糖尿病肾病气阴两虚证大鼠模型肾组织JAK／STAT通路的变化机制*

【内容】目的：观察糖尿病肾病(DN)气阴两虚病证结合大鼠肾组织蛋白酪氨酸激酶/信号转导与转录活化因子(JAK/STAT)通路、IV型胶原蛋白含量的变化,探讨DN气阴两虚证的微观变化机制。方法：复制DN和DN气阴两虚证病证结合模型。分正常(Z)组、DN模型(B)组、DN病证结合模型(BZ)组、DN病证结合模型 益气养阴中药(BZD)组、DN病证结合模型 缬沙坦治疗(BZX)组进行对比研究。实验8周后,放射免疫法定量检测尿微量白蛋白,免疫组化法测肾组织JAK／STAT、IV型胶原蛋白。结果： BZD组尿微量白蛋白明显低于B组、BZ组(P＜0.01)；造模各组JAK／STAT均显著高于Z组(P＜0.01),但BZD组、BZX组却显著低于B组和BZ组(P＜0.05),且JAK1／3、STAT1表达部位和阳性规律相似,可提示它们存在某种关联性。结论： DN气阴两虚证病证结合模型有JAK／STAT高表达而导致信号转导异常的微观机制,益气养阴中药防治DN可能与影响该通路途径有关,说明益气养阴中医对该模型有积极的干预作用。     

基于网络药理学探讨健脾益气方治疗DEN肝癌大鼠的分子机制及关键通路的验证

目的 利用网络药理学分析方法探讨健脾益气方治疗肝癌的活性成分与靶点;并在此基础上利用二乙基亚硝胺(DEN)诱导的肝癌大鼠,对其中筛选出的关键通路白介素-6/信号转导和转录激活因子3(IL-6/STAT3)进行验证.方法 采用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)数据库、中国知网和Swiss Target Prediction平台获取健脾益气方的活性成分和对应靶点;基于Gene Cards、CTD以及gene数据库获取肝细胞癌(HCC)相关靶点;将疾病相关靶点和药物靶点取交集后得出潜在靶点,导入Cytoscape软件绘制活性成分-靶点网络图;并利用STRING数据库对潜在靶点进行蛋白相互作用(PPI)网络构建与分析,以获取核心靶点.采用腹腔注射DEN[70 mg/(kg·d)]制备肝癌大鼠模型.将大鼠随机分为正常组,模型组,健脾益气方低、中、高剂量组(5.25、10.5、21 g/kg),STAT3抑制组(C188-9,4.5 mg/kg)和糖蛋白130(gp130)抑制组(SC144,4.5 mg/kg),均连续干预4周.采用HE染色法观察大鼠肝脏组织病理形态学变化;采用RT-qPCR法检测大鼠肝脏组织IL-6、gp130、Janus激酶1(JAK1)、Janus激酶2(JAK2)和STAT3的mRNA表达水平;采用ELISA法检测大鼠血清IL-6含量;采用Western Blot法检测大鼠肝脏组织gp130、JAK1、p-JAK1、JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白表达水平.结果 通过网络药理学分析获得64个活性成分和146个潜在靶点,这些分子参与的信号通路主要与IL-6/STAT3有关,且STAT3是其中潜在的核心靶点.动物实验结果显示,与正常组比较,模型组大鼠IL-6和STAT3 mRNA和蛋白质水平,及p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3水平均明显上调(P＜0.05或P＜0.01).与模型组比较,健脾益气方中、高剂量组,及STAT3抑制组和gp130抑制组大鼠血清IL-6含量,肝脏组织IL-6、gp130和STAT3 mRNA表达水平,gp130和STAT3蛋白水平,及p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3水平均降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 健脾益气方可通过多成分、多靶点、多通路发挥治疗肝细胞癌的作用,而下调IL-6/STAT3炎症信号可能是健脾益气方治疗HCC的重要途径之一.     

滋肾活血法对糖尿病肾病大鼠肾组织Ⅳ-C及MMPs/TIMPs系统的影响

目的 观察活血降糖胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)蛋白表达及MMPs/TIMPs系统作用的影响.方法 将SD雄性大鼠复制为DN动物模型,筛选DN成模大鼠,随机分成模型(DNM)组、中药(HX)组、西药(IR)组,并随机设正常对照(NC)组,分别予中西药物干预;8周后处死大鼠取肾组织,以免疫组织化学方法测定IV-C、MMP-9、MMP-2及TIMP-1、TIMP-2的蛋白表达,计算积分光密度及面密度比值.结果 HX组和IR组的Ⅳ-C免疫组织化学染色面密度及积分光密度较DNM组降低,MMP-9、MMP-2免疫组织化学染色面密度及积分光密度较DNM组升高,DNM组TIMP-1、TIMP-2与HX组和IR组比较呈强阳性表达,HX组和IR组染色面积及积分光密度均较DNM组降低,差异有统计学意义(P＜0.01);MMPs/TIMPs比值与Ⅳ-C免疫组织化学染色面积呈负相关(r1=-0.929,r2=-0.908,P＜0.01).结论 滋肾活血中药——活血降糖胶囊可能通过调节肾组织MMPs/TIMPs系统蛋白表达,改善Ⅳ-C代谢,延缓DN肾小球硬化进程,对DN肾脏发挥保护作用.     

益气养阴、祛瘀生新疗法治疗临床期糖尿病肾病的疗效观察及机理探讨

【目的】观察益气养阴、祛瘀生新中药治疗气阴两虚、瘀阻肾络型临床期糖尿病肾病(DN)的疗效,并探讨其作用机理。【方法】采用随机数字表法将80例气阴两虚、瘀阻肾络型DN患者按3∶1随机分为治疗组(60例)和对照组(20例),2组西医治疗措施相同(包括控制血糖、降血压、降血脂、优质低蛋白饮食、纠正水电解质紊乱和调节酸碱平衡、防治并发感染等),治疗组加服益气养阴、祛瘀生新中药(基本方:黄芪、桑椹子、玄参、当归、丹参、大黄、玉米须、川芎等),系统观察2组的临床症状、空腹血糖、肾功能、24 h尿蛋白量、血液流变学指标、血脂、血纤维蛋白原、血浆内皮素(ET-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)含量的变化。【结果】益气养阴、祛瘀生新中药能明显改善患者的症状和体征,有效降低24 h尿蛋白量,改善肾功能不全代偿期与失代偿期的肾功能指标,使肾功能不全衰竭期与尿毒症期的肾功能指标趋于稳定;降低患者血脂、空腹血糖水平,改善血液流变学相关指标,降低血IL-1、ET-1水平(P<0.05或P<0.01);其综合疗效优于对照组(P<0.05)。【结论】益气养阴、祛瘀生新中药治疗气阴两虚、瘀阻肾络型临床期DN具有较好疗效,其机理可能与降低血脂,改善血液流变学指标,减少尿蛋白排泄,降低血IL-1、ET-1等肾小球硬化相关因子水平有关。     

抵当汤对糖尿病大鼠心肌组织JAK2/STAT3信号通路的影响

目的 探讨抵当汤及其拆方对糖尿病大鼠肥大心肌细胞JAK2/STAT3信号通路的影响。〖JP〗方法 单次注射链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型,将糖尿病大鼠随机分为模型组、抵当汤组、桃仁大黄组、水蛭虻虫组和缬沙坦组,以正常雄性SD大鼠作为正常对照组。正常对照组和模型组给予蒸馏水灌胃,其余各组大鼠接受相应药物灌胃,连续8周。采用Western blot法检测心钠素（atrial natriuretic peptide,ANP）、心肌组织JAK2和STAT3蛋白表达,采用实时荧光定量PCR法检测JAK2、STAT3 mRNA表达。结果 与正常对照组比较,模型组ANP、JAK2、STAT3蛋白以及JAK2、STAT3 mRNA表达水平均显著上调（P<0.05）。水蛭虻虫拆方和桃仁大黄拆方对糖尿病大鼠心肌组织ANP、JAK2和STAT3蛋白表达的主效应均具有统计学意义（P<0.05）,两者的交互作用均无统计学意义（P>0.05）。水蛭虻虫拆方和桃仁大黄拆方对糖尿病大鼠心肌组织JAK2、STAT3 mRNA表达的交互作用具有统计学意义（P<0.05）。缬沙坦组、抵当汤组及两个抵当汤拆方组ANP、JAK2蛋白及JAK2 mRNA表达水平比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 抵当汤延缓糖尿病大鼠心肌细胞肥大的机制与抑制JAK2/STAT3信号通路有关,其拆方对JAK2、STAT3 mRNA表达的效应存在相互影响。     

加味消渴康对糖尿病肾病大鼠丝裂原活化蛋白激酶P38及转化生长因子-β1表达的影响

目的:探讨加味消渴康对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织丝裂原活化蛋白激酶P38(P38 MAPK)及转化生长因子-β1(TGFβ1)表达的影响.方法:采用单侧肾切除加链脲佐菌素诱导的DN模型,分为正常组、模型组、中药组和西药组.中药组予加味消渴康灌胃,西药组予氯沙坦灌胃,正常组及模型组每日灌服等量蒸馏水,共灌胃12周.各组大鼠于第12周末处死取出肾脏,观察肾组织病理学改变以及P38MAPK和TGF-β1的表达.结果:加味消渴康对DN大鼠肾组织病理损伤有较好的改善作用,并能降低肾组织P38MAPK及TGF-β1的表达.结论:加味消渴康对DN有一定的治疗作用.     

2型糖尿病大血管病变患者血清诱导的人脐静脉内皮细胞中JAK2/STAT3信号通路的表达

目的 探讨Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路在2型糖尿病大血管病变发病机制中的作用.方法 取健康志愿者、单纯2型糖尿病患者和2型糖尿病大血管病变患者的血清孵育人脐静脉内皮细胞(HUVEC)24 h,通过给予JAK2特异性抑制剂AG490阻断JAK2/STAT3信号通路,并将细胞按不同处理方式分为对照组(NC组)、单纯糖尿病组(DM组)、糖尿病大血管病变组(DV组)、单纯糖尿病+AG490组(DM+AG490组)及糖尿病大血管病变+AG490组(DV+AG490组),各30例.采用实时定量PCR技术检测各组细胞JAK2、STA T3、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体(FLT1)mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测JAK2、STAT3和磷酸化STAT3 (p-STAT3)蛋白表达量.结果 与NC组比较,DM组和DV组HUVEC细胞内JAK2、STA T3mRNA和JAK2、p-STAT3的蛋白表达水平均上调(P＜0.05),且DV组JAK2、STA T3 mRNA和JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均高于DM组(P＜0.05).DM+AG490组和DV+AG490组的JAK2、STA T3 rnRNA和JAK2、p-STAT3蛋白表达水平分别低于DM组、DV组(P＜0.05).与NC组和DM组比较,DV组VEF和FLT1 mRNA的表达水平上调(P＜0.05);而与DV组比较,DV+AG490组VEGF和FLT1 mRNA的表达水平均下调(P＜0.05).结论 JAK2/STAT3信号通路可能参与2型糖尿病大血管病变的发病过程.     

保肝宁对肝纤维化模型大鼠肝组织瘦素受体及其JAK2/STAT3信号通路的影响

[目的]探讨保肝宁抗肝纤维化的作用机制.[方法]将50只Wistar大鼠随机分为5组:正常组,模型组,保肝宁高、低剂量组(剂量分别为35.4、17.7 g/kg),秋水仙碱组(剂量为0.11mg/kg);采用复合因素复制肝纤维化大鼠模型,提取肝组织蛋白,采用Western Blot法检测肝组织瘦素受体(OB-Rb)、JAK2、STAT3表达情况.[结果]正常组蛋白表达量最少,各药物处理组蛋白条带颜色均较浅,模型组条带颜色最深.与正常组比较,模型组OB-Rb、JAK2、STAT3蛋白表达程度均增高;与模型组比较,各药物处理组的OB-Rb、JAK2、STAT3蛋白表达明显降低;保肝宁高、低剂量组与秋水仙碱组比较,OB-Rb、JAK2、STAT3蛋白表达明显降低.[结论]保肝宁抗肝纤维化的作用可能与其能抑制OB-Rb表达,进而抑制JAK2/STAT3信号通路有关.     

益气养阴活血中药对糖尿病肾病大鼠Notch/Hes1通路与血管内皮CD34、CD144的影响

目的观察益气养阴活血中药对糖尿病肾病大鼠Notch/Hes1通路与血管内皮CD34、CD144作用机制。方法采取左肾切 除术+高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射STZ复制早期糖尿病肾病大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组、西药贝拉普利 组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,设正常对照组,药物干预8周。观察24 h尿白蛋白、HE染色肾组织病理、免疫 组化肾组织Hes1、Western blot法检测CD34、CD144的表达。结果与正常组比较,模型组24 h尿白蛋白、Hes1、CD34、CD144的 含量比较均有明显差异（P<0.05）;与模型组比较,中药高剂量组、中剂量组能降低24 h尿蛋白（P<0.05）,中药各剂量组均能明显 降低肾组织Hes1、CD34含量（P<0.05）,中药高剂量组均能明显降低肾组织CD144含量（P<0.05）;与西药组比较,中药各剂量组 均能降低CD34（P<0.05）,中药低剂量组降低CD144（P<0.05）。病理观察模型组大鼠出现肾小球硬化、萎缩,系膜基质增多、系 膜出现增厚增宽并可见结节样增生等改变;中药高、中剂量组对上述病理改变有积极改善。结论益气养阴活血中药可以降低 模型大鼠肾组织Hes1和CD34、CD144,发挥对肾功能的保护作用,延缓DN的发展。     

基于彩色多普勒对2型糖尿病肾病气阴两虚证客观化的初步研究

目的探讨2型糖尿病肾病气阴两虚证与彩色多普勒部分客观化指标的相关性,为其客观化研究提供新的理论。方法选择2型糖尿病肾病中气阴两虚证患者209例,正常对照组50例。首先采用二维图像观察DN肾脏的大小及实质回声;再用CDFI观察肾血流灌注程度;再用脉冲波多普勒观察主肾动脉、段间动脉及叶间动脉血流频谱,测量收缩期峰值血流速度(VS)、舒张期末血流速度(VD)、平均血流速度(VM)、搏动指数(PI)、阻力指数(RI)值。结果 (1)气阴两虚患者肾脏体积基本正常,与正常组比较,差异不显著(P0.05)。(2)彩色多普勒观察到的肾实质回声与气阴两虚证存在一定的相关性,R_(气阴两虚)=0.4046±0.0404,且气阴两虚证与正常对照组对比,一致性中度。(3)肾动脉血流的灌注程度与气阴两虚证存在的相关性,R气阴两虚=0.4146±0.0399。(4)MRA、SRA、IRA的血流频谱指标VS、VD、VM、PI、RI与气阴两虚证存在相关性;气阴两虚证与正常对照组比较,差异显著或非常显著(P0.05,P0.01)。结论 2型糖尿病肾病气阴两虚证与肾脏的大小、实质回声、血流灌注的程度及肾动脉各分支的血流动力学存在一定的相关性。     

消银解毒方颗粒对Jurkat T细胞内JAK1/STAT3信号通路作用机制的研究

目的探讨消银解毒方颗粒对人急性T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat T)细胞内酪氨酸激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的调控作用。方法以植物血凝素(PHA)和白细胞介素-6(IL-6)共同诱导Jurkat T淋巴细胞建立血热证银屑病T细胞异常活化病理细胞模型,将模型细胞接种于24孔板,制备消银解毒方颗粒、凉血方颗粒(消银解毒方颗粒拆方)、解毒方颗粒(消银解毒方颗粒拆方)、阿维A(阳性对照)、蒸馏水(阴性对照)的药理血清,择取最佳浓度药理血清及JAK/STAT信号通路阻断剂Filgotinb(GLPG0634)作用于模型细胞48 h,同时设空白细胞组。收集各组细胞,采用蛋白质印迹(Western blot)、实时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)法检测JAK1、STAT3、糖蛋白(GP)130的蛋白表达与基因转录水平。结果模型组的JAK1、STAT3、GP130的蛋白和mRNA表达较空白组明显增高(P0.01)。与模型组相比,各实验组磷酸化酪氨酸溶酶(p JAK)1/JAK1、磷酸化信号转号和转录激活因子(p STAT)3/STAT3、GP130蛋白表达量均明显降低(P0.01);与模型组相比,各实验组JAK1、STAT3、GP130的mRNA表达量均降低(P0.05或P0.01)。结论消银解毒方颗粒能够通过抑制JAK1/STAT3信号通路的开放进而抑制T细胞异常活化,以发挥其治疗银屑病的作用。     

益气养阴消癥通络中药对高糖联合AngⅡ培养大鼠肾小球系膜细胞分泌转化生长因子β1和结缔组织生长因子的影响

目的探讨益气养阴消癥通络中药对高糖联合血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)培养的大鼠肾小球系膜细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的影响,为进一步研究其防治糖尿病肾病(DN)的作用机理提供依据。方法原代培养肾小球系膜细胞(MCs),实验共分为5组:低糖对照组、高糖组、高糖+AngⅡ组、中药血清组、厄贝沙坦血清组。于第5代时,予高糖、高糖联合AngⅡ刺激,并同时进行益气养阴消癓通络中药及厄贝沙坦西药血清干预,48 h后ELISA法检测细胞上清TGF-β1、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)的蛋白含量,Western blot检测CTGF蛋白表达水平。结果与低糖对照组比较,其他组TGF-β1、CTGF、FN、LN表达均明显升高;与高糖+AngII组比较,厄贝沙坦血清、中药血清组TGF-β1、CTGF、FN、LN表达均明显下降(P<0.01)。结论益气养阴消癥通络中药可能通过抑制CTGF表达而有效降低TGF-β1的水平,从而抑制细胞外基质的合成,发挥其保护肾脏的作用。     

糖尿病肾病伴睡眠障碍患者的中医体质分布与睡眠质量的相关性研究

【目的】探讨糖尿病肾病(DN)伴睡眠障碍患者的中医体质分布特征,以及中医体质与睡眠质量之间的关系,为DN的防治提供客观依据。【方法】于2015年10月至2018年10月,采用横断面调查方法,对300例DN患者采用匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)进行睡眠质量评估,根据PSQI评分结果分为DN睡眠障碍组143例和DN非睡眠障碍组157例,比较2组患者的中医体质分布、病情进展程度等情况,并对DN睡眠障碍组患者进一步分析中医体质与睡眠质量、睡眠障碍的自觉症状之间的内在联系。【结果】(1)随着DN病情的进展,睡眠障碍的发生率呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)DN睡眠障碍组的中医体质分布以气虚质、阴虚质为主,与DN非睡眠障碍组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)二分类Logistic回归分析结果显示,气虚质(OR=5.34)、阴虚质(OR=7.70)、气郁质(OR=6.00)和血瘀质(OR=14.00)是DN伴发睡眠障碍的高危体质,差异均有统计学意义(P<0.01)。(4)DN伴睡眠障碍组患者主要表现为入睡困难(占59.3%)、多梦(占36.0%)、易醒(占33.0%)和早醒(占32.3%)。【结论】随着DN病情进展,睡眠质量呈下降趋势;睡眠质量和中医体质有一定的相关性,气虚质、阴虚质、气郁质和血瘀质的DN患者更易发生睡眠障碍。     

基于Janus激酶/信号转导和转录激活因子信号通路的乙胺丁醇片对肺结核大鼠模型的作用机制

目的 探讨乙胺丁醇片(EMB)对肺结核(PTB)大鼠的治疗作用及其作用机制是否与Janus激酶(JAK)/信号转导和转录激活因子(STAT)信号通路有关。方法 将60只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、PTB组、PTB+EMB组(30 mg/kg)、PTB+EMB+Colivelin(JAK/STAT通路激活剂)组(30 mg/kg+1 mg/kg),每组15只。除对照组外,其他组大鼠均通过注射0.2 ml 5 mg/ml的结核杆菌悬液构建PTB模型。建模成功后,进行连续4周(1次/d)的给药处理,检测大鼠在给药第1、14、28天时的体重变化;计数结核分枝杆菌菌落数;HE染色检测大鼠肺组织病理变化;ELISA法检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α、IL-1β、γ干扰素水平;流式细胞术检测各组大鼠外周血中T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平;16S rRNA测序检测各组大鼠肠道菌群属水平的相对丰度;Western blot检测JAK/STAT通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,PTB组大鼠体重减轻(第14、28天时)、结核分枝杆菌菌...     

糖尿病肾病患者的中医证型及其与实验室指标的相关性研究

背景　糖尿病肾病（DN）的中医证型与实验室指标的相关性研究已经取得了一定成果,中医证型与相关实验室指标确实存在一定的相关性,这为规范化、标准化DN的中医药临床诊疗体系提供了一定的理论基础。但目前DN的中医证候诊断标准尚未统一化、标准化。目的　研究糖尿病肾病患者的中医证型及其与实验室指标的相关性。方法　收集2017年1月-2018年3月广州中医药大学第一附属医院、增城市中医医院肾病科与内分泌科收治的门诊及住院患者125例为研究对象,其中T2DM 31例,DNⅢ期31例,DNⅣ期32例,DNⅤ期31例;另募集同期性别、年龄相当的健康体检人员30例为健康组。统计各组本证、标证数量与比例,并检测各证型组尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、胱抑素C（CysC）、估算肾小球滤过率（eGFR）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、血清清蛋白（ALB）、尿蛋白定量、血液流变学指标。结果　T2DM患者主证主要表现为阴虚燥热证〔32.2%（10/31）〕与气阴两虚证〔58.1%（18/31）〕,DNⅢ期主要表现为脾肾气虚证〔48.4%（15/31）〕,DNⅣ期主要表现为阴阳两虚证〔46.9%（15/32）〕与脾肾气虚证〔31.2%（10/32）〕,DNⅤ期主要表现为阴阳两虚证〔64.5%（20/31）〕。T2DM和DNⅢ~Ⅴ期患者标证均主要表现为湿证和瘀证。DNⅢ~Ⅴ期各组患者肾功能指标、ALB、尿蛋白定量比较,差异均具有统计学意义（P<0.05）,其中BUN、Scr、CysC、尿蛋白定量排序为阴虚燥热证<气阴两虚证<脾肾气虚证<阴阳两虚证,eGFR、ALB排序为阴阳两虚证<脾肾气虚证<气阴两虚证<阴虚燥热证。湿证、痰证、瘀证三组之间各实验室指标比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。Spearman秩相关分析显示,主证证型与BUN、Scr、CysC、尿蛋白定量呈正相关关系,与eGFR、ALB呈负相关关系（P<0.05）。结论　DN随着疾病分期的进展,中医证型主要表现为阴虚燥热-气阴两虚-脾肾气虚-阴阳两虚;DN患者的BUN、Scr、CysC、eGFR、ALB、尿蛋白指标与中医证型存在一定的相关性。     

咳喘穴位敷贴对哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响

目的 观察咳喘穴位敷贴对慢性支气管哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、咳喘穴位敷贴组、地塞米松组,每组10只.除对照组外,其余各组采用卵清蛋白致敏并激发的方法 制备慢性支气管哮喘大鼠模型.造模成功后,咳喘穴位敷贴组大鼠相应穴位贴敷咳喘穴位敷贴进行干预治疗,地塞米松组大鼠腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液0.5 mg/(kg·d).治疗14 d后取大鼠肺组织,HE染色观察肺组织形态学变化,免疫组织化学、Real time PCR检测肺组织JAK1和STAT6蛋白及mRNA的表达水平.结果 与对照组相比,哮喘模型组大鼠肺组织可见大量炎性细胞浸润,气道内有大量分泌物,肺泡结构紊乱;与哮喘模型组相比,咳喘穴位敷贴组和地塞米松组大鼠肺组织炎性细胞浸润减少、气道分泌物减少、肺泡排列规则.与对照组相比,哮喘模型组大鼠气道上皮JAK1、STAT6蛋白和mRNA表达明显升高(P<0.01);与哮喘模型组相比,咳喘穴位敷贴组和地塞米松组大鼠气道上皮JAK1、STAT6蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01),JAK1、STAT6 mRNA表达下调(P<0.01).结论 咳喘穴位敷贴能够改善支气管哮喘大鼠支气管及肺组织炎症,其机制可能与降低JAK1、STAT6 mRNA和蛋白表达有关.     

JAK2/STAT3信号通路在白藜芦醇抗肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究

目的：：探讨JAK2/STAT3信号通路在白藜芦醇抗肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制。方法：健康雄性SD大鼠40只随机分为4组,假手术对照(SC)组、肝脏缺血再灌注(HIR)组、白藜芦醇处理(Res+HIR)组、JAK2/STAT3通路阻断剂AG490(Res+AG490+HIR)组。建立急性肝脏缺血再灌注损伤模型,于再灌注6h后收集动物血液和肝脏标本。检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(AKP)及炎症因子IL-6、TNF-α、IL-10、TGF-β的变化。肝脏组织HE染色,光镜下观察肝组织形态学变化。结果：与HIR组相比,Res+HIR组大鼠肝组织病理学变化明显改善,血清中反映肝脏功能学的指标ALT、AST及AKP的浓度明显降低,同时血清中抗炎因子IL-10和TGF-β含量升高,而促炎因子IL-6和TNF-α含量降低;使用JAK2/STAT3通路阻断剂AG490后,肝组织病理学改变明显,ALT、AST及AKP的浓度明显升高,IL-10和TGF-β含量降低,而IL-6和TNF-α含量明显升高。结论：白藜芦醇对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用可能是通过激活JAK2/STAT3信号通路,改变再灌注过程中炎性反应实现的。     

益气养阴活血方治疗2型糖尿病气阴两虚夹瘀证临床观察

目的 观察益气养阴活血方治疗2型糖尿病气阴两虚夹瘀证的临床疗效。方法 将60例2型糖尿病气阴两虚夹瘀证患者随机分为观察组和对照组,每组30例。两组患者均予饮食、运动等健康教育,并予西药控制血糖,观察组患者同时口服益气养阴活血方。治疗前和治疗1周后分别检测两组患者空腹血糖（fasting plasma glucose, FPG）、血糖水平标准差（standard deviation of blood glucose,SDBG）和空腹血糖变异系数（coefficient of variation of fasting plasma glucose,CV-FPG）,同时观察两组患者治疗4周后临床症状的改善情况。结果 治疗后两组FPG、SDBG和CV FPG均较治疗前显著降低（P<0.05）,观察组FPG、SDBG降低程度显著大于对照组（P<0.05）;观察组患者治疗后口渴多饮、乏力倦怠、多食易饥、五心烦热和肢体麻木的改善程度均明显优于对照组（P<0.05）;观察组中医证候疗效明显优于对照组（P<0.05）。结论 益气养阴活血方能有效降低2型糖尿病气阴两虚夹瘀证患者的空腹血糖和血糖波动,改善其临床症状。