保留穿支蒂皮瓣筋膜组织对大鼠背部皮瓣成活影响的实验研究

目的 探讨保留皮瓣穿支蒂部的筋膜对大鼠背部皮瓣成活的影响,探讨血流动力学改变方式及机制。方法 自2016年1—4月,安徽医科大学第一附属医院整形外科选取30只健康SD大鼠,雌雄不限,在大鼠右侧背部建立大小为8.0 cm×2.0 cm的局部原位皮瓣模型,随机分为A、B、C 3组,10只/组。A组为穿支皮瓣组,B组为穿支筋膜蒂皮瓣组,C组为随意皮瓣组。A、B组大鼠以右侧肋间后血管为皮瓣的穿支血管。术后观察皮瓣颜色、肿胀及坏死情况,计算术后7、14 d 3组皮瓣的成活率;术后7 d内对3组皮瓣血流灌注值进行比较;术后7、14 d用明胶-氧化铅灌注进行背部皮瓣造影,观察皮瓣血管结构变化情况。结果 术后7、14 d,A、B组成活率显著高于C组,其中B组成活率高于A组,3组皮瓣成活面积比较,差异具有统计学意义（P<0.05）,术后7 d与14 d比较,差异无统计学意义（P>0.05）;明胶-氧化铅灌注造影显示,B组皮瓣血管真性吻合数较其他组明显增多。结论 保留皮瓣穿支蒂和周围部分筋膜比单纯保留穿支或筋膜更加有利于皮瓣成活。     

荧光显微成像对于肝脏微循环的观察及相应肝固有动脉超选灌注动物模型的制作

目的探讨荧光显微成像对于研究肝内微循环的应用价值,总结适用于荧光显微技术的经肝固有动脉超选灌注动物模型的制作方法。方法应用10只Sprague-Dawley大鼠,开腹后,将微导管逆行置于胃十二指肠上动脉(GDA),导管开口朝向肝固有动脉的方向制成肝固有动脉超选灌注动物模型。经微导管分别注入0.02%、0.1%、0.5%、1%荧光素钠0.1ml后,应用荧光显微镜观察肝内微循环的显影情况,评价显影清晰度。经微导管分别注入栓塞剂后(碘油、直径40mm的可降解淀粉微球),观察其引发的微循环变化能否为荧光显微成像显示。结果10只Sprague-Dawley大鼠中,8只成功制成肝固有动脉超选灌注动物模型。荧光显微成像技术可以清晰的显示该动物模型肝内微循环的情况,0.1%的荧光素钠为最佳显影浓度。由栓塞剂引发的直接、间接现象均可为荧光显微成像技术所发现。结论荧光显微成像可以清晰显示肝内微循环结构,对于活体状态下肝脏微循环的形态学研究及栓塞剂的研发有高度的应用价值。适用于该技术的经肝固有动脉超选灌注动物模型的制作方法简单、成功率高,值得推广。     

大剂量激素对兔股骨头内血管影响的研究

目的通过动物实验观察单纯大剂量糖皮质激素对股骨头关节软骨下微血管变化的影响,探讨早期激素性股骨头缺血性坏死的发病机制。方法将24只12～18月龄健康日本白兔随机分成3组,实验组A组（n=9）：耳缘静脉单纯注射甲强龙．初始剂量30mg／kg,追加剂量5．4mg／kg·h,连续23h;实验组B组（n=9）：耳缘静脉单纯注射甲强龙8mg／kg·d,连续10d;对照组C组（n=6）不作任何处理。在应用激素后2、4、6周分别对实验组和对照组动物股骨头行明胶墨汁灌注、HE染色、免疫组织化学染色及图像分析等方法观察关节软骨下微血管形态、数目,直径与密度的变化。结果明胶墨汁灌注显示：A、B组股骨头关节软骨下区微血管数量明显减少,灌注不全;HE及免疫组织化学染色显示：A、B组关节软骨下微血管数量减少。部分管壁结构不完整,血管内有少量红细胞．可见红色血栓,无明显管腔狭窄;图像分析示关节软骨下微血管密度明显降低。结论大剂量激素可以引起股骨头内微血管数量减少．密度降低,管壁损伤,血管内血栓形成,这可能是早期激素性股骨头缺血性坏死的原因之一。     

大鼠化学去细胞异体神经再血管化的实验研究

目的 观察化学去细胞异体神经移植修复大鼠坐骨神经缺损后再血管化的过程. 方法 成年雄性SD大鼠80只.取16只SD大鼠坐骨结节至胫、腓神经分叉处的坐骨神经干,制备去细胞神经移植物.取64只SD大鼠随机分为实验组及对照组,每组32只.制备大鼠有侧1.0cm坐骨神经缺损模型后,实验组采用去细胞神经移植物进行桥接修复;对照组采用自体神经原位桥接修复.观察大鼠术后一般情况,并于术后5、7、10、14、21、28d及2、3个月,取材行大体观察及ALP染色观察. 结果 两组大鼠切口均Ⅰ期愈合,术后两组大鼠出现右足拖行,足趾不能伸展,术后6周改善.大体观察见两组移植物均与两端神经连接良好,移植物外观与正常神经相似.术后5 d ALP染色观察,实验组移植物内无微血管长入,对照组移植物内可见微血管长入;7 d实验组移植物内可见微血管长入,但两组移植物中部均未见微血管;10 d、14 d及21d分别见少量纵行微血管贯穿两组移植物;28 d,两组移植物内微血管网未见明显差别;2个月和3个月两组移植物内微血管构筑与正常神经相似. 结论 化学去细胞同种异体神经移植修复周围神经缺损后,新生微血管能及时长入移植物内.     

大鼠肝移植术后肝脏T淋巴细胞凋亡与免疫耐受的关系

目的探讨肝移植术后肝组织T淋巴细胞凋亡和肝移植免疫耐受之间的关系。方法采用Kamada二袖套法建立Wistar→Sprague-Dawley(SD)原位肝移植(OLT)大鼠模型。实验动物随机分为3组,每组各6只。A组:空白对照组,不作任何处理,采用SD大鼠;B组:免疫排斥组,Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,行OLT;C组:免疫耐受组,Wistar大鼠为供体、SD大鼠为受体,行OLT,术前1周胸腺内注射F蛋白0.4mg,建立稳定的移植耐受大鼠模型。A组立即处死大鼠,B组和C组分别于术后7d、100d处死大鼠取肝组织,分别取各组大鼠肝组织标本进行冰冻切片,应用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)在荧光显微镜下检测肝移植术后肝脏T淋巴细胞的凋亡情况。各组样本另取一张切片行常规苏木素-伊红(HE)染色在光学显微镜下观察,与TUNEL荧光染色法作对比观察。结果光学显微镜下,B组可见中、重度免疫排斥反应表现,C组肝组织细胞间的淋巴细胞浸润较B组大大减少,稍多于A组。荧光显微镜下,A组TUNEL切片可见零星散在的凋亡细胞,C组可见大量散在或密集分布的凋亡细胞,B组的凋亡细胞数远较C组减少,但仍多于A组。A组、B组、C组大鼠肝组织内浸润T淋巴细胞的凋亡指数(apoptosisindex,AI)分别为(8.83±0.43)%、(11.32±1.29)%和(19.00±1.96)%,两两比较差异有统计学意义(P<0.05～0.01)。结论免疫耐受移植物内浸润的T淋巴细胞凋亡明显增高,浸润的T淋巴细胞凋亡受阻可能会阻碍免疫耐受的发生,引起排斥反应。     

嗅鞘细胞与雪旺细胞修复神经缺损的效果比较

目的 比较雪旺细胞和嗅鞘细胞修复周围神经损伤的能力. 方法体外培养异体雪旺细胞及嗅鞘细胞2周后纯化浓缩待用.60只成年雌性Wistar鼠随机分成三组,坐骨神经切除25 mm长轴突,保留神经外膜吻合于近端,分别将细胞培养液、雪旺细胞、嗅鞘细胞分别植入A、B、C组神经外膜腔内,术后3个月,通过大体形态观察、显微镜及透射电镜观察、逆行标记荧光红的运输距离、免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白及神经生长因子、踝关节功能评分、酶联免疫方法检测髓鞘碱性蛋白及神经丝蛋白来评估神经缺损的修复效果. 结果神经缺损再生情况,肉眼观C组最完全,B组次之,而A组最差,光学显微镜及透射电镜观察神经纤维生长情况、荧光显微镜下观察逆行标记荧光红在神经中的运行距离,C组最长,B组次之,而A组最短;免疫荧光检测神经生长因子及胶质纤维酸性蛋白浓度、酶联免疫吸附实验检测髓鞘碱性蛋白及神经丝蛋白浓度均数、踝关节运动功能评分均数的结果都是C组最高,B组次之,而A组最低,三组间差异有统计学意义(P<0.05). 结论嗅鞘细胞能促进神经缺损再生,且效果优于雪旺细胞.     

人参皂甙Rb1冷保存大鼠坐骨神经修复周围神经缺损的实验研究

[目的]探讨人参皂甙Rb1(Ginsenoside Rb1,G-Rb1)冷保存大鼠坐骨神经对同种异体移植后受体神经再生的影响。[方法]3个月龄SPF级雄性Wistar大鼠和SD大鼠分别作为供体和受体。切取供体大鼠双侧坐骨神经15 mm长,随机在G-Rb1溶液(0、50、200 mg·L-1)中4℃保存4周(A4、B4、C4组)和6周(A6、B6、C6组),Western-blot检测供体神经Bcl-2表达,Calcein-AM染色LSCM观察冷保存6周供体神经生物活性。用冷保存6周的供体神经(A6、B6、C6组)修复对应的受体(A、B、C组)坐骨神经10 mm缺损,术后分期行大体观察、坐骨神经功能指数检测,第20周行电生理检测、再生神经组织学观察。[结果]Western-blot检测Bcl-2表达,冷保存4周时,B4组高于A4、C4组(P0.05),冷保存6周时,B6、C6组高于A6组,且B6组高于C6组,差异均有统计学意义(P0.05)。Calcein-AM染色LSCM观察,B6、C6组荧光强度与A6组比较,B6组与C6组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。移植术后各期坐骨神经功能指数,20周电生理检测、再生有髓神经纤维数目、髓鞘厚度,B、C组与A组比较,B组与C组比较,差异有统计学意义(P0.05);术后20周透射电镜显示,A组再生有髓纤维少、髓鞘薄,结缔组织增生明显,B、C组有髓纤维较多、髓鞘厚,无明显结缔组织增生。[结论]G-Rb1对冷保存大鼠坐骨神经具有保护作用,G-Rb1冷保存的坐骨神经能改善同种异体移植后神经再生效果。     

明胶、京尼平粘合颗粒骨修复大鼠胫骨骨缺损的实验研究

目的 探讨以明胶凉尼平粘合自体颗粒骨修复SD大鼠胫骨骨缺损的效果.方法 取60只SD大鼠制备右侧胫骨上端骨缺损模型,并将切除的骨质磨成颗粒骨,随机分为四组(n=15),A组为空白组不填充任何材料,B组单纯填充明胶、京尼平,C组单纯植入自体颗粒骨,D组填充明胶、京尼平和自体颗粒骨.各组术后10 d、4周和8周时各处死大鼠5只,取材检测,通过观察大体标本、X线片及组织学检查评估骨缺损修复能力. 结果 在术后各时期,从大体观察、X线检测及组织学观察结果 表明C、D组均有良好的骨修复效果,A、B组的骨修复效果相似但明显差于C、D组.材料植入10 d时,D组复合物表面均形成明显的纤维包裹,植入物不会再移动,打开包膜后,材料均可被夹起而不散开,C组颗粒骨有部分移位于周围软组织间隙. 结论 明胶、京尼平具有粘合自体颗粒骨修复骨缺损的能力.     

应用micro-CT实现兔坐骨神经显微三维结构可视化研究

目的探讨通过micro-CT扫描新西兰大白兔坐骨神经标本,利用三维可视化软件Mimics17.0重建兔坐骨神经内部显微三维结构。方法取6只成年新西兰大白兔坐骨神经组织标本分成A、B组(n=3),分别用1%、5%Lugol液对两组标本染色,于染色0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 h时,行光镜及micro-CT观察两组标本的显像变化,将显像良好的micro-CT图像序列导入Mimics软件,采用三维重建工具重建兔坐骨神经神经显微三维结构。结果 A组标本在染色2.5 h、B组标本在染色1.5 h时,经光镜及micro-CT观察可获得较为清晰的显微三维结构图像。图像显示新西兰大白兔的坐骨神经主要分3组神经束,且各神经束立体行径相对固定,Mimics软件测量各神经束横截面积分别为(0.425±0.013)、(0.038±0.007)、(0.242±0.026)mm~2,生成的数字化三维模型可在任意横断面观察坐骨神经内部显微结构。结论应用micro-CT可清晰真实显示兔坐骨神经显微三维结构,为建立大样本量周围神经显微解剖学数据库提供了可靠方法。     

腺病毒介导外源基因经动脉转染大鼠腹壁浅动脉岛状皮瓣的研究

目的：探讨腺病毒载体介导外源基因经动脉灌注转移修饰大鼠腹壁浅动脉岛状皮瓣（Superfigial inferior epigastric artery flap,SIEA）的可行性、安全性并对其转染条件作出评价。方法：本研究通过血管夹暂时夹闭形成局部封闭环境,应用腺病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因（Ad5-CMV-EGFP）经动脉灌注带蒂SIEA 60min。60只SD大鼠随机分为6组：A、B、C、D组分别为：3．0×10^6、3．0×10^7、3．0×10^8、3．0×10^9pfu／ml,E组：PBS、F组：腺病毒空载体。术后7天应用活体荧光成像系统观察皮瓣的荧光强度,应用共聚焦显微镜、RT—PCR检测皮瓣组织中EGFP的表达和分布情况,通过组织学分析对皮瓣的安全性影响。结果：术后7天B组、C组、D组活体观察皮瓣可见体表绿色荧光信号。共聚焦显微镜观察结果与活体观察结果一致,EGFP在皮瓣内血管内、外膜均可见表达,血管周围组织包括脂肪、毛囊可见EGFP表达,皮瓣外组织未见EGFP表达。对照组E组、F组未见EGFP表达。RT—PCR结果显示,EGFP仅在皮瓣内表达,其他重要脏器（心脏、肝脏、肾脏）无表达。对皮瓣组织学观察未见明显炎症反应。结论：复合组织瓣转移修复创面是一种成熟的手术方式。本研究从大体观察、组织形态学和分子生物学三方面评价外源基因经动脉内灌注转染大鼠带蒂皮瓣的可行性,为进一步深入研究基因修饰复合组织瓣,使其发挥治疗性修复创面作用提供理论依据     

四肢火器伤骨缺损修复方法的选择

分析了５６例四肢火器伤骨缺损的发生原因，总结了２８例吻合旋髂深血管的髂骨移植的优点及１５例吻合腓血管的长段腓骨移植的适应证和９例肩胛骨皮瓣移植方法的经验。强调指出半环槽式外固定架在四肢长骨火器伤骨缺损治疗中具有独特的优越性，它将成为四肢火器伤骨折、骨不连及骨缺损治疗的首选方法。     

前臂背侧血管分布特点与皮瓣设计

目的：通过成人前臂背侧血管的解剖学观测，为临床选用皮瓣提供依据。方法：用５０例上肢标本，对前臂背侧血管的分支分布和吻合进行详细的解剖学观察和分析。结果：骨间后动脉和骨间前动脉腕背支是前臂背侧的营养血管，动脉间以及与尺、桡动脉腕背支相吻合。结论：本研究为下述血管为蒂的三种逆行皮瓣，提供了可靠的解剖学依据：（１）以桡动脉腕背支为蒂前臂背侧中下段皮瓣；（２）以骨间前动脉腕背支的尺侧骨皮支为蒂前臂背侧中下段尺侧皮瓣；（３）以骨间前动脉腕背支的桡侧骨皮支为蒂前臂背侧中下段桡侧皮瓣。上述皮瓣可携带骨膜、骨质，用于手部创伤的修复。     

手术治疗胰体尾癌26例临床分析

目的探讨胰体尾癌外科治疗方法和根治性切除的影响因素。方法回顾性分析手术治疗26例胰体尾癌病例的临床病理资料。结果肿瘤侵犯横结肠者2例,脾脏者2例;侵犯脾动静脉14例,门静脉、肠系膜上静脉2例,肠系膜上动脉、腹腔干8例。肿瘤直径小于4cm11例,4—8cm13例,大于10cm2例,根治性切除组肿瘤直径平均为3．8cm（2例胰腺囊腺癌除外）,姑息性切除组肿瘤直径平均为5．4cm。根治性切除18例,姑息性切除8例,胰体尾切除加脾切除24例,门静脉、肠系膜上静脉局部楔行切除修补2例,胰体尾切除加脾切除加横结肠切除2例。根治性切除组与姑息性切除组中位生存时间分别为18．6个月和10．3个月。结论积极行手术切除肿瘤是胰体尾癌患者获得长期生存的唯一途径,而肿瘤的大小、对重要血管和邻近脏器的侵犯程度是影响肿瘤能否根治性切除的重要因素。     

胰头癌的外科治疗

胰腺癌的发病率近年来有上升趋势 ,据国外资料 ,胰腺癌的发病率近 30年来已增加 3～ 7倍 ,如美国的发病率达 10 /10万人 ,已超过胃癌的发病率 ,其病死率占恶性肿瘤的第 4位。国内统计 ,胰腺癌发病率较低 ,但近年来也呈上升趋势 ,如上海市区 196 3年统计的发病率为 1.16 /10万人 ,1977年增至3 .8/10万人 ,1990年上升至 5 .1/10万人 ,1974年占恶性肿瘤的第 14位 ,至 1984年跃居于第 5位。中国医科大学一院 196 0年 1月至 1984年 12月 ,2 5年间共收治胰腺癌 36 0例 ,196 0年1月至 1972年 12月 13年间收治 86例 ,1973年 1月至 1984年12月 12年间…     

COMPARISON OF SPEED OF ONSET OF ANALGESIC EFFECT OF DIAMORPHINE AND MORPHINE

In a random, double-blind crossover trial using an ischaemiclimb pain model we have assessed the speed of onset of analgesiaafter an i.v. bolus of equipotent doses of diamorphine and morphinein 12 healthy male volunteers. Pain and its subsequent reliefwere assessed by means of a visual analogue scale. Two of thesubjects found diamorphine acted quicker than morphine, onefound no difference and nine found that morphine was quickerthan diamorphine. The mean time to diamorphine effect was 53%greater than for morphine (P < 0.005, Wilcoxon rank sum test).These findings suggest that, for rapid relief of pain, morphineis more suitable than diamorphine.     

Cajal间质细胞在大鼠"泻剂结肠"结肠肌电变化中的作用

目的　研究长期服用接触性泻剂对大鼠结肠肌电的影响 ,探讨Cajal间质细胞 (ICC)在“泻剂结肠”肌电变化中的作用。方法　 32只大鼠随机分为 2组 ,实验组饲以含酚酞饲料 ,3个月后测定结肠慢波频率及振幅 ;用碘化锌 锇酸法 (ZIO)观察肌间丛ICC变化 ,透射电镜观察肌间丛神经和ICC的超微结构变化。结果　“泻剂结肠”结肠慢波频率明显减慢 (P <0 .0 5 ) ,肌间丛ICC分布不均匀 ,突起连接杂乱 ;电镜下见肌间丛神经轴突空化 ,ICC样细胞变性。结论　长期服用酚酞可导致结肠慢波频率减慢 ,其可能机理为肌间丛神经及ICC变性所引起