IFA和HRP-SPA用于狂犬病疫苗免疫后抗体水平测定

<正> 狂犬病疫苗的问世和应用,对狂犬暴露者的保护作用是明显和有效的。但部分暴露者狂苗免疫后仍有发病死亡者,这提示对免疫后抗体水平测定的必要性。为此,我们用免疫荧光法(IFA)和酶标SPA组化法(HRP-SPA)作狂苗免疫后抗体测定。 材料和方法 一、抗原片:由本实验室自制。 二、羊抗人IgG荧光抗体和酶标SPA试剂:     

免疫电极(Immuno Electrode)——特性及其在临床上的应用

作者从四年前开始根据抗体抗原反应试用电学的方法,从事检出生体物质的研究。结果发现,伴随抗体抗原反应的进行,有某些新的电学现象出现。方法是把抗体(或抗原)用化学方法固定在金属电极的表面上,做成“免疫电极”。然后测定电极的电位,若溶液中含有微量的抗原(或抗体),在电极表面上一发生抗体抗原反应,免疫电极则开始产生特有的电响应,利用这种现象即可以检出微量的抗原或抗体。此外,用酶或抑     

单克隆抗体与眼部恶性黑色素瘤

作者获得两种单克隆抗体,它们可与福尔马林固定,石蜡包埋的眼部恶性黑色素瘤组织相关抗原起反应,MAb8-IH和MAb8-2A,是用免疫BALB/c鼠脾细胞与骨髓瘤细胞系Sp2/0、Ag·14融合而制成。这两种McAb都是IgM。用硫酸铵沉淀和Sephacryls-300层析柱将这些抗体由腹水中纯化。两种抗体均能被各种试剂包括过氧化物酶和~(125)Ⅰ标记。     

均质酶免疫测定法

<正> 均质酶免疫测定法(Homogeneous Enz-yme Immunoassay,HEI):是Rubenstin等(1972)创建的一种新型酶免疫测定技术。所谓“均质测定法”指的是在整个操作流程中,没有用理化方法将游离的酶标记物和已同相应抗原或抗体结合的酶标记物进行分离的步骤,仅将各种有关试剂加在一起,反应后就可直接测定结果。HEI可用全自动化仪器分析,重复性较好,也可减少传染性标本污染环境的机会,其敏感性因方法而异,部分方法已接近甚至超过常规的放免测定法(RIA)。测定结果时通常使用普通的分光光     

定量检测抗甲状腺过氧化物酶抗体的吖啶酯化学发光法的建立及初步应用

目的 建立一种用于定量测定血清中抗甲状腺过氧化物酶抗体(Anti-TPO)的吖啶酯为标记物的化学发光免疫分析法并初步进行临床验证.方法 用TPO抗原偶联磁微粒,鼠抗人IgG抗体标记吖啶酯,建立间接法的反应模式.对该方法的线性范围、精密度、检出限、准确度进行测定,并与罗氏的电化学发光试剂进行比对.结果 在5～1 000 ...     

用单克隆抗体的免疫测定技术

前言 测定生物体内的微量激素、血浆蛋白、肿瘤特异性抗原、病毒抗原、药物或各种自身抗体等,主要用以放射免疫测定和酶免疫测定为代表的免疫测定(定量)技术(immunoassay),但在被测抗原中有些化学构造因与其他抗原类似或不能完全精制纯化的抗原,用过去常规抗血清检测法来正确地测定,则存在不少困难。这是因为抗血清中含有抗多种抗原决定簇的不均一抗体,测定具有类似构造的抗原会产生免疫交叉反应,以致影响测定值。     

银强化金标记免疫吸附剂试验的方法学研究

银强化金标记免疫吸附剂试验（ＳＥＧＬＩＳＡ）是一种新的非酶、非放射性免疫测定法，本文以兔抗ＢＳＡ抗体测定为模式，就它的原理、试剂制备和方法学最佳化等进行了研究，并与ＥＬＩＳＡ作了对比试验。     

检测单克隆抗体不同ELISA方法的敏感性比较(文摘)

本文比较7种不同的EL1SA方法在检测9株单克隆抗体中的敏感性。7种ELSA按试剂加入程序不间分别为①抗原、鼠抗体、酶标兔抗鼠②抗原、鼠抗体、兔抗鼠、酶标羊抗兔③羊抗体、抗原、鼠抗体、酶标兔抗鼠④鸡抗体、抗原,、鼠抗体、免机鼠、酶标羊抗兔⑤鼠抗体、抗原、兔抗体、酶标羊抗兔⑥兔抗鼠、鼠抗体、抗原、酶标兔抗体⑦羊抗鼠、鼠抗体、抗原、鸡抗体、酶标兔抗鸡。抗原为烟草花叶病毒(TMV)及其衣壳蛋白(TMVP)。用碱     

组织标本固定方法与免疫组织化学染色效果的关系

免疫组织化学技术是免疫学与分子生物学技术和病理形态学相结合的一门新兴学科 ,它是用已知抗体 (或抗原 )检测组织细胞中的未知抗原 (或抗体 )的技术。具有操作简单 ,敏感性高 ,特异性强 ,能将形态和机能密切结合起来等优点 ,已广泛用于病理诊断 ,鉴别诊断及组织胚胎 ,神经解剖等相关学科的研究之中。由于免疫组织化学试剂商品化进程加快 ,特别是即用型试剂和试剂盒的使用 ,使抗体的质量控制有可能规范化、标准化。然而在实际工作中 ,显示抗原抗体结合反应质量不稳定的情况时有发生 ,虽然影响免疫组织化学染色结果的因素较多 ,但作者认为如…     

计算机酶免疫探测器在测定抗原上的应用

本文报道一种用测定电流法,检查血清中抗原决定簇的新而灵敏的方法.本法是由肝炎乙型表面抗原-抗体的生物模型发展起来的,用计算机自动体系进行测定,因此它比其它大多数的免疫技术耗时少、敏度高、同时能消除由于使用同位素带来的许多不便.本法用葡萄糖氧化酶作为酶标,用明胶膜作为载体.抗体与酶标或与明胶膜偶联均采用戊二醛法.测定是采用夹心技术,并用     

用酶联聚乙二醇沉淀分析(ELIPEGA)检测抗血吸虫抗体

假使酶标记抗原在某一PEG浓度下沉淀量极少,而其与相应抗体结合的免疫复合物则沉淀量相对较多,则有可能作为一种特异性抗体测定的方法。我们将此设想试用于抗血吸虫抗体的检测。 将酶标记成虫和虫卵抗原用NS稀释至1:200或1:400,取50微升加入待测血清50微升中,于37℃作用2小时,再加入5.5％PEG溶液(配于0.1M硼砂缓冲液,pH8.4)0.9毫升,于4℃左右过     

单克隆抗体快速诊断巨细胞病毒感染的研究

<正> 用血清学方法检测患者标本中的病毒抗原或抗体,是巨细胞病毒(CMV)感染常用的实验诊断方法,但常因所用免疫试剂的质量问题,而影响试验结果的敏感性与可靠性。为此本室用CMV-AD_(169)病毒株免疫BALB/c鼠,与SP_2/O小鼠骨髓瘤细胞融合,从所获得的杂交瘤细胞株中经多次克隆化培养,筛选出5株能稳定地分泌较高滴度的抗CMV单克隆抗体(McAb)的瘤株。我们用其中一株CM_1的McAb(为IgG2a),在ELISA与免疫酶斑点试     

戊型肝炎病毒各生物标志物之间关系分析

目的 分析戊型肝炎病毒(HEV)各生物标志物之间关系以及各标志物在早期诊断中的作用.方法 从临床收集急性散发性肝炎患者的血清,用酶联免疫(EIA)试剂检测HEV IgG抗体、IgM抗体和抗原,用实时荧光RT-PCR方法 检测核酸,比较其相关关系.结果 在121例急性散发性肝炎中,HEV IgM抗体阴性者为51例,其中抗原或/和核酸阳性者占45.1%;IgM抗体阳性者70份,其中抗原或/和核酸阳性者占67.1%.HEV IgG抗体在IgM抗体、抗原和核酸均阴性的患者中阳性率为53.6%;在IgM阴性而抗原或/和核酸阳性者中阳性率为73.9%;在IgM阳性的HEV感染者中阳性率为92.9%.HEV抗原与核酸的符合率为81.8%,抗原与IgM抗体的符合率为58.7%,而IgM抗体与核酸的符合率为53.7%.结论 在HEV感染的早期诊断中增加抗原和核酸的检测有助于提高检出率.     

基于不同载体制备黄芪甲苷人工抗原的研究

目的:比较牛血清白蛋白(BSA)和匙孔型血蓝蛋白(KLH)两种蛋白载体合成黄芪甲苷人工抗原的免疫原性。方法:用高碘酸钠法将黄芪甲苷(AST)分别与蛋白载体BSA和KLH偶联成AST-BSA及AST-KLH免疫6~8周龄的BALB/c雌性小鼠,测定其血清抗体效价;以卵清白蛋白(OVA)为载体蛋白同样以高碘酸钠法合成AST-OVA作为包被抗原。多抗血清经间接酶联免疫吸附法(indirect enzyme-linked immunosorbent assay,iELISA)和间接竞争酶联免疫吸附法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)检测其抗体效价及特异性。结果:经AST-KLH免疫的多抗血清较之AST-BSA免疫的特异性要高,与AST进行竞争酶联免疫检测,其IC50值约为5μg/ml。两种人工抗原免疫所得血清抗体效价均为1∶51 200左右。结论:AST-KLH具有更好的免疫原性,本次实验为进一步建立黄芪甲苷的免疫学检测方法奠定了研究基础。     

复合前列腺特异性抗原的单克隆抗体制备及化学发光法免疫定量检测试剂研究

目的:获得特异性检测复合前列腺特异性抗原(c-PSA)的单克隆抗体配对,建立基于化学发光c-PSA 免疫定量试剂。方法:利用市购c-PSA 抗原免疫6 周龄雌性BALB/ c 小鼠,间接法ELISA 差异筛选抗c-PSA、游离前列腺特异性抗原(f-PSA)、总前列腺特异型抗原(t-PSA)的抗体,抗体配对后化学发光定量检测血清中c-PSA 蛋白。结果:获得抗体配对1A10/7D6-SAE,经c鄄PSA 标准品及临床血清样本初步筛选,该抗体配对适用于基于化学法发光的免疫反应定量检测试剂的开发;血清阳性样本与阴性样本检测结果显示具有统计学意义(P<0.000 1);阳性样本定量结果与Siemens 公司复合前列腺特异性抗原测定试剂盒(直接化学发光法)的相关系数为0.97;线性范围为0郾1 ~ 100 ng/ ml;检测灵敏度为0.005 ng/ ml。结论:成功筛选获得特异性检测c-PSA 的抗体配对,并开发c鄄PSA 化学发光免疫定量试剂,其检测能力与国际主流试剂相当。     

介绍一种新的相分离免疫测定技术

免疫标记技术是一项微量免疫测定技术,它把标记物的高灵敏度和血清学反应的高度特异性结合起来,大大提高了方法的敏感性和特异性。目前,这项技术已广泛地应用于各个领域。常用的免疫标记技术有:放射免疫测定法(RIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光技术等等。这些方法首先需要把已知的抗原或抗体固定在特定的固相上,然后加上含有相应抗体或抗原的溶液,因此,溶液中的抗体或抗原只能与包被于固相上的抗原或抗体的游离的结合部位发生反应,这就限制了抗原抗体作用的面     

用基因重组乙肝表面抗原与血源乙肝表面抗原检测抗-HBs的比较

目前 ,基因重组酵母乙肝疫苗已被广泛应用 ,在对该疫苗免疫效果观察中发现 ,用原有的检测抗 ＨＢｓ的ＲＩＡ试剂检测基因重组疫苗 ,免后所得的抗体阳转率及抗体几何平均滴度 (ＧＭＴ)低于血源疫苗免后效果 ,但是母婴阻断效果却显示基因重组疫苗优于血源疫苗〔1〕。针对基因重组疫苗免疫效果中的结果不一致 ,有学者对不同来源的乙肝表面抗原进行了分析 ,发现基因重组抗原和血源抗原在表位密度上有一定的差别〔2 ,3〕。评价疫苗的免疫效果 ,很重要的方法是测定接种者的抗体水平。由此提出用相应抗原制备试剂检测相应抗体 ,将会对基因重组乙肝…     

PBL教学法在免疫组织化学教学中的应用

<正>免疫组织化学技术是利用抗原与抗体结合的特点,用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原[1](或抗体)的分布进行原位检测的技术。在临床常规病理诊断中,免疫组织化学是一种不可缺少的手段。病理专业本科生对这项技术的掌握程度直接影响到日后的临床和科研工作。传统的教学模式以教师讲授为主,学生被动的接受知识,抑制了学生学     

应用酶联SPA结合法测定麻疹IgG抗体

<正> 检测麻疹抗体一般常规采用中和试验或血凝抑制试验。由于前者必须有细胞培养;后者又需用猴红细胞,因此给广泛开展麻疹血清流行病学调查或疫苗免疫后的效果考核带来困难。Shani(1981)报告快速免疫过氧化物酶试验测定麻疹的IgG抗体,具有快速诊断的优越性。我们则以感染麻疹病毒的Vero细胞为抗原,应用酶联葡萄球菌A蛋白(SPA)结合法(简称酶联法)测定人血清中的麻疹IgG抗体,取得满意的结果,为测定麻疹抗体提供敏感而快速的新途径,现报告如下。     

流感病毒A/PR/8/34株HA分子经结合单克隆抗体而引起局部不同抗原部位的构象改变

早先已用抗HA杂交瘤抗体方法描绘了流感病毒A/PR/8/34株HA分子的4个抗原部位(称为Sa、Sb、Ca、和Cb)。本研究中,作者用放射免疫分析(RIA)显示,某些放射性标记的抗体结合抗原部位Sa被同时与部位Ca结合的抗体所增强。反过来电一样,同一种抗Sa抗体增强抗Ca抗体的结合。如果有增强作用的抗体饱合了在病毒免疫吸附剂上所