阿魏酸对小鼠骨髓造血功能辐射损伤的防护作用

目的 观察阿魏酸对小鼠外周血象和骨髓造血功能辐射损伤的防护作用,初步探讨阿魏酸的抗辐射作用机制。方法 6~8周ICR小鼠96只,随机数表法分为正常对照组、照射模型组、阳性药（408片）治疗组和阿魏酸10、30、90 mg ·kg^-1·d^-1治疗组,每组16只。小鼠初次给药后24 h接受3.5 Gy ⁶⁰Co γ单次全身照射,之后连续7 d给药。其中,每组10只用于观察照射前2 d及照射后3、7、10、15、22 d的外周血象;其余6只用于照射后7 d检测骨髓嗜多染红细胞的微核细胞率、造血祖细胞集落形成能力、以及Thbd和HMGB1蛋白的表达水平。结果 与照射模型组比较,90 mg ·kg^-1 ·d^-1的阿魏酸可有效提高小鼠3.5 Gy照射后3、10、15、22 d的外周血白细胞数（t=2.267、2.399、1.945、2.828,P<0.05）,显著降低骨髓嗜多染红细胞微核细胞率（t=4.013,P<0.05）,明显提高造血祖细胞红细胞集落生成单位（CFU-E）、红细胞爆裂型集落生成单位（BFU-E）和粒-单细胞集落生成单位（CFU-GM）的集落形成能力（t=2.366、2.953、3.115,P<0.05）,并提高骨髓细胞中Thbd和核内HMGB1蛋白表达水平（t=17.75、23.39,P<0.01）。结论 阿魏酸可通过调节Thbd和HMGB1蛋白表达,促进小鼠骨髓造血功能辐射损伤修复,加速外周血象恢复。     

氚对神经细胞迁移相关因子表达及空间学习记忆能力的影响

目的 探讨氚水（HTO）对大鼠海马神经细胞迁移相关因子表达及空间学习记忆能力的影响。方法 取24 h内新生鼠脑海马细胞培养,培养第7天以0、3.7×10²、3.7×10³、3.7×10⁴、3.7×10⁵、3.7×10⁶ Bq/ml终浓度氚水培养细胞24 h;Western blot法、RT-PCR法分别检测各浓度氚水处理后的神经细胞骨架蛋白（F-肌动蛋白、α-微管蛋白、tau蛋白及MAP2蛋白）、脑源性神经细胞营养因子（BDNF）及Reelin mRNA的表达情况。取妊娠14 d孕鼠16只,采用随机数表法分两组,每组8只,实验组单次注射3.7×10⁶ Bq/g （体重）氚水,对照组注射等量体积生理盐水,Morris水迷宫法观察出生后两组大鼠的空间学习能力。结果 3.7×10²、3.7×10³、3.7×10⁴、3.7×10⁵、3.7×10⁶ Bq/ml终浓度氚水处理后的神经细胞中,F-肌动蛋白（t=8.898~25.749,P<0.05）、α-微管蛋白（t=3.261~7.900,P<0.05）、tau （t=2.274~5.003,P<0.05）、MAP2（t=2.274~5.003,P<0.05）、BDNF mRNA （t=3.580~19.792,P<0.05）、Reelin mRNA （t=3.240~39.692,P<0.05）表达水平均低于0 Bq/ml浓度并随氚水浓度的升高表达量呈递减趋势。Morris水迷宫结果显示,与对照组相比,实验组大鼠逃避潜伏期延长（t=-2.563,P<0.05）,目标象限穿行次数减少、停留时间缩短（t=3.214、3.874,P<0.05）。结论 HTO辐射对大鼠神经元迁移相关因子表达和空间学习有影响,这可能有助于了解放射性脑损伤的机制。     

PinX1对食管癌细胞放射敏感性及活性氧水平的影响研究

目的 研究端粒酶抑制因子X1（PinX1）对食管癌细胞放射敏感性及活性氧（ROS）水平的影响。方法 食管癌细胞分为对照组（未做细胞转染）、照射组（8 Gy X射线）、PinX1组（转染pDsRed1-PinX1至过表达）、照射+PinX1（转染pDsRed1-PinX1至过表达后8 Gy X射线照射）。MTT测定细胞增殖,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（Caspase-9）的活化水平,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯（DCFH-DA）法测定细胞中ROS水平,集落形成实验测定放射敏感性。构建EC9706细胞致裸鼠皮下移植瘤模型,每组20只,小鼠每4天接受5次8 Gy剂量的γ射线局部照射,分析异种移植小鼠模型中PinX1过表达与放射敏感性的关系。结果 与对照组相比,照射组和PinX1组细胞的存活率从100%降低至（67.92±4.71）%和（83.14±4.01）%,差异有统计学意义（t=9.433、4.957,P<0.05）,细胞凋亡率从（6.47±1.46）%升高到（44.38±4.16）%和（25.42±2.78）%,差异有统计学意义（t=12.882、6.439,P<0.05）,细胞中Caspase-3活化水平升高（t=6.655、2.531,P<0.05）,Caspase-9的活化水平升高（t=3.775、3.088,P<0.05）,细胞内ROS水平升高（t=12.110、7.339,P<0.05）。与照射组相比,照射+PinX1组细胞存活率从（67.92±4.71）%下降至（52.73±5.58）%,差异有统计学意义（t=8.942,P<0.05）,细胞凋亡率从（44.38±4.16）%升高至（55.29±4.98）%,差异有统计学意义（t=3.707,P<0.05）,细胞中Caspase-3活化水平升高（t=15.435,P<0.05）,Caspase-9的活化水平也升高,（t=17.990,P<0.05）,ROS水平升高（t=4.526,P<0.05）。过表达PinX1的EC9706细胞放射敏感性增加,增敏比为1.408。过表达PinX1的细胞裸鼠移植瘤体积明显减小。结论 PinX1抑制食管癌细胞增殖,诱导食管癌细胞凋亡,增加食管癌细胞放射敏感性。     

125I粒子抑制肝癌移植瘤血管形成的实验研究

目的 探讨放射性¹²⁵I粒子对肝癌裸鼠皮下移植瘤微血管形成的影响及其机制。方法 构建人肝癌Huh7细胞裸鼠皮下移植瘤模型,将12只裸鼠用随机数表法分为观察组和对照组,每组6只。观察组移植瘤植入一枚活度为2.96×10⁷Bq粒子,对照组植入一枚活度为0的空粒子。每4天测量1次移植瘤体积,记录肿瘤生长曲线。28 d后取下移植瘤,用免疫组织化学染色法检测CD31评估移植瘤微血管密度（MVD）。用免疫组织化学染色法检测血管内皮生长因子-A（VEGF-A）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）蛋白表达,并做半定量分析。用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测VEGF-A、HIF-1α mRNA的表达。结果 观察组移植瘤的生长速度较对照组缓慢,粒子植入后12 d两组肿瘤体积差异有统计学意义（t=3.167,P<0.05）,随着观察时间延长,两组肿瘤体积差距加大,在28 d时两组肿瘤体积分别为（963.61±89.56）mm³和（602.10±75.98）mm³（t=7.122,P<0.05）。两组移植瘤组织中CD31均有表达,观察组的MVD较对照组少,差异有统计学意义（t=6.360,P<0.05）。观察组VEGF-A、HIF-1α mRNA及蛋白的表达水平均低于对照组,差异均有统计学意义（t=10.480、6.414、10.890、12.250,P<0.05）。结论 放射性¹²⁵I粒子通过降低肿瘤微血管密度抑制肝癌移植瘤的生长,其机制可能与VEGF-A、HIF-1α的mRNA及蛋白表达减少有关。     

Stattic抑制STAT3和HIF-1α途径对食管癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的 探讨Stattic对食管癌ECA109细胞裸鼠移植瘤的放射增敏效果及其可能的作用机制。方法 建立食管癌ECA109细胞裸鼠移植瘤模型;移植瘤平均体积增至约150 mm³时,采用随机数表法将24只裸鼠分为4组,药物+照射组（25 mg/kg Stattic+6 Gy）、单纯药物组（25 mg/kg Stattic）、单纯照射组（6 Gy）、对照组,每组6只。25 d后测量移植瘤体积,计算肿瘤体积抑制率,Western blot法检测移植瘤组织中STAT3、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达。结果 药物+照射组裸鼠移植瘤体积为（705.1±75.5）mm³,显著低于单纯照射组（1 113.5±101.4） mm³和单纯药物组（1 696.5±100.6）mm³（t=4.35、14.14,P<0.05）,其抑制率达（66.1±3.2）%。Western blot检测发现,药物+照射组移植瘤组织中pSTAT3、HIF-1α、VEGF蛋白表达水平较单纯照射组明显降低（t=17.07、5.05、3.54,P<0.05）。结论 Stattic对食管癌ECA109细胞裸鼠移植瘤具有放射增敏作用,可能与其抑制pSTAT3、HIF-1α、VEGF途径有关。     

磁导航指导下心房颤动导管消融与手动消融辐射剂量的对比研究

目的 比较磁导航指导下心房颤动导管消融与手动消融时辐射剂量的差异.方法 连续收住入院的94例行房颤(AF)导管消融术患者,前60例为手动消融组(CON组),后34例为磁导航(MNS)指导下导管消融组(MNS组).对比两组患者的皮肤表面累积入射剂量(CD)、剂量面积乘积(DAP)、透视时间,以及医护人员的辐射剂量和透视时间.结果 MNS组和CON组两组患者的CD值分别为 (0.54±0.45)和(1.61±0.89)Gy (t=2.44,P<0.05),DAP值为(46.86±27.09)和(139.71±76.69)Gy·cm²(t=3.89,P<0.05),透视时间为(15.60±7.52)和(39.50±8.82) min (t=1.96,P<0.05).两组手术医师辐射剂量分别为(22.68±6.87)和(62.74±20.92)μSv(t=2.02,P<0.05),透视时间为(11.48±7.59)和(30.50±14.82)min(t=2.75,P<0.05),助手辐射剂量为(19.38±5.64)和(49.42±10.67)μSv(t=3.58,P<0.05)、透视时间为(8.96±5.88)和(24.49±9.09)min(t=4.20,P<0.05),护士辐射剂量为(18.98±4.99)和(47.77±13.65)μSv(t=3.17,P<0.05)、透视时间为(8.33±6.35)和(22.99±13.36)min(t=2.76,P<0.05).结论 与手动消融相比,磁导航指导下心房颤动导管消融具有明显减少医患辐射剂量的优点.     

富氢水减轻造血干祖细胞的辐射损伤

目的 探讨富氢水对辐射诱导的造血干祖细胞（HSPCs）损伤的保护作用。方法 32只C57BL/6小鼠根据体重分层随机区组法分为健康对照组、富氢水组、照射组、照射+富氢水组,共4组,每组8只。富氢水组和照射+富氢水组小鼠于照射前5 min至照后7 d,每天灌胃给予0.5 ml富氢水,其余小鼠每天灌胃给予0.5 ml蒸馏水,照射组和照射+富氢水组小鼠接受2 Gy的¹³⁷Cs γ射线全身照射。照后15 d取小鼠骨髓,检测骨髓中HSPCs比例、骨髓细胞的克隆形成和移植重建能力、骨髓中LSK细胞的活性氧（ROS）水平和细胞凋亡情况。结果 与照射组相比,照射+富氢水组小鼠骨髓中造血祖细胞和LSK细胞比例升高（t=-4.935、-7.898,P<0.05）,骨髓细胞形成克隆的数目增加（t=5.488,P<0.05）,竞争性骨髓移植后受体小鼠的供体嵌合率升高（t=-12.769,P<0.05）,骨髓中LSK细胞的ROS水平和细胞凋亡比例降低（t=4.380、3.954,P<0.05）。结论 富氢水对2 Gy电离辐射诱导的HSPCs损伤具有一定的保护作用。     

18F-FDG对小鼠Lewis肺癌移植瘤P53、XIAP与GADD45蛋白表达的影响

目的 观察¹⁸F-氟代脱氧葡萄糖(¹⁸F-FDG)内照射对Lewis肺癌移植瘤P53、XIAP与GADD45蛋白表达的影响,探讨其作为内照射治疗药的可行性.方法 建立Lewis肺癌C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型48只,随机数字表法分为高剂量组、低剂量组和对照组,每组 16只.接种后第7天,3组小鼠分别腹腔注射0.2 ml ¹⁸F-FDG及等体积生理盐水,使高、低剂量组¹⁸F-FDG注射量分别为18.5×10⁷和9.25×10⁷ Bq.第22天处死小鼠,SP免疫组织化学法检测移植瘤组织P53、XIAP与GADD45蛋白表达.结果 每种蛋白3组小鼠间表达差异有统计学意义(χ²=8.30、16.02、7.68,P<0.05).3组小鼠Lewis肺癌P53蛋白表达的平均积分光密度分别从对照组的(0.089±0.033)随照射剂量增大为高剂量组的(0.315±0.028);XIAP蛋白表达的平均积分光密度从(0.422±0.034)逐步减小为(0.149±0.055);GADD45蛋白表达的平均积分光密度从(0.126±0.023)逐步上升为(0.383±0.035).3组间蛋白表达量差异有统计学意义(P53:F=5.26,P<0.05;XIAP:F=4.29,P<0.05;GADD45:F=5.98,P<0.05).结论 ¹⁸F-FDG能够上调P53和GADD45蛋白表达,下调XIAP蛋白表达,促使小鼠Lewis肺癌组织细胞以P53依赖的方式凋亡,抑制Lewis肺癌移植瘤生长.     

希氏束起搏与普通起搏术中患者射线暴露的比较

目的 比较希氏束起搏（HBS）和右心室心尖起搏射线暴露的差异。方法 回顾性记录无锡市人民医院2018年8月至2020年1月并分析30例希氏束起搏患者（HIS组）的手术总体及各阶段皮肤表面累积入射剂量（CD）和透视时间,并与同期右心室心尖植入心室电极的双腔起搏器（RVA）的32例患者（RVA组）对比。结果 HIS组和RVA组的手术操作时间为（76.8±13.1）和（66.0±10.8）min（t=3.386,P<0.001）、透视时间为（698.2±113.7）和（293.3±63.9）s（t=14.709,P<0.001）、透视剂量为（391.3±70.0）和（162.3±40.5）mGy（t=13.694,P<0.001）;与右心室心尖电极植入过程相比,希氏束电极植入过程的透视时间[（501.2±112.3）和（103.4±30.6）s]及透视剂量[（279.9±65.0）和（57.3±13.8）mGy]明显增加（t=15.864,Z=-6.524,P<0.001）。结论 与右心室心尖起搏术相比,希氏束起搏手术时间更长,辐射剂量更大,需谨慎选择。     

177Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA靶向可降解纳米粒子腹腔灌注治疗小鼠卵巢癌伴腹膜转移的实验研究

目的 观察放射性核素¹⁷⁷Lu标记的叶酸-二乙烯三胺五乙酸-聚乙二醇-聚乳酸共聚物(¹⁷⁷Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA)纳米粒子的体内靶向分布,评价腹腔灌注纳米粒子治疗小鼠卵巢癌腹膜转移瘤及腹水疗效。方法 制备¹⁷⁷Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA纳米粒子,向人卵巢癌移植瘤荷瘤小鼠尾静脉注射纳米粒子后4、24、72 h和7 d,行微型单光子发射计算机断层显像仪(micro-SPECT/CT)显像,观察纳米粒子体内分布情况。将12只人卵巢癌腹腔转移瘤裸鼠模型按随机抽签法分为阴性对照组(生理盐水)、化疗组(顺铂3 mg/kg,2次/周)和粒子组(¹⁷⁷Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA粒子18.5 MBq),每组4只,腹腔灌注给药。7 d后行活体荧光成像评价腹腔肿瘤生长情况,计算相对抑瘤率,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率,免疫组织化学法检测肿瘤Ki67增殖活性,比较治疗后各组腹水体积。结果 micro-SPECT/CT显像显示,移植瘤放射性浓聚,24 h肿瘤肌肉摄取比值(T/M)最高,为2.81±0.49。活体荧光成像显示,腹腔给药治疗后,粒子组、化疗组和阴性对照组的腹腔肿瘤荧光强度分别为(1.45±0.19)×10¹⁰、(2.21±0.36)×10¹⁰和(2.63±0.79)×10¹⁰,差异有统计学意义(F=6.09,P=0.029);粒子组和化疗组的相对肿瘤抑制率(TGI)分别为35.6%和18.6%。粒子组和化疗组的肿瘤细胞凋亡率(AI)均高于阴性对照组(F=9.96,P=0.009),粒子组和化疗组的Ki67指数均低于阴性对照组(F=9.93,P=0.013),粒子组和化疗组腹水体积均小于阴性对照组(F=13.43,P=0.006)。结论 ¹⁷⁷Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA纳米粒子可行小鼠卵巢癌靶向显像,腹腔灌注后局部滞留和降解吸收,抑制卵巢癌腹膜转移瘤和腹水生长,为晚期卵巢癌伴腹膜转移患者诊疗提供新思路。     

全骨髓法分离培养骨髓间充质干细胞及向神经样细胞分化的研究

目的目前尚缺乏标准的骨髓间充质干细胞（BMSCs）的分离方法,实验通过全骨髓培养法分离纯化骨髓间充质干细胞,并诱导分化为神经样细胞,以寻找一种简便、实用的分离方法。方法取大鼠骨髓,全骨髓培养法结合差速贴壁法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,传代扩增。倒置相差显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态及生物学特点,免疫组化染色鉴定细胞。用MTT法间接测定不同代数细胞活力。诱导分化,先用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）预诱导24h,然后加入丁羟基茴香醚诱导（BHA）和二甲基亚砜（DMSO）诱导。观察诱导过程中细胞的形态变化,并用免疫组化染色法鉴定细胞。结果全骨髓培养法成功分离培养BMSCs,免疫荧光染色示CD90、CD71、CD106表达阳性,CD45阴性。MTT法检测细胞活力示2、4、6代细胞于酶标仪490nm波长处吸光度值均高于第8、10代细胞。细胞经诱导后,细胞呈神经样细胞形态,并且神经元特异性表面标志β微管蛋白（β-Ⅲ-Tubulin）、巢蛋白（Nestin）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）表达阳性。结论采用全骨髓培养法可获得较纯化的骨髓间充质干细胞,其在适宜的诱导分化条件下可诱导分化为神经样细胞。     

骨髓干细胞应用于肝脏疾病的治疗

最近许多研究已经报道了骨髓干细胞在正常肝脏及一些肝脏病理条件下能够分化为有功能的肝细胞和胆管细胞且可修复受损肝脏.综述骨髓源性肝脏干细胞动物模型的证据、可能的机制和条件、目前争论的问题以及未来临床应用细胞移植治疗肝病的方式等.     

骨髓干细胞应用于肝脏疾病的治疗

最近许多研究已经报道了骨髓干细胞在正常肝脏及一些肝脏病理条件下能够分化为有功能的肝细胞和胆管细胞且可修复受损肝脏。综述骨髓源性肝脏干细胞动物模型的证据、可能的机制和条件、目前争论的问题以及未来临床应用细胞移植治疗肝病的方式等。     

大鼠骨髓间充质干细胞的培养及示踪优化

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)的标记和示踪方法,优化示踪技术。方法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,通过流式细胞仪鉴定细胞表面抗原(CD29、CD34、CD45、CD90),分别用BrdU、DAPI以及GFP 3种方法标记干细胞,DAPI和GFP标记率直接通过荧光显微镜进行鉴定,BrdU标记率通过细胞免疫化学法鉴定,比较3种示踪技术的优缺点。结果流式细胞仪鉴定结果显示MSCs CD29、CD90表达阳性,CD34、CD45表达阴性。3种标记方法对细胞均未显示明显毒性。终浓度10μmol/L BrdU标记48h、终浓度1μg/ml DAPI标记12h分别为其最佳标记浓度及时间。感染复数MOI=8时,GFP慢病毒感染MSCs 12h,感染率可达90%以上。结论 GFP基因转染是一种稳定、可靠、安全的标记方法,对成体干细胞的示踪有重要价值。     

骨髓间充质干细胞在肺损伤大鼠肺组织的分化

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞的可能性.方法 将SD大鼠MSCs用DAPI标记后注入受体大鼠体内.75只受体大鼠随机分为5组(n＝15):肺损伤组、MSCs治疗组、MSCs对照组、单个核细胞对照组和正常对照组.分别于MSCs、单个核细胞注入受体大鼠体内1、2、4周后观察肺组织结构变化,检测肺组织中植入细胞情况及广谱细胞角蛋白的表达水平.结果 MSCs治疗组大鼠肺组织在各时间点均有少量植入的细胞,并且部分植入的细胞表达广谱细胞角蛋白.MSCs植入后2周大鼠细支气管壁有少量植入的细胞同时表达广谱细胞角蛋白.其余各组未发现植入细胞的标记.结论 MSCs可在损伤的大鼠肺组织中分化为肺泡上皮细胞和支气管上皮细胞.     

人胚胎骨髓间充质干细胞的分离与鉴定

目的：摸索分离和鉴定高纯度的人胚胎骨髓间充质干细胞。方法：采用密度梯度离心法，分离含有间充质干细胞的人胚胎骨髓细胞悬液，获得人胚胎骨髓间充质干细胞。用流式细胞仪检测获得的细胞中人胚胎骨髓间充质干细胞含量。结果：获得的细胞中人胚胎骨髓间充质干细胞含量达85％。结论：密度梯度离心法分离获得的人胚胎骨髓间充质干细胞纯度高。     

经体外预处理人胎儿骨髓间充质干细胞的潜在自身成瘤性

目的评价经体外预处理、启动免疫保护功能的人胎儿骨髓间充质干细胞（hfBMSCs）的潜在自身成瘤性。方法采用流式细胞术检测细胞表型及细胞周期,染色体核型分析检测遗传稳定性,裸鼠皮下接种检测体内成瘤性。结果体外预处理的hfBMSCs呈正常间充质干细胞表型,可通过阻滞细胞周期于G0-G1期抑制hfBMSCs生长增殖（P〈0.05）,对染色体核型无影响,不具备体内成瘤性。结论经体外预处理的人胎儿骨髓间充质干细胞不具有自身成瘤性。     

BMP12诱导恒河猴骨髓间充质干细胞定向分化为腱细胞

目的研究骨髓间充质干细胞定向分化为腱细胞的可能性。方法通过电穿孔法将外源基因BMP12导入骨髓间充质干细胞中，诱导骨髓间充质干细胞定向分化为腱细胞；在形态学和分子生物学水平上对诱导后的细胞加以鉴定。结果光镜下，诱导后的细胞形态发生明显改变；RT-PCR结果表明，诱导后的细胞有BMP12和Collagen Ⅰ的mRNA表达，而没有Coilagen Ⅲ的mRNA表达；诱导后98.39％的细胞呈CD44^ 、HLA-DR^-。结论BMP12能够诱导骨髓间充质干细胞定向分化为腱细胞，间充质干细胞有可能成为肌腱组织工程种子细胞来源之一。