喉癌组织RB基因突变及其与临床分期的关系

目的：探讨喉癌组织中RB基因突变及其与临床分期的关系。方法：用聚合酶链式反应和单链构象多态性（PCR-SSCP）对90例喉癌标本进行检测。结果：90例中，2例发生纯合性缺失，12例SSCP异常电泳，总突变率15.5%(14/90);Ⅰ-Ⅱ期喉癌RB基因突变5例（13.9%),Ⅲ-Ⅳ期RB基因突变9例（16.7%)，两者之间差异无显著性意义。结论：RB基因突变在喉癌的发生发展中起着一定的作用，RB基因突变与喉癌病程无关。     

喉癌中P_53基因突变

本文采用ＰＣＲ技术对４例正常喉组织、１０例正常白细胞、３３例喉癌组织，进行Ｐ５３基因的５－６和７－８外显子检测，结果发现喉癌中Ｐ５３基因突变率为６９．６９％（２３／３３）（Ｐ＜０．０１），其中５－６外显子突变率为２４．２４％（８１３３），７８外显子突变率为４５．４５％（１５／３３）。各期喉癌Ｐ５３基因突变率无明显差异（Ｐ＞０．０５）。研究表明Ｐ５３基因的突变是喉癌发生发展过程中的一个重要机制。     

免疫组化法检测喉癌组织中p53表达的临床意义

采用免疫组化Ｓ－Ｐ方法检测９５例喉癌、１０例声带息肉和６例喉正常声带组织的ｐ５３表达，结果显示，ｐ５３蛋白主要定位于喉癌细胞内，呈棕黄色阳性颗粒，少部分位于细胞浆内，９５例中阳性显色４２例，阳性率４４．２％。１０例喉气带息肉和６例喉正常声带组织均为阴性。喉癌中ｐ５３基因表达阳性与声带息肉、正常声带组织相比差异显著（Ｐ〈０．０１）。喉癌组中，不同年龄组发病有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。喉癌不同临床分     

喉鳞癌P53基因突变与癌恶性度的关系

应用结合聚合酶链反应的单链多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及ＤＮＡ序列分析（ＰＣＲ－ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）方法。检测６０例喉鳞癌石蜡包埋组织中Ｐ５３基因第５～第８外显子的突变。发现１９例发生Ｐ５３基因的点突变或碱基缺失，均引起氨基酸改变临床ＩＩＩ，ＩＶ期的突变检出率为５０％，远高于Ｉ、ＩＩ期检出率（１２．５％，２２．２％）；低分子癌突变检出率为６６．６％，高于中、高分化癌（４０．９％、１３．８     

喉癌p53基因异常的临床意义

目的p53基因异常是恶性肿瘤发生发展中常见的现象,但其临床意义仍存在争议。回顾性研究喉癌p53蛋白过度表达,并分析其与临床病理特征和致癌危险因素之间的关系,以探求p53基因异常可能的致病机制和预后判断方面的意义。 方法 以100例手术切除的喉癌标本为研究对象,收集并记录诊断时的临床参数和致癌危险因素,用免疫组化法检测p53蛋白表达。 结果100例喉癌标本中p53蛋白的阳性表达率为66％;检测中发现p53蛋白表达与年龄、性别、饮酒程度、肿瘤部位、临床分期和病理分级等临床病理参数之间无关联(P>0.05)。 结论p53基因异常与喉癌的发生发展有关,与喉癌预后无关。     

p16基因突变与喉癌生物学行为的相关性

目的 :研究 p16基因突变与喉癌生物学行为及预后的关系。方法 :应用 PCR- SSCP对 2 4例喉癌组织及 10例喉部良性病变组织中 p16基因 (exon2 )进行检测。结果 :喉癌突变检出率为 6 2 .5 % (15 / 2 4) ,而且随着组织分化程度、浸润范围和淋巴结转移的不同而不同 ;喉部良性病变无一例突变。结论 :p16基因突变与喉癌的多种生物学行为有明显关系 (P≤ 0 .0 5 ) ;这种关系有助于判断喉癌的恶性程度及预后。 PCR- SSCP检测喉癌突变 ,具有敏感、简便、重复性好 ,快速而经济等优点 ,是一种适用于临床样本筛选的方法。     

喉癌P53基因表达与放疗效果的关系

应用抗ｐ５３基因单克隆抗体，以免疫组织化学ＤＡＣＯＣＳＡＳｙｓｔｅｍ法染色技术，对７３例喉鳞癌组织标本进行检测。结果显示，Ｐ５３基因表达分为强度，中度表达及阴性表达。因此认为，可以把ｐ５３基因表达作为判定喉癌放疗预后及指导临床治疗的可靠指标。     

P53基因突变与头颈部肿瘤

近来大量资料表明，Ｐ５３基因为抗癌基因，那些具有转化作用的都是Ｐ５３突变体，而野生型Ｐ５３则。明显抑制细胞的转化。本文综述了Ｐ５３突变及其与头颈部肿瘤的关系，认为Ｐ５３突变是头颈部肿瘤发生过程中的一个环节。随着对Ｐ５３的深入研究，将有可能对临床的诊断，预测和治疗提供一个新的途径。     

喉鳞癌p53基因第7外显子的测序分析

目的探讨p53基因与喉鳞状细胞癌的关系。方法应用聚合酶链反应-单链构像多态性分析（polymerase chain reaction-single-strand conformation polymorphism,PCR-SSCP）银染系统和PCR产物直接测序技术,检测喉鳞状细胞癌新鲜或冰冻组织中抑癌基因p53第7外显子的突变情况。结果 60例喉鳞状细胞癌组织中使用SSCP检测发现25例显示电泳迁移率的改变。对25例SSCP阳性样本随机抽出8例进行PCR产物直接测序,8例第7外显子均在250密码子上第1、3位碱基缺失一个C。同时,2例在248密码子上第1位碱基缺失一个C,从而导致移码突变;3例在261密码子上第1、3位碱基发生A→G的转换和T→G的颠换,导致错义突变。1例在249密码子上缺失一个G,1例存在254密码子上第1位碱基A→T的颠换,1例262密码子上GGT→TCA。结论提示p53基因第7外显子的248、250和261位密码子可能在中国人喉鳞状细胞癌中突变率较高。     

Lack of synergistic association between human papillomavirus and ras gene point mutation in laryngeal carcinomas

The spectrum of human papillomavirus (HPV) subtypes in laryngeal carcinomas was investigated by combined polymerase chain reaction (PCR) and restriction fragment length polymorphism analysis. HPV DNA was detected in 11 (24%) of 45 cases, including HPV 16 in 9 cases and HPV 18 in 2 cases. Other HPV subtypes commonly found in the female genital organs were not detected. In addition, the point mutation of codons 12 and 13 in c-Ki-ras-2, c-Ha-ras-1, and N-ras genes was studied by the PCR-single-strand conformational polymorphism (SSCP) method. Of 45 cases tested, only 1 had a point mutation of c-Ki-ras-2 gene at codon 12. These results indicate that the incidence of ras gene point mutation is uncommon and that the synergistic effect of HPV infection and ras gene activation in laryngeal carcinogenesis is probably rare.     

Over-expression of tumour suppressor gene p53 in laryngeal squamous cell carcinomas and its prognostic significance

p53 is a nuclear phosphoprotein which acts as a tumour suppressor factor, regulating cell growth and division. Mutations in the p53 gene appear to be the most common genetic alterations in human cancer. The aim of this study was to investigate p53 expression in laryngeal squamous cell carcinomas and to assess its role as a marker of prognostic significance. Using immunohistochemical staining techniques, a series of laryngeal carcinomas (n= 87) were examined for expression of the mutant form of p53 phosphoprotein using the monoclonal antibody PAB 1801. p53 over-expression was noted in 50 biopsies of laryngeal carcinomas (57.5%) but not in any of the non-neoplastic laryngeal mucosa which were used as the control. There was no statistical correlation between p53 immunoreactivity and the clinicopathological parameters of the cancers including: site of tumour, TNM staging, differentiation grading and tumour recurrence. These findings indicate that p53 expression is strongly associated with carcinoma cells and not with normal cells in the larynx. However, p53 expression is probably unrelated to the biological aggressiveness of these tumours.     

c-erbB-2过表达及点突变与喉癌发生的关系

目的:探讨喉癌基因c-erbB-2点突变及过表达同喉癌发生发展的关系.方法:应用PCR-SSCP对c-erbB-2 的点突变进行检测,采用免疫组化法分析c-erbB-2 的过表达.结果:40例喉癌阳性表达率为52.5%(21/40).其中24例声门上癌表达率为57%(17/30);6例声带癌表达率为50%(3/6),4例声门下癌表达率为22.5%(1/4),同前者差异有高度显著性(P＜0.01),未见c-erbB-2的点突变检出.结论:喉癌中广泛存在着c-erbB-2 的扩增及过表达,而喉癌细胞中却无c-erbB-2点突变,推测可能存在着另外的基因改变或c-erbB-2的扩增和过表达为喉癌发生的主要原因.     

喉癌中p16基因突变和甲基化的研究

目的　探讨p16基因在喉癌发生发展中的作用和在喉癌中的失活机制。方法　应用聚合酶链反应 单链构象多态性分析 (polymerasechainreaction singlestrandconformationpolymorphismanalysis ,PCR SSCP)银染方法和PCR甲基化敏感内切酶方法检测 32例喉癌和相应癌旁组织的p16基因第 1,第 2外显子突变和甲基化热点区域部分内切酶位点的甲基化情况。结果　 32例喉癌中p16第 1第 2外显子无一例发生突变 ;在第 1外显子CfoⅠ位点有 6例发生甲基化 ,SacⅡ位点有 5例发生甲基化 ,HpaⅡ位点有 4例发生甲基化 ,甲基化发生频率为 (6 /32 ) 18 8%。在第 2外显子HpaⅡ位点有 5例发生甲基化 ,CfoⅠ位点有 6例发生甲基化 ,甲基化发生频率为 (6 /32 ) 18 6 %。结论　喉癌中p16基因的甲基化是该基因失活的重要机制之一 ,p16基因的失活与喉癌的发展和演进密切相关。     

p53蛋白在喉鳞癌及癌旁组织中表达的研究

应用抗ｐ５３单克隆抗休琢ＬＳＡＢ免疫组织化学染色法检测喉鳞癌，喉癌旁组织及声带息肉ｐ５３蛋白的表达。结果显示：２５例喉鳞癌呈阳性反应，４例距肿瘤边缘〈０．５ｃｍ的喉癌旁组织呈弱阳以应，２０例距肿瘤边缘〉２ｃｍ的喉癌旁组织及１６例声带息肉均为阴性。     

喉癌中p16基因突变和甲基化的研究

目的 探讨ｐ１６基因在喉癌发生发展中的作用和在喉癌中的失活机制。方法 应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎａｌｙ－ｓｉｓ,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染方法和ＰＣＲ甲基化敏感内匹酶方法检测３２例喉癌和相应癌旁组织的ｐ１６基因第１,第２外显子突变和甲基化热点区域部分内切酶     

喉及下咽鳞状细胞癌的ras基因突变热点的研究

目的 :研究 ras基因 ( N-ras,K-ras,H-ras)第 1 2密码子在喉及下咽癌组织中的突变情况。方法 :采取多聚酶链延伸反应 -限制性片段长度多态性分析 ( polymerase chain reaction-restricted fragmentlength polymorphism,PCR-RFLP)方法 ,对 3 7例喉癌、下咽癌手术标本进行三种 ras基因测定。结果 :三种 ras基因的 1 2位密码子在喉癌及下咽癌组织中的突变率为 3 5.1 % ,其中 N-ras基因的 1 2密码子突变率为 1 6.2 % ( 6/3 7) ,K-ras变突率为 1 3 .5% ( 5/3 7) ,H-ras基因的突变率为 5.4 % ( 2 /3 7)。其突变率与喉癌、下咽癌组织分化类型和分化程度无明显相关性。结论 :ras基因第 1 2密码子是喉癌、下咽癌的突变热点。     

Genotypic analysis of tumor suppressor genes PTEN/MMAC1 and p53 in head and neck squamous cell carcinomas

Objectives: Tumor suppressor gene mutations in both p53 and PTEN/MMAC1 genomic DNA have been detected in many types of cancer. The purpose of this study was to investigate the presence and importance of PTEN/MMAC1 mutations in squamous cell carcinomas. Methods: Exons of each gene were amplified after polymerase chain reaction (PCR) using genomic DNA derived from cell lines of squamous cell carcinoma of the head and neck (SCCHN) and snap-frozen biopsy specimens from primary established head and neck tumors. The amplified and purified DNA was then sequenced directly. Result: As anticipated, point mutations of the p53 gene were found in 80% of cell lines examined. A single base mutation in codon 151 was found in six of 10 cell lines studied. PTEN/MMAC1 gene mutations were found in neither the cell lines tested nor the tumor biopsy samples. Conclusion: This study, as well as a large volume of data, confirms that mutations of the p53 gene are frequent events in head and neck cancer cell lines. Although PTEN/MMAC1 gene mutations have been found in a variety of carcinomas, this gene was not found to be mutated in SCCHN cell lines or in primary squamous cell carcinomas of the head and neck. This information is useful for further studies of mutations in these cell lines. Laryngoscope, 108:1553–1556, 1998     

抑癌基因p15、Rb在喉鳞状细胞癌中表达的研究

目的 :研究抑癌基因p15、Rb蛋白表达对喉鳞状细胞癌诊断、治疗及预后判断的意义。方法 :用免疫组化SABC法检测喉癌组 45例石蜡标本与对照组 15例喉部正常或增生的黏膜上皮标本的 p15、Rb蛋白表达情况。结果 :喉鳞状细胞癌组p15蛋白阳性率 (48.9%)与对照组阳性率 (10 0 .0 %)比较 ,差异有极显著性意义 (P<0 .0 1) ;喉癌组中 0～Ⅱ期 p15蛋白阳性率 (6 6 .7%)与Ⅲ～Ⅳ期阳性率 (33.3%)比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;喉癌组Rb蛋白阳性率 (88.9%)与对照组阳性率 (93.3%)比较 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;2× 2列联表 χ2 检验 ,p15、Rb蛋白表达无相关性 (P >0 .0 5 ) ;对照组中 ,p15蛋白的表达以鳞状上皮组织中远离基膜的棘层细胞、颗粒层细胞明显 ,而Rb蛋白的表达则以基底层细胞及近侧棘层细胞明显。结论 :抑癌基因 p15的表达缺失对喉鳞状细胞癌的发生、发展有一定的作用 ,p15蛋白的检测对喉鳞状细胞癌的治疗及估计预后有指导意义 ;喉鳞状细胞癌组织中 p15、Rb的蛋白表达无相关性 ;正常及增生的喉部鳞状上皮的细胞层次间 ,p15、Rb蛋白表达不一致 ,p15蛋白表达对细胞增殖有抑制作用。