软坚消瘿颗粒对肝郁脾虚型桥本甲状腺炎模型大鼠Treg和 Th17细胞因子表达的影响

目的：观察软坚消瘿颗粒对肝郁脾虚型桥本甲状腺炎（HT）大鼠Treg和Th17特异性转录因子及细胞因子表达的影响,探讨软坚消瘿颗粒对HT的治疗作用及其免疫学作用机制。方法：采用随机数字法将48只SD大鼠分为正常组（12只）和造模组（36只）。采用高碘饮水联合甲状腺球蛋白皮下注射方法建立HT大鼠模型,再结合慢性束缚应激、过度疲劳、饮食失节等复合方法制备肝郁脾虚模型。造模后,造模组大鼠随机分为模型组、雷公藤组和软坚消瘿组,每组12只,连续给药8周。去除实验期间死亡大鼠和不合格标本,每组留取10只检测结果,观察各组大鼠一般情况;末次给药后采集大鼠腹主动脉血和甲状腺组织,采用ELISA法检测大鼠血清甲状腺球蛋白抗体（TGAb）、甲状腺过氧化酶抗体（TPOAb）、血清游离三碘甲腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）、促甲状腺激素释放激素（TRH）和超敏促甲状腺激素（TSH）水平及血清白细胞介素10（IL-10）、IL-17和IL-23水平;HE染色法检测各组大鼠甲状腺组织病理形态表现;Western blotting法检测各组大鼠甲状腺组织中Foxp3和RORγt蛋白表达水平。结果：与正常组比较,模型组、雷公藤组和软坚消瘿组大鼠血清TGAb和TPOAb水平升高（P<0.05）;血清FT3、FT4和TRH水平降低（P<0.05）,TSH水平升高（P<0.05）;甲状腺组织中Foxp3蛋白表达水平降低（P<0.05）,RORγt蛋白表达水平升高（P<0.05）;血清IL-10水平降低（P<0.05）,IL-17和IL-23水平升高（P<0.05）。与模型组比较,雷公藤组和软坚消瘿组大鼠血清TGAb和TPOAb水平降低（P<0.05）;大鼠血清FT3、FT4和TRH水平升高（P<0.05）,TSH水平降低（P<0.05）;甲状腺组织中Foxp3蛋白表达水平升高（P<0.05）,RORγt蛋白表达水平降低（P<0.05）;血清IL-10水平升高（P<0.05）,IL-17和IL-23水平降低（P<0.05）。与雷公藤组比较,软坚消瘿组大鼠血清TGAb和TPOAb水平降低（P<0.05）;血清FT3、FT4和TRH水平升高（P<0.05）,TSH水平降低（P<0.05）;甲状腺组织中Foxp3蛋白表达水平升高,RORγt蛋白表达水平降低,但差异无统计学意义（P>0.05）;血清IL-10水平升高（P<0.05）,IL-17和IL-23水平降低（P<0.05）。正常组大鼠甲状腺滤泡形态规则,结构完整,无淋巴细胞浸润;模型组大鼠甲状腺滤泡腔扩大,滤泡结构大量破坏,滤泡腔内及周围可见大量淋巴细胞浸润;雷公藤组甲状腺滤泡腔扩大,部分滤泡结构破坏,滤泡腔内及周围有少量淋巴细胞浸润,浸润程度轻于模型组;软坚消瘿组甲状腺病理形态学改变与雷公藤组类似,滤泡腔内及周围亦有少量淋巴细胞浸润。结论：软坚消瘿颗粒可以通过调节Treg和Th17特异性转录因子Foxp3和RORγt蛋白及其相关细胞因子的表达,对肝郁脾虚型HT大鼠起治疗作用。     

磁珠-流式细胞术检测肺结核患者Th1/Th2细胞因子

目的 建立磁珠-流式细胞术检测肺结核病患者血浆中的Th1/Th2细胞因子,为结核病患者免疫监测提供一种快速和客观的方法.方法 按Th1/Th2细胞因子磁珠分析试剂盒说明书进行,Th1/Th2细胞因子标准品倍比稀释,50μL等体积混合的Th1/Th2细胞因子捕获磁珠加入检测管,依次加入50μL PE标记的检测试剂,50μL标准品或50μL待检样品震荡混匀,室温避光3 h,加1 mL洗液,200 g离心5 min,加300μL洗液悬浮磁珠,上流式细胞仪前各样品振荡3～5 s.采集流式图谱并用BD CBA software(version 4.0;BDBiosciences)软件分析,并换算成细胞因子浓度.结果 涂阳肺结核患者和涂阴肺结核患者血浆中IFN-γ显著升高,而IL-5显著降低;涂阳肺结核患者循环IL-10显著升高,涂阴肺结核患者循环IL-10含量绝对值升高,但差异无显著性.结论 与常规ELISA法相比,磁珠-流式细胞术检测细胞因子需更少的时间和样品.     

桥本甲状腺炎与Th1/Th2细胞因子

桥本甲状腺炎(HT)是一种常见的器官特异性的自身免疫性疾病,实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)是研究HT的动物模型。在HT与EAT的发病过程中,Th1/Th2细胞免疫失衡发挥着重要作用,表现为Th1细胞因子亢进占优势。Th1细胞可加重炎性反应,而Th2细胞发挥抗炎作用,纠正HT患者体内失衡的细胞因子可以起到一定的治疗作用。     

HCG联合免疫球蛋白对溴隐亭致大鼠流产模型Th1/Th2型细胞因子的影响

目的:研究人绒毛膜促性腺激素(HCG)联合免疫球蛋白对溴隐亭致大鼠流产模型蜕膜局部Th1/Th2型细胞因子及妊娠结局的影响。方法:采用孕第6、7、8天大鼠皮下注射溴隐亭0.3mg/kg,诱导SD大鼠流产模型,随机分为4组:即流产模型(A)组、HCG(B)组、HCG联合免疫球蛋白(IVIG)(C)组及正常妊娠(D)组,每组10只,妊娠第14天麻醉处死并观察妊娠结局,取胚胎吸收邻近的蜕膜研磨并裂解,离心后取上清液,-80℃保存。ELISA方法测定标本中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)以及白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果:胚胎吸收率:A组明显高于其余3组,B组高于C、D组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Th1型细胞因子(TNF-α、IFN-γ)水平,A组明显高于其余3组,差异有统计学意义(P<0.05);Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)水平,A组明显低于其余3组,差异均有统计学意义(P<0.05);IL-10细胞因子水平,B、D组低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HCG联合免疫球蛋白通过上调蜕膜局部细胞因子IL-10水平来改善胚胎发育,二者具有协同作用。     

Th1/Th2细胞与自身免疫性甲状腺疾病

正1 Th细胞概述T淋巴细胞简称T细胞,可分为CD4+T细胞和CD8+T细胞两大群。长期以来,人们将CD4+T细胞按照细胞分化和功能特征分为辅助性T细胞(T help cells,Th)和调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)[1],CD4+辅助性T细胞(Th)在特异性免疫应答中发挥重要的调节作用,人们根据其产生细胞因子的不同,把活化的抗原特异性CD4+T细胞主要分为两个亚群:     

类风湿关节炎病人血清Th1/Th2细胞因子的水平及临床意义

目的：探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）病人Th1／Th2平衡状态及血清中细胞因子的变化与RA发病机制及疾病发生发展的的关系。方法：采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测RA病人和正常人血清中Th1型细胞因子IFN-γ、Th2型细胞因子IL-4的水平变化。结果：（1）RA病人血清中IFN-γ水平明显升高，IL-4水平明显下降，与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）；（2）活动期RA病人血清中IFN-γ、IL-4水平变化与缓解期RA病人比较差异具有统计学意义（P〈0．05）；（3）缓解期与活动期RA病人比较，各临床参数均有明显改善。站论：在RA血清中Th1／Th2细胞分泌的细胞因子存在明显失衡，分泌模式朝Th1偏移，Th1／Th2平衡可能与RA的发病机制及疾病的发生发展密切相关。     

HLA-G与Th1/Th2型细胞因子平衡

HLA-G属非经典的MHC-I类分子,具有限制性的组织分布及有限的多态性,主要表达于绒毛膜外细胞滋养层细胞及某些肿瘤细胞,与免疫耐受关系密切。在正常妊娠、移植后移植物存活时间长者及恶性肿瘤Th1/Th2型细胞因子平衡向Th2漂移,而异常妊娠、移植后移植物存活时间短及良性肿瘤则向Th1漂移。已有大量研究证实,HLA-G的表达与Th1/Th2型细胞因子平衡向Th2偏离关系密切,但其确切关系及机制以及HLA-G是否能诱导免疫耐受仍有待进一步的研究。     

急性发作期哮喘患儿诱导痰Th1/Th2细胞因子的研究

目的探讨哮喘儿童诱导痰Th细胞亚群的变化.方法用双抗体夹心酶联免疫吸附实验（ELISA）对65例哮喘患儿和34例正常儿童分别测定IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10、IgE以及嗜酸细胞计数.结果①Th1类细胞因子（IFN-γ、IL-12）在变态反应哮喘患儿组与正常对照组无显著性差异;②哮喘组Th2类细胞因子（IL-4、IL-10）高于正常组,有显著性变化;③Eos和IgE哮喘组高于正常组.结论哮喘儿童在发作期存在免疫功能紊乱,主要表现在Th2亚群免疫应答优势.     

消痈散结汤对浆细胞性乳腺炎模型大鼠Th1/Th2细胞因子平衡及上皮连接蛋白表达的影响

目的 观察消痈散结汤对浆细胞性乳腺炎模型大鼠Th1/Th2细胞因子平衡及上皮连接蛋白表达的影响,探讨消痈散结汤的可能作用机制。方法 将36只SPF级SD雌性大鼠随机分为正常对照组、模型组、消痈散结汤组,每组各12只。模型组、消痈散结汤组大鼠乳腺组织注射临床PCM患者浆乳组织混悬液,建立浆细胞性乳腺炎大鼠模型。造模成功后,消痈散结汤组给予消痈散结汤0.3 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组等体积生理盐水灌胃,干预2周。干预结束后,酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immuno sorbent assay, Elisa)检测大鼠乳腺匀浆组织血清白细胞介素4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)及干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)含量,免疫组化法检测大鼠乳腺组织CD138阳性浆细胞比例,HE检测大鼠乳腺组织形态学改变,免疫组化法检测大鼠乳腺组织中上皮连接蛋白E-cadherin、ZO-1及Claudin3的表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠乳头内陷、乳房肿块,部分可见乳头溢液、皮肤破溃,血清IL-4...     

阴茎癌121例临床分析

阴茎癌在男性恶性肿瘤中较为多见 ,目前国内对阴茎癌的重视程度有所下降。从近 1 0年我院治疗情况看 ,阴茎癌患者有逐年增加的趋势 ,现将临床治疗的 1 2 1例分析如下。1　临床资料1 1　病例结构　 1 970年 3月至 1 996年1 2月我院和北京医科大学泌尿研究所收治住院阴茎癌患者 1 2 1例 ,年龄 2 1 80岁 ,平均 57.2岁 ;其中农民 59例 (4 8.8% ) ,工人 40例 (33.1 % ) ,干部 1 3例 (1 0 .7% ) ,知识分子 4例 (3.3% ) ,无业者 5例 (4 .1 % )。1 2　阴茎包皮情况　包茎 75例 ,包皮过长 34例 ,曾行包皮环切术 1 2例 ,均为成年后手术 ,包皮环切时…     

凋亡基因Bcl—2、Bax、Fas、FasL在肝细胞癌中的表达

目的了解凋亡基因Bc1-2、Bax、Fas、FasL在肝细胞癌中的表达及意义.方法免疫组化SP法,对57例肝细胞癌组织、29例肝硬变组织进行染色,统计学处理采用x2检验.结果57例肝细胞癌中的阳性率分别为40.4%、89.5%、50.9%、50.9%.29例肝硬变组织中的阳性率分别为69.0%、86.2%、86.2%、86.2%.其中Bcl-2、Fas、FasL在肝细胞癌组织中的表达明显低于肝硬变组织(P＜0.05.P＜0.01、P＜0.01),而Bax则持续较高表达,且在肝细胞癌组织中Bax的表达与Bcl-2表达差异有高度显著性(P＜0.01),Bax的阳性表达较Bcl2敏感且广泛.在肝细胞癌组织中,上述基因表达水平与组织学分级之间无显著差异(P＞0.05).结论Bax在肝细胞,损伤、增殖及癌变过程中持续存在.肝细胞癌的发生可能与Bcl-2、Fas、FasL表达减少,Bcl2与Bax的比例发生变化有关.     

缺氧预处理对 L02肝细胞Bcl-2、Bax、Fas及FasL表达的影响

目的:研究缺氧预处理对正常肝细胞株L02缺血再灌注损伤的抗凋亡机制.方法:将体外培养的L02细胞分为3组:正常对照组(A组)、缺氧复氧损伤组(B组)、缺氧预处理组(C组).各组细胞缺氧复氧处理1、6、1 2、18、24 h后,使用流式细胞术检测细胞凋亡率,各组细胞分别缺氧复氧、缺氧预处理后12 h检测细胞Bcl 2、Bax、Fas及FasL蛋白表达,同时对细胞结构进行电镜观察.结果:C组和B组比较,细胞凋亡率明显降低(P＜0.05),细胞Bcl-2蛋白表达明显升高(P＜0.05),Bax、Fas及FasL蛋白表达量显著降低(P＜0.05),透射电镜观察到缺氧预处理组细胞结构基本正常.结论:缺氧预处理明显减轻了缺氧复氧所导致的L02肝细胞损伤,降低了细胞凋亡率,缺氧预处理保护机制和Bcl-2、Bax、Fas及FasL蛋白表达有关.     

替米沙坦对猪心动过速性心肌病心肌细胞Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白的影响

目的 研究替米沙坦对猪心动过速性心肌病(tachycardiomyopathy,TCM)心肌细胞Fas/FasL、Fas相关死亡结构域(Fas-associated death domain,FADD)、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白的影响,探讨替米沙坦对心肌细胞的保护作用及其作用机制.方法 18头家猪随机分为3组(每组n=6):快速右心房起搏组(TCM组),实验猪植入永久起搏器,起搏频率500次/min;快速右心房起搏加替米沙坦组(TCM+TS组),起搏器植入前3天至起搏2周后,每日给予替米沙坦(1.5 mg·kg-1·d-1)混于饲料中喂服;对照组,实验猪未植入起搏器也未服药.每周记录1次心电图,实验前后经胸心脏超声观测猪左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室射血分数(LVEF).2周后处死动物,取左心室组织,Western blot技术检测Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白含量,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测fas、caspase-3 mRNA转录水平.结果 TCM组较对照组左心室心肌细胞Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白表达量均明显增高(P<0.05),TCM+TS组较TCM组Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白表达量均明显降低(P<0.05).TCM组较对照组左心室心肌细胞fas及caspase-3 mRNA表达明显增高(P<0.05),TCM+TS组较TCM组fas及caspase-3 mRNA表达明显降低(P<0.05).Fas与caspase-3蛋白表达呈明显正相关(r=0.987,P<0.01);fas与caspase-3 mRNA表达呈明显正相关(r=0.950,P<0.01).结论 替米沙坦通过抑制Fas/FasL通路相关蛋白的表达,进而减少细胞凋亡,延缓TCM病情进展.     

大鼠急性胰腺炎凋亡相关蛋白Fas、FasL、Bcl-2的表达及意义

目的 :探讨凋亡调控基因Fas、FasL、Bcl 2在大鼠急性胰腺炎中的表达情况及其与胰腺炎严重程度的关系。方法 :通过胰胆管逆行注射不同浓度的脱氧胆酸钠 ,制作急性水肿性胰腺炎 (AEP)和急性坏死性胰腺炎(ANP)模型。用免疫组化法检测Fas、FasL、Bcl 2蛋白的表达。结果 :急性胰腺炎时 ,Fas蛋白主要表达在胰腺腺泡细胞胞膜 ,AEP组和ANP组均明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,且AEP组高于ANP组 (P <0 .0 5 ) ;FasL在各组腺泡细胞胞浆中均有不同程度表达 ;Bcl 2蛋白表达在胰腺导管细胞胞浆 ,对照组Bcl 2蛋白表达弱 ,AEP组和ANP组表达明显增强 ,ANP组高于AEP组 ,统计学处理两组间无明显差异 ,但均显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :Fas/FasL系统在大鼠的急性胰腺炎过程中可能参与诱导胰腺腺泡细胞凋亡 ,减轻胰腺炎症反应程度 ;而Bcl 2基因可能参与防止导管细胞凋亡而促进其增生并且形成导管管状复合体     

Fas/FasL,Bcl-2与系统性红斑狼疮的细胞凋亡

系统性红斑狼疮（SLE）发病机制未明。近年研究发现，SLE患者外周血淋巴细胞凋亡率较正常人升高，且凋亡调控基因fas/fasL、bcl-2表达异常。故这两类基因可能通过异常的凋亡调控打破自身耐受而导致SLE发病。     

吸烟伴COPD患者肺组织中凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2 的表达

目的 观察凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2在吸烟伴慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者与吸烟无COPD者肺组织中表达的差异性,探讨其在COPD发病中的作用.方法 收集因肺部阴影行肺叶切除手术患者肺组织32例,其中吸烟伴COPD患者(A组)11例,吸烟无COPD者(B组)10例,不吸烟无COPD者(C组)11例,用免疫组化法(SP法)检测肺组织中Bax与Bcl-2蛋白的表达.结果 A组和B组肺泡间隔细胞中的Bax与Bcl-2阳性率、Bax/Bcl-2比值均明显高于C组(均 P ＜0.05),A组肺泡间隔细胞中的Bax/Bcl-2比值明显高于B组(P ＜0.05).肺泡间隔细胞中Bax阳性率、Bax/Bcl-2比值均与气流受限的肺功能指标(FEV1% pred,FEV1/FVC%)呈负相关.A组肺泡腔内巨噬细胞Bax/Bcl-2比值明显低于C组(P ＜0.05).结论 Bax和Bcl-2在肺泡间隔细胞和肺泡腔内巨噬细胞表达的变化可能参与COPD发病机制.     

糖脂清颗粒对 ２型糖尿病大鼠心肌组织 Bax、Bcl ２表达的影响

目的：观察糖脂清颗粒对２型糖尿病大鼠心肌组织 Bax、Bcl ２表达的影响,并探讨其干预心肌细胞凋亡的机制。方法：雄性ＳＤ大鼠,采用高糖高脂饲料喂养８周后,一次性小剂量（３０ｍｇ·ｋｇ^－１）２％ 链脲佐菌素（ＳＴＺ）溶液腹腔注射造模,３ｄ后尾尖采血,测随机血糖≥16.7ｍｍｏｌ·Ｌ^－１者确定为２型糖尿病大鼠模型,８周后,用免疫组织化学法检测各组心肌组织 Bcl-２、Bax的表达。结果：糖脂清颗粒各治疗组大鼠心肌组织 Bcl-２表达明显上升,与模型组比较,差异有统计学意义（Ｐ＜0.05）;各治疗组大鼠心肌组织 Bax／Bal-２明显下降,与模型组比较,差异有统计学意义（Ｐ＜0.05）。结论：糖脂清颗粒具有抗糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的作用,其可能机制为升高 Bcl-２的表达,从而降低 Bax／Bcl-２的比值,抑制心肌细胞凋亡,延缓糖尿病心肌病的进展。     

Fas, FasL和Bcl-2在胃癌发生发展中的表达意义

目的：探讨Fas，FasL和Bcl-2在胃癌发生发展中的表达及临床病理意义．方法：收集93例不同胃粘膜标本，应用免疫组化技术检测不同病变阶段胃粘膜的Fas，FasL和Bcl-2表达．结果：在正常粘膜(n=20)、癌前病变(n=23)、高．中分化胃癌(n=25)、低分化胃癌(n=25)组织中Fas阳性表达率分别为95．0％，91．3％，60．0％和40．0％．FasL阳性表达率分别为25．0％，56．5％，88．2％和84．0％．Bcl-2的阳性表达率分别20．0％，78．3％，80．0％和64．0％．结论：Fas，FasL，Bcl-2表达失衡与胃癌的发生发展有着密切关系．     

Fas/FasL、Bcl-2基因在急性阻塞性黄疸肝细胞中的表达及意义

目的研究Fas/FasL、Bcl-2基因在急性阻塞性黄疸肝细胞凋亡中的表达情况. 方法 SD大鼠30只,随机分为3组.A组为假手术组,B、C组为实验组,结扎胆总管,B组饲养7 d,C组饲养14 d.每组动物处置后观察肝细胞凋亡现象,检测肝细胞凋亡率和Fas、FasL、Bcl-2基因的表达情况.结果 (1)电镜观察到B、C组肝细胞有典型的凋亡现象.(2)各组间的肝细胞凋亡率比较有统计学意义(P<0.05).(3)各组大鼠肝细胞中Fas均有阳性表达,阳性率比较无显著差异(P＞0.05);各组FasL、Bcl-2阳性率有显著差异(P<0.05),C组高于B组.结论 (1)肝细胞凋亡率的升高是导致阻塞性黄疸肝损伤的一个重要机制.(2)Fas/FasL系统是阻塞性黄疸肝细胞凋亡的一个重要途径.(3)Bcl-2基因的表达是肝细胞抵制凋亡的一个重要表现.