增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨增殖细胞核抗原(PCNA)在肝细胞肝癌的发生发展中的作用及作用机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测PCNA在肝细胞癌、相应癌旁组织和正常肝组织中mRNA和蛋白质的表达,正常肝组织、癌旁组织、肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为20.0％、46.2％和85.7％;结合患者的年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、有无淋巴结转移等临床病理学资料进行统计学分析,其表达与组织分化程度和淋巴结转移呈明显相关(P＜0.05).结果 PCNA在正常肝组织、癌旁组织、肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为20.0％、46.2％和85.7％,在肝细胞癌中的阳性表达率显著高于正常肝组织和癌旁肝组织(P＜0.05);RT-PCR检测结果也证实PCNA mRNA在肝细胞癌中的表达明显高于正常肝组织和癌旁肝组织(P＜0.05).PCNA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小等因素无明显相关(P＞0.05),与组织分化程度和淋巴结转移呈明显相关(P＜0.05).结论 PCNA在肝细胞癌组织中的表达高于正常肝组织和癌旁肝组织,并且与肿瘤的恶性程度密切相关.     

Survivin在肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

为研究survivin 与肝细胞肝癌（HCC）临床特征的关系，探讨其对HCC的早期诊断及治疗的意义。笔者应用免疫组织化学(SABC)法,检测survivin在39例HCC组织、4例正常肝组织和8例肝硬化组织中的表达，并分析HCC及不同病理学特征与survivin蛋白表达的关系。结果示， HCC组织、正常肝组织、肝硬化组织中survivin基因的阳性表达率依次为61.3%，0%和0%;HCC组织与后2组间差异有显著性(P<0.05);随HCC分化程度的降低, survivin的阳性表达率明显上升(P<0.05)。提示survivin的表达水平在HCC的发生、发展中具有重要意义,有望成为一新的肿瘤标志物而应用于临床。     

Survivin在原发性肝细胞癌中的表达及其与侵袭、转移的关系

目的 研究Survivin基因在原发性肝细胞癌中的表达水平及其与肝癌侵袭转移的相关性.方法 收集4种肝细胞癌细胞株,35例原发性肝癌组织标本及相应的癌旁组织,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Survivin mRNA转录情况;Western blot法检测Survivin蛋白表达.结果 在mRNA水平4株肝癌细胞株随侵袭转移能力升高Survivin表达依次升高(P＜0.01),HC-CLM6细胞株中Survivin表达水平最高.肝癌组织Survivin mRNA表达均为阳性,而癌旁组织内无一例阳性表达,Survivin mRNA的表达水平在肝内转移组(1.082±0.213)显著高于肝内无转移组(0.799±0.324,P＜0.05).Western blot的结果与RT-PCR结果一致,肝内转移组Survivin蛋白表达(0.892±0.198)显著高于肝内无转移组(0.342±0.237,P＜0.05).结论 Survivin在原发性肝细胞癌中表达,且与侵袭转移等肿瘤的恶性生物学行为有关,Survivin基因高表达可作为判断HCC侵袭性和进展的一个潜在重要指标.     

CD24在肝癌中的表达及其与PCNA、CD34的关系

目的 探讨CD24表达在肝细胞癌(hepataellular carcinoma,HCC)发生、发展中的作用及与细胞增殖、血管生成的关系.方法 运用流式细胞术检测40例HCC、26例癌旁肝硬化、7例肝硬化、5例正常肝组织CD24表达量.运用免疫组织化学法检测该40例HCC增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)、CD34表达情况,根据CD34染色情况计算HCC微血管密度(microvessel density,MVD),根据PCNA染色情况计算PCNA指数.结果 在HCC中,CD24阳性表达率及平均荧光强度均明显高于癌旁肝硬化、肝硬化和正常肝组织(P＜0.05);CD24表达与HCC组织分化程度,HBsAg状态、术前AFP水平、肿瘤是否有包膜及有否肝内转移有关,与HCC患者性别、肿瘤大小、癌肿数目无关;HCC中随着CD24表达水平增加,PCNA也随之升高,两者呈正相关;HCC中CD24表达与MVD未见明显相关.结论 CD24过表达与HCC的发生、发展密切相关,并可促使肝癌细胞增殖,使肝癌细胞具有更强的侵袭力.     

Survivin在肝癌中的表达和意义及其与血管内皮生长因子的相关性

目的　检测肝细胞癌中凋亡抑制蛋白Survivin的表达 ,研究其与肝癌临床特征的关系 ;同时研究Survivin与血管内皮生长因子 (VEGF)表达的相关性 ,探讨Survivin在肝细胞癌发生发展及转移中的作用及机制。方法　采用免疫组织化学技术和蛋白印迹技术 ,检测 3 8例肝癌组织及癌旁非癌组织中Survivin和VEGF蛋白的表达。结果　 3 8例肝癌组织中 2 3例表达Survivin蛋白 ,其中 18例VEGF表达阳性 ,5例VEGF表达呈阴性或弱阳性 ;15例不表达Survivin蛋白者VEGF的表达 3例阳性 ,12例阴性或弱阳性。而在癌周非癌组织未检测到Survivin蛋白的表达。Survivin的表达与肝癌的发病年龄、性别、肿瘤大小、分化程度无关 (均为P >0 .0 5 ) ,而与肝癌的转移有关 (P <0 .0 5 )。结论　Survivin在肝细胞癌中的表达能促进肝癌的发生发展 ,并可能通过上调VEGF的表达而促进肝癌转移。     

nm23-H1基因和增殖细胞核抗原在肝癌组织中的表达及其与癌细胞DNA含量的关系

目的　探讨转移抑制基因nm23-H1在肝癌组织中的表达和癌细胞增殖及DNA含量间的关系。方法　应用免疫组织化学染色法检测56例肝癌组织标本中nm23-H1基因和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,应用图像分析系统测定癌细胞DNA含量,分析与肝癌病理生物学行为之间的关系。结果　nm23-H1表达阳性率无包膜组肝癌(29.6%)比包膜完整(64.3%)和包膜突破组肝癌(66.7%)明显减低(P＜0.05)。DNA指数(DI)与肝癌包膜情况、组织类型、组织分级也有显著相关性(P＜0.05)。nm23-H1表达阴性的肝癌PCNA标记指数（LI）高于nm23-H1阳性者（P＜0.05);PCNA标记指数高增殖组肝癌DI值（2.30±0.90）较低增殖组肝癌DI值（1.86±0.7）明显增高（P＜0.05）。结论　nm23-H1表达与肝癌包膜形成具有一定关系,并与肝癌增殖活性相关。DNA含量测定结合PCNA免疫组织化学染色可较为准确的反映肝癌浸润侵袭特征和增殖活性。     

肝细胞癌增殖细胞核抗原表达的图像定量分析

目的 探讨原发性肝细胞癌(简称肝癌)增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况及其意义.方法 采用免疫组化ABC法极测了PCNA蛋白在41例人肝癌组织和人肝癌细胞系HCC-9204的表达情况,并用图像分析仪定量分析了其表达水平与肝癌病理分级之间的关系.结果 癌旁非肿瘤性肝细胞不表达PCNA或只有微弱的表达,而各级肝癌组织的癌细胞均有不同程度的较强的PCNA表达,并且随着肝癌组织分化程度的下降PCNA表达的平均光密度和积分光密度均呈升高趋势,在不同病理分级的肝癌组织之间具有显著性差异(P<0.05).PCNA在培养的HCC-9204细胞中表达的阳性率为86.4%.结论 PCNA可作为肝癌发生和发展过程中的一个与其恶性程度密切相关的标志物,可能在肝癌细胞的增殖过程中具有重要的作用.     

Survivin mRNA表达对肝癌细胞凋亡和增殖及MDR-1影响的实验研究

目的　研究新的凋亡抑制因子survivinmRNA在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)中的表达 ,测定肝癌的细胞凋亡和增殖及多药耐药基因mRNA在HCC中的表达 ,探讨survivin表达对肝癌细胞凋亡和增殖的影响及其与HCC多药耐药之间的相互关系。方法　 31例HCC癌组织及癌旁组织标本取自 2 0 0 0年 8月至 2 0 0 1年 4月浙江大学医学院第二附属医院。用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)、TUNEL法和免疫组织化学法分别测定HCC癌组织及癌旁组织中survivinmRNA的表达情况、细胞凋亡指数和增殖指数及MDR 1mRNA的表达 ,分析在HCC中survivin表达与细胞凋亡和增殖之间的相互关系 ,探讨survivin表达在HCC发生发展中的作用及其与MDR 1mRNA表达之间的关系。结果　 31例肝癌组织中survivinmRNA阳性例表达率为 71% (2 2 / 31) ,阴性表达率为 2 9% (9/ 31) ;而癌旁正常组织中均无表达。肝癌标本中的凋亡指数为 :0 4 %～ 15 % ,平均值为 :(4 2 4± 3 92 ) %。Sur vivinmRNA阳性表达病例平均AI值为 (4 6 4± 4 30 ) % ,阴性表达平均AI值为 (3 36± 2 98) %。两者比较P >0 0 5 ,两组间无显著差异。肝癌标本中增殖指数为 :2 %～ 80 % ,平均值为 (2 6 2 1± 14 9) %。SurvivinmRNA阳性表达病例平均Ki 6 7LI值为 (30 32± 15 4     

肝细胞肝癌Survivin与血管内皮生长因子表达相关性及其临床意义

目的　探讨肝细胞肝癌 (HCC)Survivin与血管内皮生长因子 (VEGF)的表达相关性及其临床意义。方法　应用链霉抗生物素蛋白 过氧化物酶免疫组织化学 (SP)法检测 5 6例HCC中Survivin与VEGF的表达。结果　HCC中 3 4例Survivin表达阳性 ,阳性率为 60 .7%。 3 5例VEGF表达阳性 ,阳性率为 62 .5 %。HCC组织Survivin与VEGF的表达阳性率高于癌旁组织及正常肝组织 (P <0 .0 5 )。Survivin的表达与HCC肿瘤镜下门静脉癌栓发生密切相关 (P <0 .0 5 )。VEGF的表达与HCC肿瘤大小、肿瘤镜下门静脉癌栓发生以及肿瘤病理分期密切相关 (P <0 .0 5 )。相关性检验示Survivin与VEGF之间有相关性 (χ2 =4.491,P <0 .0 5 )。结论　HCC中Survivin、VEGF蛋白表达均上调 ,共同参与HCC发生和发展 ,VEGF与Survivin有协同表达关系。     

细胞凋亡及增殖细胞核抗原双染色在肝细胞肝癌组织中的研究

目的 研究肝细胞肝癌细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）／凋亡细胞比值与肝细胞肝癌分化程度的关系。方法 应用原位末端标记法（TUNEL）及免疫组化双染色技术,对35例肝细胞肝癌石蜡包埋组织进行检测。结果 不同分化程度癌组织中细胞凋亡和PCNA的阳性率不同。分化程度高,细胞凋亡阳性率高、PCNA阳性率偏低;分化程度低,细胞凋亡阳性率偏低、PCNA阳性率高。随分化程度的降低,PCNA／凋亡细胞的比值显著增加,二者有良好的相关性。结论 PCNA／凋亡细胞的比值可作为评估肝细胞肝癌分化程度的指标。     

XIAP在膀胱癌中的表达及其与肿瘤增殖活性的关系

目的探讨XIAP在膀胱移行细胞癌(TCC)中的表达及其与TCC增殖活性的相关意义。方法应用免疫组织化学SABC技术检测47例TCC癌组织,6例正常膀胱黏膜组织中XIAP及增殖细胞核抗原Ki-67的表达水平。结果6例正常膀胱组织中仅有1例XIAP表达阳性(16．67%),而在47例TCC癌组织中有37例XIAP表达阳性(78．73%),与正常膀胱组织相比,膀胱癌组织中XIAP表达显著增高(P＜0．01)；复发的TCC癌组织中XIAP的阳性表达率(89．47%,17/19)明显高于初发的癌组织(71．43%,20/28)(P＜0．05)；但是,不同分级和分期的癌组织中XI- AP的表达差异无统计学意义(P＞0．05)；此外,XIAP表达阳性的TCC癌组织中具有较高的核增殖活性,其Ki-67标记指数为(37．51±15．85)%,明显高于XIAP表达阴性的TCC癌组织的(17．76±11．42)%(P＜0．05)。结论XIAP在TCC癌组织中呈高表达,其表达与肿瘤的分级和分期无明显相关,但是与肿瘤的核增殖活性相关,这可能与TCC发生的早期事件及药物耐受机制有关。     

Survivin在食管癌中的表达及其与bcl-2表达关系的相关研究

目的探讨Survivin在食管癌组织中的表达及其与bcl-2蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学SP法,检测Survivin、bcl-2蛋白在68例食管癌组织和20例正常食管组织中的表达。结果Survivin蛋白在正常食管组织中低表达或不表达,68例食管癌组织中,49例表达阳性,占72.1%。Survivin蛋白表达与分化程度、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。食管癌组织bcl-2蛋白表达阳性、阴性组中,Survivin蛋白阳性表达率分别为94.7%(36/38)和43.3%(13/30),两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Survivin蛋白表达与bcl-2蛋白表达密切相关。结论Survivin在食管癌组织中表达上调,通过抑制细胞凋亡,在食管癌的发生中起到重要作用;凋亡相关基因bcl-2的上调与Survivin的表达可能在食管癌变中起协同作用。     

Parkin基因在肝细胞癌中的表达与临床意义

目的 探讨Parkin基因mRNA及其蛋白在肝细胞癌中的表达规律及其临床意义。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学（S-P）法检测58例肝细胞癌中Parkin基因mRNA及蛋白的表达情况，结合病人的临床病理资料分析Parkin基因在肝细胞癌中的意义。结果 肝癌组织中Parkin基因mRNA及蛋白的表达明显降低，阳性率分别为22．4％（13／58）和25．9％（15／58），明显低于癌旁肝组织的表达阳性率：94．8％（55／58）和89．7％（52／58），其差异有统计学意义（P〈0．05），且Parkin基因蛋白表达的缺失与病人的性别、肿瘤的大小、甲胎蛋白（AFP）、HBsAg、以及有无肝硬化无关（P〉0．05），而与肿瘤的分化程度、有无包膜及有无门静脉癌栓有关（P〈0．05）。结论 Parkin基因在肝细胞癌的发生过程中可能起重要的作用，其表达水平可能成为肝细胞癌诊断及判断其生物学特性的重要分子生物学指标。     

Survivin 在胆囊癌组织中的表达及与病理的关系

目的　观察Survivin在胆囊癌中的表达情况以及与病理的关系。方法　应用免疫组织化学方法分析我院 2 0 0 1年 1月～ 2 0 0 3年 12月间行胆囊癌切除的 2 4例胆囊癌标本Survivin的表达情况 ,并分析其表达水平与肿瘤病理分期和分级之间的关系。结果　 2 4例胆囊癌标本中有 17例Survivin表达阳性 ,占总数的 70 .8%。Survivin在Ⅳ、Ⅴ期胆囊癌中的阳性率分别为 87.5 %和10 0 % ,表达水平明显比Ⅰ期 (3 3 .3 % ) ,Ⅱ期 (60 .0 % ) ,Ⅲ期 (66.7% )的高 (P <0 .0 5 ) ,在不同分化程度的胆囊癌中的表达水平不同 (P <0 .0 5 ) ,而阳性率未见明显不同 (P >0 .0 5 )。结论　Survivin在多数胆囊癌中阳性表达 ,并且其表达阳性率和表达强度均与肿瘤的病理分期呈正相关     

Survivin在食管癌中的表达及其与bcl-2表达关系的相关研究

目的 探讨Survivin在食管癌组织中的表达及其与bc1-2蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学SP法，检测Survivin、bc1-2蛋白在68例食管癌组织和20例正常食管组织中的表达。结果 Survivin蛋白在正常食管组织中低表达或不表达，68例食管癌组织中，49例表达阳性，占72．1％。Survivin蛋白表达与分化程度、淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。食管癌组织bc1-2蛋白表达阳性、阴性组中，Survivin蛋白阳性表达率分别为94．7％（36／38）和43．3％（13／30），两者比较．差异有统计学意义（P〈0．05）。Survivin蛋白表达与bc1-2蛋白表达密切相关。结论 Survivin在食管癌组织中表达上调，通过抑制细胞凋亡，在食管癌的发生中起到重要作用；凋亡相关基因bc1-2的上调与Survivin的表达可能在食管癌变中起协同作用。     

Survivin在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌增殖活性的关系

目的探讨Survivin在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌增殖活性的关系。方法用RT-PCR法检测6 2例胰腺癌、1 2例慢性胰腺炎和1 0例正常胰腺组织中Survivin mRNA的表达;用免疫组织化学法检测胰腺癌中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并观察两者的关系。结果Survivin mRNA在胰腺癌中表达率为7 4.2%,在慢性胰腺炎及正常胰腺组织中不表达,前者与后两者差异有显著性(P<0.0 1);与胰腺癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移无明显关系(P>0.0 5)。Survivin的表达与胰腺癌增殖活性有关;Survivin阳性肿瘤具有较高的增殖活性,其PCNA指数为(4 6.4±1 5.2)%,明显高于Survivin表达阴性肿瘤者(2 8.4±1 4.8)%(P<0.0 1)。结论Survivin基因在胰腺癌中过表达,并与胰腺癌的高增殖有关。提示该基因对胰腺癌的发生和发展起重要作用。Survivin基因有望成为胰腺癌诊断和治疗的新靶点。     

肝细胞癌中HBx的表达及其与肿瘤病理分级的关系

目的 检测乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)在肝细胞癌中的表达并探讨其与肝癌病理分级的关系.方法 用免疫组织化学法检测41例肝癌患者肿瘤组织中HBx蛋白的表达,与临床资料进行相关分析,并应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、PCR及Western blot法检测肝癌患者肿瘤组织及血清中HBx的表达.结果 肝癌组织中HBx的总体阳性检出率为27/41(65.85%),HBx+与HBx-者肿瘤组织低分化比例分别为11/27(40.74%)及2/14(14.29%),差异有统计学意义(P<0.01),且肿瘤组织低分化比例随HBx阳性表达程度的增加而增加,HBx强阳性表达者肿瘤组织低分化比例高达4/6(66.67%);RT-PCR对肿瘤组织HBx mRNA的检出率为10/16(62.50%),PCR对血清中HBx拷贝的检出率为1/7(14.29%),Western blot对血清中HBx蛋白的检出率则为6/7(85.71%).结论 肝癌肿瘤组织中HBx的表达与肿瘤的病理分级呈负相关,肿瘤组织低分化比例随HBx阳性表达程度的增加而增加.     

放射线敏感性自杀基因的构建及其在肝癌细胞中的表达

目的　利用可被放射线激活而转录的早期生长反应基因 1 (Egr 1 )启动子驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (tk)在肝癌细胞中高效表达。方法　构建以Egr 1为启动子 ,以tk为目的基因的重组质粒 pET ,经脂质体介导转染人肝癌细胞株SMMC 772 1 ,经G41 8抗性筛选、分别以 0、5、7.5、1 0、1 5、2 0Gy剂量γ射线照射、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)半定量分析、比较tk基因的mRNA表达。结果　转染后的肝癌细胞株经射线照射后其tkmRNA的表达较未照射组 (55 .2±7.2 )有明显提高 ,以 1 5Gy最为显著 (1 1 7.2± 1 1 .1 ,P <0 .0 0 1 )。结论　经γ射线照射后 ,可被放射线转录激活的Egr 1启动子可引起tk基因在肝癌细胞中高效表达 ,从而为肝癌的基因 放射治疗的实验研究打下坚实的基础     

microRNA-497 在肝细胞癌中的表达及意义

目的:探讨microRNA-497(miR-497)在肝细胞癌组织中的表达及其意义.方法:收集40例肝细胞癌及对应癌旁组织标本,用qRT-PCR方法检测标本中miR-497的表达;人肝癌SMMC-7721细胞经miR-497模拟物转染后,用MTT和流式细胞术检测其增殖能力与凋亡水平的变化,并用qRT-PCR和Western blot检测miR-497潜在靶点Bcl-w的mRNA与蛋白的表达.结果:miR-497在肝癌组织中的表达水平明显低于其癌旁组织[(1.181±0.779)vs.(14.599±5.266),P＜0.05];转染miR-497模拟物的SMMC-7721细胞增殖能力明显降低,细胞凋亡增加,Bcl-w的mRNA与蛋白表达均明显降低(与未转染的SMMC-7721细胞比较,均P＜0.05).结论:肝癌组织中miR-497表达下调,该下调可能导致靶基因Bcl-w表达升高,从而促进肿瘤的发生与发展.