分子分型方法在肠出血性大肠杆菌检测中的应用

自1982年首次发现肠出血性大肠杆菌O157：H7在北美引起出血性肠炎以来,与肠出血性大肠杆菌O157：H7病原菌相关疾病的发生率逐年上升,尤以发达国家病例为多,这可能与其饮食习惯和监测报告系统完善有关。大多数O157：H7肠出血性大肠杆菌的感染是食用了被牛粪污染的食物和饮水引起的,临床症状主要表现为腹部痉挛性疼痛和出血性结肠炎。近些年已经报道过多起由肠出血性大肠杆菌O157：H7引起的暴发流行,因儿童和老年人患者有时会在腹泻后继发诸如溶血性尿毒综合征等严重的并发症而死亡率较高。O157：H7是肠出血性大肠杆菌的主要血清型别,     

浙江省检出首例带stx2 O157:H7病人的报告

目前大多数学者认为肠出血性大肠杆菌O157：H7之所以能对人类致病，其致病因子为志贺毒素，并认为该毒素为肠出血性大肠杆菌（EHEC）所特有。浙江省于1997年首次在杭州人和动物中检出肠出血性大肠杆菌O157：H7后，又相继在宁波等地从动物中检出，但是都不带志贺毒素1（stxl）和志贺毒素2（stx2）。本次检出的病人为浙江省首次发现带有stx2毒素的肠出血性大肠杆菌O157：H7菌株。现报告如下。     

VIDAS-VITEK法快速检验食品中大肠杆菌O157的研究

大肠杆菌0157：H7出血性肠炎是近年引起世界广泛关注的肠道传染病。自1983年美国Riley等首次报道大肠杆菌O157：H7出血性肠炎以来，相继在英国、加拿大、13本等国出现爆发性流行病例。大肠杆菌O157：H7是肠出血性大肠杆菌（EHEC）的一个主要血清型，牛、羊、猪等家畜是其主要宿主，人类由于食用被大肠杆菌O157：H7污染的食品而致病。研究表明人感染10个活菌即可致病，     

肠出血性大肠杆菌O157：H7病原学及流行病学特征

肠出血性大肠杆菌O157∶H7是一种新型的致病性大肠杆菌,肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染性腹泻是近年来新发现的危害严重的肠道传染病。除了引起腹泻、出血性肠炎外,还可发生溶血性尿毒综合征（HUS）、血栓性血小板减少性紫癜（TTP）等严重的并发征,后者病情凶险,病死率高[1]。     

郑州市2005年肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染状况调查

目的：了解郑州市肠出血性大肠杆菌O157∶H7在腹泻病人中的检出情况和宿主动物带菌及毒力基因情况.方法：对采集的宿主动物和腹泻病人粪便及食品应用免疫磁珠富集分离法进行大肠杆菌O157∶H7分离和鉴定.结果：郑州市内共发现3例肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染病例,首次从腹泻病人中检出产毒O157∶H7菌株,采集5种以上动物粪便标本共计475份,从牛粪（247份）中分离到16株O157∶H7,检出率为6.48%,从羊粪（33份）中分离到3株O157∶H7,检出率为9.10%,并检出3株产毒O157∶H7菌株.采集5类市售食品共146份,未分离到O157∶H7.结论：郑州市存在发生肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染暴发或流行的潜在危险.     

出血性大肠杆菌EHEC O157：H7感染的研究进展

新发现的病原微生物和重新抬头的病原微生物，是当前世界医学界面临的一个新的课题，肠出血性大肠杆菌EHEC O157：H7（以下简称O157：H7）就是其中之一。自1982年美国首次发现因该菌引起的感染性疾病以来，英国、加拿大、日本等多个国家相继发生腹泻爆发和流行。1999～2000年我国安徽、江苏、河南等省发生以O157：H7感染性腹泻并发肾功能衰竭（HUS）为主的疾病爆发。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7分子生物学检测

本文对肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7分子生物学检测方法（DNA探针、聚合酶链反应），以及O157：H7的流行菌株分析的研究进展作了综述。     

安徽省1999～2003年O157：H7大肠杆菌实验监测及其意义

目的为了解我省肠出血性大肠杆菌O157：H7感染性腹泻的病人（宿主动物）带菌情况及其毒力基因携带情况,探索疾病发生的原因.方法对安徽省1999～2003年病人粪便进行O157：H7大肠杆菌的分离培养、动物宿主O157：H7大肠杆菌带菌状况调查及O157：H7大肠杆菌毒力基因的检测,并用免疫印迹法检测人群血清特异性O157：H7溶血素抗体.结果家禽家畜出血性大肠杆菌O157：H7带菌率为10.45%、2.50%、0.14%、0.72%和0.31%;从腹泻病人粪便中分离出O157：H7大肠杆菌、痢疾杆菌等,分离率分别为0.43%和4.75%;特异性O157：H7溶血素IgG抗体总阳性率为25.87%;志贺样毒素、溶血素毒力基因检测有53.2%的EHEC O157：H7菌株阳性.结论通过血清学、病原学、分子生物学实验监测,可以认为家禽家畜为O157：H7的动物宿主,分离的O157：H7大肠杆菌大部分携带毒力因子,染菌的家禽家畜是引起人群爆发流行的的重要传染源.     

肠出血大肠埃希菌O157:H7与食品安全

肠出血性大肠埃希菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli，EHEC）主要包括O157：H7和O26：H11，其中O157：H7是出血性肠炎的主要致病菌，自1982年由美国首次报道了肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7引起的出血性肠炎的爆发以来，EHEC的感染已经成为世界性问题。世界卫生组织已将O157：H7列为新的食源性疾病病原菌。尽管EHEC已被研究了近20年，但对由该菌引起的致命的溶血性尿毒综合症（HUS）和血小板减少性紫癜（TTP）仍没有有效的治疗方案。     

郑州市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染监测

[目的]2005年监测郑州市肠出血性大肠杆菌O157：H7感染状况及病原分布特点,为各级卫生行政部门制订新发传染病防治措施,提供基础疫情资料。[方法]监测标本用免疫磁珠集菌方法（IMS）做病原学分离培养、毒力基因检测用多重PCR方法、药敏试验用（K-B）常规方法。[结果]腹泻病人标本185份,大肠杆菌O157：H7检出阳性4份。外环境标本588份,检出大肠杆菌O157：H7阳性20份。用多重PCR方法做毒力基因检测,有6份家畜家禽阳性标本中检出O157：H7毒力基因（Stx2、eaeA、HIyA）为阳性。药敏试验24株肠出血性大肠杆菌O157：H7对8种抗菌药物敏感率为95%以上,对新生霉素100%耐药,其余7种对抗菌药物敏感程度各有差异。[结论]郑州市有散在的大肠杆菌O157：H7感染的病人及动物疫点。奶牛和波尔山羊是大肠杆菌O157：H7动物宿主。     

2002～2004年广西食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的监测分析

目的了解广西食品中肠出血性大肠杆菌O157：H7污染状况,为构建食品污染物数据库和防范食源性疾病提供依据.方法在广西南宁等6个市建立监测点,定期无菌采样,检验方法按照中国疾病预防控制中心营养与食品安全所统一的肠出血性大肠杆菌O157：H7检验方法进行.结果在6个监测市对6类食品共计1276份食品进行了监测检验,结果在南宁、柳州2个市的生肉中检出3株O157：H7,总检出率为0.24%,而生肉O157：H7污染率为0.46%.结论在广西首次证实生肉受到O157：H7污染,要高度警惕和防范肠出血性大肠杆菌O157：H7所致食源性疾病的发生.     

熔解曲线分析方法甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7

目的:采用熔解曲线分析技术,建立一种快速、简便、准确地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7方法。方法:选取肠出血性大肠杆菌O157:H7编码脂多糖基因(rfbE)和编码鞭毛抗原基因(fliC)作为检测靶基因,建立荧光PCR反应体系。结果:通过多种标准菌株试验,结果显示所建立的熔解曲线分析法可特异性地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7;纯培养的灵敏度达到2.8×101cfu/ml;检测108例临床样本,其中18例肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性,3例为肠出血性大肠杆菌O157:非H7阳性,与常规培养方法的符合率达到100%。结论:本方法可简便、准确地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7,结果可靠,通过进一步增加反应体系中引物的数量可同时对肠出血性大肠杆菌其他血清型进行鉴定。     

闵行区某种畜场检出大肠杆菌O157：H7的报告

肠出血性大肠杆菌O157:H7是1982年新发现的肠道致病菌,它能引起人类出血性肠炎、溶血性尿毒综合征和出血性血小板减少性紫癜.国内外调查和监测表明,家畜和家禽是大肠杆菌O157:H7的宿主.     

蚌埠市2000～2004年肠出血性大肠杆菌O157∶H7监测研究

目的：了解蚌埠市腹泻病人、动物宿主携带肠出血性大肠杆菌O157 ：H7（EHEC O157 ：H7）情况，为防治工作提供决策依据。方法：采集我市市区和怀远县部分乡镇的现症腹泻病人和动物宿主（牛、羊、猪等）的粪便标本，用免疫磁珠法和血清学等方法检测EHEC O157 ：H7。结果：5年间共采集各种标本2502份，经检测检出9株EHEC O157 ：H7，检出率为0.36％。结论：蚌埠市部分腹泻病人和动物存在着EHEC O157 ：H7感染。     

宁波市检出第一株肠出血性大肠杆菌O157：H7

自1982年发现O157:H7大肠杆菌是肠出血性大肠杆菌的主要血清型以来,由其引起的食源性爆发流行在发达国家不断发生.近年来该菌在国内检出报道不断[1],为了解宁波市肠出血性大肠杆菌O157:H7的流行状况,在辖区内的各县(市、区)建立了监测网络,进行联合监测,于2001年9月从腹泻病人粪便中分离到本市首株肠出血性大肠杆菌O157:H7,现将鉴定情况报告如下.     

2008-2012年南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7监测结果

目的 了解南宁市肠出血性大肠杆菌0157:H7在人群及外环境中的感染情况,为防制工作提供依据.方法 2008-2012年采集南宁市现症腹泻患者、动物宿主粪便标本、市场生熟食品和苍蝇标本,经mEC增菌后用SMAC分离,纯化菌株经生化鉴定、血清分型等方法进行检测.结果 在2 139份腹泻患者标本中未检出阳性标本;在3 088份外环境标本中检出阳性标本20份.南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染阳性率呈现逐年下降趋势;不同动物粪便肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性率不同,以牛粪检出阳性率最高.结论 南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7仍有散在的动物感染,应加强对动物粪便的管理及肠出血性大肠杆菌O157:H7的监测工作.     

AFLP技术对肠出血性大肠杆菌O157：H7的基因分型

目的 应用扩增片段长度多态性技术（AFLP）分析肠出血性大肠杆菌O157：H7多态性并对其进行分型。方法 32株肠出血性大肠杆菌O157：H7分离株基因以PstI酶切，将酶切后的基因组DNA与事先合成的人工接头在T4连接酶的作用下连接，然后以此连接了接头的DNA为模板，用与人工接头互补的引物，进行PCR扩增，水平电泳，照相记录结果。结果 共得到16种不同的指纹图谱，经SPSS 10．0聚类分析得到分类树状图。结论 AFLP技术可用于肠出血性大肠杆菌O157：H7的基因分型，在分子流行病学研究中有较大的应用前景。     

应用金黄色葡萄球菌协同凝集试验检测大便中O157:H7大肠杆菌的

肠出血性大肠杆菌O157:H7(以下简称O157:H7)是近些年来发现能引起腹泻等疾病的一种重要病原菌.为了提高腹泻病人粪便中O157:H7的检出率,2000年研制了检测O157:H7的金黄色葡萄球菌协同凝集试剂,并进行了实验模拟标本检测.＃     

食品中肠出血性大肠埃希菌O157:H7的PCR检测

目的建立快速准确检测食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7的方法。方法采用多重聚合酶链式反应技术（MPCR）特异性扩增肠出血性大肠埃希菌O157：H7的STX、rfbE、fliC基因。结果分别在228，378，709bp处扩增出3个目的基因片段，且只有肠出血性大肠埃希菌O157：H7获得扩增，其他菌种扩增均呈阴性。结论PCR方法比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便，为食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7的快速检测提供了新的手段。     

肠出血性大肠杆菌O157:H7活菌检测技术研究进展

<正>大肠埃希菌(Escherichia,E.coli),俗称大肠杆菌,是一类寄居于人和动物肠道的正常菌群优势菌种,是人类重要的条件致病菌,可引起肠道内和肠道外的感染[1]。肠出血性大肠杆菌(EHEC)是大肠杆菌的一个亚型,包括O157、O111、O26等血清型,O157:H7是其最常见的血清型之一,因可导致出血性肠炎而得名;可引起感染性腹泻,是与人类疾病相关的最具代表性的血清型之一。