复合缓释微球的胶原膜促创面愈合的实验研究

目的观察复合缓释微球的胶原膜对猪皮肤创面损伤的促愈合作用.方法将20μl的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)溶液滴加在2 mg的冻干微球上,复合于胶原膜内.取2.5～3月龄健康约克猪6只,随机分为3组,在每只猪背部制作6个4 cm×4 cm全层皮肤缺损创面模型.将包裹bFGF的明胶缓释微球与胶原基多孔膜复合制备,作为实验组移植创面,对照组及空白组分别给予复合bFGF的胶原膜和空白胶原膜,术后每日观察创面愈合情况,14、21、28和35 d图像分析计算创面愈合率,3、7、14、21、28和35 d行组织学染色,观察各组材料对猪皮肤全层缺损创面的影响. 结果制备的复合微球的胶原膜内明胶微球大小均一,平均粒径为12.36±3.56 μm,孔径为80～150μm.实验组、对照组及空白组创面愈合时间为27.30±1.14、29.18±1.69、31.12±1.36 d,3组组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);实验组创面愈合率在术后14、21、28和35 d均高于对照组及空白组,差异有统计学意义(P＜0.05);术后各时间点组织学观察实验组愈合创面的上皮化程度均优于对照组及空白组.结论复合bFGF缓释微球的胶原膜能有效促进猪皮肤全层缺损创面的愈合,可作为具有应用前景的覆盖材料进一步研究.     

损伤性胆总管狭窄胆管胶原含量变化的实验研究

目的：观察损伤性胆管狭窄胶原含量变化及其对手术时机的指导。方法：健康实验兔36 只,分为对照组（n=9）和实验组（n=27）,实验组分成A,B,C 3 个亚组。对照组：在胆总管汇入十二指肠的入口上1 cm 处切取一段后,随即行胆管断端吻合术。实验A 组：一期手术同样在胆总管汇入十二指肠的入口上1 cm 处造成不完全性胆管梗阻,15 d 后行二期手术,切取狭窄段胆管组织后行胆管断端吻合修复术。实验B 组：一期手术同A 组,1 个月后行二期手术。实验C 组：一期手术同A 组,3 个月后行二期手术。动物在胆管吻合修复术1 个月后处死,并切取吻合口部位上下1 cm 的胆管。将胆总管组织修复前后胶原含量进行光密度测定。结果：与对照组比较,胆管损伤性狭窄后胆管组织胶原含量明显增加（P<0.05）,且随梗阻时间的延长而增加;狭窄修复后,实验组胆管组织胶原含量仍高于对照组（P<0.05）,且梗阻时间越长胶原含量越高。结论：胆管梗阻时间越长,其炎症与组织增生越重,术后发生再狭窄的可能性也越大。提示临床对损伤性胆管狭窄的患者,在排除手术禁忌的情况下,宜尽早行胆管修复术。     

普通超声及超声造影检测兔胆道缺血模型胆道异常的可行性研究

目的探讨普通超声及超声造影应用于检测兔胆道缺血模型胆道异常的可行性。方法将20只健康新西兰兔随机分为两组,对照组及肝动脉和胆总管联合阻断2h(HBO2h)组(各10只)。HBO2h组用无损伤动脉夹阻断肝动脉及胆总管下段2h后去除动脉夹制作胆道缺血模型,对照组不进行任何手术处理。术后5d两组实验兔先后采用普通超声、超声造影观察胆总管-左叶胆管情况,然后处死动物取胆总管-左叶胆管标本行苏木素-伊红(HE)染色,对胆管组织缺血损伤程度进行评分,CD34免疫组织化学染色后行微血管密度(microvascular density,MVD)定量分析。结果普通超声表现:对照组门静脉管径/胆管管径比值为3.47±0.23,所有胆管(100%)均表现为管壁连续性好、无增厚,管腔清晰;HBO2h组胆管明显扩张,门静脉管径/胆管管径比值为1.25±0.42,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);所有胆管均表现为管壁毛糙、增厚。超声造影表现:对照组所有胆管壁(100%)较肝实质提早增强,动脉期胆管壁呈细线状高增强,门静脉期及延迟期呈等增强;HBO2h组中60%(6/10)表现为动脉期胆管壁呈增强水平明显降低,门静脉期及延迟期呈低增强;40%(4/10)表现为增强扫描全过程均呈无增强;与对照组相比,HBO2h组各时相胆管壁增强表现差异均有统计学意义(均为P<0.05)。病理学表现:对照组胆管黏膜上皮细胞和黏膜下腺体上皮细胞呈柱状,排列紧密、完整,无上皮细胞变性、坏死、脱落等,胆管损伤评分为0分,MVD为(6.1±2.5)个。HBO2h组胆管壁增厚,胆管黏膜上皮细胞及黏膜下腺体上皮变性、坏死、脱落,管壁炎症细胞浸润,胆管损伤评分为(2.1±0.6)分,MVD为(2.2±1.6)个,与对照组比较差异有统计学意义(均为P<0.01)。结论普通超声及超声造影能较早发现胆道缺血兔模型的胆道异常,为缺血型胆道病变动物实验研究提供了一种简便、无创、动态监测病程发展的有效手段。     

Masquelet技术联合人工真皮对家兔骨与软组织缺损的治疗研究

目的探讨应用Masquelet技术联合人工真皮对家兔骨与软组织缺损的修复效果,观察诱导膜的微观结构及血管化情况,以期指导临床中对Gustilo-Anderson Ⅲ型开放性骨折伴大段骨缺损及软组织缺损的治疗。方法雄性家兔80只,体质量2.03～2.27 kg,平均2.11 kg。取64只兔双侧大腿随机分为实验组及对照组,余16只兔双侧为假手术组。所有兔均制备股骨骨质缺损及软组织缺损模型。实验组以Masquelet技术第一阶段方法[将聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥填充于骨缺损区]联合人工真皮治疗;对照组单纯以Masquelet技术第一阶段方法治疗;假手术组不作处理,直接缝合伤口。术后2、4、6、8周各处死假手术组4只家兔,以及实验组/对照组16只家兔,于双侧股骨原手术部位取材,大体观察诱导膜及结合膜情况;对膜结构取材行常规HE染色观察其微观结构;行CD34免疫组织化学染色观察,并计数微血管密度(microvessel density,MVD)。结果大体观察示:术后4周,实验组人工真皮胶原蛋白海绵层完全消失,实验组及对照组均产生完整诱导膜结构;对照组膜结构呈半透明状,实验组膜结构较厚,呈淡红色不透明,伴小血管增生。术后6～8周,实验组和对照组膜结构均逐渐增厚。假手术组随时间变化仅观察到瘢痕组织增生。HE染色示:术后2周,实验组及对照组均可见大量肌纤维,少量胶原纤维增生伴炎性细胞浸润;假手术组大多为肌纤维,伴少量肌纤维间血管。术后4周,实验组较对照组胶原纤维增多,部分血管形成,对照组胶原纤维细胞核呈类圆形,实验组呈扁圆形。术后6、8周实验组和对照组胶原纤维均较前增多,对照组胶原纤维细胞核仍呈类圆形,实验组呈梭形且细胞核较同期对照组深染;两组均可观察到增生血管,实验组增生血管数目较对照组增多。假手术组仍可见大量成纤维细胞出现,未表现随时间变化的血管显著增生。CD34免疫组织化学染色示,术后随时间延长,各组MVD均呈逐渐增加趋势。术后2周假手术组MVD显著大于实验组和对照组,4、6、8周显著小于实验组和对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。实验组术后4、6周MVD显著大于对照组(P0.05),2、8周两组MVD比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 Masquelet技术结合人工真皮治疗兔股骨骨质缺损及软组织缺损,在术后4～6周明显促进了膜结构的血管化过程。这两种方法结合对临床Gustilo-AndersonⅢ型开放性骨折伴骨及软组织缺损的治疗有指导意义。     

自体浓缩生长因子膜用于口腔黏膜组织缺损对疼痛度及瘢痕的影响

目的:观察自体浓缩生长因子膜用于口腔黏膜组织缺损对疼痛度及瘢痕的影响。方法:选取笔者医院口腔科2016年1月-2018年12月收治的264例口腔黏膜组织缺损患者,按随机数表法分为观察组与对照组,每组132例。对照组:切除病变后创面不贴敷任何物质,黏膜边缘直接缝线不剪断,用碘仿纱条反包扎固定牢固;观察组:切除病变后将CGF膜贴敷于创面上,将CGF膜边缘与创缘无张力间断对角缝合,缝线保留不剪断,创面用碘仿纱条反包扎敷料固定牢固。比较两组术后拆除碘仿纱条时间、创面愈合时间、术后2周、术后3周及术后4周的缺损面积愈合率及疼痛程度、术后3个月的术区瘢痕。结果:观察组拆除碘仿纱条时间与创面愈合时间分别为(7.25±1.65)d、(1.10±0.32)个月,显著短于对照组(12.16±2.01)d、(1.79±0.45)个月(P0.05);观察组术后2周、3周、4周的缺损面积愈合率均显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组术后2周、3周、4周的VAS评分显著低于对照组(P0.05);观察组术后3个月的VSS评分显著低于对照组(P0.05)。结论:CGF膜用于口腔黏膜组织缺损修复可加速创面愈合进展、减轻术后疼痛并抑制瘢痕形成,可尽快恢复患者口腔正常功能,适合推广。     

猪胶原膜异种皮下移植远期转归的实验研究

目的探讨猪胶原膜(商品名:无菌生物护创膜)植入大鼠体内后的远期转归。方法取20只SD大鼠随机分为两组,每组10只。实验组大鼠背部皮下植入猪胶原膜,对照组不植入猪胶原膜。实验组分别于术后3、7、15 d及1、3、6、12个月连续取材,行大体及组织学观察炎性反应、CD31免疫组织化学染色观察新生血管情况、透射电镜观察胶原排列;对照组于术后12个月取大鼠背部相同部位皮肤组织进行观察并比较。结果实验组大鼠术后切口愈合良好,无明显红肿及炎性反应。大体观察示,随时间延长,猪胶原膜与周围组织接触紧密,无明显排斥反应,12个月时猪胶原膜仍清晰可辨。组织学观察示,实验组术后7 d可见成纤维细胞、炎性细胞浸润;15 d及1个月与宿主组织连接处可见明显增生微血管和成纤维细胞,炎性反应渐消退;3个月时猪胶原膜周围血管及细胞丰富,内部可见血管及细胞;6、12个月猪胶原膜内血管增生及成纤维细胞逐渐减少,新生胶原增多,边缘有融合。术后15 d、1个月实验组炎性细胞数明显多于术后12个月对照组(P0.05);12个月时与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。CD31免疫组织化学染色示,实验组术后15 d可见膜内血管新生,1个月膜内、外血管新生明显,12个月时血管新生较前明显减少。与对照组比较,实验组术后15 d及12个月CD31阳性表达量显著降低,术后1个月CD31阳性表达量显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。透射电镜观察示,实验组术后12个月移植物胶原排列与植入前无明显改变,内部可见周细胞和成纤维细胞。结论猪胶原膜植入大鼠体内后远期结构稳定,具有良好免疫耐受特性。     

生骨再造散对家兔骨折愈合影响的实验研究

目的:检验生骨再造散促进骨折愈合的疗效,并探讨其治疗机制。方法:选用42只健康家兔,做双侧桡骨3mm缺损的骨折,随机分为实验组、药物对照组(仙灵骨葆)和空白对照组,分别以生骨再造散、仙灵骨葆和生理盐水灌胃给药,术后第1、2、3、4周采血,检测血清碱性磷酸酶(ALPase)。术后第14天和第31天分批处死兔子取桡骨标本,摄X线片,作生物力学测试和骨痂组织形态学观察。结果:骨折后第14天和第31天,实验组的X线片计分显示骨折修复优于空白对照组,生物力学性能和骨痂组织形态学均显著优于空白对照组(P<0.05,P<0.01),与药物对照组无显著性差异。ALPase在第1周和第4周各组间无显著性差异;第2周3组ALPase都不同程度升高,实验组和药物对照组均明显高于空白对照组,但实验组和药物对照组无差异;第3周实验组和药物对照组的ALPase均明显高于空白对照组,且实验组和药物对照组也有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:生骨再造散能缩短骨折愈合过程所需时间,提高骨折愈合质量,与仙灵骨葆疗效相似。     

丝素蛋白/双相磷酸钙/半水硫酸钙/重组人骨形态发生蛋白-2骨水泥的制备及修复椎体骨缺损的实验研究

目的 研制丝素蛋白(SF)/双相磷酸钙(BCP)/半水硫酸钙(CSH)/重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)骨水泥,并探讨其在绵羊椎体内的成骨作用. 方法 制备SF/BCP/CSH/rhBMP-2骨水泥,分别在12只绵羊的L2 L3、L4椎体内制作直径为6.0mm、深度为10 mm的圆柱型骨缺损模型,在3个缺损处随机植入SF/BCP/CSH/rhBMP-2骨水泥作为实验组,植入聚甲基丙烯酸甲酯(PMMP)作为对照组,另一椎体缺损处不植入任何材料作为空白对照组.术后3、6个月分别随机处死6只绵羊进行CT、组织学和生物力学检查.结果 CT和组织学检查显示:术后3个月实验组椎体密度与正常椎体相似,骨缺损修复基本完成,术后6个月骨缺损修复完成;对照组术后3、6个月时PMMP无降解,并与骨之间结合疏松,表面无新骨形成;空白对照组术后3、6个月时骨缺损一直存在.生物力学测试显示:术后3、6个月时实验组椎体抗压强度和刚度与正常椎体相比差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 SF/BCP/CSH/rhBMP-2骨水泥具有良好的成骨作用,在成骨过程中能维持椎体的力学性能,有望成为经皮椎体强化术的一种可降解、具成骨作用的填充剂.     

载柚皮苷复合支架对兔骨软骨缺损修复的实验研究

目的探讨载柚皮苷复合支架的性能及其对兔骨软骨缺损修复的效果。方法利用W/O/W方法制备载柚皮苷和无载柚皮苷缓释微球;以凹凸棒石和Ⅰ型胶原蛋白为材料,通过"3层夹心法"分别构建载柚皮苷、无载柚皮苷和载TGF-β_1复合支架。分别利用体外缓释、扫描电镜和细胞计数试剂盒8法评价载柚皮苷微球的缓释效果、支架的形貌和细胞相容性。取40只日本大耳白兔随机分为A、B、C、D4组,每组10只。于兔双侧股骨髁间窝处制备直径4.5 mm、深4 mm的骨软骨缺损模型,A组为缺损组(空白对照),B、C、D组分别于骨软骨缺损处植入无载柚皮苷复合支架(阴性对照组)、载柚皮苷复合支架(实验组)及载TGF-β_1复合支架(阳性对照组)。分别于术后3、6个月时取材,行大体、HE染色、甲苯胺蓝染色,分别观察骨软骨缺损修复效果;Western blot检测新生软骨Ⅱ型胶原蛋白表达水平。结果载柚皮苷微球具有良好的缓释效果;构建的骨软骨复合支架有较好的孔隙;载柚皮苷软骨层支架细胞的增殖率与无载柚皮苷支架比较明显增加,差异有统计学意义(P0.05)。兔体内植入实验大体观察示,术后3个月C、D组缺损范围与A、B组相比明显缩小;术后6个月C组缺损处被新生软骨所覆盖,D组新生软骨与周围正常软骨整合良好。组织学染色示,术后3个月A、B组缺损处被少量纤维组织填充,C、D组可见少量软骨生成;术后6个月C、D组新生骨软骨组织与正常骨软骨类似,A、B组缺损处以大量纤维组织为主。Western blot检测示,术后3、6个月C、D组缺损处新生组织中Ⅱ型胶原蛋白表达量均显著高于A、B组,差异有统计学意义(P0.05);C、D组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论载柚皮苷复合支架具有良好的组织相容性,并对兔关节骨软骨缺损有较好的修复效果。     

负载重组人骨形态发生蛋白2的α型半水硫酸钙/纳米羟基磷灰石复合植骨材料的成骨性能研究

目的:评价负载重组人骨形态发生蛋白2(rh BMP-2)的α型半水硫酸钙/纳米羟基磷灰石(α-CSH/n HA)复合植骨材料的成骨性能。方法:制备可注射性α-CSH/n HA/rh BMP-2复合材料,取12只成年绵羊,分别经左侧椎弓根在L1~L6椎体上制作直径6mm、深15mm的6个洞形缺损,第一只绵羊的椎体缺损随机分为3组,其余羊的椎体都按此进行分组,即L2、L5为实验组,L1、L4为对照组,L3、L6为空白对照组。实验组植入α-CSH/n HA/rh BMP-2复合材料;对照组植入可注射性磷酸钙骨水泥(CPC);空白对照组不植入任何材料。术后4、8、12周各处死4只动物,取椎体标本分别行X线及micro-CT扫描,观察缺损修复情况;行生物力学检查,测定椎体压缩强度和压缩模量;行组织学观察比较新骨生成率。结果:术后4周时,实验组压缩强度及压缩模量与CPC组的差异无统计学意义(P0.05),实验组和对照组均显著性高于空白对照组(P0.05);术后8周和12周时实验组和对照组均显著性高于空白对照组(P0.05),实验组显著性高于对照组(P0.05)。影像学及组织学结果显示,术后4周时,实验组复合材料大部分已降解,密度稍低于正常骨,可见大量纤细短小、尚未塑形的新生骨小梁,边缘有大量成骨细胞环绕;对照组CPC材料呈高密度充满整个缺损,未见明显降解吸收征象,材料与骨的界限明显,缺损边缘有少量幼稚骨小梁形成;空白对照组缺损较大,边缘整齐,几乎看不到有新骨生成。术后8周时,实验组复合材料完全降解,缺损内新生骨小梁数量增多,增粗变长,且开始早期塑形;对照组材料开始部分降解,在边缘和中心降解区可见明显新骨形成,新生骨小梁数量较实验组少;空白对照组缺损修复不明显,边缘只可见少量新生骨小梁。术后12周时,实验组缺损完全被新生骨小梁充满,骨小梁趋于成熟,结构与正常骨小梁相似,密度与正常骨接近,很难与正常部位区分;对照组CPC大量降解,只残留一小团块状和零星的材料,缺损边缘修复明显,新生骨小梁长入残余材料内,将其分割成岛屿状;空白对照组缺损依然较大,呈低密度影清晰可见,新骨生成很少。结论:α-CSH/n HA/rh BMP-2复合材料在绵羊体内具有良好的成骨活性,是较好的微创植骨材料。     

四肢火器伤骨缺损修复方法的选择

分析了５６例四肢火器伤骨缺损的发生原因，总结了２８例吻合旋髂深血管的髂骨移植的优点及１５例吻合腓血管的长段腓骨移植的适应证和９例肩胛骨皮瓣移植方法的经验。强调指出半环槽式外固定架在四肢长骨火器伤骨缺损治疗中具有独特的优越性，它将成为四肢火器伤骨折、骨不连及骨缺损治疗的首选方法。     

前臂背侧血管分布特点与皮瓣设计

目的：通过成人前臂背侧血管的解剖学观测，为临床选用皮瓣提供依据。方法：用５０例上肢标本，对前臂背侧血管的分支分布和吻合进行详细的解剖学观察和分析。结果：骨间后动脉和骨间前动脉腕背支是前臂背侧的营养血管，动脉间以及与尺、桡动脉腕背支相吻合。结论：本研究为下述血管为蒂的三种逆行皮瓣，提供了可靠的解剖学依据：（１）以桡动脉腕背支为蒂前臂背侧中下段皮瓣；（２）以骨间前动脉腕背支的尺侧骨皮支为蒂前臂背侧中下段尺侧皮瓣；（３）以骨间前动脉腕背支的桡侧骨皮支为蒂前臂背侧中下段桡侧皮瓣。上述皮瓣可携带骨膜、骨质，用于手部创伤的修复。     

手术治疗胰体尾癌26例临床分析

目的探讨胰体尾癌外科治疗方法和根治性切除的影响因素。方法回顾性分析手术治疗26例胰体尾癌病例的临床病理资料。结果肿瘤侵犯横结肠者2例，脾脏者2例；侵犯脾动静脉14例，门静脉、肠系膜上静脉2例，肠系膜上动脉、腹腔干8例。肿瘤直径小于4cm11例，4—8cm13例，大于10cm2例，根治性切除组肿瘤直径平均为3．8cm（2例胰腺囊腺癌除外），姑息性切除组肿瘤直径平均为5．4cm。根治性切除18例，姑息性切除8例，胰体尾切除加脾切除24例，门静脉、肠系膜上静脉局部楔行切除修补2例，胰体尾切除加脾切除加横结肠切除2例。根治性切除组与姑息性切除组中位生存时间分别为18．6个月和10．3个月。结论积极行手术切除肿瘤是胰体尾癌患者获得长期生存的唯一途径，而肿瘤的大小、对重要血管和邻近脏器的侵犯程度是影响肿瘤能否根治性切除的重要因素。     

胰头癌的外科治疗

胰腺癌的发病率近年来有上升趋势 ,据国外资料 ,胰腺癌的发病率近 30年来已增加 3～ 7倍 ,如美国的发病率达 10 /10万人 ,已超过胃癌的发病率 ,其病死率占恶性肿瘤的第 4位。国内统计 ,胰腺癌发病率较低 ,但近年来也呈上升趋势 ,如上海市区 196 3年统计的发病率为 1.16 /10万人 ,1977年增至3 .8/10万人 ,1990年上升至 5 .1/10万人 ,1974年占恶性肿瘤的第 14位 ,至 1984年跃居于第 5位。中国医科大学一院 196 0年 1月至 1984年 12月 ,2 5年间共收治胰腺癌 36 0例 ,196 0年1月至 1972年 12月 13年间收治 86例 ,1973年 1月至 1984年12月 12年间…     

COMPARISON OF SPEED OF ONSET OF ANALGESIC EFFECT OF DIAMORPHINE AND MORPHINE

In a random, double-blind crossover trial using an ischaemiclimb pain model we have assessed the speed of onset of analgesiaafter an i.v. bolus of equipotent doses of diamorphine and morphinein 12 healthy male volunteers. Pain and its subsequent reliefwere assessed by means of a visual analogue scale. Two of thesubjects found diamorphine acted quicker than morphine, onefound no difference and nine found that morphine was quickerthan diamorphine. The mean time to diamorphine effect was 53%greater than for morphine (P < 0.005, Wilcoxon rank sum test).These findings suggest that, for rapid relief of pain, morphineis more suitable than diamorphine.     

Cajal间质细胞在大鼠"泻剂结肠"结肠肌电变化中的作用

目的　研究长期服用接触性泻剂对大鼠结肠肌电的影响 ,探讨Cajal间质细胞 (ICC)在“泻剂结肠”肌电变化中的作用。方法　 32只大鼠随机分为 2组 ,实验组饲以含酚酞饲料 ,3个月后测定结肠慢波频率及振幅 ;用碘化锌 锇酸法 (ZIO)观察肌间丛ICC变化 ,透射电镜观察肌间丛神经和ICC的超微结构变化。结果　“泻剂结肠”结肠慢波频率明显减慢 (P <0 .0 5 ) ,肌间丛ICC分布不均匀 ,突起连接杂乱 ;电镜下见肌间丛神经轴突空化 ,ICC样细胞变性。结论　长期服用酚酞可导致结肠慢波频率减慢 ,其可能机理为肌间丛神经及ICC变性所引起     

原发性下肢深静脉瓣膜关闭不全的治疗

报道18例原发性下肢深静脉瓣膜关闭不全患者,采用股浅,隐-股静脉瓣膜戴戒术,大隐静脉高位属支结扎、主干曲张静脉剥脱术,小腿局部曲张浅静脉间断缝扎技术治疗。随访4～26个月,症状基本消失,皮炎明显好转。术后1～3角溃疡愈合。有3例作逆行 顺行静脉造影,显示1级瓣膜功能。