黄芩苷对小鼠巨噬细胞环加氧酶-2和前列腺素E2表达的影响

目的:研究黄芩苷时小鼠巨噬细胞环加氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达及其主要产物前列腺素E2(prostaglandins E2,PGE2)生成的影响.方法:培养小鼠巨噬细胞 RAw 264.7,加入不同浓度的黄芩苷(终浓度10、50、100μmol/L)进行预干预,1 h后再加入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,终浓度1μg/mL)刺激,分正常对照组、LPS组、黄芩苷组、黄芩苷加LPS组.取培养24 h细胞上清,用ELISA法检测PGE2生成量;取培养8 h和24 h细胞.分别提取细胞总RNA和总蛋白,用RT-PCR法和Western Blot法检测黄芩苷对COX-2 mRNA水平和蛋白水平表达的影响.结果:LPs可以显著诱导 RAw 264.7细胞COX-2表达和PGE2的生成,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01):黄芩苷预干预可以抑制LPS诱导的COX-2基因转录和蛋白表达,下调PGE2的生成,与LPS组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:黄芩苷可通过降低LPS诱导的巨噬细胞COX-2表达和PGE2生成,发挥抗炎作用,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一.     

白细胞介素1β对气道成纤维细胞PGE2EP2及15-PGDH表达的影响

目的 研究白细胞介素-1β(IL-1β)对小鼠气道成纤维细胞前列腺素E2(PGE2)、前列腺素E2受体(EP2)及15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)表达的影响,以探讨其在吸入性损伤修复中的作用.方法 分离雄性昆明种小鼠的气道成纤维细胞并体外培养,分别收集IL-1β作用后不同时间点和不同浓度的培养上清液及细胞;采用ELISA 法测定PGE2水平,western blot测定EP2及15-PGDH蛋白表达.结果 ①经IL-1β 1 ng/mL处理后气道成纤维细胞培养上清液PGE2水平在8、16、24、48 h均高于对照组(P<0.01),其中16 h水平最高;而EP2及15-PGDH蛋白表达在8、16、24、48 h与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).②不同浓度IL-1β处理气道成纤维细胞后,气道成纤维细胞培养上清液PGE2水平在IL-1β 0.1 ng/mL 组、1 ng/mL组和10 ng/mL组均高于对照组(P<0.01),并且三组比较差异有统计学意义(P<0.01);而EP2及15-PGDH蛋白表达在IL-1β 0.1 ng/mL组、1 ng/mL组和10 ng/mL组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 炎症介质IL-1β可上调气道成纤维细胞PGE2水平,而对EP2、15-PGDH的表达无影响.表明IL-1β并不是通过EP2及15-PGDH蛋白表达来影响PGE2的合成,参与气道吸入性损伤修复过程.     

COX-2/PGE2与肿瘤相关免疫细胞

肿瘤可过表达环氧合酶-2(COX-2)及其代谢产物前列腺素E2(PGE2),后者是一种可引发炎症和癌症的生物活性脂质。PGE2通过4个不同的G蛋白耦联受体(EP1、EP2、EP3和EP4)激活不同的下游信号通路,而EP2、EP4受体是介导PGE2抗炎和抑制免疫活性的主要分子。COX-2/PGE2在肿瘤信号传导中发挥重要作用,其可影响肿瘤微环境中的癌细胞和反应性基质,并以多种机制抑制肿瘤免疫。COX-2/PGE2与肿瘤微环境中的免疫细胞及其他负性免疫信号通路之间存在复杂的相互调节关系,通过联合阻断COX-2/PGE2及其他靶点可起到协同抗肿瘤作用。     

骨性关节炎体外培养滑膜细胞上清液中前列腺素E2的表达及意义

目的:了解前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)在骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者和正常人滑膜细胞中表达的差异.方法:取材OA患者(n=22)与正常人(n=8)关节滑膜组织,分别原代培养滑膜细胞,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量检测两组滑膜细胞培养上清液中PGE2的表达水平.结果:ELISA检测OA患者细胞培养上清液中PGE2的含量为(437.224±325.284)pg/mL,健康人细胞培养上清液中PGE2的含量为(24.020±20.591)pg/mL,具备组间统计学差异(P<0.05).结论:PGE2在OA关节滑膜细胞中表达上调,提示PGE2可能直接参与了OA的发病过程.     

前列腺素E2对白细胞介素13诱导的肺成纤维细胞转分化的影响

目的：观察前列腺素E2（PGE2）对白细胞介素13（IL-13）诱导的肺成纤维细胞的影响。方法：采用体外细胞培养、免疫细胞化学技术、流式细胞术等技术,检测PGE2对IL-13诱导的成纤维细胞表达a-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）的影响。结果：IL-13诱导肺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞（MF）,表达a-SMA增强（P〈0.01）,PGE2抑制了IL-13的诱导作用（P〈0.01）,单独应用PGE2对肺成纤维细胞转分化无影响。结论：PGE2可抑制IL-13对肺成纤维细胞的转分化。     

ERK1/2信号传导通路介导碱性成纤维细胞生长因子诱导人晶状体上皮细胞中环氧合酶2的表达

背景:碱性成纤维细胞生长因子在各种白内障形成中都起着重要的作用,可促进晶状体上皮细胞的增殖并化生为纤维细胞,但其信号通路尚不清楚。目的:探讨ERK1/2信号转导通路在碱性成纤维细胞生长因子诱导的人晶状体上皮细胞环氧合酶2表达中的作用。方法:使用10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子干预培养的人晶状体上皮细胞0,1,3,6,12,24h,RT-PCR检测刺激不同时间人晶状体上皮细胞环氧合酶2mRNA的表达,Western blot检测细胞中环氧合酶2及磷酸化ERK1/2的表达。在阻断实验中应用特异性ERK1/2的阻断剂PD98059阻断ERK信号转导通路1h,再用10μg/L碱性成纤维细胞生长因子刺激细胞6h,Western blot检测细胞中环氧合酶2的表达。结果与结论:碱性成纤维细胞生长因子刺激后的人晶状体上皮细胞中环氧合酶2mRNA及其蛋白的表达显著增加(P<0.01),同时碱性成纤维细胞生长因子诱导人晶状体上皮细胞磷酸化ERK1/2活性增强,表达水平随作用时间而增加,30min时达到最高峰(P<0.01),6h后恢复至基线水平;PD98059可抑制人晶状体上皮细胞环氧合酶2的表达(P<0.01)。说明ERK1/2信号转导通路参与了碱性成纤维细胞生长因子诱导的人晶状体上皮细胞中环氧合酶2的表达,在后发性白内障的形成过程中起着重要作用。     

前列腺素E2(PGE2)在烧伤后大鼠血管内皮细胞分泌的机制研究

目的 明确外周烧伤是否可引起中枢神经系统血管内皮细胞前列腺素E2增加及其发生机制.方法 试验大鼠(SD大鼠)接受约25%的全层(Ⅲ度)烧伤,并进行相关治疗,在36小时后,对大鼠脑脊液进行采样,测量其中的前列腺素E2(PGE2)含量,同时对大鼠脑和脊椎组织进行免疫组化研究,对其中与前列腺素合成有关的2种重要酶,环氧化酶2(COX-2)和微粒体前列腺E2合成酶(mPGES)进行分析.结果 在烧伤后的大鼠脑脊液中,前列腺素E2的含量明显增加,但可以被环氧化酶2的选择性抑制剂NS398所抑制.在烧伤后,对大鼠中枢神经系统血管内皮细胞的免疫组化研究可以发现COX-2和mPGES.双重免疫荧光法发现这2种酶主要集中在内皮细胞的核周.结论 外周的烧伤主要通过诱导中枢神经内皮细胞产生COX-2和mPGES.这些酶可以提高脑脊液中的前列腺素E2浓度,从而激活中枢神经系统前列腺素E2的受体,产生烧伤后的全身症状.适当的应用COX-2抑制剂,使烧伤患者的PGE2水平处在对机体有利的合适范围内,不仅可以减少患者的临床的不适症状,以减轻烧伤早期损害和第二次打击时机体失控的炎症反应,而且可以减少患者感染的发生率.     

脂氧素A4对内毒素性肺损伤小鼠的保护作用

目的探讨脂氧素A4对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的影响。方法36只雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、脂氧素A4组、ZnPP组、内毒素组、脂氧素A4治疗组(LXA4 LPS)和ZnPP 脂氧素A4治疗组(ZnPP LXA4 LPS),每组6只。雾化吸入脂多糖8h后,测定肺泡灌洗液白细胞计数、中性粒细胞计数和TNF-α含量。测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、HO-1的蛋白表达和活性。结果与LPS组比较,脂氧素A4治疗组肺组织中性粒细胞浸润减少,MPO活性、TNF-α浓度均降低(P<0·01),肺组织损伤减轻,而HO-1的蛋白表达和活性明显升高,HO-1抑制剂ZnPP减弱脂氧素A4的保护作用。结论脂氧素A4能减轻内毒素诱导的急性肺损伤。     

ERK1/2信号传导通路介导碱性成纤维细胞生长因子诱导人晶状体上皮细胞中环氧合酶2的表达

背景：碱性成纤维细胞生长因子在各种白内障形成中都起着重要的作用,可促进晶状体上皮细胞的增殖并化生为纤维细胞,但其信号通路尚不清楚。目的：探讨ERK1/2信号转导通路在碱性成纤维细胞生长因子诱导的人晶状体上皮细胞环氧合酶2表达中的作用。方法：使用10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子干预培养的人晶状体上皮细胞0,1,3,6,12,24h,RT-PCR检测刺激不同时间人晶状体上皮细胞环氧合酶2mRNA的表达,Western blot检测细胞中环氧合酶2及磷酸化ERK1/2的表达。在阻断实验中应用特异性ERK1/2的阻断剂PD98059阻断ERK信号转导通路1h,再用10μg/L碱性成纤维细胞生长因子刺激细胞6h,Western blot检测细胞中环氧合酶2的表达。结果与结论：碱性成纤维细胞生长因子刺激后的人晶状体上皮细胞中环氧合酶2mRNA及其蛋白的表达显著增加（P〈0.01）,同时碱性成纤维细胞生长因子诱导人晶状体上皮细胞磷酸化ERK1/2活性增强,表达水平随作用时间而增加,30min时达到最高峰（P〈0.01）,6h后恢复至基线水平;PD98059可抑制人晶状体上皮细胞环氧合酶2的表达（P〈0.01）。说明ERK1/2信号转导通路参与了碱性成纤维细胞生长因子诱导的人晶状体上皮细胞中环氧合酶2的表达,在后发性白内障的形成过程中起着重要作用。     

COX-2与VEGF在急性白血病中的表达及其意义

目的观察急性白血病骨髓血血浆中环氧合酶-2(COX-2)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达水平,探讨其在急性白血病中表达的意义以及二者之间相关性。方法54例急性白血病患者分为3组,其中初治组33例,缓解组15例,复发组6例。用ELISA法检测骨髓血血浆中COX-2和VEGF的表达。结果①急性白血病初治组COX-2和VEGF表达分别为(6.33±2.01)ng/mL和(132.32±16.41)pg/mL;缓解组分别为(4.09±1.47)ng/mL和(114.47±7.06)pg/mL;复发组分别为(6.45±1.07)ng/mL和(125.84±8.68)pg/mL。COX-2和VEGF在初治组及复发组表达均明显高于缓解组(P<0.01)。②COX-2和VEGF在急性白血病中的表达呈正相关(P<0.01),同时都与骨髓原始幼稚细胞比例呈正相关(P<0.01)。结论COX-2和VEGF在初治及复发急性白血病表达水平高于缓解期,二者之间呈协同表达,且COX-2和VEGF表达水平与骨髓原始幼稚细胞比例呈正相关。为以COX-2为靶点的抗血管新生治疗急性白血病,提供了新的思路和实验依据。     

Atomic and electronic structure of solids of Ge2Br2PN,Ge2I2PN,Sn2Cl2PN,Sn2Br2PN and Sn2I2PN inorganic double helices: a first principles study

We report the results of density functional theory calculations on the atomic and electronic structure of solids formed by assembling A₂B₂PN (A = Ge and Sn, B = Cl, Br, and I) inorganic double helices. The calculations have been performed using a generalized gradient approximation for the exchange–correlation functional and including van der Waals interactions. Our results show that the double helices crystallize in a monoclinic lattice with van der Waals type weak interactions between the double helices. In all cases except Ge₂Cl₂PN, the solids are stable with a binding energy between the double helices ranging from 0.06 eV per atom to 0.09 eV per atom and inter-double helices separation of more than 3.33 Å. All the solids are semiconducting. Further calculations have been done by using meta-GGA with a modified Becke–Johnson functional to obtain better band gaps, which are found to lie in the range of 0.91 eV to 1.49 eV. In the case of Ge₂Br₂PN the solid is a direct band gap semiconductor although the isolated double helix has an indirect band gap and it is suggested to be interesting for photovoltaic, and other optoelectronic applications. The charge transfer between the atoms has been studied using Bader charge analysis and the DDEC6 method in the CHARGEMOL program, which suggests charge transfer from the outer helix to the inner helix.

We report the results of density functional theory calculations on the atomic and electronic structure of solids formed by assembling A₂B₂PN (A = Ge and Sn, B = Cl, Br, and I) inorganic double helices.     

有丝分裂原激酶MEKK2调节白细胞介素2生成的研究

目的 探讨有丝分裂原激酶MEKK2对IL-2生成的影响。方法 用MEKK2和JNK激酶活性测定、荧光素酶报告基因检测、逆转录-聚合酶链反应及Western blot等方法，检测在PHA／抗CD28抗体刺激Jurkat细胞后MEKK2对IL-2转录和翻译的影响结果经PHA／抗CD28抗体刺激后，亲本Jurkat细胞AP1和IL-2启动子荧光素酶报告基因活性分别增加4倍和5倍。而MEKK2功能域灭活的Jurkat细胞AP1和IL-2启动子荧光素酶报告基因活性仅各增加1倍。经PHA／抗CD28抗体刺激后，亲本Jurkat细胞IL-2 mRNA的转录和IL-2蛋白的表达明显增加，而MEKK2功能域灭活的Jurkat细胞IL-2 mRNA的转录和IL-2蛋白的表达无明显增加。结论 MEKK2在IL-2的生成过程中起重要的调节作用，MEKK2可以作为药物作用的靶点，从而筛选有效药物抑制免疫反应，提高移植物抗宿主病和自身免疫性疾病治疗的疗效。     

乳腺癌环氧合酶-2和基质金属蛋白酶-2及其抑制因子的表达

目的 研究环氧合酶(COX)-2、基质金属蛋白酶(MMP)-2及其抑制因子(TIMP-2)在乳腺癌组织中的蛋白表达及其相互关系.方法 建立组织芯片平台,应用免疫组织化学S-P法检测127例乳腺癌组织COX-2、MMP-2和TIMP-2蛋白的表达情况.结果 乳腺癌COX-2、MMP-2和TIMP-2阳性率分别为81.1%(103/127)、96.9%(123/127)和60.6%(77/127);COX-2的表达与乳腺癌腋淋巴结转移和TNM分期均呈正相关(P<0.01,P<0.05),与孕激素受体表达呈负相关(P<0.05);MMP-2蛋白表达与COX-2表达呈显著正相关(r=0.290,P<0.01).结论 乳腺癌COX-2表达状况与肿瘤侵袭转移有密切关系,COX-2可能通过调控MMP-2表达来促进肿瘤侵袭转移.     

2-hydroxyestradiol is a prodrug of 2-methoxyestradiol

Previous in vivo studies indicate that 2-hydroxyestradiol (2OHE) attenuates cardiovascular and renal diseases. In vitro studies suggest that the biological effects of 2OHE are mediated by 2-methoxyestradiol (2MEOE) after methylation of 2OHE by catechol-O-methyltransferase (COMT). This study tested the hypothesis that in vivo 2OHE is a prodrug of 2MEOE. We administered to male rats i.v. boluses of either 2OHE or 2MEOE and measured plasma levels of 2OHE and 2MEOE by gas chromatography-mass spectrometry at various time points after drug administration. After administration of 2OHE, plasma levels of 2OHE declined extremely rapidly [t(1/2(1)) = 0.94 min and t(1/2(2)) = 10.2 min] becoming undetectable after 45 min. Concomitant with the disappearance of 2OHE, 2MEOE occurred and then declined [t(1/2(1)) = 7.9 min and t(1/2(2)) = 24.9 min]. The peak concentration and total exposure (area under the curve) for 2OHE were much lower than for 2MEOE. 2OHE had a much higher plasma clearance (CL) and volume of distribution (V(d)) compared with 2MEOE (2OHE: CL = 1215 ml min(-1) kg(-1) and V(d) = 17,875 ml/kg; 2MEOE: CL = 50 ml min(-1) kg(-1) and V(d) = 1760 ml/kg). After administration of 2MEOE, plasma levels of 2MEOE declined [t(1/2(1)) = 2.5 min and t(1/2(2)) = 20.2 min] with a plasma CL of 50 ml min(-1) kg(-1) and a V(d) of 1500 ml/kg. We could not detect 2OHE in plasma from rats receiving 2MEOE. We conclude that the conversion of 2OHE to 2MEOE is so efficient that in terms of 2MEOE exposure, administration of 2OHE is bioequivalent to administration of 2MEOE itself.     

22项生化检测项目测量不确定度的评价

目的：根据临床实验室室内质量控制和室间质量评价的累积数据评价22项生化检测项目的测量不确定度。方法收集检验科2013年1～6月22项生化检测项目的室内质量控制数据和2012～2014年间常规化学室内质控和室间质评的数据,依据 Nordtest准则,分别计算与精密度和偏倚相关的不确定度分量,然后评估合成标准不确定度和扩展不确定度。结果利用室内质控与室间质评数据可以逐步计算出22项生化检测项目的不确定度范围为4.24～24.88,其中 ALP的扩展不确定度最大,达到24.88;Na＋的扩展不确定度最小,仅为4.24。各类指标的扩展不确定度范围如下：电解质（4.27～18.16,Na＋最低,Mg最高）;酶类（8.12～24.88,GGT最低,ALP最高）;小分子物质（4.88～12.44,GLU最低,Cr最高）;蛋白与脂类（4.78～13.1,TC最低,TG最高）。结论使用累积的室内质控与室间质评数据评定生化定量检测项目的不确定度简便可行,可用于定期评估检验结果准确性。     

高血压病人定量运动前后氧及二氧化碳分压的变化

目的 研究高血压病人定时定量运动前后氧及二氧化碳分压的变化,以指导病人正常的运动。方法 选取 30例高血压病人,按 I、Ⅱ、Ⅲ期高血压分类,分别测定其运动前、后氧及二氧化碳分压,另选取 30例无高血压病和心、脑、肾等疾病者为对照组。结果 高血压患者动脉氧分压运动后较运动前均有不同程度的升高, I、Ⅱ期高血压病患者动脉氧分压较Ⅲ期运动后比运动前有明显提高。结论 适当的运动可能有助于 I、Ⅱ期高血压病人降压治疗。     

空气净化前后老年2型糖尿病患者PaO2和PaCO2的变化

目的探讨对老年 2型糖尿病患者行空气净化前后动脉血氧分压 (PaO2 )和二氧化碳分压 (PaCO2 )的变化。方法 5 5例老年 2型糖尿病患者分为观察组 ( 2 9例 )和对照组 ( 2 6例 )。观察组患者所处疗养室每日 2 4h进行空气净化。分别于净化前、净化后第 2、3、4周抽取动脉血检测PaO2 、PaCO2 、pH值和氧饱和度。 结果空气净化 4周后 ,观察组PaO2 、PaCO2 、氧饱和度有明显改善 (P <0 .0 1) ,pH值无显著性变化。结论空气净化能改善老年 2型糖尿病患者的PaO2 、PaCO2 。     

Photoluminescence of PdS2 and PdSe2 quantum dots

Group-10 transition metal dichalcogenide (TMD) materials have recently attracted considerable attention in optoelectronics applications. However, so far their quantum dot (QD) counterparts with photoluminescence (PL) nature still remain to be revealed. In this study, 2 typical types of group-10 TMD material (PdS₂ and PdSe₂) QDs are fabricated via liquid exfoliation using N-methyl-2-pyrrolidone (NMP) solvent. The absorption and PL spectra of these QD solutions are studied, exhibiting excitation wavelength-dependent behaviors and large Stokes shifts. Furthermore, the quantum yield and decay lifetime are also investigated and analyzed. The obtained results suggest promising optoelectronic applications with group-10 TMD QDs in the future.

PdS₂ and PdSe₂ QDs are fabricated via liquid exfoliation using NMP solvent. The PL behaviors of these QD solutions are studied. The obtained results suggest promising optoelectronic applications with group-10 TMD QDs in the future.     

The safety needle switchover,part 2 of 2

South Carolina's Greenville Hospital System (GHS) minimizes caregivers' exposure to blood and body fluid through a risk-reduction program that hinges on feedback from data analysis and frontline staff.     

Efficient and stable transduction of dopaminergic neurons in rat substantia nigra by rAAV 2/1, 2/2, 2/5, 2/6.2, 2/7, 2/8 and 2/9

Dysfunction of the nigrostriatal system is the major cause of Parkinson's disease (PD). This brain region is therefore an important target for gene delivery aiming at disease modeling and gene therapy. Recombinant adeno-associated viral (rAAV) vectors have been developed as efficient vehicles for gene transfer into the central nervous system. Recently, several serotypes have been described, with varying tropism for brain transduction. In light of the further development of a viral vector-mediated rat model for PD, we performed a comprehensive comparison of the transduction and tropism for dopaminergic neurons (DNs) in the adult Wistar rat substantia nigra (SN) of seven rAAV vector serotypes (rAAV 2/1, 2/2, 2/5, 2/6.2, 2/7, 2/8 and 2/9). All vectors were normalized by titer and volume, and stereotactically injected into the SN. Gene expression was assessed non-invasively and quantitatively in vivo by bioluminescence imaging at 2 and 5 weeks after injection, and was found to be stable over time. Immunohistochemistry at 6 weeks following injection revealed the most widespread enhanced green fluorescence protein expression and the highest number of positive nigral cells using rAAV 2/7, 2/9 and 2/1. The area transduced by rAAV 2/8 was smaller, but nevertheless almost equal numbers of nigral cells were targeted. Detailed confocal analysis revealed that serotype 2/7, 2/9, 2/1 and 2/8 transduced at least 70% of the DNs. In conclusion, these results show that various rAAV serotypes efficiently transduce nigral DNs, but significant differences in transgene expression pattern and level were observed.