减少内源性脂肪酸合成对乳腺癌细胞生长的影响

内源性脂肪酸由位于细胞胞浆中的脂肪酸合成酶 (ｆａｔｔｙａｃｉｄｓｙｎｔｈａｓｅ,ＦＡＳ)催化合成 ,Ｃｅｒｕｌｅｎｉｎ是ＦＡＳ的强抑制剂。我们应用四甲基唑蓝 (ＭＴＴ)方法在体外研究Ｃｅｒｕｌｅｎｉｎ对乳腺癌细胞生长的抑制作用及ＦＡＳ直接产物软脂酸对Ｃｅｒｕｌｅｎｉｎ抑癌作用的影响 ,现报道如下。一、材料与方法1.四甲基唑蓝 :华美生物工程公司 ;Ｃｅｒｕｌｅｎｉｎ :美国Ｓｉｇｍａ公司产品 ,用二甲基亚砜配成 5 ｇ/Ｌ的使用溶液。2 .细胞培养 :人乳腺癌细胞株ＭＣＦ 7由中国科学院上海细胞研究所提供 ,常规单层贴壁传代培…     

细胞素及合用异博定对人乳腺癌细胞多药耐药性逆转作用的研究

我们利用人乳腺癌耐药细胞系以流式细胞术及噻唑蓝 (ＭＴＴ)法检测肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)、白细胞介素 (ＩＬ) 2、α 干扰素 (α ＩＦＮ)单用及与异博定合用对细胞耐药性的调节作用 ,结果报道如下。一、材料与方法1.细胞 :人乳腺癌亲代ＭＣＦ 7细胞及对阿霉素耐药的ＭＣＦ 7/ＡＤＲ细胞来源于美国国立癌症研究院 ,常规培养。2 .ＭＣＦ 7/ＡＤＲ细胞的抑制率测定 :将细胞调整至 3× 10 8个 /Ｌ浓度 ,取2 0 0 μｌ加入 96孔板中过夜 ,去掉培养基 ,加入含不同药物浓度的新培养基 ,培养 48ｈ收集细胞 ,ＭＴＴ法检测半抑制浓度 (ＩＣ50 )。3.细…     

反义c-myc寡核苷酸对人肝癌细胞恶性表型的逆转作用

我们采用反义ｃ ｍｙｃ核酸技术观察反义ｃ ｍｙｃ寡核苷酸 (ＯＤＮ)对人肝癌细胞ＳＭＭＣ 772 1生长的抑制作用 ,现将结果报道如下。一、材料与方法1.寡核苷酸的合成及修饰 :正义、错配及反义ｃ ｍｙｃＯＤＮ (均为 15 ｍｅｒ)的合成和磷酸基硫代化修饰均由上海生物工程公司完成。设计的序列为 :5’ ＡＴＧＣ ＣＣＣＴＣＡＡＣＧＴＴ 3’正义寡核苷酸序列 ;5’ ＡＡＣＧＴＴＧＡＧＧＧＧＣＡＴ 3’反义寡核苷酸序列 ;5’ ＴＡＣＧＧＧＧＴＴＧＡＧＣＡＡ 3’错配链寡核苷酸序列。2 .人肝癌细胞ＳＭＭＣ 772 1培养和基因转染 :人肝癌细胞Ｓ…     

苯乙酸对脑胶质瘤细胞超微结构的影响

本实验旨在观察诱导分化剂苯乙酸 (ＰＡ)对脑胶质瘤细胞形态及细胞周期的影响 ,在细胞水平探讨苯乙酸的作用机理。一、材料与方法1.细胞培养 :苯乙酸及ＩＭＤＭ培养基购于美国Ｆｌｕｋａ公司 ,小牛血清为长春生物制品所生产 ,胰蛋白酶为美国Ｓｉｇｍａ公司产品 ,胶质瘤细胞Ｃ6购于美国菌种存储中心ＡＴＣＣ。Ｃ6细胞接种于 2 5ｃｍ2 培养瓶中常规单层培养 ,置于 37℃体积分数为 5 %的ＣＯ2 恒温恒湿培养箱中。2 .电镜观察 :Ｃ6细胞在培养瓶中传代培养 ,分别加入 0、2 .5、5 .0ｍｍｏｌ/Ｌ苯乙酸。 7ｄ后胰酶消化收集细胞 ,离心 ,取离心管底…     

Effect of dexamethasone by local treatment on cerebral edema and serum myelin basic protein after brain injury in rabbits

ＳＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ ,ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ,ＨｅｎａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ 45 0 0 5 2 ,Ｃｈｉｎａ (ＹａｎｇＢａｎｄＳｏｎｇＬＪ)ＡｌｂｅｒｔＥｉｎｓｔｅｉｎＣｏｌｌｅｇｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅｏｆＹｅｓｈｉｖｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,ＮｅｗＹｏｒｋ ,10 46 1(ＧｕａｎＦＸ)ＴｈｅＰｈｙｓｉｃｓＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅｎａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ 45 0 0 5 2 ,Ｃｈｉｎａ (Ｌｉ…     

双荧光素染色检测5-氟尿嘧啶及羟基喜树碱诱导的肝癌SMMC-7721细胞凋亡的研究

我们用 5 氟尿嘧啶 (5 Ｆｕ)、羟基喜树碱 (ＨＣＰＴ )在体外诱导人肝癌细胞ＳＭＭＣ 772 1产生凋亡 ,并用双荧光染料吖啶橙 /溴乙锭 (ＡＯ/ＥＢ)染色结合ＤＮＡ电泳法进行观察 ,结果报道如下。一、材料与方法将 1× 10 8/ＬＳＳＣ 772 1细胞 (中国科学院上海细胞学研究所 )接种于含体积分数为 10 %小牛血清的ＲＰＭＩ 164 0培养液中 ,于 3 7℃ ,体积分数 5 %ＣＯ2培养 2 4ｈ ,细胞铺满瓶底 ,呈对数生长时加入 5 Ｆｕ、ＨＣＰＴ使二者终浓度分别为75ｍｇ/Ｌ、1ｍｇ/Ｌ ,再继续孵育 ,分别于6、12、2 4、48ｈ观察结果。细胞孵育至特定时间 …     

FAM联合化疗和α-干扰素联用抑制肝癌生长的研究

我们利用人肝细胞癌裸鼠移植瘤模型 ,研究α 干扰素与ＦＡＭ 5 氟脲嘧啶 (5 Ｆｕ) +丝列霉素 (ＭＭＣ) +阿霉素(ＡＤＭ) ,联合化疗方案应用对肝癌生长的影响。一、材料与方法1 .实验材料 :人肝细胞癌Ｈ91 0 1瘤株由厦门大学抗癌研究中心提供。ＢＡＬＣ/Ｃ裸小鼠 5～ 6周龄 ,雌性 ,体重1 8～ 2 0 ｇ ,由厦门大学抗癌研究中心提供 ,饲养于ＳＰＦ级无菌饲养室。脱氧核苷末端转移酶介导的缺口末端标记法(ＴＵＮＥＬ法 )原位细胞凋亡检测试剂盒采用德国宝灵曼公司的ＩｎＳｉｔｕＣｅｌｌＤｅ ｔｅｃｔｉｏｎＫｉｐ,ＡＰ试剂盒。2 .人肝细胞癌裸鼠…     

体外培养骨髓基质细胞向软骨细胞分化的研究

骨髓基质作为髓腔内的结缔组织,其主要作用是支持造血系统细胞的功能并影响其分化,并在组织再生或修复中起重要作用。我们采用体外分离培养技术使骨髓基质细胞(ＭＳＣ)扩增,探讨诱导ＭＳＣ向软骨方向分化,而不是向成骨细胞方向分化的可能性。一、材料与方法1.ＭＳＣ分离及原代培养:新西兰大耳白兔6只,4～6月龄,平均体重22ｋｇ。抽取骨髓,计数有核细胞,随即以1×104/ｃｍ2密度接种于25ｍｌ培养瓶中;培养瓶中予留小盖玻片,用于组织学检查;置ＣＯ2培养箱中培养。2.ＣＦＵＦ(ｃｏｌｏｎｙｆｏｒｍｉｎｇｕｎｉｔｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｉｃ)传代培…     

γ刀照射对胶质瘤细胞p16基因蛋白水平表达的影响

我们针对体外培养的胶质瘤细胞 ,在亚细胞水平探讨了肿瘤细胞γ刀照射后的凋亡机理 ,为以后研究提供依据 ,现报道如下。一、材料与方法1.主要试剂及来源 :培养基及蛋白酶为美国Ｆｌｕｋａ公司产品。小牛血清为长春生物制品所生产。兔抗鼠 ｐ16多抗(ＮＨ 46)为美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品。链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶染色试剂盒 (ＳＰ90 0 0 )为北京中山公司产品。2 .细胞培养 :Ｃ6细胞为高度恶性的胶质瘤细胞 ,购自美国生物菌种存储中心 (ＴＡＣＣ ,Ｐｏｃｋｖｉ ,ＭＤ ) ,接种于 2 5ｃｍ2培养瓶中单层培养。培养基含 10 %热灭活小…     

蛋白激酶拮抗剂对大鼠气道纤毛运动频率的影响

本研究应用选择性蛋白激酶Ａ(ＰＫＡ)拮抗剂Ｒｐ 8 Ｂｒ ｃＡＭＰＳ、选择性蛋白激酶Ｇ (ＰＫＧ )拮抗剂Ｒｐ 8 Ｂｒ ｃＧＭＰＳ以及竞争性蛋白激酶拮抗剂Ｈ 9作用于纤毛 ,以了解ＰＫＡ、ＰＫＧ被单独或同时阻断后ＣＢＦ的变化。表 1　各实验组ＣＢＦ的变化 (Ｈｚ,组织块数 =5 ,ｘ±ｓ)分组Ｔ0 (Ｈｚ)Ｔ5(Ｈｚ)Ｔ1 0 (Ｈｚ)Ｔ1 5(Ｈｚ)Ｔ2 0 (Ｈｚ)Ｔ2 5(Ｈｚ)ＰＢＳ 7 6 2± 1 14 7 70± 1 12 7 79± 1 337 93± 1 317 89± 1 387 95± 1 38Ｒｐ 8 Ｂｒ ｃＡＭＰＳ 7 6 7± 0 4 47 6 0± 0 4 6 7 57± 0 517 6 0± 0 517 6 6± 0 587 …     

蛋白激酶C参与乳鼠心肌细胞缺氧预处理的保护作用

近年来发现,心脏自身具有强大的内源性保护机制———缺血预处理(ＩＰＣ)〔1〕,其保护作用的机制迄今不明了。我们的实验,通过建立乳鼠心肌细胞模拟缺血再灌注损伤细胞模型,研究缺氧预处理对心肌细胞的保护作用,并从蛋白激酶Ｃ的角度探讨其在预处理中的保护机制。材料和方法　1.材料:新生ＳＤ大鼠(第二军医大学动物所);ＭＥＭ干粉培养剂及胰蛋白酶(Ｇｉｂｃｏ公司);佛波醇酯(ＰＭＡ)及虫萤光素酶-虫萤光素(Ｓｉｇａｍａ公司);1-(5-异喹啉硫酰)-2-甲基哌嗪(Ｈ7)(第二军医大学药学院);链球菌溶血素-Ｏ(ＢｕｒｒｏｕｇｈｓＷｅｌｌｃｏｍｅ公司…     

休克大鼠外周血白细胞表面粘附分子的表达

细胞内粘附分子 (ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ ,ＩＣＡＭ 1)又名ＣＤ5 4,是淋巴细胞功能相关抗原 1(ｌｙｍｐｈｏ ｃｙｔｅｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄａｎｔｉｇｅｎ 1,ＬＦＡ 1)可诱导的细胞表面配基 ,作用非常活跃。为观察烧伤性休克时白细胞表面ＬＦＡ 1、ＩＣＡＭ 1表达的变化 ,笔者进行了此项实验。材　料　与　方　法1.取雄性ＳＤ大鼠 12只 ,体重 180～ 2 30 ｇ ,随机分为正常对照组 (5只 )和烧伤休克组 (7只 )。大鼠用质量浓度为133ｇ/Ｌ的乌拉坦和 5ｇ/Ｌ氯醛糖麻醉 (0 6ｍｌ/ 10 0 …     

Gene expression of inducible nitric oxide synthase in injured spinal cord tissue

ＮＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ ,ＺｈｕｊｉａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ,ＴｈｅＦｉｒｓｔＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ 5 10 2 82 ,Ｃｈｉｎａ (ＬｉｕＣＬ ,ＪｉｎＡＭ ,ＺｈｏｕＣＳａｎｄＣｈｅｎＢ)ＴｈｉｓｗｏｒｋｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ (Ｎｏ :3980 0 16 6 )ｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ (ＮＯ) ,ａｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅ ,ｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎ…     

人骨肉瘤OS-732血管生成活性及血管内皮生长因子抗体对骨肉瘤血管生成的抑制作用

我们应用鸡胚绒毛尿囊膜 (ＣＡＭ )模型 ,观察人骨肉瘤ＯＳ 73 2细胞血管生成特性 ,并给予血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)抗体 ,研究其对骨肉瘤血管生成及瘤细胞生长状态的影响 ,一、材料与方法1.ＣＡＭ制备及瘤细胞接种 :人骨肉瘤细胞株ＯＳ 73 2 ,购自北京积水潭医院骨科实验室。选取孵育至 9ｄ的胚蛋参考付生法[1] 的方法制备ＣＡＭ ,瘤细胞接种每只 5× 10 7个 /ｍｌ,共接种 10只。另10只设为空白对照组。于接种第 2～ 9天在解剖显微镜下观察接种区 5ｍｍ范围内血管变化。2 .组织切片的制备及免疫组织化学检测 :ＣＡＭ常规处理 ,行苏木素 …     

端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸对人肝癌细胞生长抑制的研究

本实验旨在探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸 (ＡＳＯＤＮ ｔ)抑制端粒酶活性[1] ,诱导肝癌细胞凋亡 ,从而抑制肝癌细胞生长的作用[2 ] ,为肝癌基因治疗提供依据 ,现将结果报道如下。一、材料和方法1.ＡＳＯＤＮ ｔ对细胞抑制作用的观察 :取 2× 10 7个 /Ｌ对数生长期肝癌细胞 (肝癌细胞株ＳＭＭＣ 772 1引自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库 )接种于 96孔的细胞培养板中 ,每孔 10 0 μｌ,设3个复孔。分别加入ＡＳＯＤＮ ｔ(上海生工生物工程公司合成 ,序列为 5’ ＣＴＣＡＧＴ ＴＡＧＧＧＴＴＡＧＡＣＡ 3’ ,调节其终浓度分别为 1、2、3…     

Retinochoroidal changes after severe brain impact injury in rabbits

ＣＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＳｕｒｇｅｒｙ/ＤａｐｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ,ＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ 40 0 0 42 ,Ｃｈｉｎａ (ＹｅＪ ,ＹｕａｎＲＤ ,ＬｉｕＳＺ ,ＷａｎｇＺＧａｎｄＺｈｕＰＦ)ｌｏｓｅｄｅｙｅｄａｍａｇｅｓｕｓｕａｌｌｙｏｃｃｕｒａｆｔｅｒｂｌｕｎｔｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙ .Ｔｈｅｉｎｃｉｄｅｎｃｅｒａｔｅｉｓ 0 .5% 5%ｉｎｃｌｏｓｅｄｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙ .1Ａｂｏｕｔ 50 %ｏｆｔｈｅｐａｔｉｅｎｔｓｒｅｍａｉｎｐｅｒｍａ…     

应用旋转生物反应器和微载体技术体外大规模扩增人骨髓间充质干细胞

骨髓间充质干细胞 (ＭＳＣｓ)因其自身所具有的特殊性而日益受到关注[1,2 ] 。我们采用微载体技术在旋转生物反应器内扩增人骨髓间充质干细胞。一、材料与方法1.试剂 :细胞培养基ＤＭＥＭ购自美国Ｇｉｂｃｏ公司 ;旋转生物反应器购自美国Ｓｙｎｔｈｅｃｏｎ公司。2 .ＭＳＣｓ的分离与培养 :骨髓来源于正常献髓者 ,将人骨髓经ＤＭＥＭ稀释后用一种细胞分离液Ｐｅｒｃｏｌｌ分离 ,Ｐｅｒｃｏｌｌ分离液的比重为 10 73 ｇ/Ｌ。分离后收获单个核细胞 ,ＤＭＥＭ洗 2次 ,接种于 2 4孔板内 ,浓度为 2 .0× 10 5个 /ｃｍ2 ,各孔内加入 10 %胎牛血清 …     

第一作者和分类索引

ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｐｉｎｅａｎｄＳｐｉｎａｌＣｏｒｄ 第 11卷 1～ 6期　双月刊Ｂｉｍｏｎｔｈｌｙ　ＶＯＬＵＭＥ 11,　ＮＵＭＢＥＲ 1～ 6 2 0 0 1年 2月 10日至 12月 10日10Ｆｅｂｒｕａｒｙｔｈｒｏｕｇｈ 10Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ,2 0 0 1作者索引ＡＵＴＨＯＲＩＮＤＥＸＡ敖强 .保留棘突韧带复合体的腰椎管扩大术 .11( 2 ) :99Ｂ包岳丰 .Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ支具治疗青少年特发性脊柱侧凸的疗效分析与应用体会 .11( 4 ) :2 0 1Ｃ蔡福金 .后纵韧带对椎体爆裂骨折椎管内骨块复位作用的生物力学研究 .11( 6 ) :35 1蔡钦林 …     

地塞米松对三维培养大鼠肝细胞分泌的影响

三维培养是近年发展起的技术 ,能够模仿体内的结构特点[1 ] 。肝细胞三维培养主要应用于人工生物肝研究及肝细胞疾病基础研究中 ,我们利用该技术研究地塞米松 (ｄｅｘ)对肝细胞形态的影响并探讨其机制。一、材料和方法1.肝细胞球状体 (ＨＳ)的制备 :成年雄性Ｆ344大鼠 ,6周龄 ,15 0～ 2 5 0 ｇ ,采用Ｓｅｇｌｅｎ两步灌注法[2 ] 灌注肝脏 ,以Ｐｅｒｃｏｌｌ溶液梯度离心获取肝细胞 ,将其以2 .5× 10 2 个细胞 ｍｍ2 密度、无血清Ｗｉｌｌａｍｓ’Ｅ培养基培养于一次性培养皿上 ,5 %ＣＯ2 3 7℃下孵育 3～ 4ｄ后ＨＳ形成。2 .ＨＳ的三维培养[…     

Clinical features of diffuse axonal injury

ＤＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ ,ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ,ＷｅｓｔＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ ,Ｃｈｅｎｇｄｕ 6 10 0 41,Ｃｈｉｎａ (ＪｉａｎｇＳ ,ＪｕＹ ,ＨｅＭａｎｄＭａｏＢＹ)ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＦｏｒｅｉｇｎＬａｎｇｕａｇｅｓ ,ＷｅｓｔＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ ,Ｃｈｅｎｇｄｕ 6 10 0 41,Ｃｈｉｎａ (ＨｅＹ)ｉｆｆｕｓｅａｘｏｎａｌｉｎｊｕｒｙ (ＤＡＩ)ｗａｓｔｅｒｍｅｄｆｏｒ…