双下肢不同时间大鼠挤压伤-挤压综合征模型生化与病理观察

[目的]探讨不同挤压时间后再灌注对大鼠相关指标的影响。[方法]江苏大学实验动物中心提供2个月龄健康SD大鼠48只,雌雄不限,体重160~200 g,随机(随机数字法)分为实验组(n=40只)和对照组(n=8只)。其中实验组分为挤压3、6、12、24、48 h 5组,每组各8只大鼠。预定挤压时间到达解除后4 h观察大鼠双下肢改变及血尿情况,眼眶采血行血生化检测;取挤压部位肌肉、肾脏、心脏行组织病理形态学观察。对照组大鼠不作处理,同上法采血及取相同部位组织进行检测比较。[结果]挤压期间实验组共7只大鼠死亡,解除压迫后,存活大鼠双下肢肿胀明显,不能正常活动;ALT、AST、BUN、CK组间比较差异有统计学意义(P<0.05),Cr,K+组间比较差异无统计学意义(P>0.05),实验组3、6、24、48 h组ALT均显著高于对照组(P<0.05),各时间点AST均显著高于对照组(P<0.05),BUN在3、24、48 h组均显著高于对照组(P<0.05),CK在24、48 h组均显著高于对照组(P<0.05)。实验组挤压3 h局部受压肌肉组织轻度水肿;24 h后开始变性坏死,48 h后部分肌纤维发生断裂、碎裂,横纹和细胞核消失,细胞质呈匀质化,肌纤维间质水肿,炎性细胞浸润。实验组挤压3 h时肾小球充血肿胀,间质毛细血管扩张充血;挤压12 h时肾小管间散在出血,未见肾小球结构;24 h见毛细血管扩张充血;48 h时肾小管上皮细胞水肿、坏死、脱落,坏死改变。实验组各时间点心肌结构无明显变化。[结论]不仅挤压时间对大鼠的再灌注产生不同的病理生理影响,而且利用本模型可为挤压伤-CS的预防、早期诊断及治疗提供指导。     

内质网应激反应在严重烧伤大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的内质网应激反应(endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的凋亡是真核细胞重要凋亡途径之一,通过观察严重烧伤大鼠心肌ERS不同通路蛋白表达变化,探讨其在心肌细胞凋亡中的可能作用。方法雄性7周龄Wistar大鼠64只,体重200～220 g;随机分为两组,每组32只。实验组大鼠背部制备30%体表面积Ⅲ度烫伤;对照组制备假伤模型。伤后1、4、7、14 d两组各处死8只大鼠取心肌组织,透射电镜观察心肌超微结构变化,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,Western blot检测ERS相关蛋白,如葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP 78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase 12)剪切体表达变化。结果大鼠均存活至实验结束。透射电镜观察示实验组大鼠心肌细胞呈凋亡改变。伤后各时间点实验组心肌细胞凋亡指数均明显高于对照组(P<0.05),伤后1、4、7 d凋亡指数逐渐升高,14 d时下降,各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组心肌细胞GRP78、CHOP及Caspase 12剪切体蛋白表达持续升高,其中各时间点GRP 78及Caspase 12剪切体表达均较对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);除伤后1 d外,其余各时间点实验组CHOP蛋白表达均较对照组升高(P<0.05)。结论严重烧伤后大鼠心肌发生ERS,其中CHOP、Caspase 12介导的凋亡通路活化,ERS可能是心肌细胞凋亡的途径之一。     

大鼠急性脊髓损伤后肺组织的病理改变及其意义

目的:探讨大鼠急性脊髓损伤后肺组织的病理改变及其意义。方法:84只体重240～250g Wister成年大鼠随机分为对照组和实验组,每组42只,每组又分为造模后6h、12h、24h、3d、1周、2周、4周共7个时间点,每个时间点6只,雌雄不限。实验组采用T10段脊髓的Allen′s打击模型,打击力度为10×2.5g·cm;对照组只暴露T10段脊髓。在不同时间点处死大鼠,取肺组织,称湿、干重量,计算湿干重之比;通过大体解剖和光学显微镜观察肺组织的病理学变化。结果:实验组大鼠急性脊髓损伤后12h出现肺部出血和水肿,伤后3d最为严重,伤后1周开始减轻,伤后4周基本恢复正常;对照组无肺组织出血及水肿。实验组大鼠伤后6h出现散在肺泡毛细血管充血,伤后12h肺泡毛细血管有少量出血,伤后3d出血、水肿达到高峰,伤后1周开始减轻,伤后4周基本恢复正常。伤后6h实验组大鼠肺的湿干重之比与对照组比较无显著性差异(P>0.05);伤后12h、24h、3d、1周、2周湿干重之比明显较对照组高,有显著性差异(P<0.05);伤后4周时无明显差异(P>0.05)。结论:大鼠急性脊髓损伤后早期出现肺组织充血、出血和水肿,这可能是早期呼吸功能衰竭和肺部感染的病理基础。     

大鼠急性颈脊髓损伤后P物质与肺水肿的关系

目的 :探讨大鼠急性颈脊髓损伤后P物质与肺水肿的关系。方法 :成年Wistar大鼠40只,体重240~250g,雌雄不限,随机分为实验组和对照组,每组20只,每组又分为造模后24h、3d、1周、2周共4个时间点,每个时间点5只大鼠。实验组采用改良Allen′s打击法制作大鼠C7急性脊髓损伤(SCI)模型,打击力度为10×2.5g.cm;对照组只暴露C7段脊髓。在造模后相应时间点处死大鼠,通过光学显微镜观察肺组织的病理学变化,并检测各时间点两组大鼠血清和肺泡灌洗液中P物质含量和蛋白浓度,计算肺通透指数(肺泡灌洗液蛋白浓度/血清蛋白浓度)。结果:实验组大鼠急性SCI后24h肺组织可见肺毛细血管充血,肺泡内分泌物增多、红细胞增加;伤后3d达到高峰;伤后1周肺泡内水肿、出血较3d时减轻;伤后2周明显好转;对照组肺泡透亮,无水肿和出血。实验组伤后24h血清和肺泡灌洗液中P物质升高,伤后3d达高峰,伤后1周开始下降,伤后2周明显下降;实验组伤后24h、3d、1周血清及伤后24h、3d肺泡灌洗液中P物质含量与对照组比较有显著性差异(P<0.05),伤后2周两组比较无显著性差异(P>0.05)。肺通透指数的变化与P物质的变化趋势相同。结论:大鼠急性颈SCI后肺泡灌洗液及血清中P物质含量变化与肺水肿程度变化同步,P物质可能参与了急性颈SCI后肺水肿的形成过程。     

TGFβ1对脓毒症大鼠肝脏MD2表达的影响

目的建立大鼠脓毒症模型,观察不同时间点大鼠肝脏髓样分化蛋白2(Myeloid Differential protein-2,MD2)表达情况和NF-κB含量动态变化,并给予外源性TGFβ1干预,探讨TGFβ1对大鼠脓毒症的作用及可能机制,为临床脓毒症的治疗提供思路。方法健康雄性CL级SD大鼠120只随机分为三组:对照组40只,脓毒症模型组40只,TGFβ1干预组40只。按2 h、6 h、12 h、24 h、48 h时间点活杀大鼠取肝脏,HE染色光镜观察肝脏组织形态改变;用ELISA法检测肝脏组织匀浆上清液NF-κB含量;RT-PCR法检测肝脏MD2 mRNA的表达。结果模型组较对照组组织损伤严重,炎症细胞浸润多,伴有出血;TGFβ1组较对照组仍有炎细胞浸润,但较模型组炎症细胞浸润减少,损伤减轻;NF-κB在模型组(6 h、12 h、24 h、48 h)较对照组含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),并且在24 h达到最高,48 h进入平台期。TGFβ1组(6 h、12 h、24 h)较模型组含量减少,差异有统计学意义(P<0.05);MD2 mRNA在在模型组(6 h、12 h、24 h、48 h)较对照组表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),并且在24 h表达达到最高,48 h进入平台期;TGFβ1组(12 h、24 h)与模型组比较表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MD2 mRNA脓毒症时表达明显增加,提示LPS信号转导增强。TGFβ1可能通过抑制LPS的信号转导,减轻炎症反应。     

挤压综合征模型肾脏细胞凋亡的研究

目的 观察挤压综合征模型大鼠肾脏细胞的凋亡.方法 将雄性Wistar大鼠22只随机分为两组,正常组10只,实验组12只.实验组复制挤压综合征模型,解除压力后12h眼眶取血检测血清学指标,取肌肉、肾脏行苏木素-伊红(HE)染色,肾脏同时行TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling)染色.观察致伤后肌肉和肾脏病理变化及肾脏细胞凋亡情况.结果 实验组大鼠血清尿素氮、肌红蛋白、钾离子、肌酐、肌酸激酶较正常组明显升高(P<0.01),血清钙离子显著下降(P<0.01).实验组大鼠肾脏组织每400倍视野中凋亡细胞数明显高于正常组(22.07±2.64比0.08±0.28,P<0.01). 结论挤压综合征中大鼠肾小管上皮细胞出现明显凋亡.     

缺血后处理对后肢挤压伤兔肠屏障的保护作用

目的 观察两种缺血后处理方式对后肢挤压伤兔肠道屏障的保护作用.方法 建立兔后肢挤压伤模型,并分别采取两种缺血后处理方式:交替夹闭-开放挤压伤侧髂总动静脉(I-post A,每次60 s,反复3次);交替捆绑-松弛挤压伤肢体近端(I-post B,每次60 s,反复3次).检测处理前、处理后2、6、12、24 h后血浆二胺氧化酶(DAO)及肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)水平,24 h后取回肠组织苏木素-伊红(HE)染色观察肠黏膜形态学改变.结果 缺血后处理组在上述处理后4个时相点iFABP水平分别为I-post A:(108.75±4.81)、(117.04±3.70)、(125.52±4.22)、(109.12±6.95)μg/L,I-post B:(108.62±3.05)、(117.83±3.45)、(127.93±3.86)、(106.59±3.92)μg/L,均低于对照组(P＜0.05);处理后2、6 h血浆DAO水平分别为I-post A:(7.48±0.46)、(8.69±0.69)U/ml,I-post B:(7.43±0.46)、(8.70±0.70)U/ml,均低于对照组(P＜0.05);两缺血后处理模式组间差异无统计学意义(P＞0.05);各组肠黏膜在形态上未见明显差异.结论 缺血后处理对后肢挤压伤早期兔肠道屏障有保护作用,肠黏膜形态恢复早于肠屏障功能的修复.     

虾青素对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究虾青素对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响。方法 144只健康成年清洁级SD大鼠按随机数字表法分为实验组、对照组及假手术组3组,每组48只。对照组和实验组采用改良Allen法制作脊髓损伤模型,假手术组仅切开椎板不损伤脊髓。术后即刻实验组给予虾青素(75 mg/kg)灌胃,对照组和假手术组给予等量橄榄油灌胃,每日2次。术后1 d及1、2、3、4周采用BBB评分法评定大鼠运动功能;术后24 h采用硫代巴比妥酸法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;术后6、24、48 h采用TUNEL法检测细胞凋亡指数(apoptosis index,AI);术后48 h采用干湿重法测定脊髓组织含水量,计算脊髓损伤面积比,透射电镜观察脊髓组织超微结构,并采用Kaptanoglu评分法进行超微结构评分。结果术后各时间点对照组和实验组大鼠BBB评分均显著低于假手术组(P<0.05);术后1～4周实验组大鼠BBB评分均显著高于对照组(P<0.05)。术后24 h对照组和实验组MDA含量显著高于假手术组,实验组显著低于对照组(P<0.05);对照组和实验组SOD活性显著低于假手术组,实验组显著高于对照组(P<0.05)。术后各时间点对照组和实验组脊髓组织中AI显著高于假手术组,实验组显著低于对照组(P<0.05)。术后48 h,对照组和实验组脊髓组织含水量、脊髓损伤面积比及超微结构评分均显著高于假手术组,实验组均显著低于对照组(P<0.05)。结论虾青素能够抑制脊髓损伤后的脂质过氧化,减轻脊髓损伤后细胞凋亡,减轻脊髓水肿,减少脊髓损伤面积,减轻脊髓组织病理学损伤,改善了脊髓损伤大鼠的运动功能,有效地保护了脊髓组织,具有明显的神经保护作用。     

维生素E对大鼠早期激素性股骨头缺血性坏死的作用及机制研究北大核心CSCD

目的探讨维生素E防治大鼠早期激素性股骨头缺血性坏死(steroid-induced avascular necrosis of femoral head,SANFH)的可能性及作用机制。方法取雄性SD大鼠72只,随机分为对照组、模型组和干预组,每组24只。对照组大鼠不作处理;模型组及干预组采用脂多糖联合激素法制备SANFH模型,干预组在注射激素的同时每天肌肉注射维生素E 40 mg/kg,连续7 d。末次激素注射后2、4、8周取股骨头,HE染色观察骨坏死发生情况,计算空骨陷窝率;TUNEL染色观察细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数;免疫组织化学染色及Western blot检测观察胱天蛋白酶9(Caspase-9)、Caspase-3、细胞色素-c(cytochrome-c,Cyt-c)蛋白表达情况。结果组织学观察示,干预组空骨陷窝率仅8周时与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),4、8周时与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);干预组细胞凋亡指数各时间点均低于模型组(P<0.05),8周时与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色及Western blot观察示,干预组各时间点Cyt-c、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达显著低于模型组(P<0.05),8周时与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论维生素E可通过减轻线粒体依赖性骨细胞凋亡来延缓大鼠早期SANFH病程发展。     

环孢霉素A对大鼠脊髓损伤早期环氧化酶-2与肿瘤坏死因子α表达的影响

目的:观察环孢霉素A(CsA)对大鼠脊髓损伤(SCI)早期环氧化酶-2(Cox-2)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响,探讨CsA对大鼠SCI的作用。方法:180只大鼠随机分成对照组、损伤组和损伤后CsA治疗组(治疗组),每组60只。用25g.cm致伤损伤组和治疗组大鼠T8~T11脊髓,对照组不损伤脊髓。治疗组于术后1h予尾静脉注射CsA(2.5mg/kg),之后每隔12h给药1次,对照组和损伤组在相同时间点尾静脉注射相同体积生理盐水。损伤组和治疗组于术后2h、6h、12h、24h、48h和72h处死动物取损伤段脊髓标本,对照组在相应时间点取相应节段脊髓标本,切片后分别行HE染色观察脊髓组织损伤情况、免疫组织化学EnVision法检测TNF-α、免疫组织化学SP法检测Cox-2,并对TNF-α和Cox-2进行定量分析。结果:对照组各时间点脊髓无出血、水肿等变化。损伤组和治疗组伤后2h、6h脊髓灰质可见水肿、出血,但无坏死,周围白质无明显改变;12h、24h脊髓灰质出现广泛灶性出血及出血后形成囊腔,神经元肿胀,部分细胞核浓缩,染色增强,白质见少量红细胞渗出,髓鞘轻度肿胀;48h、72h脊髓灰质中出现神经元固缩、坏死、溶解,细胞体积变小,有大量小胶质细胞增生和中性粒细胞浸润,白质中可见较多红细胞渗出,髓鞘肿胀和大量空泡,周围有炎性细胞浸润和胶质细胞增生;治疗组各时间点的病理改变均较损伤组轻。对照组大鼠脊髓Cox-2呈可疑阳性表达;损伤组和治疗组伤后2h Cox-2即有表达,6h达到高峰,之后逐渐下降;损伤组在伤后72h Cox-2表达仍较对照组高(P<0.05),而治疗组到伤后48h即恢复到对照组水平(P>0.05),治疗组各时间点Cox-2表达均较损伤组低(P<0.05);对照组大鼠脊髓TNF-α呈可疑阳性或弱阳性表达;损伤组和治疗组伤后2h即有TNF-α表达,12h达到高峰,之后逐渐下降;损伤组在伤后72h TNF-α表达仍较对照组高(P<0.05),而治疗组在伤后72h即恢复到对照组水平(P>0.05),治疗组各时间点TNF-α表达均较损伤组低(P<0.05)。结论:CsA能显著降低大鼠SCI后早期损伤脊髓组织中Cox-2和TNF-α的表达,从而减轻脊髓继发性损伤。     

四肢火器伤骨缺损修复方法的选择

分析了５６例四肢火器伤骨缺损的发生原因，总结了２８例吻合旋髂深血管的髂骨移植的优点及１５例吻合腓血管的长段腓骨移植的适应证和９例肩胛骨皮瓣移植方法的经验。强调指出半环槽式外固定架在四肢长骨火器伤骨缺损治疗中具有独特的优越性，它将成为四肢火器伤骨折、骨不连及骨缺损治疗的首选方法。     

前臂背侧血管分布特点与皮瓣设计

目的：通过成人前臂背侧血管的解剖学观测，为临床选用皮瓣提供依据。方法：用５０例上肢标本，对前臂背侧血管的分支分布和吻合进行详细的解剖学观察和分析。结果：骨间后动脉和骨间前动脉腕背支是前臂背侧的营养血管，动脉间以及与尺、桡动脉腕背支相吻合。结论：本研究为下述血管为蒂的三种逆行皮瓣，提供了可靠的解剖学依据：（１）以桡动脉腕背支为蒂前臂背侧中下段皮瓣；（２）以骨间前动脉腕背支的尺侧骨皮支为蒂前臂背侧中下段尺侧皮瓣；（３）以骨间前动脉腕背支的桡侧骨皮支为蒂前臂背侧中下段桡侧皮瓣。上述皮瓣可携带骨膜、骨质，用于手部创伤的修复。     

手术治疗胰体尾癌26例临床分析

目的探讨胰体尾癌外科治疗方法和根治性切除的影响因素。方法回顾性分析手术治疗26例胰体尾癌病例的临床病理资料。结果肿瘤侵犯横结肠者2例,脾脏者2例;侵犯脾动静脉14例,门静脉、肠系膜上静脉2例,肠系膜上动脉、腹腔干8例。肿瘤直径小于4cm11例,4—8cm13例,大于10cm2例,根治性切除组肿瘤直径平均为3．8cm（2例胰腺囊腺癌除外）,姑息性切除组肿瘤直径平均为5．4cm。根治性切除18例,姑息性切除8例,胰体尾切除加脾切除24例,门静脉、肠系膜上静脉局部楔行切除修补2例,胰体尾切除加脾切除加横结肠切除2例。根治性切除组与姑息性切除组中位生存时间分别为18．6个月和10．3个月。结论积极行手术切除肿瘤是胰体尾癌患者获得长期生存的唯一途径,而肿瘤的大小、对重要血管和邻近脏器的侵犯程度是影响肿瘤能否根治性切除的重要因素。     

胰头癌的外科治疗

胰腺癌的发病率近年来有上升趋势 ,据国外资料 ,胰腺癌的发病率近 30年来已增加 3～ 7倍 ,如美国的发病率达 10 /10万人 ,已超过胃癌的发病率 ,其病死率占恶性肿瘤的第 4位。国内统计 ,胰腺癌发病率较低 ,但近年来也呈上升趋势 ,如上海市区 196 3年统计的发病率为 1.16 /10万人 ,1977年增至3 .8/10万人 ,1990年上升至 5 .1/10万人 ,1974年占恶性肿瘤的第 14位 ,至 1984年跃居于第 5位。中国医科大学一院 196 0年 1月至 1984年 12月 ,2 5年间共收治胰腺癌 36 0例 ,196 0年1月至 1972年 12月 13年间收治 86例 ,1973年 1月至 1984年12月 12年间…     

COMPARISON OF SPEED OF ONSET OF ANALGESIC EFFECT OF DIAMORPHINE AND MORPHINE

In a random, double-blind crossover trial using an ischaemiclimb pain model we have assessed the speed of onset of analgesiaafter an i.v. bolus of equipotent doses of diamorphine and morphinein 12 healthy male volunteers. Pain and its subsequent reliefwere assessed by means of a visual analogue scale. Two of thesubjects found diamorphine acted quicker than morphine, onefound no difference and nine found that morphine was quickerthan diamorphine. The mean time to diamorphine effect was 53%greater than for morphine (P < 0.005, Wilcoxon rank sum test).These findings suggest that, for rapid relief of pain, morphineis more suitable than diamorphine.     

Cajal间质细胞在大鼠"泻剂结肠"结肠肌电变化中的作用

目的　研究长期服用接触性泻剂对大鼠结肠肌电的影响 ,探讨Cajal间质细胞 (ICC)在“泻剂结肠”肌电变化中的作用。方法　 32只大鼠随机分为 2组 ,实验组饲以含酚酞饲料 ,3个月后测定结肠慢波频率及振幅 ;用碘化锌 锇酸法 (ZIO)观察肌间丛ICC变化 ,透射电镜观察肌间丛神经和ICC的超微结构变化。结果　“泻剂结肠”结肠慢波频率明显减慢 (P <0 .0 5 ) ,肌间丛ICC分布不均匀 ,突起连接杂乱 ;电镜下见肌间丛神经轴突空化 ,ICC样细胞变性。结论　长期服用酚酞可导致结肠慢波频率减慢 ,其可能机理为肌间丛神经及ICC变性所引起     

原发性下肢深静脉瓣膜关闭不全的治疗

报道18例原发性下肢深静脉瓣膜关闭不全患者,采用股浅,隐-股静脉瓣膜戴戒术,大隐静脉高位属支结扎、主干曲张静脉剥脱术,小腿局部曲张浅静脉间断缝扎技术治疗。随访4～26个月,症状基本消失,皮炎明显好转。术后1～3角溃疡愈合。有3例作逆行 顺行静脉造影,显示1级瓣膜功能。