环氧合酶2启动子区-899G/C 基因多态性与中国乙肝相关性肝癌的关系

背景：肝细胞肝癌的发病与乙型肝炎病毒感染密切相关,研究发现环氧合酶2（COX-2）在肝癌中高表达,并参与了肝癌的发生。本研究通过分析COX-2启动子区-899G/C基因多态性在中国甘肃省健康人群、乙肝病毒性肝炎、乙后肝硬化、原发性肝癌患者的分布,旨在探讨COX-2 -899G/C基因多态性与中国甘肃省乙肝相关易感性肝癌的关系。 方法：采用PCR-TaqMan 探针方法检测甘肃省健康人群、乙肝病毒性肝炎、乙肝后肝硬化、原发性肝癌患者COX-2启动子区-899G/C的基因多态性。 结果：COX-2-899G/C分为GG、GC、CC三种基因型,其频率在乙肝病毒性肝炎患者中分别为：87.00%, 12.67%, 0.33%;在乙后肝硬化患者中分别为：85.33%, 14.00%, 0.67%;在原发性肝癌患者中分别为：77.00%, 21.67%, 1.33%;在普通人群中分别为: 8790.67%, 9.00%, 0.33%。与GG基因型相比,COX-2-899 C等位基因携带者患乙肝相关易感性性肝癌的风险增加。 结论：COX-2-899G/C的C等位基因增加我国肝癌高发地区甘肃省乙肝相关易感性肝癌发病的风险。     

环氧合酶-2在大鼠肝移植缺血再灌注损伤中对前列环素产物的影响

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）及其下游产物前列环素I_2（PGI_2）、血栓素A_2（TxA_2）在肝移植缺血再灌注损伤（LT-IRI）中的作用及变化规律。方法 80只雄性SD大鼠随机分为3组：E1：假手术组;E2：肝移植组;E3：特异性COX-2抑制剂NS398干预＋肝移植组,留取血液及肝组织进行检测。HE染色确定组织损伤程度并统计;生化分析仪检测血清谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）的水平;放射免疫法检测PGI_2、TxA_2的稳定代谢产物6-酮-前列腺素F-1a（6-Keto-PGF-1a）和血栓素B_2（TxB_2）在血清及肝组织中的水平。结果与E1组比较,HE染色病理切片见E2、E3组中肝脏均有病理损伤,但E3组较E2组明显减轻（P〈0.05）;E2、E3组血清AST、ALT水平明显升高,但E3组水平明显低于E2组（P〈0.05）;E2、E3组6-Keto-PGF-1a和TxB_2水平明显升高（P〈0.05）,但E3组水平较E2组明显降低,以TxB_2降低较明显（P〈0.05）。结论 COX-2高表达在LT-IRI中具有损伤性作用,抑制COX-2的高表达可降低其下游产物TxA_2,升高PGI_2水平,改善肝脏的微循环,可能减轻LT-IRI。     

兔肝外胆道内脏感觉传导途径的实验研究

目的:通过动物造模观察与内脏痛相关核团中C-fos、一氧化氮合酶(NOS)的表达,探讨内脏感觉传导途径。方法:新西兰大白兔36只,随机分为假手术a组、假手术b组、胆管注射大肠杆菌组、胆囊内注射大肠杆菌组、胆管扩张组、扩张Oddis括约肌组共6组,每组6只,取脊髓、脑干以及间脑作连续切片后,采用HE染色光镜定位及免疫组织化学技术检测各组脑和脊髓不同部位C-fos、NOS的表达,并进行比较。结果:胆管注射大肠杆菌组、胆囊内注射大肠杆菌组在脊髓(C5-7、T6-9)后角、薄束核、楔束核、丘脑腹后外侧核、孤束核中NOS的阳性表达明显高于假手术a组(P<0.05);胆管扩张组脊髓(C5-7、T6-9)后角、薄束核、楔束核、孤束核、丘脑腹后外侧核中C-fos的阳性表达明显高于假手术b组(P<0.05);扩张Oddis括约肌组脊髓后角(C5-7)和孤束核中C-fos的阳性表达明显高于假手术b组(P<0.05)。结论:胆囊和胆管引起的疼痛均与脊髓(C5-7、T6-9)后角、薄束核、楔束核、丘脑腹后外侧核、孤束核有关,推测由交感和迷走神经双重支配;Oddis括约肌引起的疼痛与孤束核有关,推测由迷走神经传入。     

环氧合酶-2在口腔黏膜下纤维性变癌变过程中作用研究

目的 探讨环氧合酶-2（COX-2）在口腔黏膜下纤维性变（OSF）癌变组织中的表达，观察槟榔碱对人口腔角质形成细胞（KC）COX-2表达的影响。方法 应用免疫组化SP法检测15例OSF癌变组织，30例OSF组织，10例正常口腔黏膜中COX-2蛋白表达，Western-blot法检测不同浓度槟榔碱（30、60、90ug／mL）对KCCOX-2蛋白表达的影响。结果 COX-2在正常黏膜组织中无明显表达，在OSF组织及OSF癌变组织中阳性表达率分别是36．7％（11／30）、80．0％（12／15），且癌变组织中表达强度明显高于OSF组织（P〈0．05）；槟榔碱呈剂量依赖性增加KCCOX-2蛋白表达，不同浓度槟榔碱组均高于空白对照组（P〈0.05）。结论 COX-2在OSF癌变组织中表达异常增高，槟榔碱能增加KCCOX-2表达，COX-2过度表达可能在OSF癌变过程中起一定作用。     

环氧化酶2在肾癌中表达的意义

目的:研究肾癌组织中环氧化酶2(COX-2)蛋白的表达,探讨COX-2表达与肾癌可能的相关性.方法:应用免疫组织化学S-P法,对46例肾癌及其25例癌旁组织COX-2蛋白表达进行检测.结果:COX-2在46例肾癌组织中的表达阳性百分比为71.74%,癌旁组织中为32.00%.肾癌组织中COX-2表达与癌旁组织相比差异具有统计学意义(P＜0.01);结论:COX-2在肾癌组织中表达明显增高,与肾癌的发生、发展可能相关,有可能作为肾癌诊断的辅助指标之一.     

CD40配体通过诱导型环氧合酶途径诱导单核巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶

目的:观察重组人CD40配体(rhCD40L)对U937细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,探讨其可能的作用机制.方法:不同浓度(0.1、0.2、0.4 μg/ml)的rhCD40L和不同浓度(10-5、10-4、10-3 mol/L)的NS-398(COX-2特异性抑制剂)分别刺激体外培养的U937细胞24 h后收集上清液;在加入终浓度为0.4 μg/ml rhCD40L的基础上,分别加入终浓度为10-4 mol/L的阿司匹林(COX-1抑制剂)或NS-398,共同刺激U937细胞24 h后收集上清液.酶谱法测定上述U937细胞培养上清中MMPs活性.结果:rhCD40L可使MMP-2和MMP-9活性增加(P＜0.01),且随浓度的增加而逐渐增强,0.4 μg/ml rhCD40L作用最强;NS-398可抑制MMP-2和MMP-9的活性,且抑制作用随剂量的增加而增强(P＜0.05).NS-398、阿司匹林均可抑制rhCD40L诱导U937细胞分泌MMP-2和MMP-9(P＜0.01),NS-398的抑制作用强于阿司匹林(P＜0.05).结论:rhCD40L以浓度依赖的方式诱导单核巨噬细胞分泌MMPs,这种诱导作用可能与诱导型环氧合酶(COX)有关,而且与COX-2的相关性可能较COX-1更密切.     

Celecoxib Inhibits Proliferation and Induces Apoptosis via Cyclooxygenase-2 Pathway in Human Pancreatic Carcinoma Cells

In order to evaluate the effects and mechanisms of celecoxib in inhibiting proliferation and inducing apoptosis on human pancreatic carcinoma cells, the anti-proliferative effect was measured by using methabenzthiazuron (MTT) assay. Cell cycle and apoptosis were analyzed by using flow cytometry (FCM), and the PGE2 levels in the supernatant of cultured pancreatic carcinoma cells were quantitated by enzyme-linked immunoabsordent assay (ELISA). Our results showed that celecoxib suppressed the production of PGE2 and inhibited the growth of JF-305 cells, and the anti-proliferative effect of celecoxib could be abolished by addition of PGE2. FCM revealed that celecoxib could inhibit proliferation and induce apoptosis by G1 S cell cycle arrest. It was concluded that cyclooxygenase-2 specific inhibitor celecoxib could inhibit proliferation and induced apoptosis of human pancreatic carcinoma cells via suppression of PGE2 production in vitro.     

环氧酶-2抑制剂对关节炎大鼠小肠黏膜的影响

目的 探讨环氧酶-2抑制剂对关节炎大鼠小肠黏膜的影响。方法 将32只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、造模对照组、空白给药组和造模给药组,造模对照组、造模给药组给予弗氏完全佐剂右后足跖注射,空白对照组、空白给药组注射等量生理盐水。1周后造模给药组、空白给药组给予选择性环氧酶-2抑制剂塞来昔布（溶于1%甲基纤维素）灌胃28 d,空白对照组、造模对照组给予等量溶剂。处死大鼠后观察小肠黏膜大体损伤、病理评分,酶联免疫吸附试验检测末段小肠前列腺素浓度。结果 造模对照组与造模给药组模型复制第7天的足周径比较,差异无统计学意义（P>0.05）,但两组分别与空白对照组和空白给药组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,空白对照组与空白给药组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。空白对照组与造模对照组小肠黏膜损伤面积比较,差异有统计学意义（P <0.05）,空白给药组与空白对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）。造模对照组、空白给药组和造模给药组组间小肠黏膜病理评分比较,差异无统计学意义（P>0.05）,且空白对照组与其他3组比较,差异有统计学意义（P &...     

正常成年大鼠脑内环氧合酶-2的表达

目的:观察正常大鼠脑内环氧合酶-2(COX-2)的表达. 方法:用自行制备的COX-2多抗采用免疫组织化学ABC法观察了COX-2蛋白在正常成年大鼠脑内的表达. 结果:在正常成年大鼠脑内COX-2蛋白主要表达于皮层、海马、齿状回、视上核、杏仁核、小脑和脑干等部位,阳性细胞主要为神经元,神经胶质细胞染色很少. 结论:COX-2蛋白在脑内广泛分布.     

Expression of Cyclooxygenase-2 in Ovarian Cancer Cell Lines

Summary： To investigate the expression of cyclooxygenase-2 （COX-2） in ovarian cancer cell lines, RT-PCR and immunocytochemistry were used to detect the expression of COX-2 in 5 ovarian cancer cell lines. The expression of COX-2 mRNA and protein was detected in all 5 cell lines. It is suggested that COX-2 is expressed in ovarian cancer cell lines, which provides a Basis for the chemoprevention of ovarian cancer.     

家族性腺瘤性息肉病中COX-2的表达分析

目的:分析环氧化酶2(COX-2)在家族性腺瘤性息肉病(FAP)中的表达,探讨COX-2在腺瘤形成以及癌变过程中的可能作用.方法:收集我科2001年1月至2003年6月10例FAP患者手术切除标本,分别取≤0.5 cm、≥1 cm的腺瘤性息肉以及癌变腺瘤组织,采用EnVision免疫组化方法观察COX-2在这些病灶中的表达.结果:COX-2主要在上皮细胞内表达,在部分间质细胞中也表达.COX-2在≤0.5 cm腺瘤上皮细胞中的表达强于正常上皮,但相差并不显著;在≥1.0 cm腺瘤中表达显著强于正常上皮(P＜0.01);在不同大小腺瘤之间的表达差异显著,≥1.0 cm腺瘤中表达强于≤0.5 cm腺瘤(P＜0.01);癌变腺瘤中的COX-2表达显著高于正常上皮(P＜0.01);癌变腺瘤中表达强于≥1.0cm的腺瘤组织,但相差并不显著.结论:COX-2可能是FAP发展中的重要促进因子,参与了腺瘤早期形成以及癌变过程;选择性抑制COX-2是预防治疗FAP的有效靶点.     

环氧合酶-2在早产产妇胎膜组织中的表达及意义

目的:探讨环氧合酶-2（COX-2）在早产发病机制中的作用。方法:采用免疫组织化学方法（SP法）检测8例早产临产、10例足月临产及12例足月未临产正常产妇(对照组)宫颈及宫体胎膜组织中COX-2的分布和表达。结果:COX-2在羊膜及绒毛膜上皮细胞和间质细胞中均有表达;早产临产组宫颈及宫体胎膜组织中COX-2表达的免疫组织化学积分均高于足月临产组和对照组（P<0.05）,同时足月临产组也均高于对照组(P<0.05);3组产妇的宫颈胎膜与同组宫体胎膜组织COX-2的表达均无统计学意义（P>0.05）。 结论：COX-2可能参与早产分娩的发动,在早产发病机制中起一定作用。     

Role of cyclooxygenase-2 signaling pathway dysfunction in unexplained recurrent spontaneous abortion

Background Experimental evidence indicates that cyclooxygenase-2 （COX-2） plays a critical role in blastocyst implantation; however, little is known of the role of COX-2 in unexplained recurrent spontaneous abortion （URSA）. Methods We evaluated the expression level and potential signaling pathway of COX-2 in 30 cases of URSA who were excluded the abnormality of chromosomes, anatomy, endocrine, infectious, autoimmune diseases and in 30 normal pregnancies. Results The mRNA and the protein expression level of COX-2 in the URSA group （-0.238±0.848, 0.368±0.089, respectively） were significantly lower than that in the control group （1.943±3.845, 1.046±0.108, respectively） （both, P 〈0.01）. The expression of prostaglandins PGF2a, PGD2, PGE2, and PGI2, in the URSA group （（2326.0±295.6） pg/ml, （2164.0±240.5） pg/ml, （238.7±26.4） pg/ml, （2337.0±263.0） pg/ml, respectively） were significantly lower than that in the control group （（3450.0±421.7） pg/ml, （3174.0±415.6） pg/ml, （323.5±43.8） pg/ml, （3623.0±460.4） pg/ml, respectively） （P 〈0.05）. The mRNA expression level of PPARI3 and RXRa （0.859±0.653, -0.172±0.752, respectively） in URSA group was significantly lower than that in the control group （1.554±1.735, 0.777±2.482, respectively） （both P 〈0.05）. The mRNA and protein expression levels of vascular endothelial growth factor-A （VEGF-A） in the URSA group （2.010±1.522, 0.35±0.46） was significantly lower than that in the control group （4.569±2.430, 0.750±0.350） （both P 〈0.05）. Conclusions COX-2 and the COX-2-derived PGI2 signaling pathway possibly play an important role in successful embryo implantation, and their decreased expression may result in URSA. The decreased expression may influence the expression of VEGF-A which interferes with placental angiogenesis causing failure of embryo implantation, leading to spontaneous abortion.     

双氯芬酸抑制肝癌细胞增殖和促进环氧合酶-2 mRNA作用的表达

目的 观察环氧合酶抑制剂双氯芬酸钠对体外培养的肝癌细胞HepG2、Hep3B和正常肝细胞系QSG-7701增殖的作用以及药物对环氧合酶-2（COX-2）mRNA表达的影响,探讨COX-2与肝癌细胞增殖的关系。方法 采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）细胞计数法测定药物作用24、48、72h后细胞增殖活性,半定量逆转录聚合酶链反应检测各种细胞系COX-2 mRNA的表达水平以及药物作用对基因表达的影响。结果双氯芬酸在10～200μmol/L浓度依赖性地抑制HepG2和Hep3B细胞的增殖,50μmol／L作用48h后抑制率分别为40．47％和54．49％,半数抑制浓度分别为70．54和48．39μmol／L。双氯芬酸对正常肝细胞株QSG-7701的抑制作用较弱,作用48h的半数抑制浓度为189．91μmol／L。HepG2、Hep3B细胞均表达COX-2 mRNA,QSG-7701细胞几乎不表达COX-2 mRNA。双氯芬酸和化疗药5-氟尿嘧啶均可增强HepG2和Hep3B细胞COX-2 mRNA的表达。结论 双氯芬酸特异性地抑制表达COX-2的肝癌细胞HepG2和Hep3B的增殖,并且诱导COX-2 mRNA表达上调,提示COX-2在肝癌细胞增殖中具有重要意义。     

PGE2通过EP2受体激活cAMP-PKA-CREB信号通路上调SnoN的表达而促进CCLP1细胞的增殖

目的:探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)对人胆管上皮癌细胞CCLP1增殖能力影响的作用机制。方法:用PGE2、EP1～4 4种受体激动剂、AC激动剂Forskolin、PKA抑制剂H89、cAMP拟似物db-cAMP处理CCLP1细胞,通过RT-PCR、Western blot、WST等实验检测SnoN mRNA、SnoN蛋白等表达水平、CREB蛋白磷酸化水平以及CCLP1细胞增殖能力的变化。结果:10μmol/L PGE2处理CCLP1细胞24 h后,SnoN mRNA的表达水平与对照组相比上升了22.5%(P<0.01),SnoN蛋白的表达水平上升了35.6%(P<0.05);10μmol/L EP受体激动剂处理CCLP1细胞24 h后,SnoN蛋白的表达水平与对照组相比明显增高,其中以EP2受体激动剂的作用最明显,上升了64.9%(P<0.05),细胞增殖能力上升了26.5%;10μmol/L AC激动剂Forskolin处理CCLP1细胞24 h后,SnoN蛋白的表达水平及CREB蛋白的磷酸化水平较对照组分别上升了25.1%、71.3%(P<0.05),细胞增殖能力也上升了...     

环氧化酶-2与氧化应激在急性肝损伤中的作用

目的 :研究环氧化酶 2 (COX 2 )在急性肝损伤中的表达 ,探讨COX 2与氧化应激在急性肝损伤中的作用。　方法 :将 3 0只Wistar大鼠随机分为三组 ,正常组 10只 ;对照组 10只 ,腹腔注射CCl4原液 1ml/kg ;实验组 10只 ,腹腔注射CCl4原液 1ml/kg、2h后给予 80mg/kg塞来昔布 (Celecoxib)灌胃。　 结果 :血清学检测结果显示 ,对照组和实验组大鼠血清丙氨酸转氨酶 (ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)和细菌内毒素 (LPS)均较正常组大鼠显著增高(P <0 .0 5 ) ,对照组与实验组大鼠血清ALT、AST和LPS水平差异显著 (P <0 .0 5 )。对照组和实验组大鼠肝匀浆一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)均较正常组大鼠明显增高 (P <0 .0 5 ) ,对照组与实验组大鼠血清NO和MDA水平差异显著 (P <0 .0 5 )。H E染色光镜下示对照组和实验组大鼠大量肝细胞肿胀、空泡变性和脂肪变性 ,部分肝细胞坏死。免疫组化结果显示COX 2在正常肝组织无表达 ,实验组大鼠较对照组大鼠COX 2表达明显增高 (P <0 .0 5 )。　结论 :急性肝损伤后 ,内毒素刺激COX 2表达 ,氧化应激反应加剧 ,COX 2表达和NO水平增高可能是机体对抗损伤的一种保护性机制。     

体外培养的皮层神经元和胶质细胞上COX-2的表达

目的观察环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）在体外培养的皮层神经元和胶质细胞上的表达。方法在体外培养鼠的皮层神经元和神经胶质细胞,神经元培养第6、10、12d时收获细胞,神经胶质细胞传代后培养待细胞密度约为每毫升5×105时和6×105时收获细胞,然后进行免疫染色以观察神经元和胶质细胞上COX-2的表达。同时用免疫荧光双标记法对COX-2阳性的细胞类型进行了鉴定。结果体外培养6、10和12d时的胚鼠皮层神经元细胞均呈现OX-2免疫阳性,但不同时间点免疫染色强度不同,10d时免疫染色最强;而体外培养的新生鼠的皮层神经胶质细胞只有极个别细胞呈现COX-2免疫阳性;双标记结果表明这些胶质细胞既有星形胶质细胞,又有小胶质细胞。结论离体条件下COX-2主要在神经元上表达,而神经胶质细胞则很少表达,与在体研究结果基本一致。     

不同剂量厄贝沙坦对兔主动脉粥样硬化中环氧合酶2的影响

目的 检测环氧合酶-2(COX-2)在兔主动脉粥样硬化(AS)中的表达,探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-1型受体拮抗剂厄贝沙坦(Irbesartan,Irb)对COX-2表达的影响及其可能的抗AS效应.方法 健康雄性新西兰兔30只,按随机数字表法分为对照组、高胆固醇组(HC)、小剂量Irb(Sirb)组(10 mg·ks-1·d-1)、中剂量Irb(Mirb)组(20 mg·kg-1·d-1)和大剂量Irb(Lirb)组(30 mg·kg-1·d-1),每组6只.喂养14周后,取各组兔主动脉,行AS斑块面积及主动脉内膜/中膜值测定,采用RT-PCR、免疫组化和Western blot法分别检测主动脉AS斑块中COX-2 mRNA和蛋白的表达.结果 Lirb和Mirb组AS斑块面积均较HC组显著缩小[分别为(14.84±2.51)%和(33.77±3.53)%比(61.74±4.33)%,P＜0.01].Lirb和Mirb组内膜/中膜值较HC组明显减小[分别为(0.11±0.07)和(0.50±0.08)比(0.92±0.07),P＜0.01].HC组COX-2 mRNA的表达较对照组显著增强[(1.01±0.04)比(0.024±0.01),P＜0.01];Lirb和Mirb干预后COX-2 mRNA的表达量明显下降[分别为(0.24±0.03)和(0.47±0.05),P＜0.01].14周时HC组主动脉AS斑块中COX-2蛋白表达明显增强,Mirb和Lirb干预后显著降低[免疫组化分别是(0.81±0.06)比(0.47±0.10)和(0.14±0.02)(P＜0.01),Western blot 分别是(1.10±0.05)比(0.89±0.02)和(0.51±0.04)(P＜0.01)].结论 COX-2参与AS的发生和发展,中剂量和大剂量Irb均能降低AS斑块中COX-2的表达而抗AS,Irb对AS的有益作用可能是通过抑制COX-2表达实现的.     

特异性环氧化酶Ⅱ抑制剂治疗慢性盆腔疼痛综合征的临床研究

目的从治疗学的角度探讨慢性盆腔疼痛综合征的可能病因及治疗选择.方法112例门诊诊断为慢性盆腔疼痛综合征的患者根据前列腺液中白细胞数量大于或小于等于10个/高倍视野,分为Ⅲa(炎症性)组和Ⅲb(非炎症性)组;两组患者接受相同的治疗,口服塞来昔布,治疗随访6周;比较两组患者治疗前后慢性前列腺炎症状评分及前列腺液中卵磷脂小体数量的变化.结果每组患者治疗前后及两组患者治疗后的症状评分和前列腺液中卵磷脂小体数量的变化均有统计学意义.结论炎症反应能导致慢性盆腔疼痛综合征;特异性环氧化酶Ⅱ抑制剂对慢性盆腔疼痛综合征有较好的疗效,其对Ⅲa型(炎症性)的疗效优于Ⅲb型(非炎症性).