧带术后行5个阶段的规范、系统、适度、个体化的康复训练,可有效的预防术后并发症和恢复关节功能,是一种安全、有效的康复训练方案。     

同种异体甲状旁腺移植的动物实验研究

本实验旨在研究永久性甲状旁腺功能低下不用免疫抑制剂的甲状旁腺同种异体移植。方法　将实验受体鼠分成四组 ,每组 7只 ,两组裸细胞植入肾包囊 ,两组微囊化植入胸锁乳突肌。其中各一组加Caspase抑制剂。移植后隔两周测血钙及甲状旁腺素 (PTH)。结果　裸细胞组 8周内血钙及PTH均降至移植前水平 ,而微囊化组在 12周后仍保持较高水平。结论　不用免疫抑制剂情况下 ,微囊化甲状旁腺移植可保证移植甲状旁腺组织长期存活并有功能 ,可进一步用于临床     

同种异体冷冻骨移植治疗大段骨缺损的安全性及有效性分析

【目的】对比分析同种异体冷冻骨移植和自体骨移植的临床疗效,为同种异体冷冻骨移植的安全性及有效性做出评价。【方法】选取2009年7月至2014年7月60例来本院就诊的大段骨缺损患者作为研究对象,采用随机数表法分为观察组和对照组,观察组采用同种异体冷冻骨移植治疗,对照组采用自体骨移植治疗;比较两组临床疗效以及并发症发生情况。【结果】观察组、对照组愈合良好率分别为93.3%、96.7%,对照组高于观察组,但差异不具有统计学意义(P >0.05);观察组、对照组骨愈合时间分别为(12.3±4.2)个月、(10.7±5.3)个月,观察组长于对照组,但差异不具有统计学意义(P <0.05);观察组、对照组术后48 h 引流量分别为(262.6±38.9)mL、(249.4±49.2)mL,对照组低于观察组,但差异不具有统计学意义(P >0.05)。观察组在排斥反应、感染、体温升高、切口渗液、延迟愈合的发生例数上与对照组无明显差异,差异不具有统计学意义(P >0.05)。【结论】同种异体冷冻骨移植临床疗效与自体骨移植相似,安全性高,且不会造成二次创伤、取材方便,值得临床借鉴使用。     

黄芩素通过WNT/β-catenin信号通路促进大鼠腱骨愈合

目的探讨黄芩素对大鼠腱骨愈合的作用及相关分子机制。 方法取40只8周龄的雄性SD大鼠,随机分为对照组（n=20） 和实验组（n=20）。两组动物均行大鼠腱骨愈合模型造模。实验组大鼠灌胃黄芩素10 mg/(kg·d）,对照组灌胃等量的生理盐水。术后3周、6周各处死10只大鼠并取材,通过生物力学、组织学观察各组腱骨愈合的程度。此外,体外培养原代大鼠肌腱干细胞,加入不同浓度（0、0.1、1、10 μmol/L）的黄芩素处理,14 d后分别进行ALP、茜素红染色。Q-PCR、Western Blot检测Runx2、 OSX、OCN、一型胶原以及β-catenin的变化。随后,在肌腱干细胞中加入10 μmol/L的黄芩素,并且加入WNT/β-catenin通路抑制剂DKK-1共培养,14 d后收集蛋白行Western Blot检测,观察β-catenin、Runx2以及OCN蛋白表达的变化。 结果生物力学结果显示术后3周和术后6周时实验组的腱骨愈合程度明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。组织学结果显示实验组在术后3 周和6 周时腱骨界面细胞成熟程度更高,sharpey 纤维生长密集度与间质钙化程度更高。ALP、茜素红染色、Q-PCR和 Western Blot结果显示不同浓度黄芩素均能提高肌腱干细胞的ALP活性,增加矿化结节形成、提高Runx2、OSX、OCN、一型胶原和β-catenin的表达。而β-catenin抑制剂DKK-1后能显著降低黄芩素的这种促成骨作用。结论黄芩素可以有效促进腱骨界面细胞成熟与腱骨界面的胶原分泌,加速腱骨愈合并提高腱骨愈合质量,这种促进作用呈现WNT/β-catenin信号依赖性。      

膀胱粘膜点状移植于浆肌层肠段重建膀胱的实验研究

为减少肠管膀胱术的并发症,于1994年3月～1994年7月,用犬分三组作了膀胱粘膜点状移植于浆肌层肠段重建膀胱的实验。A组:自体膀胱粘膜点状移植于浆肌层肠段形成人工膀胱。B组:在A组基础上一期将输尿管与人工膀胱吻合。C组:将同种异体膀胱粘膜移植于浆肌层肠段。结果表明:A、B组可在术后第3周形成结构和功能与正常膀胱几乎相同的人工膀胱。C组其移植物能存活,并有所增长。本研究为临床应用自体膀胱粘膜点收移植于浆肌层肠段形成人工膀胱和进一步利用尸体正常膀胱粘膜作移植物提供了实验依据。     

文化护理在肾移植受者康复期的应用研究

目的探讨文化护理在肾移植受者康复期的作用。方法选取64例出院肾移植受者为研究对象,将其随机分为实验组和对照组各32例。对实验组实施3个月的文化护理干预,对照组按常规护理。比较干预前后两组受者的焦虑、抑郁程度。结果干预前两组SAS、SDS得分差异无统计学意义;干预3个月后,实验组SAS、SDS得分均低于对照组,差异有统计学意义。结论文化护理有助于缓解出院肾移植受者的负性情绪,促进心理康复。     

循证护理在亲体肾移植受者心理护理中的应用

目的探讨亲体肾移植受者的心理状况及相关因素,寻求科学、有效的护理干预措施。方法将120例行亲体肾移植术的受体患者随机分成对照组60例和实验组60例,对照组采用传统的心理护理方法,实验组运用循证护理方法进行心理护理,对两组患者的术后心理状况、康复情况进行比较。结果实验组与对照组比较,术后心理状况、病情康复情况差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论循证护理为临床实践提供了可靠的科学依据,可以减少亲体。肾移植受者术后心理障碍和并发症的发生,提高护理质量。     

60角膜缘干细胞移植治疗复发性翼状胬肉的临床研究

目的探讨改进显微手术切除联合自体角膜缘上皮干细胞移植术治疗复发性翼状胬肉的临床疗效。方法88例（88眼）复发性翼状胬肉,随机分别采用单纯显微手术切除方法（A组）和显微手术切除联合自体角膜缘移植术（B组）,各44例（44眼）。术后随访4～28（平均14．30&#177;7．42）。结果A组真性胬肉复发9眼,复发率20．45％;B组真性胬肉复发3眼,复发率为6．82％。两组复发率差异有统计学意义（X^2=1．137,P〈0．05）。结论改良的显微手术切除联合自体角膜缘上皮干细胞移植术是治疗复发性翼状胬肉的理想方法。     

亲体肝移植患者术中低潮气量联合呼气末正压通气与间歇正压通气对呼吸功能的影响

【目的】比较术中低潮气量联合呼气末正压通气（PEEP）与间歇正压通气（IPPV）对亲体肝移植患者呼吸功能的影响。【方法】53例患者,根据肺功能状况分为：肺功能正常、术中IPPV组（Ⅰ组,n=23）和PEE组（Ⅱ组,n=10）;肺功能减退、术中IPPV组（Ⅲ组,n=10）和PEEP组（IV组,n=10）。观察比较各组术前、进腹后、无肝期5min、1h、再灌注后5min、术毕各时点的呼吸指标。记录术后14d内急性肺损伤（ALI）／急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的发生率。【结果】Ⅱ组的肺血管压力指数（PVPI）在无肝期与再灌注后均低于Ⅳ组（P〈0．05）。Ⅲ纽血管外肺水（EVLW）在术前、进腹后、再灌注后以及术半时均高于Ⅰ组,在再灌注后与术毕时高于Ⅳ组（P〈0．05）。Ⅲ组的肺泡-动脉氧分压差（PAO2-PaO2）从术前到术毕全程均显著高于Ⅰ组,其中术毕时Ⅲ组的PAO2-PaO2显著高于Ⅳ组（P〈0．05）。Ⅲ组的PaO2／FiO2从术前到术毕全程均低于Ⅰ组,其中再灌注后与术毕时Ⅲ组显著低于Ⅳ组（Pd0．05）Ⅱ组的Pa（）2／Fi02则在再灌注至术毕时均高于Ⅳ组（P〈0．05）。Ⅱ组患者的ALI发生率显著低于Ⅰ组;而Ⅲ组患者ALI、ARDS的发生率均显著高于Ⅰ组与Ⅳ组（P〈0．05）。【结论】低潮气量PEEP可以改善肝移植患者手术期间的PVPI,降低EVLW和气道阻力,改善肺顺应性,可能有利于防治术中与术后ALI／ARDS的发生。     

三氧化二砷抗裸鼠肺癌移植瘤药效学研究

目的:探讨三氧化二砷(A s_2O_3)对裸鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用。方法:建立肺癌移植瘤模型。随机分为5组,每组6只,A s2O33组分别给予A s2O310、5、2m g/kg体重,腹腔注射;生理盐水(N S)组给予等体积的生理盐水,用法同A s_2O_3组;顺铂组(D D P)组按1m g/kg体重给药。用药2周后,观察用药前后肿瘤生长情况、裸鼠体重变化,测量肿瘤大小,流式细胞仪检测瘤细胞凋亡,取瘤组织行病理学检查和瘤细胞超微结构观察。结果:A s_2O_3组肿瘤大小均较N S组明显缩小(P<0.01);大、中剂量的A s_2O_3瘤组织细胞凋亡增多,病理可见以中度坏死为主,小剂量以轻度坏死为主。电镜下大、中剂量A s_2O_3组可见肿瘤细胞凋亡征象。结论:A s_2O_3对裸鼠肺癌移植瘤有显著的抗肿瘤作用,诱导肿瘤细胞凋亡可能是A s_2O_3三氧化二砷的抗肿瘤机制之一。