益气养阴活血法对糖尿病肾病大鼠肾皮质AGEs及其受体的影响

目的观察益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠肾皮质糖基化终产物(AGEs)及其受体(RAGE)mRNA表达的影响,探讨其治疗糖尿病肾病的作用机制。方法用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病肾病大鼠模型,模型大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、益气养阴活血方组(简称中药组),并用相应的药物干预,给药8周后检测各组大鼠肾皮质中AGEs的含量,用免疫组化法检测肾皮质中AGEs的蛋白表达,用RT-PCR的方法检测肾皮质RAGEmRNA的表达。结果糖尿病肾病大鼠肾皮质AGEs含量明显增加,RAGEmRNA出现过度表达。经中药治疗8周后肾皮质AGEs含量明显减少,由(513.26±97.2)AUF/mg降为(417.35±89.9)AUF/mg;RAGEmRNA表达明显下调,由(1.51±0.01)降为(0.62±0.04),P0.01。结论益气养阴活血方能够减少AGEs在肾皮质的积累,下调糖尿病肾病大鼠肾皮质RAGEmRNA的过度表达。     

电针联合氟西汀抑制慢性应激抑郁大鼠额叶皮质nNOS、c-Fos上调和SYP下调

目的:观察电针联合氟西汀对慢性应激抑郁模型大鼠额叶皮质神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、基因片段(c-Fos)和突触素(SYP)表达的作用。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、电针组、氟西汀组和电针+氟西汀组。对大鼠进行21 d的应激刺激建立慢性应激抑郁模型。按分组给予电针刺激百会、神庭穴30 min,氟西汀灌胃,每天1次,持续21 d,旷场实验检测大鼠行为学。免疫组织化学法检测额叶皮质nNOS、c-Fos和SYP的表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠额叶皮质nNOS和c-Fos阳性神经元表达增加(P<0.05),SYP阳性神经元表达减少(P<0.05),大鼠行为学指标降低;与模型组比较,电针组、氟西汀组和电针+氟西汀组大鼠额叶皮质nNOS和c-Fos阳性神经元表达减少(P<0.05),SYP阳性神经元表达增加(P<0.05),大鼠行为学指标提高;与电针组、氟西汀组比较,电针+氟西汀组大鼠额叶皮质nNOS和c-Fos阳性神经元表达减少(P<0.05),SYP阳性神经元表达增加(P<0.05),大鼠行为学指标提高。结论:电针联合氟西汀可发挥协同作用,可能通过抑制慢性应激抑郁对额叶皮质nNOS、c-Fos的上调和SYP的下调,更好地达到抗抑郁的作用。     

糖尿病大鼠下丘脑室旁核nNOS免疫阳性神经元的变化

目的观察糖尿病大鼠下丘脑室旁核(PVN)内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元数目的变化,探讨PVN内NO在糖尿病发展中的作用机制。方法建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型,于第2、7、12周末取脑组织进行ABC免疫细胞化学法染色,定量分析PVN内nNOS免疫阳性神经元数目变化。结果2周时糖尿病组大鼠PVN内nNOS免疫阳性神经元数目与对照组相比无显著差异(P>0.05);7、12周时糖尿病组大鼠PVN内nNOS免疫阳性神经元数目显著高于对照组(P<0.05)。结论PVN内nNOS免疫阳性神经元数目在糖尿病中、后期明显升高,糖尿病状态下PVN内nNOS活性改变可能与糖尿病神经内分泌及肾上腺素能途径改变有关。     

脑溢安对脑出血大鼠脑内神经营养因子-3表达的影响

目的 观察脑出血大鼠神经营养因子-3(NT-3)的表达情况,以及脑溢安对NT-3表达的影响,探讨脑溢安治疗脑出血的可能机制.方法 80只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组及脑溢安组,用Ⅶ型胶原酶立体定位注射于苍白球建立脑出血模型,术后1、4、7、14、21d分别用免疫组织化学及原位杂交方法观察NT-3蛋白和mRNA的表达.结果正常组和假手术组大鼠脑内未见NT-3蛋白表达,正常组、假手术组大鼠脑内皮质和海马均可见NT-3 mRNA表达,正常组与假手术组相比较,差异无统计学意义(P>0.05);模型组和脑溢安组大鼠血肿周围、海马和脑内皮质自造模1d后,可见NT-3蛋白和mRNA表达,4d达到高峰,7d开始下降;与模型组相比较,脑溢安组大鼠脑内上述区域NT-3蛋白和mRNA在各个时间点的表达均显著增加(均P<0.01).结论脑出血后大鼠脑内有NT-3的表达,脑溢安上调NT-3的表达,这可能是脑溢安防治脑出血的机制之一.     

舒郁散对慢性应激抑郁大鼠神经肽及海马神经元5-HT 表达的影响

目的观察中药舒郁散对慢性应激抑郁大鼠神经肽(neuropeptide Y,NPY)及海马5-HT表达的影响。方法 50只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、百忧解组、舒郁散小剂量组、舒郁散大剂量组;对大鼠进行21 d的应激刺激建立慢性应激抑郁大鼠模型,采用open-field方法观察各组处理前、后2 min内大鼠行走路线及格子交叉点数的变化,了解大鼠行为的改变,用竞争酶联免疫分析法测定各组大鼠血浆、海马NPY的含量变化,采用免疫组织化学染色,观察各组大鼠额叶皮质、海马5-HT的表达。结果模型组大鼠血浆、海马NPY含量明显下降,与对照组比较,P<0.05;舒郁散大剂量组、百忧解组治疗后大鼠血浆、海马NPY含量较模型组显著升高,与模型组比较,P<0.05。免疫组化结果显示:舒郁散、百忧解组大鼠额叶皮层、海马区5-HT免疫反应阳性神经元数目明显增加,平均光密度明显增加,与模型组比较差异有显著性。结论舒郁散能显著提高慢性应激抑郁大鼠血浆、海马NPY含量,明显增加大鼠额叶皮层、海马区5-HT免疫反应阳性神经元数目,上述作用与其剂量呈正相关。     

益气养阴活血法对糖尿病合并脑缺血大鼠海马脑源性神经营养因子表达及空间学习记忆的影响

目的观察益气养阴活血法对糖尿病合并脑缺血大鼠空间学习记忆能力及脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响,并运用工具药(BDNF的Trk受体抑制剂)证实BDNF通路在其中的作用。方法将大鼠分为假手术组、模型对照组(糖尿病合并脑缺血伴气阴两虚、瘀血阻络证)、益气养阴活血组、益气养阴活血+K252a组、益气活血组,每组20只,选用具有益气养阴活血作用的人参、川芎、玉竹、黄精组合,运用免疫组织化学法和Morris水迷宫实验观察益气养阴活血药对糖尿病合并脑缺血模型大鼠空间学习记忆的作用及对BDNF表达的影响。结果与模型对照组比较,益气养阴活血药物和益气活血药物均可以明显增加糖尿病合并脑缺血大鼠海马齿状回BDNF的表达(P0.01),益气养阴活血药物显著缩短模型大鼠找到水下平台的潜伏期(P0.01),益气养阴活血药物和益气活血药物均显著延长大鼠在原水下平台的停留时间(P0.05,或P0.01),其中益气养阴活血药物效果优于益气活血药物(P0.05)。侧脑室注射K252a可以阻断益气养阴活血药物促进模型大鼠的空间记忆能力的恢复(P0.01)。结论益气养阴活血药物可能通过促进模型大鼠海马齿状回BDNF的表达而改善空间记忆功能。     

大鼠额叶创伤后早期神经元型一氧化氮合酶的表达变化

目的观察大鼠额叶创伤后不同时间点创伤区及周边皮质神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的表达变化。方法采用成年健康SD大鼠（76只）脑额叶锐器损伤模型,随机分成空白对照组、假手术组和脑损伤组3组。于伤后0、1、3、6、12、24h等6个时间点分别采用尼氏染色法、免疫荧光组织化学方法、Western blot法来观察创伤区及周边皮质神经元的病理变化、nNOS阳性细胞和nNOS蛋白的表达变化。结果尼氏染色显示创伤区及周边皮质神经元数目减少,胞浆染色加深,尼氏小体减少,神经元突起不明显甚至消失。免疫荧光组织化学、Western blot免疫印迹显示,空白对照组及假手术组额叶皮质中偶见nNOS阳性细胞,nNOS蛋白表达量较低;伤后1h创伤区及周边nNOS阳性细胞表达开始增多,nNOS蛋白表达开始升高,6h达高峰,12h开始下降。结论大鼠额叶创伤后早期创伤区及周边皮质有nNOS的时程表达变化。     

小檗碱抑制JAK2/STAT3信号通路改善糖尿病大鼠前额叶皮层神经元损伤

目的 探讨小檗碱(BBR)通过介导JAK2/STAT3信号通路对糖尿病大鼠前额叶皮层神经元损伤的作用。方法 将48只8周龄的雄性Wistar大鼠分为对照组(Nor组)、糖尿病组(DM组)、小檗碱治疗组(BBR组)、二甲双胍治疗组(Met组)4组。DM模型通过给予高脂高糖饲料并联合尾静脉注射链脲佐菌素(25mg/kg)诱导造模,之后将小檗碱187.75mg/(kg·d)和二甲双胍184mg/(kg·d)以灌胃方式给药治疗,连续给药6周。取材后通过HE染色观察各组大鼠前额叶皮层区神经元形态的变化;通过免疫组化观察各组大鼠前额叶皮层区小胶质细胞的活化程度;通过Western blot法检测各组大鼠前额叶皮层中p JAK2/JAK2与p STAT3/STAT3的蛋白表达水平;通过免疫荧光检测各组大鼠前额叶皮层区Caspase 3的蛋白表达水平。结果 与Nor组相比,DM组大鼠的前额叶皮层区神经元发生了变性,小胶质细胞过度活化,Iba 1蛋白表达水平明显升高,JAK2/STAT3信号通路显著激活和Caspase 3蛋白荧光强度明显增强;经BBR和Met治疗后,糖尿病大鼠的前额叶皮层区神经元均有不...     

糖尿病大鼠下颌下腺内nNOS和NT-3表达变化及意义

目的 观察不同病程糖尿病大鼠下颌下腺内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和神经营养因子-3(NT-3)的表达变化,探讨其对糖尿病下颌下腺结构和功能的影响.方法 48只SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组和治疗组.糖尿病组和治疗组给予腹腔注射链脲佐菌素复制2型糖尿病模型,治疗组给予胰岛素治疗,于造模后3个月和6个月每组分别处死8只大鼠,测定空腹血糖,并取下颌下腺组织,分别进行HE染色、免疫组织化学染色和计算机图像分析.结果 糖尿病组血糖较同期对照组升高且随着病程的延长显著,治疗组血糖较同期糖尿病组下降.光镜下,与对照组相比,糖尿病组下颌下腺腺泡萎缩加重,颗粒曲管数目减少,管腔变窄,治疗组无明显变化;免疫组织化学法检测显示,nNOS在糖尿病组表达较同期对照组增强,在造模3个月表达最强,治疗组表达较同期糖尿病组降低;NT-3在糖尿病组表达较同期对照组降低且随病程的延长减少,治疗组较同期糖尿病组增强.结论 糖尿病大鼠下颌下腺内nNOS表达升高和NT-3表达下降,可能是引起糖尿病下颌下腺结构和功能紊乱的重要原因;胰岛素治疗可能与nNOS和NT-3的表达改变有关.     

宁痫冲剂对戊四唑致痫大鼠脑源性神经营养因子蛋白表达的影响

[目的]探讨以升清降浊法组成的中药复方宁痫冲剂的抗痫作用机理。[方法]SD大鼠40只,随机分为5组:即正常组,模型组,宁痫冲剂高、低剂量组(10g/kg和5g/kg)及苯巴比妥组(60 mg/kg);除正常组外,其他4组均以戊四唑(PTZ)亚惊厥剂量35mg/kg诱导慢性癫痫模型,造模同时各组按设定剂量分别给药,1次/d,连续4周;动物处死后以免疫组织化学方法,观察宁痫冲剂对大脑额叶皮质、海马CA3区脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。[结果]模型组大鼠脑内海马、皮质区免疫标记阳性神经元数目均增多(P<0.05或P<0.01),标记强度增强;宁痫冲剂低剂量组能减少免疫阳性神经元数目(P<0.05或P<0.01),减弱免疫反应性。[结论]PTZ慢性诱导癫痫反复发作可导致脑内BDNF表达增强;宁痫冲剂的抗痫作用机制可能与降低BDNF蛋白表达有关。     

益气养阴活血方对糖尿病大鼠肝脏病理及肝脏miRNA-126表达水平的影响

[目的]通过观察益气养阴活血方对大鼠肝脏组织miRNA-126的含量的影响,探讨其改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗(IR)的作用机制。[方法]12周龄Wistar雄性大鼠60只,随机分组,其中空白组10只,实验组50只。采用高脂饮食加小剂量链尿佐菌素(STZ)诱导形成2型糖尿病大鼠模型,造模成功后,50只糖尿病组大鼠随机分5组,空白组10只、模型组10只予生理盐水,津力达组10只予津力达颗粒、益气养阴活血方大、中、小剂量组各10只,予相应剂量中药灌服,干预4周,常规取血测定血糖、糖化血清蛋白GSP、空腹胰岛素水平等生化指标,取大鼠肝脏切片,HE染色,光镜下观察病理改变;再取一部分肝脏组织,运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术,进行miRNA-126含量的测定。[结果]益气养阴活血方中、高剂量组和津力达组的大鼠体质量明显降低;益气养阴活血方各剂量和津力达颗粒均可降低大鼠空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h BG)、GSP;其中益气养阴活血方中剂量效果优于津力达颗粒;益气养阴活血方各剂量组和津力达颗粒均可减轻大鼠肝脏组织病理损害,其中中剂量组效果最为明显。益气养阴活血方各剂量和津力达颗粒均可降低肝脏组织miRNA-126的表达,其中中剂量组效果更明显,优于津力达组。[结论]益气养阴活血方能够改善2型糖尿病大鼠血糖代谢紊乱,可改善肝脏的病理损害,其机制可能与降低肝脏中miRNA-126的含量有关。     

益气生津活血方对链脲霉素引发糖尿病大鼠模型的心肌微血管损伤防护作用

目的：观察益气生津活血方对链脲霉素引发糖尿病心肌微血管损伤的保护作用。方法用链脲霉素引发SD雄性大鼠成糖尿病模型，成模后分为5组，分别为益气生津活血方低剂量组、益气生津活血方高剂量组、二甲双胍组、模型对照组、益气生津活血方预防组，另外有一组空白对照组。分别按分组灌胃给药。6周后处死动物，腹腔静脉取血并取心肌匀浆，分别按SICAM-1、IL-1、ET-1说明书测含量，然后HE染色做病理切片。结果模型组与空白对照组空腹血糖比较P﹤0.05，糖尿病模型成功；模型组与用药组比较，SICAM-1、IL-1、ET-1含量都有显著性差异。结论益气生津活血方对STZ引发糖尿病大鼠模型的心肌微血管损伤有防治作用。     

两种中药复方对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织Hes-1、Hes-5表达的动态影响

目的：探讨益气活血方和补肾生髓方对脑缺血再灌注大鼠缺血侧额顶叶皮质Hes-1、Hes-5蛋白表达的动态影响。方法：采用线栓法复制局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和补肾生髓方组。脑缺血2h,分别再灌注1,2．3周,采用免疫组织化学SABC法检测Hes-1、HeS-5蛋白表达的阳性面积和平均吸收光密度值。结果：在缺血区额项叶皮质。再灌注1-2周时,模型组Hes-1、Hes5表达阳性面积单位、平均吸收光密度值较假手术组明显增加（P〈0．05,或P〈0．01）。再灌注1周时．益气活血方和补肾生髓方组Hes-1、Hes-5蛋白表达阳性面积及平均光密度值显著高于模型组（P〈0．05．或P〈0．01）,益气活血方组Hes-1和Hes5蛋白表达平均光密度值显著高于补肾生髓方组（P〈0．01）。再灌注2周时,除补肾生髓方组Hes-5外,益气活血方组和补肾生髓方组Hes-1和Hes5蛋白表达阳性面积及平均光密度值显著高于模型组（P〈0．05,或P〈0．01）,益气活血方组Hes-5表达阳性面积显著高于补肾生髓方组（P〈0．01）。再灌注3周时。补肾生髓方组Hes1表达阳性面积,补肾生髓方组和益气活血方组Hes5表达阳性面积及益气活血方组Hes5表达平均光密度值显著高于模型组（P〈0．05）。结论：两种中药复方均能通过增强缺血侧脑组织额顶叶皮质Hes-1和Hes-5的表达,促进局灶性脑缺血后内源性神经干细胞的增殖分化。     

补肾生髓方和益气活血方对局灶性脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Notch信号通路Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达的影响

目的 探讨补肾生髓方和益气活血方对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Notch信号转导通路Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达的影响。方法 采用线栓法复制右侧大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾生髓方组和益气活血方组。脑缺血2 h后,持续灌注7 d。采用PCR检测额顶叶皮质Nurr1、SMO mRNA表达水平,采用Western blot检测其蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达水平均明显上调（P<0.05）;益气活血方组和补肾生髓方组Nurr1 mRNA及其蛋白、SMO蛋白相对表达水平均较模型组明显下调（P<0.05）;模型组、益气活血方组和补肾生髓方组SMO mRNA相对表达水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;益气活血方组与补肾生髓方组Nurr1、SMO蛋白表达水平有显著差异（P<0.05）。结论 补肾生髓方和益气活血方促进脑组织修复的作用与其下调Notch信号转导通路中Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达有关。     

自拟益气养阴活血通络方对冠心病心绞痛免疫调节和血管内皮功能的影响

目的：探讨益气养阴活血通络方对冠心病心绞痛免疫调节和血管内皮功能的影响。方法选取冠心病心绞痛患者120例,随机分为观察组和对照组,各60例,对照组进行常规西医治疗,观察组则在此基础上采用益气养阴活血通络方开展治疗。比较2组患者的临床疗效及免疫调节和血管内皮功能的改善情况。结果观察组治疗后的临床总有效率明显高于对照组,治疗效果差异有统计学意义（P＜0.05）;治疗后观察组hs-CRP、TC、TG、LDL水平明显优于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论益气养阴活血通络法治疗冠心病心绞痛可有效缓解患者心绞痛,改善免疫及血管内皮功能,临床疗效明显。     

益气养阴活血化瘀法治疗微小残留白血病凋亡机制

[目的]探讨益气养阴活血化瘀法诱导微小残留白血病细胞凋亡的发生机制。[方法]建立微小残留白血病大鼠型，通过FCS法观察细胞凋亡率和脾细胞周长。[结果]治疗组凋亡率明显高于模型组，而模型组中G2 M期细胞率明显高于中药治疗组。[结论]益气养阴活血化瘀法可以诱导白血病细胞凋亡，有效治疗微小残留白血病。     

补肾益气活血方对胎儿生长受限胎鼠IGF-1、IGFBP-1及IGFBP-3表达的影响

目的 观察补肾益气活血方对胎儿生长受限胎鼠肝脏IGF-1、IGFBP-1、IGFBP-3表达的影响,探讨补肾益气活血方治疗FGR的作用机制.方法 采用被动吸烟法建立SD大鼠FGR模型,分为正常组、FGR组、补肾益气活血方治疗组(中药组)、精氨酸治疗组(精氨酸组).采用免疫组织化学方法检测胎鼠肝脏IGF-1、IGFBP-...     

益气养阴活血化瘀法治疗微小残留白血病凋亡机制*

[目的]探讨益气养阴活血化瘀法诱导微小残留白血病细胞凋亡的发生机制.[方法]建立微小残留白血病大鼠型,通过FCS法观察细胞凋亡率和脾细胞周长.[结果]治疗组凋亡率明显高于模型组,而模型组中G2+M期细胞率明显高于中药治疗组.[结论]益气养阴活血化瘀法可以诱导白血病细胞凋亡,有效治疗微小残留白血病.     

丹蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠治疗作用的观察

目的:观察益气养阴活血方丹蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠的治疗作用。方法:SD大鼠单侧肾脏结扎后链脲佐菌素腹腔注射制造糖尿病肾病大鼠模型,分为假手术组、模型对照组、益气养阴活血方(丹蛭降糖胶囊)低、中、高剂量组,分别给药6周后观察糖尿病肾病大鼠一般情况及血糖、糖化血红蛋白、尿量、24 h尿蛋白量。结果:模型大鼠给药前造模动物血糖、糖化血红蛋白、尿量、24 h尿蛋白量显著升高,给药6周后均能不同程度降低各指标。结论:益气养阴活血方(丹蛭降糖胶囊)可降低糖尿病肾病大鼠的血糖,改善糖尿病肾病大鼠肾功能,对糖尿病肾病有一定的治疗作用,为临床使用提供依据。     

糖尿病大鼠学习能力与脑细胞凋亡及血糖的关系

目的探讨糖尿病大鼠学习能力与大脑神经元凋亡状况及血糖的关系。方法采用电迷宫法测试26只糖尿病大鼠（糖尿病组）和30只正常大鼠（对照组）的学习能力,并应用原位末端标记法检测其额叶皮层和海马发生细胞凋亡的神经元数目,免疫组化法检测凋亡调节基因Bcl 2、Bax的表达,并对糖尿病大鼠学习能力与额叶皮层和海马凋亡细胞数目及糖化血红蛋白进行相关分析。结果糖尿病组大鼠电迷宫测试成绩明显下降,达到学会标准前所需训练次数明显多于对照组（P＜0.001）,额叶皮层和海马细胞凋亡数高于对照组,Bcl 2表达减少,而Bax表达则增加（P均＜0.01）。糖尿病大鼠达到学会标准前所需训练次数与额叶皮层和海马细胞凋亡指数呈正相关（r=0.410,P＜0.05）,且与糖化血红蛋白呈正相关。结论糖尿病高血糖状态下额叶皮层与海马凋亡调节基因表达改变引起的细胞凋亡增加可能与糖尿病认知功能障碍有关。