针刺对大鼠脊髓损伤后脊髓前角运动神经元功能的影响

目的探讨针刺对脊髓损伤(SCI)大鼠前角运动神经元功能恢复的影响。方法成年雄性SD大鼠60只,改良Allen法压迫致伤T8、T9,随机分为实验组和对照组,伤后分别给予电针刺激大鼠双下肢足三里和悬钟、伏兔和三阴交穴,取治疗2,4,6周伤段脊髓进行PCR扩增和组织切片。利用RT-PCR技术检测伤区脊髓胶质源性神经营养因子(GDNF)mRNA基因体内表达的变化;应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察大鼠SCI后伤区脊髓前角运动神经元存活的数目和乙酰胆碱酯酶(AChE)的变化;采用斜板试验和BBB评分法观察大鼠后肢运动功能恢复情况。结果实验组较对照组AChE活性显著增加(P<0.01);实验组脊髓前角大、中型神经元的数目较对照组明显增加(P<0.05);实验组GDNF mRNA基因体内表达较对照组明显增加(P<0.01);大鼠SCI 3周后针刺治疗组后肢运动功能评分均明显高于对照组(P<0.05)。结论针刺治疗对脊髓损伤后前角运动神经元的功能恢复有一定的促进作用。     

大鼠脑干5－羟色胺神经元至腰骶髓的投射研究

应用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）逆行追踪法结合免疫细胞化学双重标记法，观察了大鼠脑子５－羟色胺（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔｍｉｎｅ，５－ＨＴ）神经元向脊髓腰６（Ｌ６）和骶１（Ｓ１）节段的纤维投射。结果表明：在脑桥尾侧网状核、前庭神经外侧核、巨细胞网状核、外侧旁巨细胞网状核、外侧网状核三叉下亚核、中缝大核及中缝苍白核出现ＨＲＰ－５－ＨＴ双标记细胞。提示Ｌ６和Ｓ１节段的５－ＨＴ传入纤维起源是广泛的，不仅延髓网状结构，而且脑桥网状结构和脑神经核内的５－ＨＴ能神经元也向Ｌ６和Ｓ１投射。     

环孢素对大鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元的保护作用

目的:通过观察应用环孢素对大鼠坐骨神经切断后脊髓前角运动神经元GAP-43mRNA的表达,研究环孢素对脊髓前角运动神经元的影响。方法:60只大鼠随机分为实验组和对照组,实验组进行环孢素干预,在3、7、14、21、28天,5个不同的时相点各从实验组和对照组中随机抽取6只大鼠,取下脊髓T12-L1节段,脊髓前角GAP-43mRNA的表达用荧光定量RT-PCR检测。结果:对照组GAP-43mRNA第3日呈低表达,第7天表达量增加,第14天表达量达到高峰,第21天表达量下降,第28天表达量接近第3天水平。实验组第3、7和14天表达量与对照组相似,第21和28天表达量较对照组有所提高,经统计学处理,第3、7和14天实验组与对照组比较,差异无显著性(P>0.05),第21天和28天实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:应用环孢素对坐骨神经损伤后脊髓运动神经元有一定的保护作用,可延缓神经元的退变。     

脊髓爆震伤后早期脊髓前角运动神经元的形态学变化

目的:建立脊髓爆震伤动物实验模型,探讨脊髓爆震伤后早期脊髓前角运动神经元形态学变化. 方法:将36只家兔随机分为对照组(A组,n=12) ,6 h实验组(B组,n=12)及24 h实验组(C组,n=12),采用0.9 g单质金属炸药黑索金(RDX)将B,C组家兔炸伤,分别于伤后6 h及24 h两个时间点取材,进行HE染色、甲苯胺蓝染色及银浸染色,观察脊髓神经元形态学改变. 结果:脊髓爆震伤后6 h脊髓运动神经元发生可逆性改变,部分神经元坏死,死亡均数为12.58±2.23,而伤后24 h脊髓运动神经元大量坏死,死亡均数达到了31.52±2.69,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01). 结论:脊髓爆震伤后6 h内脊髓运动神经元以可逆性改变为主,提出早期发现和治疗的重要性.     

大鼠脊髓压迫性损伤后神经细胞的死亡方式

目的：观察实验性脊髓损伤后神经细胞死亡方式。方法：应用凋亡细胞原位末端标记法，ＨＥ染色，对脊髓组织进行定量形态学分析，结果；在脊髓损伤区及相邻区域中发现少量神经元以大量胶质细胞凋亡，结论：脊髓损伤后的神经细胞的凋亡是继发损伤期的重要病理变化。     

Shenfu injection attenuates neurotoxicity of bupivacaine in cultured mouse spinal cord neurons

Background Our previous in vivo study in the rat demonstrates that Shenfu injection, a clinically used extract preparation from Chinese herbs, attenuates neural and cardiac toxicity induced by intravenous infusion of bupivacaine, a local anesthetic. This study was designed to investigate whether bupivacaine could induce a toxic effect in primary cultured mouse spinal cord neuron and if so, whether the Shenfu injection had a similar neuroprotective effect in the cell model. Methods The spinal cords from 11- to 14-day-old fetal mice were minced and incubated. Cytarabine was added into the medium to inhibit the proliferation of non-neuronal cells. The immunocytochemical staining of β-tubulin was used to determine the identity of cultured cells. The cultured neurons were randomly assigned into three sets treated with various doses of bupivacaine, Shenfu and bupivacaine+Shenfu, for 48 hours respectively. Cell viability in each group was analyzed by methyl thiazoleterazolium (MTT) assay. Results The viability of the cultured neurons treated with bupivacaine at concentrations of 0.01%, 0.02%, 0.04% and 0.08% was decreased in a dose-dependent manner. Although the Shenfu injection at concentrations ranging from 1/50 to 1/12.5 (V/V) had no significant influence on the viability of cultured neurons (P&lt;0.05 vs control), the injection significantly increased the cellular viability of cultured neurons pretreated with 0.03% bupivacaine (P&lt;0.05). Conclusion Although Shenfu injection itself has no effect on spinal neurons, it was able to reduce the bupivacaine- induced neurotoxicity in vitro.     

不同浓度臭氧对脊髓神经元的影响

目的 观察臭氧(O3)对体外培养脊髓神经元(SCN)的影响,为临床合理应用O3提供实验依据.方法 体外培养SCN随机分为4组,行NSE、Bcl-2、Bax染色计数阳性细胞率,并在倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化.结果 随O3浓度增加,神经元胞体皱缩或肿胀,突起变短断裂成串珠状,部分细胞破裂消失.Ⅲ组、Ⅳ组NSE免疫组化染色、免疫荧光阳性细胞率低于Ⅰ组,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组Bcl-2阳性细胞率低于Ⅰ组,Ⅱ组、Ⅲ组Bax阳性细胞率高于Ⅰ组.结论 低浓度O3引起SCN凋亡,高浓度引起SCN坏死.     

脊髓病变的运动诱发电位研究及其应用探讨

目的 探讨脊髓病变的运动诱发电位（ＭＥＰ）及其临床应用。方法 采用经颅和椎骨的电刺激技术检查１９例脊髓病变患者上下肢的ＭＥＰ反应。结果 对锥体束产生压迫和（或）破坏的病变、可造成潜伏时和中枢运动传导时间延长,波幅降低。下肢异常比上肢异常明显。异常改变在肢体的分布与病变部位密切相关。结论 ＭＥＰ可作为脊髓病变的神经电生理诊断手段。     

脊髓损伤(SCI)后呼吸运动功能的恢复

 高颈段脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)往往导致膈肌麻痹,了解如何恢复SCI患者膈神经的节律活动至关重要。控制膈运动神经元(phrenic motor neuron,PhMn)的兴奋性前运动神经元主要起源于同侧延髓,因此,当C2脊髓半离断(spinal cord hemisection,SH)后,损伤侧的下行冲动中断,同侧膈神经的节律消失。随后,潜在的对侧下行冲动逐渐增强(神经可塑性),使PhMn的节律性活动恢复。众多证据表明神经营养因子(如脑源性神经营养因子,brain derived neurotrophic factor, BDNF)通过原肌球蛋白相关激酶受体(如TrkB)在神经可塑性中发挥重要作用。我们的实验结果表明,在鞘膜内注射BDNF能促进PhMn节律性的恢复,而注射TrkB-Fc(一种可抑制细胞外BDNF的融合蛋白)则延迟恢复。应用腺病毒载体(adeno-associated viral vector,AVV)靶向诱导PhMn中TrkB的表达也可促进PhMn节律性的恢复,而Si-RNA诱导的PhMn中TrkB表达抑制则延缓恢复。总之,增强PhMn的BDNF-TrkB信号通路可能是促进SCI后功能恢复的有效治疗手段。     

GB对胚鼠脊髓运动神经元存活与生长的影响

目的探讨银杏内酯B（ginkgolide B,GB）对体外培养的胚鼠脊髓运动神经元生长发育及细胞活性的影响。方法取胚胎大鼠脊髓腹侧组织进行原代培养,从细胞形态学、MTT法、mAb SMI-32免疫组化染色观察GB和NGF对大鼠脊髓运动神经元生长发育的影响。结果 GB及NGF能够促进体外培养胚胎大鼠脊髓运动神经元的存活,促进胞体及突起的生长。结论 GB能促进培养大鼠脊髓运动神经元存活、分化和生长。     

实验性家兔脊髓损伤后后肢运动功能与肌肉运动诱发电位的关系

目的 了解实验性家兔脊髓损伤模型损伤后肢体肌力和肌肉运动诱发电位(MEP)之间的关系.方法 45只家兔随机分为打击组和对照组共9组,打击能量分别为0、50、75、100、125、150、175、200、250 gcf.打击后和第4周末记录实验兔双后肢肌力、MEP的潜伏期和波幅,并在第4周末取家兔脊髓固定,脊髓神经中丝(NF)免疫组化及病理形态观察,测量NF光密度,进行统计分析.结果 脊髓受到外伤打击后,术中MEP的表现是出现或消失,即有或无,并与伤后实验兔后肢运动功能状态、术后皮质脊髓束神经微丝NF光密度相关.伤后4周实验兔的后肢MEP潜伏期延长程度与肌力下降呈线性相关,但其波幅与伤后肌力变化无相关.结论 在脊髓损伤中可以通过肌肉MEP的有或无作为判断脊髓损伤程度的指标.     

刺五加皂苷对体外培养大鼠脊髓运动神经元缺氧损伤的保护作用

目的:观察刺五加皂苷(acanthopanax senticosus saponins, ASS)对脊髓运动神经元缺氧损伤有无保护作用,并探讨其可能机制.方法:对胚鼠运动神经元进行原代分离培养,免疫组化鉴定后建立缺氧诱导的神经元凋亡模型.取运动神经元培养在24孔板中,每组10孔,分为4组:对照组,无缺氧损伤;缺氧损伤组;ASS保护组,缺氧前24 h加入50 μg/ml的ASS;神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)保护组,缺氧前24 h加入0.1 μg/ml的GDNF.倒置显微镜及电镜下观察细胞形态学变化;MTT法测定神经元细胞活性;检测细胞外液LDH释放量来观察ASS对神经元细胞膜稳定性的影响.提取细胞匀浆液,Western印迹法检测分析ASS对缺氧的运动神经元HIF-1α表达的影响.结果:形态学观察显示ASS、GDNF保护组神经元缺氧损伤较缺氧损伤组明显减轻.ASS保护组神经元的细胞活性(0.21±0.028)比缺氧损伤组(0.15±0.012)高(P<0.05),而LDH的释放量(28.6±1.309)比缺氧损伤组(40.7± 1.885)低(P<0.01);缺氧损伤组的神经元HIF-1α的相对表达量(0.72±0.027)比对照组(0.16±0.003)高(P<0.01),但ASS保护组HIF-1α的表达(1.15±0.016)最高(P<0.01).ASS对大鼠脊髓运动神经元缺氧损伤的保护作用与GDNF相仿.结论:ASS可以提高体外缺氧损伤的运动神经元的细胞活性,对细胞的缺氧损伤有明显的保护作用,其保护作用的发挥,可能与增强细胞膜的稳定性及提高细胞HIF-1α的表达有关.     

强啡肽A及其受体拮抗剂对大鼠脊髓损伤后脊髓血流量的影响

目的；探讨强啡肽Ａ在脊髓损伤（ＳＣＩ）中的作用。方法，采用Ａｌｉｅｎ打击法复制大鼠ＳＣＩ模型，应用强啡肽Ａ放免检测技术和氢清除法分别测定伤段脊髓组织２４ｈ内主Ａ含量和脊髓血流量（ＳＣＢＦ）的变化，并观察脊髓蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ及其受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ对ＳＣＢＦ的影响。结果；ＳＣＢＦ在伤后１０ｍｉｎ即有明显下降，２ｈ较１ｈ略有回升，４－８ｈ又进一步下降，两次下降相差显著；ＳＣＩ后脊髓蛛网膜下腔     

用运动诱发电位评价急性脊髓损伤的治疗效果

目的探讨运动诱发电位对脊髓损伤疗效的评价作用。方法健康雄性猫３２只,随机分为对照组、脊髓损伤组、治疗组和假治疗组,每组８只。采用Ａｌｅｎ’ｓ重量降落冲击法制备脊髓损伤模型,用ＮｅｕｒｏｐａｃｋⅡＭＥＢ５１００型诱发电位记录仪测各组动物的运动诱发电位。直接刺激大脑皮层运动区,记录电极位于腰椎棘突间。分别测试手术前、后、损伤后立即、损伤后３０、６０、９０、１２０ｍｉｎ的运动诱发电位。采用硫代巴比妥酸法测脊髓组织中反映自由基水平的指标之一丙二醛含量。治疗组动物于致伤后立即静脉输入超氧化物歧化酶,假治疗组则给于等量的生理盐水。结果损伤组动物ＭＥＰ呈进行性恶化,损伤处脊髓组织中丙二醛含量较对照组明显升高。治疗组动物ＭＥＰ较损伤组和假治疗组有改善,尤以伤后３０ｍｉｎ和６０ｍｉｎ为明显,而后逐渐恶化,其致伤脊髓组织中丙二醛含量也较上二组明显降低而接近正常对照组。治疗组动物病理结果亦较损伤组和假治疗组有改善。结论ＳＯＤ具有保护损伤脊髓组织的作用。ＭＥＰ可以做为评价脊髓损伤后治疗效果的客观指标。     

睫状神经营养因子对脊髓神经元的保护作用

目的：研究脊髓操作后脊髓神经元内酶学的变化,并探索睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对神经元的保护作用,方法：用Ａｌｌｅｎ改良法打击摸型致ＳＤ大鼠Ｔ８脊髓操作分别于术前及术后３,７,１０ｄ测定脊髓组织内乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰ）的含量。结果：ＡＣｈＥ于术后持续下降;ＡＣＰ在术后第３天开始上升,第７天至最高,以后逐渐下降;用ＣＮＴＦ处理的大鼠上述两种酶变化的幅度较小,且整个过程也比较平     

Brain motor control function in a patient with sub-acute, incomplete, asymmetrical spinal cord injury

Spinal cord injury (SCI) is a major cause of disability. A serious consequence of SCI is the loss or partial loss of motor control. A number of therapies are currently being developed for restoring motor function in SCI patients.1'2 However, such approaches generally require intact neural motor systems for driving limb movements.     

大鼠慢性压迫性脊髓损伤后EphA2在脊髓前角运动神经元中的表达

目的 探讨慢性脊髓损伤后红细胞生成素诱导肝癌细胞株受体A2(EphA2)在脊髓中的变化规律,寻找脊髓损伤后治疗的靶点.方法 将40只Wistar大鼠分为假手术组、轻度压迫组(CR 20%)、中度压迫组(ca 40%)、重度压迫组(ca 60%)4组.T10水平脊髓背侧加压,压迫方法采用塑料螺钉渐进性加压,分次完成手术.对大鼠进行后肢运动功能评分及所取脊髓标本进行原位杂交分析,对脊髓前角EphA2阳性细胞率进行统计分析,比较各组之间的差异.结果 EphA2阳性细胞主要存在于压迫远端脊髓灰质中,其中以脊髓前角运动神经元为著.假手术组有很少量EphA2阳性细胞,压迫组EphA2阳性细胞明显升高(P<0.01),中度压迫组及重度压迫组较轻度压迫组升高(P<0.05).中度压迫组及重度压迫组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 慢性压迫性脊髓损伤后脊髓前角运动神经元EphA2表达升高.慢性脊髓压迫可以诱发脊髓EphA2表达升高,对脊髓损伤是一个保护性因素.     

Brain motor control function in a patient with subacute,ncomplete, asymmetrical spinal cord injury

Spinal cord injury （SCI） is a major cause of disability. A serious consequence of SCI is the loss or partialloss of motor control. A number of therapies are currently being developed for restoring motor function in SCI patients. However, such approaches generally require intact neural motor systems for driving limb movements. There is evidence that SCI can generate such conditions in the brain,     

胶质源性神经营养因子对脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用

目的 :探讨胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对脊髓损伤后运动神经元的保护作用。 方法 :大鼠分为假手术组、生理盐水 (NS)组和 GDNF组 ,改良 Allen法撞击致伤 T1 2 脊髓 ,蛛网膜下腔分别给予 NS和 GDNF,分别取不同时间的伤段脊髓进行切片 ,应用酶组织化学染色方法显示脊髓前角外侧核运动神经元中胆碱酯酶 (Ch E)和酸性磷酸酶 (ACP)活性 ,并结合计算机进行图像分析。结果 :GDNF组较 NS组 Ch E活性显著增加 ,ACP活性显著降低 ;2 1d时 NS组的 ACP及 Ch E活性均高于及低于假手术组 ;GDNF组与假手术组 Ch E和 ACP活性差别不显著。 结论 :GDNF对脊髓损伤后的前角外侧核运动神经元有一定的保护作用     

外泌体源性microRNA-124对急性创伤性脊髓损伤大鼠脊髓小胶质细胞活化及炎症反应的影响

目的 观察外泌体（Exos）源性microRNA-124(miR-124)对急性创伤性脊髓损伤（ASCI）大鼠脊髓小胶质细胞（MG）活化及炎症反应的影响。方法 取对数期HEK239细胞,分为空白组、转染组。空白组不处理,转染组转染miR-124-mimics质粒。从35只大鼠中随机选取10只仅咬除椎板显露脊髓,不进行损伤处理,设为假手术组;其余25只复制ASCI模型,模型复制成功20只,随机分为ASCI组、实验组,每组10只。分离含有miR-124的Exos,鉴定后用于后续实验。模型复制成功后24 h,实验组经尾静脉注射Exos 3×109个微粒,假手术组及ASCI组注射等量PBS溶液。实时荧光定量聚合酶链反应检测脊髓组织miR-124的表达;流式细胞术检测脊髓组织MG占比;酶联免疫吸附试验检测脊髓组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平;Western bloting检测脊髓组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、P2X7蛋白的表达。结果 转染组miR-124相对表达量高...