硅胶柱色谱结合高速逆流色谱法分离纯化丹参中丹参酮

目的建立硅胶柱色谱结合高速逆流色谱(HSCCC)法分离纯化丹参中丹参酮的方法。方法丹参粗提物经硅胶柱色谱分离,得到组分F1、F2,分别采用石油醚-醋酸乙酯-甲醇-水(4∶3∶4∶2)、(8∶5∶8∶3)的溶剂系统进行HSCCC分离,下相为流动相,体积流量2.0 mL/min,转速850 r/min,检测波长254 nm,所得产物采用ESI-MS、NMR进行结构鉴定。结果 80 mg组分F1分离得到丹参酮I(14 mg)、二氢丹参酮I(22 mg)、丹参酮IIA(26 mg);80 mg组分F2分离得到二氢丹参酮(11 mg)、三叶鼠尾酮B(15 mg)、隐丹参酮(30 mg);6个化合物进行HPLC分析,质量分数均大于96%。结论硅胶柱色谱结合HSCCC是一种有效的分离制备丹参酮的方法。     

硅胶柱色谱-高速逆流色谱法分离纯化羌活中佛手柑内酯

目的 以羌活的根和根茎为原料,建立硅胶柱色谱-高速逆流色谱(HSCCC)法制备分离羌活中佛手柑内酯的方法.方法 羌活粗提物先经过硅胶柱色谱初步分离,富集目标化合物;组分Q5再经过HSCCC分离,以正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水(5∶5∶4∶5)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相;经气-质及核磁共振氢谱、碳谱鉴定化合物的结构.结果 经过HSCCC分离后,从300 mg Q5样品中一次性分离得到佛手柑内酯37.6 mg,经HPLC检测其质量分数达到99.1％.结论 该方法操作简便、高效,为制备高纯度的佛手柑内酯提供了一条新途径.     

高速逆流色谱分离中藏药甘西鼠尾草脂溶性成分

利用高速逆流色谱对中藏药甘西鼠尾草进行脂溶性成分的分离研究。以石油醚、醋酸乙酯、甲醇、水,按体积比8∶6∶7∶3配制HSCCC用两相溶剂系统,结果表明此条件可用作高速逆流色谱分离甘西鼠尾草中的脂溶性成分,以期为甘西鼠尾草成分的短时间高效分离制备提供新思路和新方法,也为藏药现代化积累一些有意义的经验。     

高速逆流色谱法分离岩黄连中的生物碱类成分

目的:从岩黄连的粗提物中快速分离生物碱类成分。方法:采用高速逆流色谱技术,以正丁醇-乙酸乙酯-水-甲酸(5∶1∶5∶0.01)和正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(5∶5∶1∶9∶0.05)作为两相溶剂系统分离岩黄连中的主要生物碱。结果:经过连续三次色谱分离,从岩黄连的正丁醇粗提物(300 mg)中得到6个纯度较高的生物碱,分别为:scoulerine(3.6 mg,质量分数:71%)、isocorydine(9.2 mg,质量分数:92%)、dehydrocheilanthifoline(5.5 mg,质量分数:85%)、dehydrocavidine(7.5 mg,质量分数:76%)、palmatine(20.4 mg,质量分数:90%)、berberine(20.9 mg,质量分数:97%)。结论:采用高速逆流色谱法制备分离岩黄连中的生物碱,省时、方便、产物得率和纯度较高。     

高速逆流色谱在快速筛选中药天然产物活性成分中的应用

高速逆流色谱结合快速生物活性检测方法,特别适合从中药和天然产物中筛选活性成分。结合本课题组的研究和近年研究进展,本文综述了高速逆流色谱在中药和天然产物中快速筛选活性成分的应用进展。     

高速逆流色谱应用于黄酮类成分分离与纯化研究进展

高速逆流色谱（HSCCC）是一项无固体载体即一种连续高效的新型液-液分配色谱技术,主要利用化合物在溶剂系统中分配系数的差异达到分离目的,在化合物分离以及单体制备等方面有广泛运用。综述了近年来高速逆流色谱技术在分离纯化黄酮苷元和黄酮苷类化合物中的应用,包括高速逆流色谱技术分离纯化已知和未知天然产物黄酮类成分、筛选黄酮活性成分,为今后高速逆流色谱在分离黄酮类化合物中的应用提供借鉴。     

高速逆流色谱法分离制备独活中蛇床子素

目的:以独活粗提物为原料,利用高速逆流色谱法(HSCCC)分离制备高纯度蛇床子素。方法:利用超高效液相色谱(UPLC)分析并优化溶剂体系,选择正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1.5∶2.5∶2∶1.5)为HSCCC溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速3 m L·min-1,主机转速850 r·min-1,进样量200 mg,检测波长323 nm。所接收馏分在50℃减压浓缩,得到蛇床子素单体,应用核磁共振氢谱、碳谱、质谱、红外光谱等进行鉴定,并用UPLC测定其纯度。结果:蛇床子素一次制备量为6.6mg,纯度达到97.1%。结论:高速逆流色谱技术操作简单,分离快速高效,一次制备量大,可以用于独活中高纯度蛇床子素的分离制备。     

高速逆流色谱技术分离纯化藜芦中甾体类生物碱

目的:采用高速逆流色谱(HSCCC)技术对藜芦中的甾体类生物碱进行分离鉴定。方法:以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(5∶5∶3∶7,V/V)为溶剂系统,在转速为850 r·min~(-1)、流速为2.0 m L·min~(-1)、检测波长为280 nm的实验条件下进行分离。结果:从300 mg粗提物中分离得到2.1 mg的藜芦酰棋盘花胺(veratroylzygadenine)和9.3 mg的介芬胺(Jervine),经HPLC分析,其纯度分别为91.34%、98.10%。结论:该方法简便、重现性好、分离量大,适合于甾体类生物碱的分离纯化。     

高速逆流色谱法分离纯化松塔中的化学成分研究

目的为了寻找抗H IV活性单体化合物,研究华山松Pinus armandiiFranch.松塔的化学成分。方法应用高速逆流色谱仪,以正己烷-正丁醇-甲醇-水-乙酸(1:7:1:7:0.15,V/V)上相为固定相,下相为流动相,组成溶剂系统对华山松松塔的提取物行分离纯化。结果分离到两个化合物,根据理化性质和波谱数据,鉴定了它们的化学结构:4-(1,′2′-二羟基异丙基)环己烯甲酸(Ⅰ);4-羟基苯甲酸甲酯(Ⅱ)。结论首次采用制备型高速逆流色谱仪TBE2300A对华山松松塔的成分进行分离纯化,并首次从该属植物中分离化合物Ⅰ和Ⅱ。     

人参中的人参皂苷高速逆流色谱法分离

目的应用高速逆流色谱(HSCCC)分离人参中的人参皂苷,并鉴定分离所得到的化合物。方法以溶剂配比为醋酸乙酯-正丁醇-水-醋酸(4∶1∶3∶0.02,V∶V∶V∶V)作为制备型逆流色谱分离的溶剂系统,以上相为固定相,下相为流动相,流速为1.5 ml.min-1,仪器转速为950 r.min-1,检测波长254 nm,并利用高效液相色谱对分离所得到的组分与标准品进行对照,确定单体皂苷。结果应用高速逆流色谱技术一次性分离得到Re、Rg1、Rg33个人参皂苷单体化合物,经高效液相色谱(HPLC)检测其纯度均达到95%以上。结论高速逆流色谱分离单体化合物具有迅速、简单、重复性好的特点。     

高速逆流色谱分离制备钩吻素子

目的 建立应用高速逆流色谱技术分离纯化中国钩吻中钩吻素子的方法。方法 从中国钩吻中提取得到的钩吻总碱以氯仿-甲醇-0.1 mol/L HCl(4 ∶ 4 ∶ 2 ,V/V/V)为溶剂体系,通过高速逆流色谱进行分离,得到的目标单体采用高效液相色谱分析纯度,核磁共振谱氢谱、质谱分析确证化学结构。结果 进样300 mg钩吻总碱,分离得到生物碱单体为75 mg,经结构鉴定确证为钩吻素子,高效液相色谱分析得到质量分数为99.2 %。结论 高速逆流色谱技术可高效分离纯化钩吻素子。     

黄芩中总黄酮的提取及高速逆流色谱分离纯化

目的探讨中药黄芩中总黄酮的提取方法,并应用高速逆流色谱进行分离纯化,得到纯度较高的总黄酮有效部位。方法采用正交设计法乙醇回流提取得到总黄酮粗提物,再应用高速逆流色谱进行分离纯化。结果最佳提取工艺条件为:60%乙醇提取2次,溶剂量分别为12倍、10倍,时间分别为2 h、1 h,粗提物总黄酮含量达15.8%;高速逆流色谱两相溶剂系统为氯仿-甲醇-水-醋酸(4∶3∶3∶0.1,V/V),进样量为400 mg,得到45 mg纯度达90.2%的总黄酮有效部位。结论本实验应用乙醇回流提取及高速逆流色谱分离纯化可得到纯度较高的黄芩总黄酮有效部位。     

pH区带逆流色谱结合制备液相分离制备大黄根化学成分

目的:运用p H区带逆流色谱和制备液相分离制备大黄根的化学成分。方法:本研究以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶1∶1∶1)作为溶剂系统,上相加入10 mmol·L~(-1)三氟乙酸(TFA)作为固定相,下相加入20 mmol·L~(-1)NaOH作为流动相,转速为850 r·min~(-1),流速为2 m L·min~(-1),检测波长为254 nm,进行初步分离;尾吹液经制备液相进一步分离。结果:从750 mg大黄根粗提物中经一次pH区带逆流色谱分离得到反式桂皮酸(2)85.8 mg和3个蒽醌类化合物:大黄酸(1)34.9 mg,芦荟大黄素(3)52.5 mg和大黄素(4)50.4 mg;经制备液相分离得到大黄酚(5)215.4 mg和大黄素甲醚(6)26.8 mg。经HPLC分析,其纯度分别为95.46%、97.28%、94.75%、95.02%、98.84%、98.12%。结论:大黄根中的化学成分具有有机酸的性质,可以运用p H区带逆流色谱进行分离,特别是与制备液相相结合,实现了不同酸性强度化合物的快速制备分离。     

Isolation and Purification of Isoaloeresin D and Aloin from Aloe vera by High-speed Counter-current Chromatography

Objective To develop an efficient method to isolate and purify the main components isoaloeresin D and aloin from Aloe vera for its industrial production. Methods High-speed counter-current chromatography was used to isolate isoaloeresin D and aloin in a one-step separation from dried crude extract of A. vera. The biphasic solvent system composed of hexane-ethyl acetate-acetone-water (0.2︰5︰1.5︰5) was used at a flow rate of 1.0 mL/min, while the lipophilic phase was selected as the mobile phase and the apparatus was rotated at 840 r/min. The effluent was detected at 254 nm. Results Isoaloeresin D (53.1 mg) and aloin (106.9 mg) were separated from the crude extract (384.7 mg) with the purities of 98.6% and 99.5%, respectively. Conclusion HSCCC is a powerful technique for isolation and separation of chemical composition from aloe.     

Preparative Separation of Four Alkaloids from Gelsemium elegans by High-speed Counter-current Chromatography

Objective To develop an efficient preparative method for the separation of Gelsemium alkaloids from Gelsemium elegans. Methods High-speed counter-current chromatography (HSCCC) with several two-phase solvent systems was investigated for the separation of Gelsemium alkaloids. The purity and structure identification of the purified compounds were performed with HPLC and NMR spectra, respectively. Results In a single operation, 206.6 mg of crude alkaloid sample was separated to yield 28.7 mg of koumine, 24.9 mg of gelsemine, 26.9 mg of humantenine, and 7.2 mg of gelsevirine, with the purities of 97.8%, 95.4%, 97.4%, and 93.5%, respectively. Conclusion A preparative HSCCC method is successfully established for the separation of four Gelsemium alkaloids from G. elegans with a modified two-phase solvent system composed of n-hexane-ethyl acetate-ethanol-0.5% triethylamine-H₂O (3:5:3:4).     

Separation of Five Quinolone Alkaloids from Fruits of Evodia rutaecarpa by High-speed Counter-current Chromatography

Objective To develop a suitable method for the large-scale separation of quinolone alkaloids from the fruits of Evodia rutaecarpa by high-speed counter-current chromatography(HSCCC).Methods Two solvent systems were developed for the separation method.The upper phase was used as the stationary phase,and the lower phase was used as the mobile phase at 35 oC with the flow rate of 2 mL/min and rotation speed of 855 r/min.Results Using the described method,1-methyl-2-undecyl-4(1H)-quinolone(1),evocarpine(2),1-methy-2-[(6Z,9Z)]-6,9-pentade-cadienyl-4-(1H)-quinolone(3),dihydroevocarpine(4),and the mixture(5)of 1-methyl-2-[(Z)-10-pentadecenyl]-4(1H)-quinolone(Va)and 1-methyl-2-[(Z)-6-pentadecenyl]-4(1H)-quinolone(Vb)could be isolated from a petroleum ether extract.They were identified by 1H-NMR,13 C-NMR,and MS/MS,and the purities were 94.3%,95.2%,96.8%,98.3%,and 96.8%,respectively.Conclusion Five quinolone alkaloids from the fruits of E.rutaecarpa could be systematically isolated and purified using HSCCC.The presented method is simple and efficient with good potentials on the preparation of reference substances,especially on the quality control of Chinese materia medica.     

高速逆流色谱在天然产物分离中的方法学研究

高速逆流技术是近20年来发展起来的一种新型的色谱分离技术。本文介绍了高速逆流色谱的发展历程和研究现状，以及近年来该技术在天然产物分离研究方面的创新之处。同时对高速逆流色谱进行了方法学研究，着重探讨了分配系数的测定方法及其与分离度，峰宽等色谱参数之间的关系，详尽地总结了溶剂系统选择的规律，展望了其应用前景。     

高速逆流色谱结合UNIFAC数学模型分离纯化淡竹叶中的槲皮素-3-O-葡萄糖苷

目的:建立一个经济有效的方法用于淡竹叶Lophatherum gracile中槲皮素-3-O-葡萄糖苷的分离纯化。方法:采用高速逆流色谱(high-speed counter-current chromatography,HSCCC)进行分离纯化,所用溶剂体系为乙酸乙酯-正丁醇-水(2∶1∶3),其上相和下相是根据UNIFAC数学模型单独配制,并与传统配制方法配制所得溶剂系统的分离效率进行比较;分离所得产物的纯度经HPLC检测,结构经MS,UV,NMR鉴定。结果:HSCCC使用UNIFAC数学模型单独配制的溶剂系统成功的从竹叶中制备出纯度高于99%的槲皮素-3-O-葡萄糖苷,与传统溶剂系统配制方法相比,节省了乙酸乙酯、正丁醇和水的用量。结论:在淡竹叶中槲皮素-3-O-葡萄糖苷的HSCCC分离过程中,使用UNIFAC单独配制的溶剂系统既可保证较好分离效果,又可节省大量的有机溶剂,减少了资源浪费,益于环保。