活力苏口服液对自然衰老小鼠肝、脑、肾组织p16基因表达的影响

目的观察活力苏口服液对自然衰老小鼠肝、脑、肾组织p16基因的影响,探讨活力苏口服液抗衰老的机制。方法取自然衰老小鼠,给予活力苏口服液治疗,采用实时荧光定量PCR法观察小鼠肝、脑、肾组织p16基因的mRNA表达。结果在肝、脑、肾组织中,活力苏口服液各剂量组均能降低p16基因mRNA表达,与衰老模型对照组比较均有显著性差异(P均<0.01)。结论活力苏能降低自然衰老小鼠肝、脑、肾组织p16基因的表达,发挥抗衰老作用。     

左归丸对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠抗氧化酶及P16蛋白表达的影响

本研究旨在通过观察左归丸对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠抗氧化酶的影响,从实验的角度探讨抗衰老古方左归丸的延缓衰老作用机制。结果显示D-gal可以造成大鼠抗氧化酶活力降低、肝和脑海马区的P16蛋白表达升高,给予左归丸后大鼠血T-AOC、肝组织CAT和GSH-PX以及肝、脑组织SOD活力表现出不同程度的升高而P16蛋白表达降低,提示左归丸的抗衰老作用可能与其提高抗氧化酶活力和下调P16蛋白表达作用有关。     

D-半乳糖致小鼠亚急性衰老模型方法优化

目的:优化D-半乳糖致小鼠亚急性衰老实验中,腹腔注射法和皮下注射法的最佳造模剂量。方法:8周龄雄性ICR小鼠随机分为8组,分别为正常对照组、腹腔注射D-半乳糖组(1.25g/kg、2.5g/kg和5.0g/k)和腹腔注射D-半乳糖联合亚硝酸钠组(1.25g/kg+0.08g/kg-Na NO2),皮下注射组D-半乳糖组(0.125g/kg和0.5g/kg)和皮下注射组D-半乳糖联合亚硝酸钠组(0.125g/kg+0.08g/kg)。连续给药第7周测定各组小鼠空腹血糖情况,8周后解剖,计算脏器指数,检测血清、脑组织和肝脏组织中生化指标变化,同时对肝脏进行石蜡切片。结果:腹腔注射D-半乳糖2.5g/kg可显著提高血清中TC和TG含量,降低脑组织中GSH水平;皮下注射D-半乳糖0.5g/kg显著提高血清中TC、TG和脑组织中MDA含量,并降低脑中GSH水平;肝脏石蜡切片显示以上两组的小鼠肝组织排列疏松,体现衰老状态。结论:腹腔注射D-半乳糖2.5g/kg和皮下注射D-半乳糖0.5g/kg使小鼠整体表现出衰老症状,可分别作为D-半乳糖致小鼠亚急性衰老腹腔注射和皮下注射的最佳造模剂量。     

黄龙丸对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的影响

目的：观察黄龙丸对D-半乳糖所致小鼠亚急性衰老模型的自主活动、记忆力及抗疲劳和对SOD活性的影响。方法：ICR小鼠40只,雌雄各半,按体重随机分为4组,即空白对照组、模型组、黄龙丸、抗衰复春片组。黄龙丸组以2.5g/kg,抗衰复春片组0.7g/kg、均0.2mL/10g灌胃给药,模型组与对照组灌胃同体积的蒸馏水,每日1次,连续灌胃49天。给药的同时模型组和给药组小鼠每天颈背部皮下注射5%D-半乳糖,空白对照组皮下注射生理盐水,0.5mL只/,连续注射49天。黄龙丸对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠自主活动、跳台学习记忆能力及学习记忆遗忘、游泳时间和血清SOD活力的影响。结果：黄龙丸可使D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的站立次数明显增多,与模型组比较有显著性差异P〈0.05;明显增强学习记忆和延长学习记忆遗忘时间,可使跳台实验潜伏期延长,错误次数减少,与模型组比较P〈0.05;明显延长衰老小鼠游泳时间,与模型组比较P〈0.05;升高血清SOD活力,与模型组比较P〈0.05。结论：黄龙丸能够改善D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的多项体征,具有一定的抗衰老作用。     

化痰开窍方对D-半乳糖大鼠衰老模型自由基的影响

随着年龄的增加,机体各脏腑功能衰退,导致痰饮瘀血等病理产物在体内积聚,可加速衰老进程并导致一系列老年病的发生。因此,采用化痰、活血等治法可通过清除体内的代谢产物而延缓衰老［１］。自由基是导致机体衰老的重要物质［２］,Ｄ－半乳糖可以促进自由基的产生,增...     

艾灸督脉穴对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠免疫功能的影响

目的:探讨艾灸督脉穴抗亚急性衰老机理.方法:选用D-半乳糖造成的亚急性衰老小鼠为实验模型,艾灸督脉"大椎"命门""百会"穴,与非经非穴部位作对照,观察衰老小鼠的胸腺和脾脏指数、T细胞亚群中CD3 、CD4 、CD8 百分率及CD4 /CD8 比率、红细胞Csb受体花环率、可溶性白介素-2受体含量.结果:各造模组小鼠免疫功能较正常小鼠降低(P＜0.01).督脉穴组小鼠的胸腺、脾脏指数和免疫功能增强,与模型组相比差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论:艾灸督脉穴可延缓免疫器官的萎缩,增强机体的免疫机能.     

D-半乳糖致亚急性衰老大鼠的海马衰老信号的改变

目的:研究D-半乳糖(D-Galactose,D-gal)对大鼠海马细胞衰老相关信号的影响。方法:取6月龄雄性SD大鼠30只,平均分成两组,每组15只,D-gal组利用进行D-gal连续腹腔注射(120mg/kg.day),对照组注射同体积的PBS共10周。利用Western blot和免疫组织化学观察SirT1和FoxO3a的表达变化。结果:Western blot和免疫组化结果显示,SirT1在D-gal组表达明显降低(分别为p=0.02,p=0.018);FoxO3a的免疫组化检测发现,D-gal组的海马锥体细胞FoxO3a在胞核的分布明显高于对照组(p=0.002);而相对胞浆的分布却显著降低(p=0.005)。结论:短期给予D-gal能够导致大鼠海马衰老信号的改变。     

艾灸对D-半乳糖致小鼠衰老模型海马突触蛋白的影响

本实验将空白对照组和D-半乳糖造模组及造模同时又艾灸其“百会”、“大推”穴的小鼠的海马粗制突触体的总蛋白进行SDS-聚丙烯酸胶凝胶平板电泳,老马斯亮兰染色,薄层扫描分析,观察艾灸对D-半乳糖所致小鼠海马的突触蛋白的影响,以探讨艾灸抗衰老作用可能的中枢机制。 1材料与方法1．1材料健康3月龄的ICR雄性小鼠30只,体重309士Zg,由本校实验动物中心提供。丙烯酸胺（Acr）、甲叉双丙烯酸胺（Bis）、十二烷基磺酸钠（SDS）等均为FLUKA公司生产,低分子量标准蛋白为上海丽珠东风生物技术有限公司生产,D一半乳糖为上海试剂二厂生…     

疏肝益肾方对三阴乳腺癌患者免疫功能的影响

目的研究疏肝益肾方对三阴乳腺癌患者免疫功能的影响。方法选取2012年11月—2014年1月在我院治疗三阴乳腺癌的患者42例,随机分为两组,每组21例,对照组给予化疗,治疗组给予疏肝益肾方治疗,观察两组患者治疗后症状的改善情况、患者生活质量及体内自然杀伤细胞变化。结果治疗后患者的生活质量及自然杀伤细胞与治疗前比较均提高,治疗组提高程度优于对照组,差异显著(P0.05);治疗组治疗后失眠、盗汗、疼痛改善情况相比对照组更明显,差异显著(P0.05)。结论疏肝益肾方可以缓解三阴乳腺癌患者的症状,提高患者生活质量,增加患者免疫系统功能。     

疏肝益肾方对激素依赖性乳腺癌的前瞻性队列研究

目的 观察疏肝益肾方对激素依赖性转移性乳腺癌患者的影响并从耐药机制角度进行探讨.方法 采用队列研究的方法,依据治法将226例晚期激素依赖性乳腺癌意向人群分为2个队列,疏肝益肾方联合西医治疗队列及单纯西医治疗队列.疏肝益肾方,1剂/d,服药至少半年或至肿瘤进展;西医按照美国综合癌症治疗网(national compreh...     

芪归益肾方延缓单侧输尿管梗阻小鼠肾脏纤维化进展机制的探讨

目的:利用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)肾病模型研究芪归益肾方通过调控细胞信号通路TGF-β/Smad/ILK的表达水平影响肾脏纤维化进展的程度。方法:昆明种小鼠32只,随机分为正常组、模型组、贝那普利组和芪归益肾方组,每组8只,除正常组外,其余各组制备UUO肾病模型后分别进行药物干预,第10天处死后取肾组织,分别采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肾组织的病理变化,免疫组化观察小鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1),细胞信号转导分子2(Smad2),Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和整合素连接激酶(ILK)蛋白的表达,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测小鼠肾组织TGF-β1,Col-Ⅰ和ILK mRNA及蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,免疫组化结果显示模型组小鼠肾组织TGF-β1,Smad2,Col-Ⅰ,ILK蛋白表达量明显升高,RT-PCR和Western blot检测结果显示小鼠肾组织TGF-β1,Col-Ⅰ和ILK mRNA及蛋白表达明显升高(P0.05),模型组小鼠肾脏纤维化程度较为明显;与模型组比较,贝那普利组和芪归益肾方组治疗后肾脏纤维化程度均有减轻,明显降低小鼠肾组织TGF-β1,Smad2,Col-Ⅰ,ILK蛋白表达,明显降低小鼠肾组织TGF-β1,Col-Ⅰ和ILK mRNA及蛋白的表达(P0.05),其中芪归益肾方治疗组比较贝那普利组效果更为明显(P0.05)。结论:芪归益肾方对于UUO肾病模型的纤维化病变程度具有抑制作用,其作用主要与调控细胞信号通路TGF-β/Smad/ILK表达相关。     

清肝益肾祛风方干预血管紧张素II诱导的小鼠高血压及神经炎症的作用研究＊

目的 探讨清肝益肾祛风方（Qinggan Yishen Qufeng formula，QYQ）对血管紧张素II（Angiotensin II，Ang II）诱导的高血压的干预效应及可能的神经炎症相关调控机制。方法 将C57BL/6J小鼠随机分为3组，即假手术对照组（Sham组），模型组（Vehicle组），清肝益肾祛风方组（QYQ组）。Vehicle组及QYQ组皮下植入含Ang II（490 ng/kg/min）的渗透泵，QYQ组自造模后第1日起开始给予QYQ灌胃，而Sham组及Vehicle组则给予同体积的生理盐水灌胃，连续28天；分别于造模前1天，及造模后第7、14、28天（± 2天）采用tail-cuff法测量小鼠血压，以评价QYQ降压作用；第29天取脑组织，采用免疫组织化学法观察室旁核（Paraventricular nucleus，PVN）区小胶质细胞激活情况，同时采用Real-time PCR技术对小鼠PVN区促炎因子IL-6及TNFα 的mRNA表达进行分析，以评价QYQ对高血压相关神经炎症的干预作用。 结果 与Vehicle组相比较，QYQ干预显著抑制Ang II诱导的小鼠血压升高（P < 0.05），显著抑制PVN区小胶质细胞激活（P < 0.05），QYQ组PVN区IL-6、TNFα mRNA的表达水平显著降低（P < 0.05）。结论 本研究结果表明QYQ不仅有效拮抗Ang II 诱导的高血压状态，同时对Ang II诱导的PVN区小胶质细胞激活及炎症因子表达具有显著的抑制作用。本研究提示QYQ抑制高血压相关神经炎症的效应可能是其有效防治高血压的作用途径之一。     

疏肝益肾通瘀方联合疏肝补肾针刺法治疗肝郁肾虚型月经后期临床研究

目的：观察疏肝益肾通瘀方联合疏肝补肾针刺法治疗肝郁肾虚型月经后期临床疗效及其安全性。 方法：选取98 例月经后期肝郁肾虚型患者，按随机数字表法分为对照组47 例及观察组51 例。对照组进行现 代医学常规治疗（戊酸雌二醇片、地屈孕酮片），观察组在常规治疗基础上加用疏肝益肾通瘀方联合疏肝补肾 针刺法治疗。比较2 组临床疗效、排卵率及不良反应发生情况，比较2 组治疗前后中医证候积分、性激素水平 ［雌二醇（E2）、黄体生成素（LH）、血清促卵泡生成素（FSH）］、子宫内膜厚度的变化。结果：观察组临床疗 效总有效率为96.08%，对照组总有效率为82.98%，2 组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后，2 组 经期错后、经量少、小腹胀痛、乳房胀痛中医证候积分均较治疗前下降（P＜0.05），观察组上述4 项中医证 候积分均低于对照组（P＜0.05）。治疗后，对照组排卵率为72.34%，观察组排卵率为92.16%，2 组排卵率比 较，差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后，2 组性激素E2、LH、FSH 水平均较治疗前上升（P＜0.05），观察 组上述3 项水平均高于对照组（P＜0.05）。治疗后，2 组子宫内膜厚度均较治疗前增加（P＜0.05），观察组子 宫内膜厚度大于对照组（P＜0.05）。2 组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：疏肝益 肾通瘀方联合疏肝补肾针刺法治疗肝郁肾虚型月经后期临床疗效显著，可缓解患者症状，改善性激素水平，提 升排卵率，安全性高。     

制山茱萸活性部位对D-半乳糖致小鼠肝损伤的保护作用

目的:研究制山茱萸活性部位对D-半乳糖致小鼠肝损伤的保护作用。方法:采用D-半乳糖造成小鼠急性肝损伤模型,以血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及肝脏丙二醛(MDA)含量作为考察指标,观察制山茱萸活性部位(醇沉多糖部位、正丁醇萃取部位、石油醚萃取部位)对小鼠急性肝损伤的保护作用。另取肝组织进行常规HE染色病理组织学切片,结合透射电镜观察肝细胞的凋亡情况。结果:生化分析结果表明,与正常对照组比较,模型组小鼠肝匀浆SOD活性显著降低,MDA含量及ALT、AST活性活性均显著升高(P<0.05);与模型组比较,三种制山茱萸活性部位干预组小鼠肝脏ALT、AST活性及MDA含量均显著降低,肝脏SOD活性显著升高(P<0.05)。肝脏病理形态学显示,模型组肝脏出现明显坏死和炎症,而制山茱萸活性部位干预组变性坏死明显减少,炎症细胞数减少,肝组织的损伤修复程度较好。电镜结果显示,模型组肝细胞损伤较为明显,小鼠肝脏细胞出现明显凋亡特征,而制山茱萸活性部位用药组未见凋亡。结论:制山茱萸多糖、正丁醇萃取部位、石油醚萃取部位均表现出保肝作用,提示三者均存在保肝活性成分,是制山茱萸保肝的物质基础所在,其保肝机制可能与抑制氧化应激及抗炎症反应有关。     

益肾汤与强的松联合依那普利对IgA肾病小鼠肾组织TGF-β1表达影响的比较研究

目的：探讨益肾汤治疗IgA肾病（IgAN）的作用机理。方法：口服牛血清白蛋白联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B法复制小鼠IgAN模型。设正常组、模型组、益肾汤低浓度组、益肾汤高浓度组、强的松＋依那普利组、强的松＋依那普利＋益肾汤低浓度组、强的松＋依那普利＋益肾汤高浓度组。用FQ-PCR法分别检测小鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达，免疫组化SABC法检测小鼠肾组织TGF-β1的含量。结果：模型组小鼠肾组织TGF-β1含量及mRNA表达均显著高于正常组（P〈0．05）。强的松＋依那普利＋益肾汤低浓度组与强的松＋依那普利＋益肾汤高浓度组肾组织TGF-β1含量及其mRNA表达分别低于单用西药和单用中药组（P〈0．05）。结论：IsAN小鼠肾组织TGF-β1含量及其mRNA表达均明显增加。益肾汤可明显抑制IgAN模型肾组织中TGF-β1的分泌及其mRNA表达。中西药联合用药较单纯用药作用明显。     

补肾方、柔肝方与化痰方对膝骨关节炎滑膜细胞增殖及COMP表达的影响

目的：探讨补肾方、柔肝方和化痰方对膝骨关节炎滑膜细胞增殖及COMP表达的影响。方法：补肾方、柔肝方和化痰方含药血清培养早期和晚期滑膜细胞，MTS／PMS法测定OD值，hCOMP定量试剂盒测定COMP含量。结果：通过MTS／PMS法观察确定补肾方、柔肝方和化痰方含药血清培养滑膜细胞观察点在第5～7天；三方培养滑膜细胞OD值低于正常血清对照组（P≤0．05）。结论：补肾方、柔肝方与化痰方可以抑制体外培养早期和晚期膝骨关节炎患者滑膜细胞增殖，柔肝方可以降低体外培养滑膜细胞分泌液中COMP的浓度。     

参芪扶正注射液对小鼠肝转移癌组织基因表达谱的影响

目的 探讨参芪扶正注射液对小鼠肝转移癌组织基因表达谱的影响。方法 20只小鼠采用将结肠癌C26细胞株瘤细胞液0.2 mL注射于脾脏建立肝转移癌模型,随机分为两组,造模后5日,分别给予参芪扶正注射液（参芪组）和生理盐水（模型组）腹腔内注射,隔日1次,共5次;造模后15日处死动物留取检测标本,应用小鼠全基因芯片分析两组肝癌组织基因表达谱。结果 （1）造模成功率100%;（2）基因表达：与模型组比较,参芪组上调基因123个,其中Ensemble数据库登录52个;下调基因1个,其中Ensemble数据库登录0个。结论 参芪扶正注射液主要是通过上调多种基因促进肿瘤细胞凋亡和稳定染色体而发挥抗肿瘤作用。     

山茱萸提取部位对D-半乳糖致衰模型小鼠骨髓细胞脱氧核糖核酸的影响

目的 探讨山茱萸几种提取部位对D-半乳糖致衰模型小鼠骨髓细胞DNA的影响.方法 取ICR小鼠,复制D-半乳糖致衰模型,给小鼠灌服药液,通过单细胞电泳和流式细胞仪检测,观察D-半乳糖致衰模型小鼠骨髓细胞DNA的变化及山茱萸几种提取部位的保护作用.结果 D-半乳糖对小鼠骨髓细胞脱氧核糖核酸(DNA)结构表现出一定的的影响,山茱萸几种提取部位尤其是石油醚萃取部位表现出保护作用.结论 山茱萸提取部位对D-半乳糖致衰模型小鼠DNA结构有不同程度的影响.     

养阴舒肝颗粒对肝郁证模型小鼠行为学及脑内单胺类神经递质的影响

目的探讨养阴舒肝颗粒对肝郁证模型小鼠行为学和脑内单胺类神经递质的影响。方法采用孤养和慢性不可预见性温和刺激法制备肝郁证模型,观察小鼠造模期间的一般情况、体质量变化,取造模成功小鼠72只,按照体质量随机分为模型组,养阴舒肝颗粒低、中、高剂量组(3、6、12 g·kg^-1),逍遥丸组及盐酸氟西汀组,另取12只正常小鼠作为对照组,连续灌胃28 d。采用悬尾实验观察各组小鼠悬尾不动时间;测定额叶皮质和海马的质量;以ELISA试剂盒测定皮质和海马内多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量。结果与正常对照组比较,模型组小鼠悬尾不动时间明显延长,额叶皮质和海马内DA、5-HT含量均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,养阴舒肝颗粒高剂量组的小鼠悬尾不动时间明显缩短(P<0.05),小鼠额叶皮质DA含量明显升高(P<0.05);养阴舒肝颗粒中剂量组、高剂量组小鼠额叶皮质5-HT含量以及海马区DA、5-HT含量明显升高(P<0.05)。结论养阴舒肝颗粒可以有效改善模型小鼠的肝郁状态,其机制可能与调节肝郁证小鼠的神经递质,升高额叶皮质及海马内的DA、5-HT有关。     

益肾祛浊方对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗模型大鼠激素受体表达的干预作用

目的:探索益肾祛浊方对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(PCOS-IR)模型大鼠激素及胰岛素受体表达的干预作用。方法:选取6~8周龄SPF级SD雌性大鼠60只随机分为空白组、模型组、益肾祛浊组、益肾组、西药组(达英-35联合二甲双胍),每组12只。空白组给予普通饲料喂养,其余各组均给予来曲唑灌胃联合高脂饲料喂养至第27天。然后给予不同药物灌胃2周,采用免疫荧光法检测各组大鼠雄激素受体(AR)、促黄体生成素受体(LHR)在卵巢、胃、肠组织的表达;并观察胰岛素受体(INSR)在卵巢的表达。结果:治疗14 d后发现,益肾祛浊方可以显著降低大鼠卵巢局部AR、LHR和INSR的表达,差异有统计学意义(P<0.05);且明显减少胃中AR及LHR的表达,差异有统计学意义(P<0.05);同时显著减少结肠组织LHR的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾祛浊方可能通过降低AR、LHR表达而调整模型大鼠内分泌紊乱,又可通过降低INSR的表达,对PCOS-IR大鼠的代谢紊异常起到治疗作用。