健康志愿者单次皮下注射重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]耐受性研究

目的：在中国健康成年志愿者中评价单次皮下注射重组人胰高血糖素类多肽-1（7-36）[rhGLP-1（7-36）]的安全性、耐受性。方法：根据GCP设计试验方案，并获得伦理委员会批准。受试者须自愿签署知情同意书。选择42名18～50岁健康成人，将受试者随机分至0．10～0．45mg7个剂量组，每组6名，男女各半，分别接受单次皮下注射rhGLP-1（7-36），进行临床和实验室检查，考察药物耐受性。结果：单次皮下注射rhGLP-1（7-36）耐受性试验中，各组受试者各项指标测定值均在正常范围内，条件均衡，具较好可比性。因剂量至0．30mg时，不良事件（恶心、呕吐）在该组发生率超过50％，故于该剂量组试验完成后终止了下一剂量组试验，仅有4个剂量组共24名健康受试者完成了本试验。24例受试者完成的4个剂量组耐受性试验中，给药后实验室检查未见有临床意义的改变。试验中出现10例（共15例次）可能与药物有关的不良反应，如头晕、恶心、呕吐等，但均可耐受，且为一过性反应，于给药后1h内自行消失。其中，不良反应主要发生在0.25、0．30mg组（共7例12例次），而低剂量组（0．10、0．20mg）仅有3例发生轻度不良反应。15例次不良反应中，头晕、恶心有10例次，呕吐有5例次；整个试验过程未见严重不良事件。结论：24名中国健康成年受试者分别单次皮下注射rhGLP-1（7-36），最大剂量至0．20mg，比较安全、耐受性较好，为最大耐受剂量。而单次给药剂量至0．25mg或0．30mg则不良反应发生率较高，最大耐受剂量为0．20mg。建议单次用药剂量不宜超过0．20mg。在Ⅱ期临床试验中需严密观察恶心、呕吐这些与药物可能有关的不良反应及其发生机制。     

RP-HPLC法分析重组人胰高血糖素类多肽-1（7-36）肽图谱

目的:建立重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]胰蛋白酶或V_8蛋白酶肽图分析方法。方法:酶解缓冲液分别为1%碳酸氢铵缓冲液(pH7.8)和磷酸盐缓冲液(pH7.8),酶与底物的比例为1∶10,酶解时间分别为3h和6h。采用ODS柱(250mm×4.6 mm,5μm),以三氟醋酸-水(0.1∶100)为流动相A,三氟醋酸-水-乙腈(0.1∶5∶95)为流动相B。胰蛋白酶洗脱梯度:0-30min,流动相A与B的比例为80:20→55:45。V_8蛋白酶洗脱梯度:0-8min,流动相A与B的比例为99:1→95:5;8-55 min,比例为95:5→48:52。流速:1.0mL·min~(-1),检测波长214nm,柱温:37℃。结果:无论用胰蛋白酶或V_8蛋白酶酶解rhGLP-1(7-36),控制好酶与底物的比例及酶解的时间,都可以得到重现性好的稳定的肽图。结论:本方法可用于重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)胰蛋白酶和V_8蛋白酶肽图分析,简便,可行。     

胰高糖素样肽-1及其类似物在糖尿病治疗中的研究进展

胰高糖素样肽-1（GLP-1）是由小肠L细胞在营养摄入及神经、内分泌刺激因素作用下分泌的一种具有包括调节血糖在内的多功能肽类激素。目前研究证实其不仅能促进胰岛素合成及分泌、抑制胰高糖素分泌、延缓胃排空、减少摄食，而且可以有效刺激胰岛B细胞增殖及新生、抑制细胞凋亡。有关GLP-1及其类似物的研究，是近年糖尿病治疗方面的热点。下面就有关GLP-1及其类似物的临床及实验研究进展作一综述。     

胰升糖素样肽-1对胰岛β细胞胰岛素基因表达的调节作用

目的 研究不同浓度胰升糖素样肽-1（GLP-1）对大鼠胰岛β细胞胰岛素基因表达的影响,探讨GLP-1在2型糖尿病治疗中的作用。方法 不同刺激浓度的GLP-1（0nmol／L、1nmol／L、10nmol／L、10^2nmol／L、10^3nmol／L）与葡萄糖浓度分别为2．2mmol／L、5．5mmol／L、11.1mmol／L的RPMI1640营养液共培养24h后,提取细胞总RNA,运用半定量RT-PCR技术检测胰岛素基因表达的变化。结果 葡萄糖浓度为2．2mmol／L和5．5mmol／L时,随GLP-1浓度升高,胰岛素基因表达量呈钟型方式升高;葡萄糖浓度为11．1mmol／L时,随GLP-1浓度升高,胰岛素基因表达量呈浓度依赖性升高。结论 GLP-1以葡萄糖依赖和浓度依赖方式促进胰岛素基因的表达。     

重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)免疫原性的实验研究

目的:观察重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]对小猎兔犬的免疫原性。方法:健康小猎兔犬随机分为rhGLP-1(7-36)高、中、低剂量组(200、100、50μg/kg)和生理盐水对照组,每组6只,雌雄各半。皮下注射给药,每天1次,每周6次,连续9个月。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和碱性磷酸酶免疫斑点试验检测犬血清中的抗体。结果:连续给药3、9个月及恢复期血清均未发现抗rhGLP-1(7-36)抗体。结论:长期给予rhGLP-1(7-36)对小猎兔犬无免疫原性。     

重组人胰高血糖素样多肽-1(7-36)在健康人体的药代动力学

目的研究重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)](促胰岛素生成药)在健康志愿者的药代动力学。方法选择12,9名健康志愿者,分别单次(0.1,0.15,0.2mg)和多次(0.2mg)皮下注射rhGLP-1(7-36),连续5日,用荧光酶联免疫分析法测定其血药浓度,用DAS软件计算其药代动力学参数。结果单次:药-时曲线符合一房室模型,Cmax、AUC0-t随剂量增加而增加,tmax约为19~21min,t1/2为10~14min。多次:首次与末次给药后的Cmax分别为(726.76±94.07),(737.15±72.12)ng·L-1;tmax为18min左右;t1/2为15~17min。结论在0.1~0.2mg内,过程呈一级线性动力学特征,体内无蓄积,耐受性较好。     

ELISA试剂盒方法测定重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)浓度

目的：定量检测血浆样本中重组人胰高血糖素类多肽-1（7-36）[rhGLP-1（7-36）]的含量。方法：用LINCO公司生产的试剂盒对rhGLP-1（7-36）的标准品和血浆样本进行定量检测。结果：测定的特异性、灵敏度、测量范围、重现性和回收率满足生物制品药代动力学研究的要求。结论：用LINCO公司生产的试剂盒定量血浆样品中的rhGLP-1（7-36），该检测方法符合生物制品检测方法，可以作为其药代动力学研究血药浓度的检测方法。     

重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)对化学致糖尿病模型动物的降血糖作用

目的　本文研究了重组人胰高血糖素类多肽 1(7 36 )[rhGLP 1(7 36 ) ]对化学所致糖尿病模型动物的降血糖和促胰岛素分泌作用。方法　对四氧嘧啶型糖尿病小鼠及链脲霉素型糖尿病大鼠皮下注射不同剂量的rhGLP 1,分别于给药 4天后采血 ,收取血清 ,测定血糖及胰岛素值。结果　四氧嘧啶型糖尿病小鼠皮下注射 4 0、80 μg·kg-1rhGLP 1后 ,血糖值显著下降 (P <0 0 1) ,而 2 0 μg·kg-1剂量组则无显著性改变 ;链脲霉素型糖尿病大鼠皮下注射 2 8、5 6 μg·kg-1rhGLP 1后 ,血糖值显著下降 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,而 14 μg·kg-1剂量组则无显著性改变。结论　rhGLP 1对实验动物部分 β细胞破坏的胰岛仍有促分泌胰岛素及降糖作用     

重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)对正常动物降糖作用的实验研究

目的 :观察rhGLP 1(7 36 )对正常动物的降血糖和促胰岛素分泌作用以及该作用的葡萄糖依赖性。方法 :用不同动物模型sc不同剂量的rhGLP 1(7 36 )后 ,收集血清 ,测定血糖值及胰岛素值。结果 :正常C5 7小鼠和家兔sc不同剂量的rhGLP 1(7 36 )后 ,血糖和胰岛素分泌均无明显改变 ,提示rh GLP 1(7 36 )并不影响血糖正常动物的胰岛素分泌及血糖 ;对于给糖负荷动物 ,rhGLP 1(7 36 )使其胰岛素分泌增加 ,并进而使升高的血糖明显降低 ,表明rhGLP 1(7 36 )具有明显的葡萄糖依赖的促胰岛素分泌作用。在C5 7小鼠和家兔糖耐量实验中发现 ,rh GLP 1(7 36 ) 16 μg·kg-1使糖负荷家兔胰岛素分泌增加 ,血糖升高曲线明显降低 ,说明rhGLP 1(7 36 )能明显增加动物对糖的耐受。结论 :rhGLP 1(7 36 )通过葡萄糖依赖的胰岛素分泌作用降低过高血糖 ,而不降低正常血糖 ,同时用量小 ,起效快 ,安全性高。     

RP-HPLC法测定重组人胰高血糖素类多肽-1（7-36）原料及其制剂的肽含量和有关物质

目的:建立重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGIP-1(7-36)]原料及制剂的肽含量和有关物质的RP-HPLC测定方法。方法:采用ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2 mol·L-1硫酸钠缓冲液(用乙醇胺调节pH至2.3)-乙腈(82:18)为流动相A,50％乙腈为流动相B,调整流动相的比例[A-B(55:45)]使主峰的保留时间在20-25 min,流速为1.0 mL·min-1,检测波长214 nm,柱温为45℃。结果:线性范围为0.6-18.6μg,制剂平均回收率为96.01％,原料和制剂精密度试验RSD分别为0.15％和0.25％,最低检测限6.25 ng。结论:本方法可用于rhGLP-1(7-36)原料及其制剂的肽含量和有关物质的测定,具有准确、简便、快速、灵敏的特点。     

胰高糖素样肽-1及其类似物和二肽酰肽酶-IV抑制剂对胰岛功能的保护作用

2型糖尿病的病理生理包括胰岛素抵抗、胰岛素分泌不足和肝糖原生成过多.研究发现,与静脉输注葡萄糖相比,口服等量的葡萄糖可以导致更多胰岛素释放,这表明口服营养物质可刺激肠源性信号促进胰岛素分泌增加,这就是肠促胰岛素(Incretin)的作用.     

rhGLP-1(7-36)对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护机制研究

目的 探讨rhGLP-1（7-36）对糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）大鼠肾脏的保护机制。方法 DKD模型大鼠随机分成模型组、rhGLP-1（7-36）低剂量组（20 μg·kg^-1）、rhGLP-1（7-36）中剂量组（40 μg·kg^-1）、rhGLP-1（7-36）高剂量组（80 μg·kg^-1）,另设正常组,皮下注射给药4周。全自动生化分析仪检测24 h尿微量白蛋白、血肌酐及尿肌酐水平,计算肌酐清除率;进行腹腔糖耐量实验并计算药时曲线下面积（area under the cure,AUC）;HE染色行肾组织病理形态学观察;Western blotting检测肾组织SIRT1蛋白水平。结果 与模型组相比,rhGLP-1（7-36）高剂量组大鼠肌酐清除率有明显改善（P<0.05）;24 h尿微量白蛋白水平明显下降（P<0.05）;腹腔糖耐量AUC水平明显减小（P<0.05）;肾组织病理变化有不同程度改善;肾组织SIRT1蛋白水平明显上升（P<0.05）。结论 rhGLP-1（7-36）能有效改善DKD大鼠的肾脏功能,其机制可能与上调肾脏组织的SIRT1水平有关。     

胰高糖素样肽-1受体激动剂对甲状腺髓样癌细胞生长和增殖的影响

目的：探讨胰高糖素样肽-1(glucagon like peptide-1, GLP-1)受体在甲状腺髓样癌(medullary thyroid cancer, MTC)细胞系TT的表达情况及其对该细胞生长和增殖的影响。方法蛋白免疫印迹( Western blot)法检测TT细胞系GLP-1受体表达情况,采用甲基噻唑基四唑( MTT)评估两种GLP-1受体激动剂对细胞增殖及降钙素分泌的作用,Western blot法测定细胞信号通路相关蛋白的表达。结果 TT 细胞中可检测到 GLP-1受体的表达。1、10、100 nmol/L利拉鲁肽或艾塞那肽处理TT细胞后各时点的吸光度值与0 nmol/L比较差异无统计学意义,且相同浓度的两种药物在同一时间点对细胞增殖的作用比较差异无统计学意义(P>0．05)。不同浓度利拉鲁肽或艾塞那肽作用于TT细胞24 h后降钙素浓度比较差异均无统计学意义(P>0．05)。1、10、100 nmol/L利拉鲁肽和艾塞那肽作用于细胞24 h后Akt和Erk1/2的磷酸化水平与0 nmol/L比较无显著变化。结论人MTC细胞系TT中有GLP-1受体的表达。GLP-1受体激动剂对TT细胞的增殖、降钙素分泌及细胞信号通路相关蛋白的表达无明显影响。     

长效胰高糖素样肽-1治疗肥胖2型糖尿病的临床疗效观察

目的观察长效胰高糖素样肽-1(GLP-1)联合二甲双胍治疗肥胖2型糖尿病的临床疗效及不良反应。方法肥胖2型糖尿病患者78例,随机分为两组。对照组给予二甲双胍控制血糖治疗;治疗组在对照组治疗基础上再给予长效胰高糖素样肽-1类似物利拉鲁肽治疗。比较两组患者在空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、体质量指数(BMI)等指标的变化情况。结果治疗8周后,治疗组在FBG、2 hPBG、HbA1c各项指标达标率均明显高于对照组,治疗14周后,治疗组患者体质量指数较对照组明显改善。两组患者均无明显的不良反应发生。结论长效胰高糖素样肽-1类似物利拉鲁肽联合二甲双胍治疗肥胖2型糖尿病的临床效果较单用二甲双胍好,未见严重不良反应发生。     

黄连有效成分及其组合物对荷糖小鼠胰岛素和胰高血糖素样肽1(GLP-1)分泌影响的初步研究

目的：探讨黄连有效成分及其组合物对荷糖小鼠胰岛素和胰高血糖素样肽1（GLP-1）分泌的影响。方法：制备黄连粉末模拟胃液溶出物并检测其中盐酸小檗碱（BER）、黄连碱（COP）、盐酸药根碱（JAT）、阿魏酸（FA）、盐酸巴马丁（BM）含量,结合BER治疗2型糖尿病（T2D）有效剂量确立其他成分剂量,组合物剂量为5种化合物剂量的1/10倍量。对照组灌服葡萄糖（2 g·kg^-1）,药物组灌服等剂量葡萄糖及不同药物。各组分别在灌服的前1 h及灌服1 h时眼眶静脉采血、灌服1.5 h时摘眼球采血,分离血清,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中的GLP-1和胰岛素含量。结果：BER、COP、JAT、组合物及黄连粉末均能在1,1.5 h升高荷糖小鼠血清胰岛素浓度,与对照组比较,P<0.05;BER、组合物及黄连粉均能在1,1.5 h升高荷糖小鼠血清GLP-1浓度,即促进GLP-1分泌;药物组其他成分呈现一定升高GLP-1水平作用趋势,但统计学差异不显著。结论：黄连及其部分活性成分能有效刺激小鼠GLP-1及胰岛素分泌,且低剂量组合物作用活性高于高剂量单个活性成分活性,黄连刺激肠道GLP-1分泌作用是其治疗T2D机制之一。     

胰高糖素样肽-1类似物的进展与临床应用评价

目的:胰高糖素样肽-1类似物的问世为抗糖尿病药宝库中增添了一朵奇葩,其进展神速,作用途径独特,迂回在胰岛β细胞和胰岛素之外,本文总结其作用特点和临床评价。方法:对国内外近期文献进行分析。结果与结论:胰高糖素样肽-1类似物作用确切,在大量的临床研究中显示了良好效果和安全性,为糖尿病者的治疗展现了治疗前景,在延缓或逆转糖尿病自然病程的治疗策略中,为研发抗糖尿病新药提供了更为广阔的空间。     

重组人胰高血糖素样肽-1对实验性糖尿病大鼠血糖的影响

目的观察重组人胰高血糖素样肽 1[rhGLP 1(7 36 )NH2 和rhGLP 1(7 37) ]对实验性糖尿病大鼠模型血糖和血浆胰岛素水平的影响。方法正常SD大鼠按 3.2 4g/kg腹腔注射 5 0 %葡萄糖 ,诱发暂时性高血糖动物模型。腹腔注射不同剂量 (2 0、4 0、80 μg/kg)rhGLP 1(7 36 )NH2 和rhGLP 1(7 37) ,间隔取血测定血糖与血浆胰岛素水平。正常SD大鼠按 6 0mg/kg腹腔注射链脲佐菌素 ,建立实验性 1型糖尿病大鼠模型。静脉输注rhGLP 1(7 36 )NH2 [4.0ng/(kg·min) ]12 0min并观察血糖变化。结果腹腔注射 4 0、80 μg/kgrhGLP 1(7 36 )NH2 和rhGLP 1(7 37)处理组大鼠的血糖、血浆胰岛素水平与对照组之间的差别具有非常显著性意义 (P <0 .0 0 1) ,且呈现一定的量效关系。二者之间促胰岛素分泌和降血糖活性差异无显著性。静脉输注rhGLP 1(7 36 )NH2 6 0min后 ,血糖水平 (17.0 4± 1.31)mmol/L(P <0 .0 5 ) ,12 0min后血糖水平 (11.98± 1.0 5 )mmol/L(P <0 .0 0 1)。结论rhGLP 1能显著改善实验性糖尿病大鼠的血糖水平 ,这与其促胰岛素分泌活性有关。     

人过氧化物酶体增殖物激活受体γ-胰高糖素样肽-1类似肽融合蛋白的表达和纯化

<正>2型糖尿病发病过程中胰岛素抵抗和胰岛素分泌缺陷占据着重要地位。针对胰岛素抵抗及胰岛素分泌的药物研究在2型糖尿病及其并发症的治疗领域具有非常重要的意义。目前临床应用胰高糖素样肽-1(GLP-1)制剂对糖尿病患者的治疗,已有研究证实效果较好[1]。过氧化物酶体增殖物激活受体     

3种胰高糖素样肽-1受体激动剂周制剂遴选评价：基于医院卫生技术评估

目的 对司美格鲁肽、度拉糖肽和洛塞那肽3种胰高糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RA）周制剂进行医院卫生技术评估（HB-HTA）,探索HB-HTA在医院药物遴选中的应用模式与前景,为医院基本用药供应目录科学调整提供循证依据。方法利用药品HB-HTA快速评分体系,从临床治疗必需性、有效性、安全性、经济性、依从性、国家基本药物属性、医保属性、质量层次、包装属性、药品企业属性、市场属性等11个维度分别对司美格鲁肽、度拉糖肽和洛塞那肽进行评价。结果 司美格鲁肽、度拉糖肽和洛塞那肽总得分分别为65,64,60,均可安全有效地控制血糖并增加心血管获益,且一周使用一次的优势可提高患者依从性、改善生活质量。但上述3种药品在包装属性、市场属性等方面具有一定差异,可根据实际需求遴选药品。结论 本次HB-HTA可为医院遴选与合理使用3种GLP-1RA周制剂提供循证依据,为建立基于HB-HTA的药品管理决策支持体系提供思路。     

重组白蛋白人胰高糖素样肽-1突变体的串联体的融合蛋白在小鼠体内的药代动力学

目的研究重组白蛋白融合人胰高糖素样肽突变体的串联体rh(GLP-1A2G)2-HSA(GGH)在小鼠体内的药代动力学特性。方法采用氯胺T法标记目标蛋白rhGGH,γ放射免疫计数器检测三氯醋酸(TCA)沉淀前后血浆、组织、尿和粪的放射性计数,用DSA1.0软件拟合药物动力学模型,并计算相应动力学参数。结果 125I-rhGGH单次单剂量皮下注射后在小鼠体内的动力学过程符合二室模型,分布容积为53.4 mg.L-1.h-1,体内吸收相半衰期T12α为26.6 h,体内消除相半衰期T12β为57.8 h。125 I-rhGGH在小鼠甲状腺、血、胃、肝、肾、肺等组织器官中有较高的放射性摄取,而心、脑、胰腺、脾其它组织中放射性活度较小。125I-GGH主要经肾由尿排泄,给药后306 h,79.3%的药物由尿排出。结论小鼠体内的药代动力学表明rhGGH体内的半衰期明显优于非融合人胰高糖素样肽-1,因而使用rhGGH可以减少给药次数,并有可能提高疗效。