ISO通过CaMKⅡ和PKA激活RyR2诱发心肌细胞凋亡

目的：探讨异丙肾上腺素（ISO）持续激活Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）和蛋白激酶A (PKA)后对心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：将H9C2心肌细胞分为Control组、ISO组、ISO+KN93 (CaMKⅡ抑制剂)组、ISO+H-89 (PKA抑制剂)组，经不同药物干预后，通过CCK-8法检测心肌细胞活力，Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒和流式细胞术检测心肌细胞凋亡，Western blot法检测CaMKⅡ、PKA、兰尼碱受体2 (RyR2)及凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Bax、Bcl-2的表达情况，荧光显微镜观察细胞形态变化和钙荧光强度。结果：与Control组比较，ISO组细胞活性降低，CaMKⅡ、PKA和RyR2的磷酸化水平增加，凋亡蛋白Cleaved-Caspase3、Bax/Bcl-2表达增加，胞内钙含量增多，细胞凋亡率增多，差异均有统计学意义（P<0.01）；与ISO组比较，ISO+KN93和ISO+H-89组细胞活性增高，CaMKⅡ、PKA和RyR2的磷酸化水平降低，凋亡蛋白Cleaved-Caspase...     

沙库巴曲缬沙坦对心肌梗死后心力衰竭大鼠室性心律失常的影响及其机制

目的 探究血管紧张素受体-脑啡肽酶抑制剂(angiotensin receptor neprilysin inhibitors,ARNI)沙库巴曲缬沙坦(sacubitril)对心肌梗死后心力衰竭(heart failure,HF)大鼠室性心律失常的影响及其可能机制。方法 采用左冠状动脉前降支结扎法制作SD大鼠心肌梗死后心力衰竭模型,随机分成心衰组(HF组)、沙库巴曲缬沙坦组(HF+ARNI组)(68 mg/kg·d^-1,灌胃)、缬沙坦组(HF+ARB组)(30 mg/kg·d^-1,灌胃)、MCU抑制剂-钌红组(HF+RR组)(2 mg/kg·d^-1,腹腔注射)。另设假手术组(Sham组)。连续药物干预4周。药物干预前和结束后行超声心动图检查。开胸burst刺激,检测大鼠室性心律失常诱导率。HE染色观察大鼠心脏组织病理形态学的改变。Western blot法检测大鼠心肌线粒体钙单向转运体(mitochondrial Ca²⁺uniporter protein,MCU)表达。结果 与Sham组相比,H...     

CaMK Ⅱ途径在慢性心衰模型触发性心律失常产生中的作用

目的研究异丙肾上腺素和高频率刺激对心衰心肌细胞晚发后除极(DADs)产生的影响以及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)途径在DADs产生中的作用。方法制备家兔慢性心衰模型,酶解法分离心室肌细胞,将细胞分为正常对照组(Ctl组)、正常对照+异丙肾上腺素干预组(Ctl+ISO组)、慢性心衰组(CHF组)、慢性心衰+异丙肾上腺素干预组(CHF+ISO组)、慢性心衰+异丙肾上腺素干预+KN93干预组(KN93组)。应用全细胞膜片钳技术记录动作电位(AP),采用含1μmol/L异丙肾上腺素的正钙蒂罗德液灌流心室肌细胞,在1～2Hz电刺激下,诱发心肌细胞产生DADs。在此基础上用KN93(1μmol/L)灌流心衰心肌细胞,观察CaMKⅡ的特异抑制剂KN93对DADs发生率、DADs的幅值、联律间期和发生个数的影响。结果灌流正钙蒂罗德液,并在1Hz电刺激下,Ctl组、Ctl+ISO组、CHF组、CHF+ISO组的DADs发生率分别为15.0%(3/20)、45.0%(9/20)、26.7%(12/45)、92.3%(36/39)。以含1μmol/L异丙肾上腺素和1μmol/L KN93的蒂罗德液灌流心衰心肌细胞,在1Hz电刺激下,KN93组的DADs诱发率为50%(7/14);再给予2Hz的刺激,记录到DADs的幅值为(1.82±0.78)mV、联律间期为(524.62±390.91)ms、个数为(2.42±0.90)。结论异丙肾上腺素和高频率刺激均可诱发心衰心肌细胞DADs的产生;模型应激状态下,KN93可以抑制慢性心衰心肌细胞DADs,CaMKⅡ信号转导途径可能是慢性心衰触发性心律失常产生的重要途径。     

CaMKⅡ对多囊卵巢综合征模型小鼠颗粒细胞中Caspase-3表达的影响

目的：探讨钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在正常小鼠卵巢和多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢组织中的差异表达,阐明CaMKⅡ对PCOS小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法：用蓖麻油溶解脱氢表雄酮(DHEA)皮下注射诱导PCOS小鼠模型(PCOS组),对照组小鼠注射等体积蓖麻油,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组小鼠血清中睾酮水平,阴道涂片监测2组小鼠发情周期变化,HE染色观察2组小鼠卵巢组织病理形态表现,免疫荧光染色法检测2组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ蛋白定位和荧光强度,Western blotting法检测2组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (Caspase-3)蛋白表达水平。采用短发夹RNA (sh-RNA)-CaMKⅡ慢病毒转染人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)建立稳转体系,分为空白对照组、 sh-CaMKⅡ-1组和sh-CaMKⅡ-2组,Western blotting法检测各组KGN细胞中CaMKⅡ和Caspase-3蛋白表达水平。结果：与对照组比较,PCOS组小鼠血清中总睾酮和游离睾酮水平明显升高(P<0.01),发情周期紊乱,停滞于发...     

氯通道阻滞剂DIDS对自发高血压大鼠左心室有效不应期及心室颤动阈值的影响

 [目的]分析不同剂量氯通道阻滞剂DIDS对自发高血压大鼠左心室有效不应期及心室颤动阈值的影响。[方法]32只10周龄雄性自发高血压大鼠随机分成非DIDS处理组及3个DIDS不同剂量(0.05, 0.5, 5.0 umol/Kg. iv)处理组，每组8只，取8只雄性Wistar大鼠作为对照组，分别测定各组大鼠心率、动脉收缩压、心室有效不应期及心室颤动阈值左室质量指数。[结果]①自发高血压大鼠左室质量指数明显大于Wistar大鼠(P<0.01)；②DIDS非处理组的心室颤动阈值明显小于对照组(15.0±1.2 mA vs 26.4±1.5 mA, P<0.01)；③DIDS呈浓度依赖地延长左室肥厚心肌的心室有效不应期和提高左室肥厚心肌的心室颤动阈值(P<0.05)，④心室有效不应期与心室颤动阈值正相关，DIDS的3个不同处理剂量与心室有效不应期或心室颤动阈值正相关。[结论] DIDS可以延长左室肥厚心肌的心室有效不应期，提高左室肥厚心肌的心室颤动阈值。     

激活κ阿片受体改善大鼠心肌缺血导致的血流动力学变化及心律失常

目的 观察κ阿片受体激动剂(U50488H)对心肌缺血所致大鼠血流动力学及心律失常的效应.方法 实验大鼠随机分为4组,Ⅰ组:对照组(手术但未实施缺血再灌注及药物干预);Ⅱ组:缺血/再灌注(I/R)组;Ⅲ组:I/R+U50488H干预组;Ⅳ组:I/R+U50488H+κ阿片受体阻断剂(Nor-BNI)共同干预组.常规监测心电图、心率(HR)、动脉压(ABP)等血流动力学指标;记录发生室性心律失常的种类及其持续时间.结果 选择性κ阿片受体激动剂可显著降低大鼠HR和ABP;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组大鼠心肌缺血导致心室纤颤发生率分别为0、50%、30%、40%;Ⅲ组与Ⅱ、Ⅳ组相比,心室纤颤的发生率和Pugsley评分最低,心动过速的持续时间缩短(P<0.05).结论 U50488H通过上调心脏κ阿片受体的兴奋性产生了抗大鼠心肌缺血所致室性心律失常的作用.     

缺血后处理对大鼠缺血再灌注心律失常的影响

目的 观察缺血后处理对缺血再灌注心律失常的影响,进一步探讨其可能的机制. 方法 建立大鼠心肌缺血再灌注模型,设假手术组(n=8)、缺血再灌注组(n=8)及缺血后处理组(n=8).全程监测心电图,再灌注结束后,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法半定量检测各组Cx43 mRNA的表达水平,并用室性心律失常评分来评价室性心律失常的发生率.结果 RT-PCR显示,缺血再灌注组与假手术组比较,Cx43mRNA的表达水平显著降低(P<0.01),缺血后处理组与缺血再灌注组比较,Cx43 mRNA的表达水平显著增高(P<0.01);监测心电图显示,与假手术组相比,缺血再灌注组的室性心律失常评分显著升高(P<0.01),与缺血再灌注组相比,缺血后处理组的室性心律失常评分显著降低(P<0.01). 结论 缺血后处理能抑制由缺血再灌注导致的心室肌Cx43 mRNA降解,从而减少再灌注心律失常的发生.     

频发心室期前收缩对犬心功能、交感活性和电生理特性的影响

目的 探讨频发心室期前收缩对心功能、心肌电生理和交感神经活性的影响.方法 8只杂种犬植入双腔起搏器,两根电极均植入心室,4只为对照组,4只为心室期前收缩组.心室期前收缩组通过调节房室传导时间造成心室期前收缩两联律模型.起搏前和起搏4周后心脏彩超测量左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF);抽血测试血浆去甲肾上腺素浓度;电生理检查测量心室有效不应期(VERP)和程控刺激诱发室性心动过速.结果 心室期前收缩组在4周的起搏后LVEF和LVESD均较起搏前低(均P＜0.05),LVEDD较起搏前高(P＜0.05);对照组在整个观察期间未见LVEF、LVEDD、LVESD有明显的变化.心室期前收缩组在4周的起搏后VERP较起搏前有延长的趋势,对照组在观察期间VERP未见明显变化.两组在4周前后均不能程控刺激诱发出持续性室性心动过速和室颤.结论 长时间高负荷的心室期前收缩能造成左心扩大、LVEF下降,还可能引起血浆去甲肾上腺素的水平升高和VERP的延长.     

甲状腺素诱发房性和室性心律失常的实验研究

目的:应用单相动作电位技术,通过比较甲亢状态下心房肌和心室的电生理特性的改变来探讨发生房性心律失常的可能机制。方法:24只日本大耳白兔随机分为对照组(12只)和甲状腺素组(12只)。甲状腺素组腹腔注射左旋甲状腺素(L-T4)1 mg/(kg.d)复制甲状腺机能亢进模型。对照组给予等体积的生理盐水腹腔注射。两组动物各自随机分为心房组和心室组进入实验(每组6只)。采用单相动作电位记录技术记录四组心房肌和心室肌电生理指标的变化,同时程序刺激诱发房性和室性心律失常。结果:心房肌和心室肌单相动作电位时程(MAP90)、有效不应期(ERP)和ERP/MAP90比值均较对照组明显缩短,具有显著性差异;但是在给予程序性电刺激时,甲状腺素组的房性心律失常的发生率明显高于对照组;而两组间室性心律失常的发生率差异无显著性。结论:甲亢状态下房性心律失常比室性心律失常易于诱发,可能与心房肌单相动作时程和有效不应期非同步性缩短的电异质性,以及和心房解剖结构存在的各向异性密切相关。     

CNP对急性心肌缺血大鼠室性心律失常的影响

目的 探讨C型利钠肽(CNP)对急性心肌缺血大鼠室性心律失常的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=10)、急性心肌缺血组(模型组,n=15)和CNP干预组(CNP组,n=15)。结扎大鼠冠状动脉左前降支构建急性心肌缺血模型,CNP组在造模前30min由股静脉泵入CNP。缺血后15min检测血浆去甲肾上腺素水平,缺血1h后检测大鼠心室电生理指标,留取组织标本,记录并分析缺血后室性心律失常发生情况及心率变异性,检测心脏缺血区和左侧星状神经节环磷酸鸟苷水平。结果 与假手术组比较,模型组缺血后室性心律失常发生率明显增加,心室缺血区有效不应期缩短,动作电位时程电交替升高,心室颤动阈值降低,心率变异性的低频成分及低频成分与高频成分的比值升高,血浆去甲肾上腺素水平升高,心肌缺血区及左侧星状神经节环磷酸鸟苷水平明显下降。CNP处理明显改善心肌缺血对上述指标的影响。结论 CNP通过抑制交感神经活性减少急性心肌缺血大鼠室性心律失常的发生。     

右室中位间隔起搏治疗缓慢型心律失常的临床效果观察

目的:评价应用主动固定电极行右室中位间隔起搏治疗缓慢型心律失常的可行性、有效性与安全性。方法:选择2014年9月-2015年9月在本院心血管内科行永久性起搏器植入术的缓慢型心律失常患者40例,随机分成两组,每组各20例,分别行右室中位间隔起搏(RVSP组)和右室心尖部起搏组(RVAP组)。并对比两组心室电极植入时间、术中透视时间,心室起搏心电图QRS波群宽度,术毕与术后3个月电极阈值、感知、阻抗,术前与术后3个月左室射血分数(LVEF)、室间隔与左室后壁运动延迟时间(SPWMD)等指标,并记录术中、术后相关不良反应。结果:与RVAP组相比,RVSP组电极植入时间与透视时间比较差异无统计学意义(P0.05)。两组术毕及术后3个月阈值、感知、阻抗,以及术前与术后3个月LVEF比较差异均无统计学意义(P0.05)。与RVAP组相比,RVSP组心室起搏心电图QRS波形较窄,SPWMD更少,两组比较差异均有统计学意义(P0.01)。本试验中未发现围术期相关的不良反应。结论:主动固定电极右室中位间隔起搏安全有效,适宜县区级医院临床推广应用。     

超速起搏预适应保护缺血心肌的实验观察

目的　探讨超速起搏预适应 (PP)对缺血再灌注心肌梗塞范围及室性心律失常发生率的影响。　方法　 2 4只健康家兔随机分为缺血再灌注损伤组 (IR组 )和超速起搏预适应组 (PP组 ) ;测定两组梗塞区、危险区的心室重量 ,计算梗塞范围 ,并对室性心律失常发生率进行评分。　结果　 (1)心脏 IR组和 PP组梗塞区检测结果 :梗塞区心室重量为 44 1.3± 31.0 3m g比 175 .7± 41.8m g,梗塞范围为 42 .4%± 3.6 %比 16 .7%± 1.2 % ,差异有显著性(P<0 .0 1)。 (2 ) IR组和 PP组室性心律失常发生率评分为 3.6 7± 0 .89比 1.83± 0 .72 ,差异有显著性 (P<0 .0 1)。　结论　 (1) PP降低心肌急性缺血再灌注时梗塞范围 ;(2 ) PP降低心肌急性缺血再灌注时室性心律失常的发生。     

最小化心室起搏模式的临床比较

目的评估起搏器减少右心室起搏程序模式的临床疗效和安全性。方法因病态窦房结综合征而植入Medtronic AdaptaADD01型双腔起搏器的患者32例,分别以心室起搏管理(MVP)模式、固定延长房室间期(LAVD)模式和增强的房室间期自动搜索(Search AV+)模式起搏2个月后,比较此三种能减少右心室起搏工作模式的心室起搏百分比及心律失常情况。结果在6个月的随访中,所有患者未观察到与起搏器相关的房性和室性心律失常及其他不良反应事件。MVP模式下,心室起搏百分比最低,为0.35%,明显低于Search AV+模式的0.70%和LAVD模式的0.65%,差异均有统计学意义(P<0.05);Search AV+模式下的心室起搏百分比略高于LAVD模式,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论在最小化心室起搏策略中,MVP模式优于Search AV+模式和LAVD模式。     

心力衰竭幼鼠心肌钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ表达及药物干预研究

目的：研究缬沙坦对心力衰竭（heart failure,HF）幼鼠心室肌内钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ）表达的影响。方法：采用腹主动脉部分缩窄（abdominal aortic constriction,AAC）的方法建立3周龄SD幼鼠的HF模型,同时设假手术组;术后4周将HF鼠随机分为HF组和缬沙坦治疗组,缬沙坦组每日灌胃给药,HF组和假手术组给予安慰剂;术后8周使用高频超声检测大鼠左心室收缩和舒张末期内径（left ventricular-internal dimension systole,LVIDs;left ven－tricular-internal diastolic diameter,LVIDd）、左心室收缩和舒张末期容积（left ventricular end-systolic volume,LVESV;left ven－tricular end diastolic volume,LVEDV）、左心室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）、左心室短轴收缩率（left ventricu－lar fractional shortening,LVFS）;左、右心室重量指数（left ventricular mass index,LVMI;right ventricular mass index,RVMI）;West－ern blot检测CaMKⅡ及其亚型表达情况。结果：与假手术组（n=8）比较,HF组（n=10）LVIDs、LVESV均明显升高（F=21.082,P<0.001;F=14.178,P=0.001）,LVEF、LVFS均明显降低（F=103.766,P<0.001;F=62.953,P<0.001）,LVIDd、LVEDV无明显差异;LVMI明显增加（F=13.272,P =0.01）;心室肌细胞内CaMKⅡ表达升高1.95倍（F=7.541,P=0.026）,CaMKⅡ亚型（δB+δ9）表达升高1.93倍（F=7.042,P=0.029）,CaMKⅡδC表达升高1.93倍（F=6.714,P=0.045）;经缬沙坦治疗后,缬沙坦组（n=8）与假手术组比较,超声结果（LVIDs、LVIDd、LVESV、LVEDV、LVEF、LVFS）、LVMI和CaMKⅡ表达差异无统计学意义（P >0.05）。结论：HF幼鼠心室肌上CaMKⅡ表达增高;缬沙坦改善HF心脏收缩功能,可能与其部分下调心室肌细胞内CaMKⅡ的表达有关。     

家兔左室心肌肌浆网Ca2+-ATP酶活性与心力衰竭后室性心律失常的关系

目的 探讨家兔左室心肌肌浆网Ca2+-ATP 酶(SERCA2a)活性与心力衰竭(心衰)后室性心律失常的关系.方法 采用主动脉瓣返流联合腹主动脉缩窄的方法制作家兔心衰模型.随机分为假手术组、假手术姜黄素组、心衰组、心衰姜黄素组.心衰姜黄素组与假手术姜黄素组给予姜黄素胶囊100 mg/(kg·d),心衰组与假手术组给予等量空白胶囊,连续给药10 周.手术10 周后行心脏彩超检测心脏结构和功能变化,对所有家兔行在体电生理检查,观察左室心尖部三层心肌单相动作电位复极90%的时程(MAPD90)并计算跨室壁复极离散度(TDR),测定心室颤动(室颤)阈值.采用差速离心法提取左室心肌肌浆网,用孔雀绿比色法检测SERCA2a 活性.结果 与假手术组相比,心衰组左室内径增大(P<0.05),左室射血分数明显降低(P<0.05),SERCA2a 活性显著减弱(P<0.05),MAPD90 延长(P<0.05),TDR增大(P<0.05),室颤阈值降低(P<0.05).与心衰组相比,心衰姜黄素组左室内径缩小(P<0.05),左室射血分数显著提高(P<0.05),SERCA2a 活性明显增强(P<0.05),MAPD90 缩短(P<0.05),TDR 减小(P<0.05),室颤阈值升高(P<0.05).假手术姜黄素组上述指标较假手术组差异无统计学意义(P>0.05).结论 左室容量和压力超负荷可成功制作家兔心衰模型,通过姜黄素提高心衰家兔SERCA2a 活性,可改善心衰心脏电生理异常,降低室性心律失常风险.     

杭白菊乙酸乙酯提取物对大鼠实验性心律失常的影响及其机制

目的:研究杭白菊乙酸乙酯提取物(CME)对大鼠实验性心律失常、心肌易损性与动作电位的影响及其机制.方法:采用乌头碱诱发的整体大鼠心律失常模型研究CME对大鼠实验性心律失常的影响.采用Langendorff离体心脏灌流方法,结扎冠状动脉左前降支30 min后复灌复制局部缺血/复灌模型,测定心肌缺血复灌前后的心室电生理学参数:舒张期兴奋阈(DET)、有效不应期(ERP)、室颤阈(VFT).采用常规微电极技术记录大鼠右心室乳头肌动作电位,观测静息电位(RP)、动作电位幅度(APA)、有效不应期(ERP)、动作电位的时程(APD90)、动作电位0期最大除极速率(Vmax).结果:与对照组相比,CME明显降低室性心动过速发生次数,缩短其持续时间,延迟室性早搏、室性心动过速出现时间,心律失常评分显著降低.与对照组相比,CME明显延长离体大鼠心脏的ERP,并对缺血/复灌所致的ERP缩短和VFT降低有明显的减弱作用.与对照组相比,CME明显延长大鼠右室乳头肌动作电位APD50和APD90,降低动作电位Vmax,对动作电位的其他参数影响不显著.结论:CME具有降低大鼠心室易颤性、抗心律失常的作用,其机制可能涉及延长心肌动作电位时程及有效不应期,提高大鼠心脏电生理稳定性.     

阿魏酸对慢性心力衰竭小鼠心室胶原重构的影响

目的探讨阿魏酸对慢性心力衰竭小鼠心室胶原重构的影响。方法 40只小鼠分为假手术组、假手术阿魏酸组、心衰组、心衰阿魏酸组;心衰组和心衰阿魏酸组采用主动脉缩窄术制作压力超负荷慢性心力衰竭小鼠模型。手术8周后行超声心动图检测心脏结构和功能变化;心肌天狼猩红染色观察胶原变化;取左室游离壁心室肌,利用RT-PCR及免疫组化方法观察心肌纤维化指标基质金属蛋白酶9(MMP9)mRNA和蛋白表达变化。结果与假手术组相比,心衰组、心衰阿魏酸组左室内径增大、室壁增厚,射血分数降低(均P<0.05),MMP9mRNA和蛋白表达均增强,胶原面积占总面积的比值明显增大(均P<0.05);与心衰组相比,心衰阿魏酸组左室内径减小、室壁肥厚程度降低,射血分数升高(均P<0.05),MMP9mRNA和蛋白表达水平减弱,胶原面积明显减小。结论阿魏酸能够抑制慢性心力衰竭小鼠心肌MMP9的表达,在一定程度上改善了心室胶原重构和心脏功能。     

京尼平苷通过AMPK/mTOR通路抑制帕金森模型氧化应激及细胞凋亡的机制研究

目的 探究京尼平苷(geniposide, GP)通过AMP依赖的蛋白激酶［Adenosine 5′-monophosphate(AMP)-activated protein kinase, AMPK］/哺乳动物雷帕霉素靶点(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路对1-甲基4-苯基-四氢吡啶离子(1-methyl-4-phenyl 1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPP+)诱导人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞获得的帕金森细胞模型细胞凋亡及氧化应激损伤的影响。 方法 以SH-SY5Y细胞为研究对象,按照处理方法将其分为Control组(正常培养)、MPP+组(在Control组基础上添加1 mmol/L MPP+)、GP组(在Control组基础上添加100 μmol/L GP)、MPP++GP组(在MPP+组基础上添加100 μmol/L GP)。使用丙二醛(malondialdehyde,MDA)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的酶联免疫吸附测定试剂盒、流式细胞术及Western blot法检测各组细胞氧化应激损伤、细胞凋亡及AMPK、mTOR、LC3蛋白相关表达水平的差异。应用AMPK激活剂、mTOR抑制剂处理后,再次使用Western blot检测MPP+组及MPP++GP组细胞上述蛋白表达水平的变化。 结果 相较于Control组,MPP+组细胞凋亡率、LDH活性、MAD含量、AMPK磷酸化水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显增加,SOD活性及mTOR磷酸化水平明显降低(P＜0.01)。相较与MPP+组,MPP++GP组细胞凋亡率、LDH活性、MAD含量、AMPK磷酸化水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显降低,SOD活性及mTOR磷酸化水平明显增加(P＜0.01)。而添加AMPK激活剂或mTOR抑制剂后,MPP+组及MPP++GP组细胞AMPK磷酸化水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显升高,mTOR磷酸化水平明显降低(P＜0.05)。 结论 GP部分通过调控AMPK/mTOR信号通路抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡、氧化应激损伤及自噬。     

阿伐他汀通过PI3K/Akt/mTOR途径调节白血病细胞自噬的作用及机制

目的:研究阿伐他汀对白血病细胞K562自噬的影响及相关信号机制。方法:取对数生长期的K562细胞,分为阴性对照组、阿伐他汀组、阿伐他汀+PI3K抑制剂(LY294002)组、阿伐他汀+mTOR抑制剂(雷帕霉素)组。共培养24h后,采用吖啶橙染色观察细胞自噬体的变化,Western Blot检测Ⅱ型自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)和自噬血管基因Beclin-1的表达,RT-PCR和Western Blot检测磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化mTOR(p-mTOR)的表达。结果:与阴性对照组相比,阿伐他汀抑制白血病细胞K562自噬体的形成(P<0.05),下调LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达(P<0.05)。与阿伐他汀组相比,阿伐他汀+PI3K抑制剂(LY294002)组LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达增加(P<0.05);阿伐他汀+mTOR抑制剂(雷帕霉素)组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达增加(P<0.05)。与阿伐他汀组相比,阿伐他汀+PI3K抑制剂(LY294002)组p-Akt和p-mTOR基因的mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05);阿伐他汀+mTOR抑制剂(雷帕霉素)组p-Akt和p-mTOR基因的mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05)。结论:阿伐他汀可以抑制白血病细胞K562自噬,推测其机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。     

充血性心力衰竭患者心律失常的临床分析

目的探讨充血性心力衰竭(心衰)患者心律失常的发生情况及其对预后的影响。方法119例心衰患者按NYHA分级标准分为4组,进行动态心电图及超声心动图检查,结果进行χ2检验。结果心功能Ⅰ、Ⅱ级组房性与室性心律失常发生率,心功能Ⅲ、IV级组与Ⅰ、Ⅱ级组复杂室性心律失常发生率以及左室舒张末内径增大组与正常组室性心律失常发生率的差异均有统计学意义。结论室性心律失常的发生率与心功能减退的程度及左室重构关系密切。