组织工程化皮肤的研制与应用

组织工程皮肤的研究发展迅速，目前已有许多组织工程化皮肤具有与正常皮肤相似的结构及屏障功能，应用于临床可达到理想愈合效果。根据人工表皮、无细胞活性的人工真皮替代物和有细胞活性的人工皮肤三大类，对组织工程皮肤的研制与应用进行介绍。     

组织工程化皮肤及临床应用研究进展

皮肤是人体最大的器官组织,是机体与外界环境接触的屏障。具有保护、分泌、代谢和感觉等重要功能。当由于外界损伤或疾病等因素造成皮肤缺损时,可造成屏障功能丧失,可以造成感染、水电解质失衡、免疫低下、多脏器衰竭甚至是致命的。自1975年,Rheinwald和Green以3T3细胞作为滋养层连续培养人类表皮角阮细胞获得成功,为组织工程化皮肤提供了坚实的理论和实践基础。随后,胶原海绵、脱细胞基质以及自体或异体细胞复合皮肤产品或商品应运而生。近年来,干细胞研究、转基因技术又为组织工程增加了更强的生命力。本文对组织工程皮肤及其临床应用进展进行了综述。     

组织工程化皮肤及临床应用研究进展

皮肤是人体最大的器官组织，是机体与外界环境接触的屏障。具有保护、分泌、代谢和感觉等重要功能。当由于外界损伤或疾病等因素造成皮肤缺损时，可造成屏障功能丧失，可以造成感染、水电解质失衡、免疫低下、多脏器衰竭甚至是致命的。自1975年，Rheinwdd和Green以3T3细胞作为滋养层连续培养人类表皮角阮细胞获得成功，为组织工程化皮肤提供了坚实的理论和实践基础。随后，胶原海绵、脱细胞基质以及自体或异体细胞复合皮肤产品或商品应运而生。近年来，干细胞研究、转基因技术又为组织工程增加了更强的生命力。本对组织工程皮肤及其临床应用进展进行了综述。     

角质细胞、混合皮肤移植和免疫调节

1 皮肤相关淋巴细胞(SALT):皮肤免疫系统面临概念的更新1.1 SALT只包括真皮→真皮、表皮同时涉及;1.2 表皮中免疫细胞为郎罕细胞→同时包括郎罕细胞(Lhc)、角质细胞(Kc)和T细胞;1.3 皮肤免疫应答由Lhc捕获抗原至引流淋巴结激活T细胞→T细胞可以同时在表皮和真皮中被激活;1.4 角质细胞主要参与炎症反应发挥屏障作用→可直接参与T细胞激活.但同种异体移植中Kc对T如何发挥作用未明?分泌细胞因子、趋化T细胞因子?直接刺激?递呈抗原?免疫调节?     

Transwell模拟生物屏障

Transwell,即穿透小室,既是一种试验装置,也是一种试验技术。Transwell可用于生物屏障的建立、细胞共培养、细胞趋化、细胞迁移和细胞侵袭等多方面的研究。在模拟生物屏障方面,研究较多较成熟的有血脑屏障、肠黏膜屏障、血视网膜屏障、胎盘屏障和腹透屏障。本文将分别对上述五种屏障的建立进行阐述。     

成纤维细胞生长因子在皮肤创面组织修复中的应用

皮肤是机体的重要屏障，烧伤后引起的局部或全身损害均与皮肤屏障的丧失有关，尽早修复缺损皮肤，封闭创面，重建皮肤屏障，有利于创面愈合和促进组织修复，最大限度地恢复皮肤的防御功能与外观。而目前大面积深度烧伤患者常存在严重的皮源不足，皮肤替代物的性能又较差，因此如何提高植皮成活率，改善皮肤替代物的性能就成为重要的因素。     

创面覆盖物

皮肤具有重要的物理、化学及生物学屏障功能，创伤、烧伤后引起的局部或全身病理变化均与皮肤屏障的损害有关。尽早封闭、修复缺损皮肤并最大可能地恢复功能与外观成为创伤及烧伤治疗的重要目标。因此，创面覆盖物的研究已引起越来越多的重视。     

组织蛋白酶参与皮肤生理的研究进展

组织蛋白酶(cathepsin,Cat)是半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员,与皮肤肿瘤、慢性炎症等多种皮肤病密切相关.近年来多项研究表明Cat在人类皮肤生理方面的重要意义,主要集中于CatD/CatL/CatV维持表皮正常分化和完整屏障,CatB/CatD/CatG/CatK维持真皮细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的稳态,CatV保证毛囊正常发育和生长周期.这些研究已深入细胞信号、基因调控,增进对正常皮肤生理调控的理解,未来也可能应用到疾病的基因治疗领域.     

角质形成细胞在银屑病中作用的研究进展

银屑病是慢性复发性皮肤疾病,其发生与免疫功能失调、环境因素、信号转导通路紊乱及银屑病易感基因相关。既往研究表明角质形成细胞(KC)在银屑病的发生发展中发挥重要作用。银屑病中KC如何影响炎症细胞的募集、活化,及炎症因子如何导致炎症级联放大尚不明确。KC作为银屑病治疗的靶标,具有广泛的应用前景。本文从银屑病中KC的屏障功能、增殖分化及角质形成细胞与免疫细胞的相互作用作综述。     

组织工程皮肤的生物学特性及其临床应用评价

背景:尽管组织工程皮肤已应用于皮肤缺损的修复治疗,但远未达到完全代替永久性皮肤的程度。目的:探讨不同类型组织工程皮肤的生物学特性及其临床应用评价。方法:应用计算机检索Pubmed数据库(1990-01/2005-12),检索词为"tissue-engineeredskin";应用计算机检索CNKI数据库(2002-01/2007-12),检索词为"组织工程皮肤"。结果与结论:计算机初检得到226篇文献,阅读标题和摘要进行初筛,排除因研究目的与此文无关或内容重复性的研究,共保留11篇文献进行分析。皮肤组织工程学目的是创建出组织学及功能特性上最接近人类皮肤组织的皮肤替代物,尽管目前已经有多种较为成熟的组织工程皮肤产品应用于临床,并且又研制了多种人工皮肤类型,但是它们大多数只是在结构上与人体皮肤类似,只具有皮肤的屏障功能,由于缺乏皮肤附件,所以它们并不具备完整的皮肤功能,并没有达到真正的皮肤重建。理想的皮肤替代物应具有表皮层和真皮层,真皮层可以快速的血管化和神经再分布,可促进快速的生理性的伤口修复;表皮层可以快速地获得充分的屏障和保护功能,与伤口创面充分一体化。一种良好的真皮载体除了应具备较好的组织相容性外,还必须具有一定的理化性能,如强度、柔软度、弹性、透气、透湿性能,才能保证真皮和创面贴附良好,为细胞生长提供理想的纤维支架,从而促进自体皮生长。组织工程皮肤应用前景良好,但目前在生物相容性、皮肤功能重建等方面仍存在各种问题需要解决。     

siRNA-Tie1下调紧密连接相关蛋白claudin-5、occludin和ZO-1增加血肿瘤屏障通透性

目的研究Tie1 AS和Tie1表达变化对血肿瘤屏障通透性的影响和相关机制。方法建立体外血脑屏障和血肿瘤屏障模型,Real-time PCR检测h CMEC/D3细胞中Tie1 AS和Tie1的表达水平。转染p IRES2-EGFPTie1 AS表达载体上调体外血肿瘤屏障模型h CMEC/D3细胞中Tie1 AS的表达,Western blot检测Tie1的表达变化。将si RNA-Tie1转染人h CMEC/D3细胞并建立体外血肿瘤屏障模型,跨内皮电阻测量系统分析血肿瘤屏障通透性变化;Western blot和免疫荧光法检测h CMEC/D3细胞中紧密连接相关蛋白claudin-5、occludin和ZO-1的表达和分布变化。结果和正常脑微血管内皮细胞相比,体外血肿瘤屏障模型h CMEC/D3细胞中Tie1的表达显著增加,而Tie1 AS的表达显著降低。上调体外血肿瘤屏障模型内皮细胞中Tie1 AS的表达水平,能够显著降低Tie1的表达。下调体外血肿瘤屏障模型内皮细胞中Tie1的表达后屏障通透性显著下降,伴有claudin-5、occludin和ZO-1的表达下调以及在细胞膜上呈不连续分布。结论体外血肿瘤屏障模型内皮细胞中低表达的Tie1 AS能够负性调控Tie1的表达,进而通过调节紧密连接相关蛋白的表达和分布影响屏障的通透性。     

黑素细胞对表皮渗透屏障功能的影响

表皮渗透屏障功能是表皮的主要生理功能之一,深肤色个体较浅肤色个体具有更优越的表皮屏障功能,提示黑素细胞和/或黑素与表皮渗透屏障功能密切相关.有关黑素细胞对角质形成细胞及对表皮渗透屏障功能影响的机制尚不清楚,近几年研究发现,酸性黑素小体进入表皮可能是深肤色者表皮屏障功能增强的细胞基础,表皮pH对增强屏障功能重要性不可忽视,内源性酸化机理可能提供一个促进深肤色个体表皮酸化的新机制.此外,黑素细胞-角质形成细胞的交叉对话及相关信号机制可能在增强表皮渗透屏障功能中起重要作用.     

缓激肽对胶质瘤血瘤屏障体外模型中钙激活钾电流的作用

目的建立胶质瘤血瘤屏障体外模型,研究缓激肽(BK)对胶质瘤血瘤屏障钙激活钾电流(Ikca)的作用,探讨BK开通血瘤屏障的机制。方法条件培养和共培养,膜片钳全细胞记录。结果条件培养的脑微血管内皮细胞(BMECs)形态无明显变化,胶质瘤C6细胞之间相互接触紧密。共培养的BMECs和C6细胞各自聚集,之间形成界面,1μmol.L-1缓激肽使BMECs和C6细胞界面内钙激活钾电流下降。结论1μmol.L-1的缓激肽抑制部分血瘤屏障体外模型BMECs和C6细胞的钙激活钾电流。     

SIRT在肠屏障中作用的研究进展

沉默信息调节子(SIRT)是一组保守的NAD+依赖的蛋白去乙酰化酶,参与调控细胞的基因稳定、代谢、衰老和凋亡等过程。研究表明,SIRT对肠屏障具有保护作用,其通过参与调节炎性因子的释放、肠上皮细胞间紧密连接蛋白的表达、改变肠道潘氏细胞和杯状细胞的数量等影响肠屏障的结构与功能。     

miR-19a对血肿瘤屏障通透性的影响

目的研究miR-19a对血肿瘤屏障通透性的影响。方法将miR-19a模拟物转染至人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3,应用real-timePCR法检测miR-19a的表达。用过表达miR-19a的hCMEC/D3细胞和人U251胶质瘤细胞建立体外血肿瘤屏障模型,跨内皮电阻测量系统检测血肿瘤屏障跨内皮阻抗值的变化;Western blot和免疫荧光法检测体外血肿瘤屏障hCMEC/D3细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达。结果经miR-19a模拟物转染后,hCMEC/D3细胞中miR-19a的表达水平显著升高;血肿瘤屏障跨内皮阻抗值显著下降;体外血肿瘤屏障hCMEC/D3细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达水平显著降低,在细胞膜上呈不连续分布。结论 miR-19a过表达能显著增加血肿瘤屏障的通透性,其机制之一可能与降低紧密连接相关蛋白相关。     

过表达miR-34a增加血肿瘤屏障通透性机制的研究

目的探讨过表达miR-34a增加血肿瘤屏障通透性的机制。方法将miR-34a模拟物转染至培养的人脑微血管内皮细胞NKIM-6,采用实时荧光定量PCR方法检测miR-34a的表达。用miR-34a模拟物转染的NKIM-6细胞和U87胶质瘤细胞建立体外血肿瘤屏障模型,跨内皮电阻测量系统检测血肿瘤屏障跨内皮阻抗值的变化;western blot和免疫荧光法检测体外血肿瘤屏障NKIM-6细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和claudin-5的表达。结果经miR-34a模拟物转染后,NKIM-6细胞中miR-34a的表达水平显著升高;血肿瘤屏障跨内皮阻抗值显著下降;体外血肿瘤屏障NKIM-6细胞中紧密连接相关蛋白ZO-1和claudin-5的表达水平分别显著降低,在细胞膜上呈不连续分布。结论过表达miR-34a显著增加血肿瘤屏障的通透性,其机制之一可能与降低紧密连接相关蛋白相关。     

角质层渗透性质的有限元数值模拟计算

角质层是皮肤屏障作用的最主要部分，它决定可外界物质对皮肤的渗透情况。本研究在假设角质层细胞为一种三维的十四面体（物理学经典的Tetrakaidecahedron体）下，进行对角质层渗透性质的数值模拟工作。为此，首先完成了对角质层空间结构的网格拆分，拆分过程分两步进行：首先对角蛋白细胞的网格拆分；然后对角蛋白细胞周围的网状脂质体的网格拆分。在数值模拟过程中，则用有限元法得到方程的离散格式，用多重网格算法降低高频误差，提高计算精度。最后，给出了数值模拟结果的可视化效果图。     

儿童激素耐药肾病综合征相关致病基因及其临床检测策略

肾病综合征（NS）是因肾小球滤过屏障受损而引起的一绀临床综合征。肾小球滤过屏障由内皮细胞、基底膜和足细胞构成。多项研究表明,足细胞在肾小球滤过屏障中起关键作用,特别是足细胞相邻足突构成的裂隙膜（slitcliaphragm,SD）[1-4]。依据对激素治疗的反虚可将Ns分为激素敏感型（SSNS）和激素耐药型（SRNS）[5]。     

将目标物质靶向至心脏的研究进展

当前心血管疾病的发病率和死亡率仍位居全球前列。随着分子生物学和细胞心脏病学知识的不断更新，基因治疗已在临床研究中有了长足的进步。然而对于如何将目的细胞或基因成功运送到心脏并发挥作用，仍需克服各种障碍，如解剖、血流机械力、内皮屏障、细胞屏障以及免疫应答等。病毒和非病毒载体，一些细胞及细胞外囊泡、生物材料、外科手术等方法已被广泛运用于各种临床前实验当中。     

烧伤后肠道屏障损害与MODS发生的研究进展

正常状态下，胃肠黏膜屏障包括机械屏障、生物屏障和免疫屏障三部分，它们共同作用形成一个多方面、多层次的防护网，胃肠道依赖于胃肠黏膜屏障的防御机能，能够保护宿主免受肠腔中细菌、内毒素的侵袭。严重烧伤后发生的急性胃肠黏膜缺血损害以及由此而引起的胃肠道屏障功能的改变，可以产生一系列胃肠道功能紊乱，并且是导致烧伤后全身炎症反应综合征（SIRS）和多器官功能障碍综合征（MODS）发生的重要原因。近年来越来越明确，缺血和应激肠道能成为促炎症器官，在内脏缺血再灌注期后，肠源性介质的释放不仅激活巨噬细胞、中性粒细胞和其他促炎症细胞，而且可导致急性远处器官和细胞功能障碍。肠道屏障功能在防止全身感染和MODS中扮演了重要角色。