选择性COX-2抑制剂Celecoxib诱导胶质瘤细胞凋亡作用机制初探

背景与目的：选择性COX-2抑制剂具有诱导多种肿瘤细胞凋亡的作用，但在胶质瘤方面研究还不多见，本研究门的是探讨选择忡COX-2抑制剂塞来昔布（Celecoxib）诱导胶质瘤C6细胞凋亡，及其在诱导胶质瘤细胞凋亡的作用机制方法：应州PGE2检测、吖啶橙染色、流式细胞仪（FCM）检测不同浓度的Celecoxib对胶质瘤C6细胞作用，通过放免法检测不同浓度Celecoxib作用于胶质瘤C6细胞后PGE2的含量，通过吖啶橙染色从形态上观察治疗组细胞的形态学变化，流式细胞仪检测各组细胞发生凋亡的情况。结果：随Celecoxib浓度增加而PGE2合成减少（P〉0．05）．吖啶橙染色荧光染色对照组细胞核DNA为均匀黄色或黄绿色的荧光，治疗组（Celecoxib 50μmol／L）凋亡细胞的细胞核或细胞质内可处致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片．Celecoxib浓度为12．5μmol／L和50μmol／L时．FCM法检测凋亡分别为5．83％和15．32％．Celecoxib对C6胶质瘤细胞增殖抑制作用具有浓度依赖性．细胞凋亡随浓度增加而增多。结论：Celecoxib具有诱导胶质瘤C6细胞凋亡的作用并呈剂量依赖性，随PGE2合成下降细胞凋亡增多，PGE2途径是Celecoxib诱导胶质瘤细胞凋亡机制之一．对胶质瘤的治疗有重要意义。     

X射线诱导C6胶质瘤细胞凋亡的研究

目的：探讨X射线能否诱导胶质瘤细胞凋亡及剂量-效应关系。方法：用不同剂量X射线照射细胞，并分别在不同时间段用倒置显微镜、电镜观察形态变化；DNA凝胶电泳观察阶梯状条带形成；流式细胞仪检测凋亡峰及细胞凋亡百分率。结果：20Gy照射后48h观察组细胞凋亡率最高(38．49％)。结论：放射可诱导胶质瘤细胞凋亡，20Gy的照射剂量对胶质瘤有最强的诱导凋亡作用，但不存在时间效应关系。     

miRNA-184在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨miRNA-184在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响以及胶质瘤发生发展过程中的分子机制。方法:利用荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miRNA-184在患者胶质瘤组织以及癌旁组织中的表达水平；利用体外细胞培养实验向胶质瘤细胞中转染miRNA-184 mimics；利用CCK-8比色法和流式细胞仪分别检测转染miRNA-184 mimics后胶质瘤细胞的增殖能力和凋亡情况；利用Western blot检测转染miRNA-184 mimics后胶质瘤细胞中AKT蛋白的表达水平。结果:荧光定量PCR检测结果表明，miRNA-184在患者胶质瘤组织中的表达水平显著低于癌旁组织（P＜0.05）；细胞体外转染实验结果表明，转染miRNA-184 mimics后，胶质瘤细胞的增殖能力显著下降，凋亡率显著升高（P＜0.01）；Western blot检测结果表明，转染miRNA-184 mimics后胶质瘤细胞中AKT蛋白表达水平显著下降（P＜0.05）。结论:miRNA-184在胶质瘤组织中显著低表达，miRNA-184与胶质瘤的发生发展密切相关；过表达miRNA-184可以抑制胶质瘤细胞的增殖，促进胶质瘤细胞的凋亡；miRNA-184可能通过抑制AKT信号通路从而抑制胶质瘤的发生发展。     

LGI1基因对胶质瘤细胞作用的研究

目的：研究富亮氨酸胶质瘤失活基因1（LGI1）与胶质瘤细胞生长及胶质瘤细胞凋亡的关系。方法：构建pcDNA3.1／LGI1质粒，采用脂质体介导的方法转染LGI1缺失的胶质瘤细胞系。RT—PCR法和免疫组化法检测转染细胞的LGI1基因表达．MTT法检测转染细胞的增殖活性，Annevin V—FITC法检测转染细胞的凋亡。结果：pcDNA3．1／LGI1转染胶质瘤细胞系A172后，A172细胞LGI1mRNA和蛋白表达阳性；细胞增殖活性受到抑制，MTT吸收值在转染后24和48小时下降。与正常对照组相比有统计学意义（P〈0．05）；转染后24小时早期凋亡细胞较多，48小时后早期凋亡减少。结论：LGI1基因可抑制肿瘤细胞的增殖，诱导细胞凋亡。     

γ刀照射对胶质瘤细胞c-myc基因mRNA表达的影响

颅内恶性胶质瘤的γ刀治疗，是胶质瘤综合治疗的一个重要组成部分。关于γ刀照射后胶质瘤细胞凋亡机制的报道越来越多，但在γ刀照射后胶质瘤细胞癌基因mRNA水平表达变化对凋亡过程的调控，国内外报道较少。我们针对体外培养的胶质瘤细胞，在基因水平方面探讨了γ刀的作用机理．为体内研究及临床应用提供了依据。     

IFN-β基因诱导裸鼠胶质瘤Fas 表达上调及细胞凋亡的实验研究

 目的 研究β干扰素基因对人脑胶质瘤的诱导凋亡作用,以及能否诱导胶质瘤细胞Fas表达上调,并探讨了β干扰素基因诱导细胞凋亡及Fas表达上调之间的联系. 方法 建立裸鼠SHG44胶质瘤模型,用脂质体包埋法将IFN-β基因的真核表达载体pSV2IFNβ注入裸鼠皮下SHG44脑胶质瘤,观察肿瘤生长情况并计算肿瘤体积,通过免疫组化、TUNEL染色,了解IFN-β基因诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的作用以及胶质瘤细胞Fas表达情况. 结果 IFN-β在荷瘤裸鼠瘤体内获得表达,裸鼠皮下胶质瘤生长受到抑制,并诱导SHG44胶质瘤细胞凋亡,胶质瘤细胞Fas表达明显高于对照组. 结论 IFN-β基因能够抑制人脑胶质瘤生长,并诱导胶质瘤细胞凋亡;IFN-β基因诱导胶质瘤细胞凋亡可能是Fas表达上调的结果.     

IFN-β基因诱导裸鼠胶质瘤Fas表达上调及细胞调亡的实验研究

目的研究β干扰素基因对人脑胶质瘤的诱导凋亡作用,以及能否诱导胶质瘤细胞Fas表达上调,并探讨了β干扰素基因诱导细胞凋亡及Fas表达上调之间的联系.方法建立裸鼠SHG44胶质瘤模型,用脂质体包埋法将IFN-β基因的真核表达载体pSV2IFNβ注入裸鼠皮下SHG44脑胶质瘤,观察肿瘤生长情况并计算肿瘤体积,通过免疫组化、TUNEL染色,了解IFN-β基因诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的作用以及胶质瘤细胞Fas表达情况.结果 IFN-β在荷瘤裸鼠瘤体内获得表达,裸鼠皮下胶质瘤生长受到抑制,并诱导SHG44胶质瘤细胞凋亡,胶质瘤细胞Fas表达明显高于对照组.结论 IFN-β基因能够抑制人脑胶质瘤生长,并诱导胶质瘤细胞凋亡;IFN-β基因诱导胶质瘤细胞凋亡可能是Fas表达上调的结果.     

G422胶质瘤冷冻后出现凋亡及其意义

目的 观察Ｇ４２２胶质瘤局部冷冻后出现细胞凋亡,并探讨凋亡在冷冻杀伤机制中的可能作用及意义。方法 建立胶质瘤动物模型,用ＴＵＮＥＬ法、ＤＮＡ电泳检测细胞凋亡。结果 Ｇ４２２胶质瘤经冷冻治疗后,冷冻中心区显示坏死改变,冻凋周边区出现许多凋亡细胞,峰值在冷冻后２４～４８小时。结论 冷冻治疗不仅可导致胶质瘤细胞坏死,而且可诱导其凋亡,这可能是冷冻杀伤胶质瘤细胞的机制之一。     

苦参碱诱导胶质瘤C6细胞凋亡及其可能的基因机制

摘 要 目的: 探讨苦参碱诱导C6胶质瘤细胞凋亡的作用特点和可能的基因作用机制。 方法：MTT法测定不同浓度苦参碱对C6细胞增殖的抑制率，求出IC50值；倒置显微镜及透射电镜观察苦参碱诱导C6细胞凋亡的形态学改变；Annexin/FITC染色流式细胞术检测不同浓度苦参碱诱导C6细胞的凋亡率；实时定量PCR芯片（Realtime PCR Array）检测苦参碱作用后C6细胞凋亡相关基因的差异表达；免疫细胞化学及Western blotting方法检测苦参碱对C6细胞caspase3表达的影响。结果：苦参碱对C6细胞增殖的抑制率随着药物剂量的增加（0.1~1.0 mg/ml）而增加（P<005），其IC50为0.715 mg/ml。倒置显微镜观察显示苦参碱可诱导胶质瘤细胞出现凋亡改变，透射电镜观察显示苦参碱诱导胶质瘤细胞出现凋亡的超微形态改变，流式细胞术检测显示胶质瘤细胞的凋亡率随着药物剂量的增加（0.2~1.0 mg/ml）而增大[(3.56±0.73)%~(27.55±1.92)%](P<0.05)。胶质瘤细胞经苦参碱作用后出现显著表达差异基因共68个，其中57个基因表达明显上调、11个基因表达明显下调，其中有22个基因与诱导凋亡的死亡受体相关，15个基因与线粒体途径有关；ICC及Western blotting检测都显示苦参碱可诱导C6胶质瘤细胞caspase3表达的上调(P<0.05)。 结论：苦参碱能诱导C6胶质瘤细胞的凋亡，其机制与死亡受体途径和线粒体途径的众多基因有关。     

黄芩甙诱导C6胶质瘤细胞凋亡的实验研究

[目的]研究黄芩甙对C6胶质瘤细胞致凋亡作用及其方式。[方法]用不同浓度的黄芩甙溶液处理C6胶质瘤细胞，MTT法观察增殖抑制，透射电镜观察用药后细胞形态的变化，用琼脂糖凝胶电泳观察用药后细胞DNA断裂情况，用流式细胞术定量观察C6细胞凋亡和细胞周期情况。[结果]经1．0mg／ml、2．0mg／ml、4．0mg/ml、8．0mg／ml黄芩甙溶液处理12h的C6胶质瘤细胞增殖能力降低；1．0mg／ml、2．0mg／ml、4．0mg/ml、8．0mg／ml黄芩甙溶液均可以使C6细胞显示明显凋亡征象、DNA断裂现象，并有浓度依赖性。[结论]黄芩甙溶液在体外能诱导C6胶质瘤细胞凋亡．抑制细胞增殖，是一种具有抗胶质瘤作用的药物。     

Pharmacogénétique des fluoropyrimidines. La méthylènetétrahydrofolate réductase

Résumé: Lefficacité optimale des fluoropyrimidines nécessite des concentrations élevées en 5-10 méthylènetétrahydrofolate (CH₂FH₄), contrôlées par la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR) qui convertit irréversiblement le CH₂FH₄ en 5-méthyltétrahydrofolate (CH₃FH₄). Les polymorphismes 677CT et 1298AC du gène MTHFR sont associés à une baisse dactivité de lenzyme. Les tumeurs «MTHFR mutées» devraient donc être plus sensibles aux fluoropyrimidines que les tumeurs «MTHFR sauvages». Les études expérimentales et cliniques publiées à ce jour tendent à montrer une plus grande sensibilité au 5-FU (associé ou non à lacide folinique) dans les tumeurs MTHFR mutées par rapport aux tumeurs sauvages. Ces résultats montrent la nécessité de poursuivre ces recherches afin de confirmer limpact de ces polymorphismes sur lefficacité des fluoropyrimidines.     

Oncogénétique et psycho-oncologie, une collaboration recommandée...

Résumé: La possibilité depuis 1994, de connaître la probabilité individuelle de développer certains cancers a permis de proposer de nouvelles modalités de prévention, de traitements et contribué au développement actuel de loncogénétique. Une meilleure connaissance des répercussions psychologiques tant pour les patients que pour les apparentés est désormais possible et limplication des psycho-oncologues dans ce cadre de la réalisation des tests prédictifs, recommandée. La mission de «messager» qui incombe au «cas-index» doit faire lobjet dune attention particulière. La complexité de linformation et la dimension paradoxale que peut avoir parfois la communication à propos des choix, rend difficile lévaluation de la qualité du consentement. La situation particulièrement délicate dune aide à la décision à légard de la chirurgie prophylactique, exige une collaboration étroite des généticiens et des psycho-oncologues.Les soins de support en oncologie     

The role of papillomaviruses in human cancers

This review comprehensively evaluates the influence of gene-gene, gene-environment and multiple interactions on the risk of colorectal cancer (CRC). Methods of studying these interactions and their limitations have been discussed herein. There is a need to develop biomarkers of exposure and of risk that are sensitive, specific, present in the pathway of the disease, and that have been clinically tested for routine use. The influence of inherited variation (polymorphism) in several genes has been discussed in this review; however, due to study limitations and confounders, it is difficult to conclude which ones are associated with the highest risk (either individually or in combination with environmental factors) to CRC. The majority of the sporadic cancer is believed to be due to modification of mutation risk by other genetic and/or environmental factors. Micronutrient deficiency may explain the association between low consumption of fruit/vegetables and CRC in human studies. Mitochondrial modulation by dietary factors influences the balance between cell renewal and death critical in colon mucosal homeostasis. Both genetic and epigenetic interactions are intricately dependent on each other, and collectively influence the process of colorectal tumorigenesis. The genetic and environmental interactions present a good prospect and a challenge for prevention strategies for CRC because they support the view that this highly prevalent cancer is preventable.     

Antifungal combination therapy in localized candidosis

A mouse model of localized candidosis in air-filled subcutaneous cysts imitating thrush has been developed. We have now tested various antifungal combinations in this animal model. Flucytosine (5-FC) + amphotericin B (Amph B) showed the highest efficacy, a clear additive or even synergistic effect was seen. The combination of 5-FC + imidazole or triazole derivative was less efficacious, an additive effect was rare. The combination of 5-FC + Amph B was also tested against Candida albicans strains showing various degrees of 5-FC-resistance. A significant reduction in 5-FC-resistant mutants was seen after the treatment with the combination.     

Les génériques en cancérologie: à molécule identique, médicaments identiques? Les biosimilaires, des super-génériques?

Résumé: Les biosimilaires vont bientôt voir leur apparition en Europe. Comment un laboratoire peut-il aborder le développement de son dossier dAMM? Quelles sont les bases légales et les recommandations officielles? Comment la similarité et/ou le caractère générique peuvent-ils être démontrés? Les règles sont-elles identiques à celles des produits chimiques conventionnels pour lesquels, notamment en cancérologie, il existe des médicaments génériques? Comment faire pour que la sécurité et lefficacité des médicaments biosimilaires soient assurées pour les patients?     

PSA-Test zur Früherkennung des Prostatakarzinoms

Zusammenfassung Prostatakrebs ist hierzulande seit einigen Jahren die häufigste Krebserkrankung bei Männern. Da über die Ätiologie wenig gesichertes Wissen vorliegt und daher kaum Möglichkeiten zur primären Prävention bestehen, konzentrieren sich die Anstrengungen auf die Suche nach wirksamen Verfahren zur sekundären Prävention. Hierbei gilt die Verwendung des PSA-Tests zur Früherkennung des Prostatakarzinoms als derzeit aussichtsreichstes Verfahren. Bevor ein neues Früherkennungsverfahren zur breiten Anwendung empfohlen oder in das gesetzliche Früherkennungsprogramm aufgenommen wird, muss jedoch seine Wirksamkeit in hierfür geeigneten wissenschaftlichen Untersuchungen nachgewiesen werden. Bis jetzt gibt es bereits eine ganze Reihe epidemiologischer Studien zur Effektivität des PSA-Screenings, doch konnte ein Wirksamkeitsnachweis bisher nicht erbracht werden. Zwei große randomisierte Studien in Europa und den USA lassen für die Jahre 2005–08 erste Ergebnisse erwarten. Da epidemiologische Arbeiten belegen, dass durch PSA-Screening eine nicht unerhebliche Überdiagnostik und Übertherapie eintritt, d. h. Schaden angerichtet werden kann, ist das Ergebnis der genannten randomisierten Studien vor weitergehenden Entscheidungen unbedingt abzuwarten. Bis dahin sollte von der Anwendung des PSA-Tests zur Prostatakrebsfrüherkennung unmissverständlich abgeraten werden. Da für den Test bereits ausgiebig Werbung betrieben wurde, kommt einer gründlichen ärztlichen Aufklärung von an dem Test interessierten Personen eine Schlüsselrolle zu.     

Cancer immunotherapy

Unprecedented progress has seen made in the last decade in the field of cancer immunotherapy. The recent approval of nivolumab （Opdivo）, the first anti-programmed cell death-1 （PD-1） antibody, for metastatic melanoma in Japan, marked a milestone in the rapidly advancing field of cancer immunotherapy. Nivolumab together with ipilimumab （Yervoy）, the anti-cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 （CTLA-4） antibody, are the first 2 drugs in the class of ＂immune checkpoint inhibitors＂ that have delivered impressive responses in patients with metastatic melanoma and renal cell cancer （RCC） as well as a variety of solid tumors.     

异基因造血干细胞移植后患者肝损害病因与临床特征分析

 【摘要】　目的　总结异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后患者肝损害的发生率、发生原因、诊断方法与治疗选择。方法　回顾性分析郑州大学附属肿瘤医院2006～2010年接受allo-HSCT的83例良、恶性血液病患者中Ⅱ～Ⅳ级肝损害的发生率、各种病因的构成比、临床表现以及诊断方法,分析移植后不同时期肝损害病因的差异、治疗方法、疗效。结果　83例allo-HSCT患者中,发生Ⅱ～Ⅳ级肝损害45例（54.2 %）。按肝损害致病病因分类,预处理化疗所致7例,环孢素所致9例,肝静脉闭塞病（HVOD）所致2例,肝脏移植物抗宿主病（GVHD）所致24例,乙型肝炎病毒再激活所致2例,多器官衰竭所致1例。发生于移植后1个月内者20例（44.4 %）,以药物性肝损害为主,1个月～100 d者13例（28.9 %）,101 d～1年者12例（26.7 %）,均以肝脏GVHD为主。经减停肝损害药物、抗排异、保肝等治疗后,27例治愈,10例好转,2例未愈,6例死于原发病复发或移植相关并发症。结论　肝损害是allo-HSCT后常见的并发症,药物及肝脏GVHD是其最主要的致病原因,肝损害与其发生时间的相关性可作为肝损害病因学诊断的参考依据。根据肝损害的病因选择针对性的治疗方法,可取得较好的疗效。     

Pharmacokinetics and dosage of fluconazole in continuous hemofiltration (CAVH, CVVH) and hemodialysis (CAVHD, CVVHD)

Continuous haemofiltration (CAVH, CVVH) and haemodialysis (CAVHD, CVVHD) are increasingly used in patients with acute renal failure (ARF). The elimination rates of fluconazole vary considerably among the different procedures. In CVVHD, the elimination rate is, depending on the combined dialysate/ultrafiltrate flow rate, the most marked compared to CVVH and intermittent dialysis with a fluconazole clearance exceeding the values of healthy persons in CVVHD 2 L/h. To achieve therapeutic plasma levels during continuous renal replacement therapy, the same loading dose as in patients without renal failure should be applied, followed by the adjusted maintenance dose for anuric patients multiplied by a factor taking the extracorporeal elimination of the absorbed dose into account (CAVH, CVVH: x 2.2, ultrafiltrate flow 0.5 L/h; CAVHD, CVVHD: x 3.8, combined dialysate/ultrafiltrate flow 1.5 L/h). Despite the broad therapeutic margin of fluconazole, drug monitoring is recommended with respect to the very limited number of investigations with relatively low dosages up to 200 mg/day and--which is of paramount importance--to achieve therapeutic drug levels in vital indications.