蟾蜍心肌组织自然冻融的组织学观察

本实验以自然温度(-22℃)冻融蟾蜍心脏。冷冻50分钟后,以温水30℃复温,1—2分钟后,蟾蜍复苏。经组织学常规处理,HE染色,光镜观察:结果发现,整体和开胸腹冻融的心肌组织结构完整,心肌纤维、心肌细胞核及闰盘清楚可见。离体冻融的心脏心肌纤维部分断裂和透明玻璃样变,心肌细胞核增大。上述结果表明:在体蟾蜍心脏可以在—22℃冷冻至少50分钟。蟾蜍在30℃温水中复温,1—2分钟后复苏,心肌组织有活力和功能。     

蟾蜍肌组织自然冻融的组织学观察

本实验观察了冬眠状态下,蟾蜍在体和离体的心脏和骨骼肌冻融后形态学变化。Olympus显微镜观察和图像分析:在体冻融蟾蜍心肌和骨骼肌,组织结构完整。肌纤维,肌细胞,毛细血管均清楚可见。结果表明:蟾蜍心脏及骨骼肌可在自然温度—22℃暴露冷冻50分钟。以500ml温术为30℃复温,1—2分钟,使其心脏和骨骼肌组织恢复活力和功能。     

自然冻融蟾蜍眼球的形态学观察

本实验采用自然和离体冻融(—22),冷冻蟾蜍眼球。将其分为在体和离体冻融。冷冻60分钟后,用0.2%甘油30℃复温,1—2分钟后复苏,速将其眼球经组织学常规处理。HE染色,olympus显微镜观察及图像分析冻融后蟾蜍眼球组织结构的变化。离体眼球组,显微镜下可见:角膜、视网膜、脉络膜、巩膜细胞体积增大,颗粒增多现象。纤维呈透明玻璃样变。在体冷冻复温组,眼球组织结构完整。各种细胞和纤维清楚可见,实验结果提示:蟾蜍眼球可以左—22℃条件下至少保存60分钟。0.1%甘油30℃复温。1—2分钟复苏。实验结果提示:眼球器官具有活力和功能。     

五味子合剂对冻融蟾蜍脑组织的组化影响

本实验采用显微镜和722分光光度计分别观察测定了冻融蟾蜍脑组织碱性磷酯酶(AKPase)活性,及五味子合剂的保护效应,结果表明,药物复温组血浆脂质过氧化物(LPO)和红细胞的malondialdehyde(mda)含量显著低于对照组(P<0.01);全血谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于对照组(P<0.01);脑组织AKPase活性显著高于对照组呈强阳性.提示五味子合剂具有抗脂质过氧化,保护GSH-Px酶活性,对冻融脑组织能间接提高机体清除超氧自由基和羟自由基的能力.这为组织器官的保存和移植提供了理论依据.     

自然冻融蟾蜍血液的理化特性

目的：探讨血液、细胞、亚细胞和分子等不同水平的冻触损伤和低温保护的机制，进而能为冻融损伤的机制和防止冷冻损伤的方法奠定理论基础，而且还能为细胞、组织和器官低温保存的实际应用提供实验依据。这必将促进人体保存以及低温生物学和移植的发展。方法：实验采用722分光光度计分别现察了冻融蟾蜍血液抗氧自由基和龙牙楤木合剂保护效应。结果：药物复温组血桨脂质过氮化物(LPO)和红细胞的(MDA)含量显著位于对照组(P＜0．01)；全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活性显著高于对照组(P＜0．01)。结论：龙牙楤木合剂具有抗脂质过氮化，保护GSH—Px酶活性，对冻融血液能间接提高和机体清除超氧自由基和羟自由基的能力。这表组织器官的保存和移植提供了理论依据。     

对冻融蟾蜍脑Akpase活性的测定方法

目前国内外关于组织化学研究细胞组织器官的活性保存和移植作了许多研究及报道。但是,对于组织的保存温度、液体、时间,以及组织细胞保存活性还很少有人报道。本实验采用Olympus显微镜观察冻融蟾蜍脑Akpase活性及灵芝孢子粉合剂对脑的保护效应,这将为临床药物开发提供了理论依据。     

电子显微镜对冻融蟾蜍腺体A K pase染色观察

组织、器官、细胞的保存和移植存活是目前国内外学术研究的重要课题,已有很多学者做了大量的研究报道,并且取得了可喜成功。目前我们就冻融皮肤复活及电子显微镜对于蟾蜍冻融腺体碱性磷酸酶活性染色方法观察结果做了如下工作。     

蟾蜍肠组织冻融AKPase组化研究

目的：为了探讨组织细胞冻融和低温保存的活性，以实现组织的保存和移植。方法：本实验采用Olympus显微镜观察测定了冻融蟾蜍肠组织碱性磷酸酶(AKPase)活性及茯苓合剂的保护效应。结果：实验表明：-5℃、-18℃、-22℃冻融蟾蜍肠组织经茯苓合剂等渗后碱性磷酸酶(AKPase)具有活性。结论：这为组织的保存和移植提供了临床理论依据．也为药物临床应用提供广阔前景。     

激素替代法和自然周期法进行冻融胚胎移植的临床观察

目的 比较激素替代法和自然周期法进行冻融胚胎移植的效果.方法 回顾性分析200例冻融胚胎移植周期,比较两组周期取消率、移植日子宫内膜厚度、复苏胚胎数、优质胚胎率、移植胚胎数、临床妊娠率的差异.结果 激素替代组和自然周期组移植日子宫内膜厚度、复苏胚胎数、优质胚胎率、移植胚胎数和临床妊娠率比较差异无统计学意义(P>0.05),自然周期组周期取消率高于激素替代组(P<0.05).结论 在冻融胚胎移植周期中,采用激素替代法进行子宫内膜准备可以获得良好的临床结局.     

大鼠组织冻融后的形态学研究

动物组织的冻融问题不仅在冻伤研究中十分重要,而且对于组织和器官的低温保存具有重要价值。过去,研究者们应用了电子显微镜,低温显微镜对结冰时期的形态学改变进行了观察,主要是定性研究。我们在对大鼠尾部和离体脑、心、肺、肝、脾、肾进行了组织温度、组织冷点、过冷点     

人参合剂对冻融蟾蜍心脏电生理理化特性的影响

目的:观察人参合剂对冻融蟾蜍心脏和血液电生理物理化学的影响.探索:人参合剂对心血管保护作用及物理化学特性.方法:采用冰箱-22℃冷冻蟾蜍冷休克模型,并将其分为正常对照组、RS任氏液组,人参药物合剂组80～83℃复温,采用计算机生物机能实验系统,记录观察不同温度蟾蜍复活心电图变化.结果:人参合剂组心电图波形PQRST明显比RS任氏液和对照组好.结论:人参合剂复温对冻融蟾蜍心血管具有保护作用.     

YAG激光对脑血管、组织作用的实验观察

本文观察了YAG激光对动物脑组织和血管的作用，2.5kg－3kg的新西兰白兔共18只分A、B两组，分别观察急性和慢性病理改变．共80根不同直径的血管经激光照射，激光能量2W-28W，照射时间12秒-42秒．结果，直径4．3mm的颈浅静脉和1mm直径以下的动脉可立即被激光投闭，颈总动脉、股动脉只能在2周后形成血栓．不同能量的激光照射脑皮层，时间均为3秒．结果显示，低能量激光可使脑组织凝固，高能量则可气化组织．镜下可见碳化层、凝固层、水肿层，病理改变程度与激光能量大小直接相关，能量越大病理改变越明显．     

大白鼠离体器官冻融组织学观察及理化特性

用AC15型复射式检流计和Olympus显微镜组织学观察研究以及图像分析了不同的温度浸冻大白鼠(Wistar)在体尾和离体心、肺、肝、脾、肾、脑的组织温度和组织有无显著变化。结果离体器官的组织温度和组织有显著变化。组织过冷点温度(-4.4±0.69℃～-12.13±1.87℃)与鼠尾的组织过冷点相比有统计学意义(p<0.01)。从过冷点到组织冻结点均为-0.60℃,时间均为2秒,我们认为细胞、组织、器官复温速率为120～360℃/min为宜。冷液浸冻组织以-12℃～-20℃为宜,否则组织将不出现过冷现象,或者细胞、组织变性,处于亚稳定状态。     

高效液相色谱法测定大鼠脑组织中川陈皮素含量

目的建立大鼠脑组织中川陈皮素含量的高效液相色谱紫外检测法。方法脑组织匀浆液经乙腈蛋白沉淀,再采用乙酸乙酯和正己烷进行萃取,吸取有机相,N2气流吹干后,流动相复溶,离心,取上清液待测。采用Kro—masilC18柱（4．6mm×150mm,5μm）,流动相为甲醇-水（65：35,v／v）,流速0．8mL·min^-1,柱温为40℃,检测波长335nm,以尼莫地平为内标进样分析。结果川陈皮素、内标和内源性杂质分离良好,线性范围6．25～1200ng·g^-1（r=0．9992）,定量下限为6．25ng·g^-1,萃取回收率〉59％,方法回收率〉99％,批内、批间RSD均〈15％。结论本方法灵敏度高、专属性强,适合于大鼠脑组织中川陈皮素含量测定。     

镁与胰岛素对大鼠缺血脑组织的保护作用

目的 探讨镁与胰岛素对缺血脑组织的保护作用。方法 大鼠全脑缺血前后腹腔注射硫酸镁和胰岛素，与对照组比较脑组织含水量、神经细胞计数和形态学观察、超氧化物歧化酶（SOD）和神经原特异性烯醇化酶（NSE）。结果 观察组海马区正常神经元计数和SOD含量显著高于对照组（P分别＜0．01和0．05），脑组织含水量和NSE含量显著低于对照（P分别＜0．01和0．05）。结论 硫酸镁和胰岛素对缺血脑组织有肯定的保护作用。     

右美托咪定对脑外伤所致认知功能和脑组织损伤的保护作用

目的： 研究右美托咪定对脑外伤（traumatic brain injury,TBI）后小鼠认知功能和脑组织损伤的影响,揭示右美托咪定（Dex）治疗脑外伤的可能作用机制。方法： 将60只小鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（TBI组）和右美托咪定治疗组（Dex+TBI组）。采用神经损伤严重程度评分（NSS）和旋转实验（Rotarod test）评价各组小鼠在TBI后24 d的神经功能;采用行为学实验评估TBI后小鼠运动依赖的学习记忆能力损害;HE染色观察脑组织体积损伤,TUNEL染色分析神经元细胞死亡,蛋白印迹实验分析突触相关蛋白pre-BDNF、BDNF、GAP43、Synaptophysin和Synapsin表达。结果： 与TBI组相比,TBI+Dex组小鼠神经损伤恢复水平和认知能力均提高,差异有统计学意义（P<0.01）;脑组织体积损伤减小（P<0.01）,TUNNEL阳性细胞数量显著增加（P<0.01）;突触相关蛋白表达显著增加（P<0.01）。结论： 右美托咪定对脑外伤后小鼠认知功能和脑组织损伤具有保护作用,其机制可能是增加了突触相关蛋白的表达。     

HPLC法测定蟾皮中蟾毒配基类成分的含量

目的用HPLC法测定蟾皮中蟾蜍灵、脂蟾毒配基、华蟾蜍精等成分的含量。方法样品经乙醇室温浸渍提取,采用HPLC法测定。色谱柱为DiamonsilTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(体积比为4∶1∶5),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为296 nm,柱温为40℃。结果蟾蜍灵、脂蟾毒配基和华蟾蜍精分别在0.0848~0.5088、0.0884~0.5304和0.2000~1.2000μg内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数r分别为0.9999、0.9992和1.0000。蟾蜍灵、脂蟾毒配基和华蟾蜍精的平均回收率分别为99.3%、99.6%和99.0%,RSD分别为0.5%、0.2%和0.6%(n=9)。结论HPLC法可用于蟾皮中蟾蜍灵、脂蟾毒配基和华蟾蜍精的含量测定。     

6－苄胺基嘌呤对 D－半乳糖致小鼠脑组织氧化损伤的保护作用

目的：观察6－苄氨基嘌呤（6－BA）对小鼠脑组织氧化损伤的保护作用。方法小鼠随机分为4组,对照组、模型组和低、高2个剂量实验组（6－BA,20,40 mg? kg－1）,用D－半乳糖复制小鼠脑组织氧化损伤模型,连续给药6周。用分光光度法检测小鼠脑组织总超氧化物歧化酶（ T－SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（ GSH－Px）活力和丙二醛（ MDA）含量;HE染色观察形态结构,单细胞凝胶电泳观察DNA氧化损伤水平。结果与模型组相比,实验组小鼠的 T－SOD、GSH－Px活力显著提高,MDA含量显著降低;同时,6－BA明显改善D－半乳糖诱发的形态损伤和DNA损伤。结论6－BA对小鼠脑组织氧化损伤具有一定的保护作用。