荧光标记多糖及其体内药动学应用进展

多糖研究和应用越来越普及,多糖荧光标记技术也在不断发展。由于多糖自身分子结构的特点,目前尚无标准的多糖体内吸收代谢的检测方法,使多糖在生物医药领域的应用受到限制。体外荧光标记技术已广泛用于多糖体内药动学研究。本文总结了目前用于多糖标记的各种荧光素,及其在多糖口服、静脉注射和腹腔注射给药的体内药动学研究中的应用。并进一步结合荧光标记多糖在体内药动学研究中的优势,阐述多糖口服吸收机制,增加多糖口服吸收的策略,影响多糖药动学的因素,以及多糖体内降解机制等,旨在为多糖体内药动学研究提供参考。     

聚集诱导发光效应相关的胶束的应用研究进展

摘要：聚集诱导发光（aggregation-induced emission, AIE）效应有独特的光学性质、良好的稳定性和优异的成像性能。AIE分子或基团可用于构建胶束给药系统,有助于跟踪药物的递送过程,监测药物的分布、激活和疗效;另外,具有AIE效应的胶束可充当荧光探针,能实现对药物和污染物实施高灵敏度的选择性检测。本文总结了近年来AIE相关胶束的最新研究进展,展示其在疾病治疗和定量分析的应用。     

新型发光材料在肿瘤标志物免疫分析检测中的应用

肿瘤标志物在癌症诊断、治疗和监测中具有至关重要的意义。但是肿瘤标志物早期诊断的敏感性较低,从而降低了其临床实用性,因此需要开发灵敏度高、特异性好的检测方法。荧光免疫分析方法因其灵敏度高、特异型好、操作简单、可实现实时高通量快速筛选等优势,在生物医学、临床诊断等领域得到了广泛应用。本文对多种新型发光材料的分析性能进行了综述,阐述了这些新型材料在荧光免疫技术中的应用,并对该技术在肿瘤标志物早期诊断中的不断优化进行了展望。     

氧氟沙星与DNA的相互作用

目的:用荧光光谱技术研究在生理条件下氧氟沙星与DNA分子间结合作用的机理。方法:在pH 7.20条件下,测量不同DNA浓度下氧氟沙星的荧光激发与发射光谱。结果:DNA存在能使氧氟沙星荧光猝灭,测得该反应的结合常数K=2448 L·mol-1。结论:氧氟沙星与DNA结合生成了不发光的复合物导致氧氟沙星的荧光猝灭。     

多糖的修饰与药理作用的关系

多糖具有很多作用,但是部分多糖从植物中提取后没有活性,需要经过修饰才能发挥出作用,有些多糖水溶性不好,可以增加易溶于水的基团,或把分子量较大的多糖降解成较小的多糖,从而增加多糖的水溶解能力。本文主要是阐明多糖修饰的各种方法来改变多糖的性质,而使多糖能更好地发挥药理作用。     

基于Cre-LoxP系统的B细胞特异性荧光报告基因小鼠模型的构建及鉴定

目的 应用Cre-LoxP重组酶系统构建B细胞特异性表达tdTomato蛋白的荧光报告基因小鼠。方法 在Gt(ROSA)26Sor(Rosa26)位点插入1个由CAG启动子驱动的报告基团，其LoxP侧翼设计有STOP盒，可阻止tdTomato荧光蛋白表达，经与CD19-Cre工具小鼠交配繁殖获得tdTomato^CD19-Cre小鼠，Cre重组酶特异性识别LoxP序列，删除STOP盒，从而使B细胞特异性表达tdTomato荧光蛋白。利用PCR进行基因型鉴定。通过流式细胞术和脑膜免疫荧光分别检测野生型对照组小鼠和tdTomato ^CD19-Cre荧光报告基因小鼠脾和脑膜B细胞中tdTomato红色荧光蛋白表达。结果 基因型为tdTomato^F/-CD19-Cre⁺或tdTomato ^F/FCD19-Cre⁺的小鼠为B细胞特异性表达tdTomato天然红色荧光蛋白的荧光报告基因小鼠。而对照组小鼠基因型为tdTomato ^F/-CD19-Cr...     

荧光猝灭法测定生物体内甲硝唑血药浓度

目的　测定甲硝唑的血药浓度。方法　基于甲硝唑对荧光试剂芘丁酸的荧光强度有猝灭作用 ,采用荧光猝灭法 ,测定其在人血浆中的浓度。结果　本法精密度高 ,重现性好 ,检测限低。结论　本方法可用于临床对甲硝唑血药浓度的监测及对甲硝唑药代动力学研究     

RNR2调控的重组绿色荧光蛋白酵母细胞的构建及其对化学诱变原的高通量筛选

目的建立RNR2调控的酵母增强绿色荧光蛋白(yEGFP)发光酵母细胞,高通量筛选化学诱变原。方法用PCR方法从酵母(W303-1A)基因组扩增RNR2启动子,经酶切后,用T4连接酶与线性化的含酵母嗜好遗传密码子的yEGFP报告载体相连,连接产物转化子质粒经酶切和测序鉴定,构建RNR2调控的yEGFP酵母报告载体。用醋酸锂方法将其转化于W303-1A酵母细胞,从而构建成RNR2调控的yEGFP发光酵母细胞(W303-1A/RNR2-yEGFP)。用甲磺酸甲酯0～400mg·L-1分别作用于该发光酵母细胞0,4,8,12,16和20h后,于倒置荧光显微镜下观察荧光,用多功能酶标仪检测其荧光发光强度,选择最佳诱导时间;用不同浓度的DNA烷化剂、DNA断裂剂和DNA合成酶抑制剂作用于该重组细胞16h,检测其荧光发光强度,考察W303-1A/RNR2-yEGFP细胞对各种化学诱变原的敏感性。结果经测序确定W303-1A/RNR2-yEGFP构建成功。选择16h为最佳诱导时间;各种化学诱变原与W303-1A/RNR2-yEGFP细胞作用16h后,与DNA发生结合的化合物中放线菌素D和溴乙锭诱导的发光度与对照组无明显差别,发光倍数<1.5;与DNA发生烷基化的化合物中,甲磺酸甲脂200mg·L-1诱导的细胞发光度最强,发光倍数为5.21,瘤可宁200μg·L-1诱导的发光倍数为1.9,而丝裂霉素C的发光度与对照组无明显差别。在使DNA发生断裂的诱变原中,顺铂250mg·L-1诱导的细胞最高发光倍数为3.7,其次4-硝基-N-氧化喹啉3.1mg·L-1、博来霉素12.5mg·L-1和福来霉素200mg·L-1,最高诱导倍数分别为2.35,2.26和2.53;在抑制DNA合成酶或拓扑异构酶的诱变原中,5-氟尿嘧啶500μg·L-1、羟基脲570.45mg·L-1和喜树碱30mg·L-1所诱导的细胞最大发光倍数分别为2.36,2.65和2.53;而非基因毒性化合物秋水仙碱、刀豆氨酸和四环素诱导的发光度与对照无明显差别。结论该重组发光酵母细胞可用于对多数造成DNA断裂或合成阻断的化学诱变原筛选,具有快速、方便和高通量等特点。     

时间分辨荧光免疫法检测甲胎蛋白的应用及其临床意义

以往测定甲胎蛋白（AFP）用ELISA法，但是这种方法只能达到半定量，而且还有钩状效应。第二种方法是酶联荧光（ELFA）法，虽然能定量检测AFP，但以常用荧光素作为标记物，往往受血清成分、试管、仪器组件等的本底荧光干扰，以及激发光源的杂色光的影响，使灵敏度受到很大限制。时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）是针对这些缺点加以改进的一种新型检测技术。其基本原理是以镧系元素铕（Eu）螯合物作为荧光标记物，利用这类荧光物质寿命长的特点，延长荧光测量时间，待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再行测定，所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光，从而有效排除非特异性本底荧光的干扰。本研究应用TR-FIA法测定AFP，并与ELFA法作比较，另外还对其临床意义作初步探讨，现报告如下。     

系列黄酮化合物与血清白蛋白结合及其结构相关性

目的比较具有不同取代基基团的八种黄酮类化合物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用及与其结构的相关性。方法基于黄酮化合物能够猝灭色氨酸残基的内源性荧光,采用荧光光谱法研究黄酮类化合物与BSA结合作用,根据荧光猝灭方程计算黄酮类化合物与BSA的表观结合常数(KA)和结合位点数。结果八种黄酮类植物化学物与BSA的结合强弱依次为:橙皮素(5.59×105)>槲皮素(4.94×105)>柚皮素(3.04×105)>异槲皮素(4.66×104)>淫羊藿苷(3.60×104)>芦丁(1.65×104)>橙皮苷(2.50×103)>柚皮苷(8.70×102)。结论糖苷基取代对黄酮类化合物与BSA的结合作用有很大影响,A环可能是黄酮类化合物插入BSA疏水区的关键部位,其C7位上的糖苷基取代是影响其与BSA结合的关键基团。此研究探讨了黄酮类化合物与BSA的作用及其与结构相关性规律,对了解黄酮类化合物在体内的运输、代谢和分布提供了一定实验依据。     

碳青霉烯类双联治疗铜绿假单胞菌的临床疗效

目的 分析并探讨碳青霉烯类双联治疗铜绿假单胞菌的临床效果，并对其安全性进行评估，进而为临床治疗方案的选择提供依据。方法 选取2016年5月—2017年5月江油市九〇三医院收治的铜绿假单胞菌肺炎患者120例，根据随机数字表法将其分为对照组和研究组，各60例。对照组患者给予头孢哌酮钠舒巴坦钠2 g，静脉滴注，每天3次；研究组给予碳青霉烯类双联法治疗，静脉滴注亚胺培南-西司他丁钠1 g，以及美罗培南500 mg，每天3次。连续治疗15 d为1个疗程。比较两组患者的治疗效果，观察并详细记录患者的两组患者细菌的清除情况，采用问卷调查的形式对患者的社会功能、躯体功能、角色功能以及认知功能进行评分。结果 研究组的治疗总有效率为91.6%，对照组总有效率为78.3%，研究组有效率明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05)。治疗前，两组患者的生活质量评分无明显区别；治疗后，研究组患者的生活质量评分明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后，研究组细菌清除率（80.0%）明显高于对照组（66.7%），差异有统计学意义（P<0.05）。结论 使用碳青霉烯类双联法对铜绿假单胞菌肺炎患者进行治疗，可有效地清除患者体内的细菌，提高患者的生活质量，该治疗方法临床效果显著，相比较其他的治疗方法更有应用价值，症状改善明显，且安全性高，值得临床推广。     

左旋氨氯地平联合依那普利治疗尿毒症肾性高血压的效果分析

目的分析左旋氨氯地平联合依那普利治疗尿毒症肾性高血压的临床效果。方法80例尿毒症肾性高血压患者,根据治疗方法不同分为对照组和联合治疗组,每组40例。对照组给予左旋氨氯地平治疗,联合治疗组给予左旋氨氯地平联合依那普利治疗。比较两组生存质量评分,治疗前后肾功能指标、收缩压和舒张压水平,临床疗效。结果联合治疗组患者的生存质量评分(92.21±3.45)分高于对照组的(75.26±3.12)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组24 h蛋白尿、血肌酐、尿素氮、收缩压和舒张压水平均较治疗前降低,且联合治疗组24 h蛋白尿、血肌酐、尿素氮、收缩压和舒张压水平均显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。联合治疗组患者的治疗总有效率95.00%显著高于对照组的75.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论左旋氨氯地平联合依那普利治疗尿毒症肾性高血压的疗效确切,可一定程度改善生存质量和肾功能,降低患者收缩压和舒张压,提高治疗效果,值得推广。     

Japan’s patent issues relating to life science therapeutic inventions

Japan has made ‘innovation in science and technology’ as one of its central pillars to ensure high growth in its next stage of economic development and its life sciences market which hosts regenerative medicine was proclaimed to be ‘the best market in the world right now.’ Although life science therapeutic inventions are patentable subject matter under Japanese patent law, there are nuanced obviousness and enablement challenges under Japanese patent law that can be surmounted in view of some encouraging Japanese court developments in fostering a pro-patent applicant environment in the life sciences therapeutic patent field. Nevertheless, great care must be taken when drafting and prosecuting such patent applications in the world’s second most important life sciences therapeutic market.     

结肠癌行完整结肠系膜切除联合化疗对老年病人生活质量的影响

目的 探讨完整结肠系膜切除联合术后化疗对老年结肠癌手术后病人疗效及生活质量的影响.方法 选取行结肠癌治疗的100例老年病人,根据病人的手术方式不同分为完整结肠系膜切除联合化疗组(观察组)和传统手术联合化疗组(对照组),比较两组病人临床疗效和生活质量的差异.结果 观察组在术中出血量、术后排气时间、住院时间显著低于对照组(P<0.001),淋巴结清除数比对照组明显增加(P<0.001).观察组的缓解率90.74%明显高于对照组的73.91%(P<0.05).观察组并发症显著低于对照组(P<0.05).观察组的生活质量评价分值显著高于对照组(P<0.001).结论 完整结肠系膜切除联合化疗对老年结肠癌手术后病人的临床治疗效果与传统的治疗方法相比,并发症少,利于病人康复,提高病人的生活质量.     

康艾注射液联合化疗治疗中晚期恶性肿瘤40例临床观察

目的 观察康艾注射液联合化疗治疗中晚期恶性肿瘤的临床效果及对患者生存质量(QOL)的影响.方法 将80例中晚期恶性肿瘤根据治疗方法分为对照组和观察组,每组40例.对照组予单纯化疗;观察组在化疗基础上加用康艾注射液.2个周期后观察两组的临床疗效、QOL评分及毒副反应.结果 两组客观缓解率(RR)差异无统计学意义(P>0.05),观察组疾病控制率(DCR)较对照组明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后QOL评分较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);观察组胃肠道反应、血液毒性、肝功能损害及周围神经毒性等毒副反应的发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 康艾注射液联合化疗中晚期恶性肿瘤能提高远期疗效,增强机体免疫力,减轻化疗毒副作用,提高患者QOL,延长生存期.     

唑来膦酸联合美施康定治疗骨癌痛的临床观察

目的 观察唑来膦酸联合美施康定治疗骨癌痛的临床效果.方法 采取随机对照方法,96例骨癌患者随机分为3组：美施康定组（A）,唑来膦酸组（B）,唑来膦酸＋美施康定组（C）.采用疼痛程度主述分级法评估用药前后的疼痛评分,比较治疗前后的疼痛缓解程度、美施康定用量、患者生活质量.结果 C组疼痛缓解程度明显大于A、B组;与治疗前相比,C组美施康定用量比A组少（P＜0.05）;联合用药组患者的生活质量明显优于单一用药组.结论 唑来膦酸联合美施康定能减少美施康定的用量,有效控制骨癌痛,提高患者生活质量.     

晚期卵巢癌综合治疗的分析

目的探讨两种不同手术联合化疗方案在晚期卵巢癌中的疗效。方法选取2008年1月至2010年11月于本院进行治疗的52例晚期卵巢癌患者为研究对象,将其随机分为对照组和观察组每组各26例,对照组进行肿瘤减灭术然后进行化疗,观察组则先进行新辅助化疗后进行减灭术,然后将两组患者的手术时间、出血量、生存时间、治疗前后生存质量及血清CA125、TSGF、VEGF、CEA水平进行比较。结果观察组的手术时间短于对照组,出血量少于对照组,生存时间长于对照组,生存质量优于对照组,血清CA125、TSGF、VEGF、CEA低于对照组,P均<0.05,均有显著性差异。结论新辅助化疗联合肿瘤减灭术对晚期卵巢癌的疗效更好,可有效改善患者生存质量及延长生存期。     

艾迪注射液联合化疗在中晚期非小细胞肺癌中的应用观察

目的 观察艾迪注射液联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效及其毒副作用。方法 选择2007年1月-2013年1月就诊的264例中晚期NSCLC患者,按照不同的治疗方法 分为对照组和观察组,对照组采用单化疗治疗,观察组在对照组的基础上给予艾迪注射液治疗,观察两组的总有效率、疾病控制率、生活质量改善率和不良反应发生率。结果 观察组治疗总有效率、疾病控制率、生活质量改善率和不良反应发生率（33．1％、80．3％、62．0％、10．6％）均优于对照组（31．2％、60．7％、4012％、18．8％）（P〈0．05）。结论 艾迪注射液联合化疗治疗中晚期NSCLC的效果显著,有助于改善患者的生活质量．降低药物不良反应。     

西药联合灌肠疗法治疗腹部手术后胃肠功能障碍的效果分析

目的：探讨西药联合灌肠疗法治疗腹部手术后胃肠功能障碍的效果。方法选取本院2010年5月∽2014年5月收治的80例腹部手术后出现胃肠功能障碍患者为研究对象,随机分成联合组与常规组,各40例,常规组采用常规西药进行治疗,联合组在常规组的基础上采用灌肠疗法进行治疗,比较两组治疗后的排气、排便、肠鸣音恢复时间,进食时间,肠胃功能障碍评分,住院时间等指标。结果两组治疗前胃肠功能障碍评分比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗后,常规组的胃肠功能障碍评分明显高于联合组,差异有统计学意义（P〈0.05）;常规组胃肠功能恢复时间、进食时间、住院时间均长于联合组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论对腹部手术后出现胃肠功能障碍的患者行西药联合灌肠疗法,疗效显著,能有效缩短患者术后排气、排便、肠鸣音恢复时间,改善进食效果,缓解胃肠功能障碍症状,对改善患者生活质量、促进其早日回归正常生活等具有积极意义,值得临床推广应用。     

围术期护理联合呼吸功能训练对经支气管镜球囊扩张治疗的结核性气道狭窄患者依从性及生活质量的影响

目的 分析呼吸功能训练对经支气管镜球囊扩张治疗的结核性气道狭窄患者依从性及生活质量的影响.方法 选取2014年1月至2016年2月在本院治疗的结核性气道狭窄患者88例,将其动态随机化分2组,研究组和对照组各44例.所有患者均行支气管镜下球囊扩张治疗.两组患者都给予围手术期护理,研究组患者在此基础上给予呼吸功能训练.结果 研究组患者总依从率88.64％,而对照组为65.91％,两组之间存在统计学差异(P＜0.05).研究组躯体功能、心理功能、社会功能、物质生活评分均显著高于对照组(P＜0.05).结论 采用围术期护理联合呼吸功能训练能提高结核性气道狭窄患者行支气管球囊扩张术的依从性,改善生活质量,可以在临床上广泛应用.