1，25-二羟维生素 D3对白血病6T-CEM细胞株作用的体外研究

目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25（OH）2 D3]对人白血病6T-CEM细胞株凋亡及维生素D受体（VDR）蛋白表达的影响。方法在体外用不同浓度的1,25（OH）2 D3作用于6T-CEM。末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记染色法（TUNEL）检测细胞晚期凋亡的变化,免疫细胞化学法检测VDR蛋白表达。结果不同浓度的1,25（OH）2 D3作用后可促进6T-CEM 细胞的凋亡,呈剂量和时间依赖性（P ＜0．05）。1,25（OH）2 D3作用前后6T-CEM细胞均表达VDR蛋白,药物作用后VDR蛋白表达上调。结论1,25（OH）2 D3在一定浓度范围内可诱导6T-CEM细胞凋亡,使VDR蛋白表达上调。     

利用载体介导的RNA干扰技术抑制人骨肉瘤细胞HOS-8603内维生素D3受体的表达及功能

目的:构建由载体介导的抑制人维生素D3受体(VDR)表达的RNA干扰载体,并在人骨肉瘤细胞中初步研究其对VDR表达及功能的影响.方法:通过在线筛选设计了两段针对人VDR的RNAi序列,并与载体pSilencer-2.1-U6连接,获得了表达载体pSilencer-2.1-U6-VDR1与pSilencer-2.1-U6-VDR2.利用脂质体转染法分别转入人骨肉瘤细胞系HOS-8603细胞中,通过Western 印迹法检测其对内源性VDR蛋白表达、对1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]激活PKC作用的影响,利用细胞计数和MTT的方法检测其对1,25(OH)2D3抑制HOS-8603细胞增殖作用的影响.结果:在分别转染pSilencer-2.1-U6-VDR1/2的HOS-8603细胞中,与对照细胞比较,内源性VDR蛋白的表达、1,25(OH)2D3对细胞的增殖抑制作用以及1,25(OH)2D3快速诱导PKC磷酸化的作用均有显著降低.结论:构建的表达载体pSilencer 2.1-U6-VDR1与pSilencer 2.1-U6-VDR2均能在细胞水平显著抑制内源性VDR基因的表达,并能有效阻断一些由VDR介导的1,25(OH)2D3生物学作用,为进一步研究VDR与维生素D3的功能提供了一个有用工具.     

1,25-(OH)D3及其类似物对人骨肉瘤细胞增殖分化的影响及对VDR mRNA表达的调节

目的:研究1,25-(OH)2D3及其类似物MC1288对人骨肉瘤细胞系(HOS-8603)增殖及分化的影响,并探讨二者对HOS-8603细胞维生素D3受体(VDR)mRNA表达的调节作用.方法:用细胞计数及碱性磷酸酶(ALP)测定法观察1,25-(OH)2D3及MC1288对HOS-8603细胞系细胞的增殖抑制及诱导分化的作用;用半定量RT-PCR法研究1,25-(OH)2D3及类似物对VDR mRNA表达的调节作用.结果:MC1288和1,25-(OH)2D3与HOS-8603细胞孵育后,其增殖分化均明显减弱,以MC1288作用更强,但二者对HOS-8603细胞VDR mRNA表达均无影响.结论:MC1288的选择性活性并非由于转录调节而引起;MC1288的选择性活性对临床治疗肿瘤和其他疾病有较大价值.     

维生素D受体mRNA在白血病患者外周血细胞中的表达

目的：检测白血病患者外周血维生素Ｄ受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ表达,探讨１,２５（ＯＨ）２Ｄ３诱导分子的分子学机制。方法：以ＲＴ－ＰＣＲ技术检测白血病患者外周血细胞中ＶＤＲｍＲＮＡ表达。结果：白血病患者外周血细胞中均有ＶＤＲｍＲＮＡ表达。结论：白血病患者外周血细胞是维生素Ｄ３（ＶＤ３）作用的靶细胞,１,２５（ＯＨ）２Ｄ３的作用可能是通过ＶＤ３核受体（ＶＤＲ）而介导,提示ＶＤ３能用于各种类型白血病的诱导分     

维生素D受体变异对下游靶基因转录调控的研究进展

维生素D 受体(vitamin receptor,VDR)是介导1,25(OH)2D3VD(维生素D的活性形式)发挥生物效应的核受体.VD与VDR结合后可与靶基因上游启动子区或调控区域上的特定DNA序列相结合,进而对靶基因的转录表达进行调控[1].研究表明,VDR在药物代谢、转运及药物疗效中起关键作用[2],而造成个体对药物代谢、疗效及肿瘤易感性的差异与基因多态性密切相关[3],因而对VDR变异的研究也就成为近年来研究的热点.本文在转录水平上论述VDR的变异对药物代谢酶CYP3A4的影响.     

维生素D及维生素D受体在糖尿病肾病中的作用

目的 糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病最常见、最严重的微血管并发症之一,也是糖尿病患者死亡的重要危险因素.已有大量研究表明,维生素D(vitamin D,VD)和维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)在肾脏保护方面发挥着重要作用.1,25(OH)2D3是...     

维生素D受体在乳腺癌进展过程中mRNA及蛋白表达情况及其意义

目的：通过测定维生素D受体( VDR)在乳腺疾病进展过程中的mRNA及蛋白表达情况,以探讨VDR在乳腺疾病演变过程中的表达变化及其意义。方法成组设计,分为四组(非特殊类型浸润性癌、正常乳腺、腺病、导管原位癌),采用逆转录实时荧光PCR( Real-time RT-PCR)方法检测乳腺标本的VDRmRNA的表达情况,采用免疫组织化学染色方法检测VDR的蛋白水平表达情况。结果在浸润性乳腺癌组织中,VDRmRNA表达水平显著降低,与正常乳腺组织相比差异有统计学意义(P<0．05),同时蛋白表达水平降低;正常乳腺组、腺病组与导管原位癌组VDRmRNA表达水平及蛋白水平依次降低,但差异无统计学意义(P>0．05)。结论浸润性乳腺癌组织中VDR表达下调,在本实验中显示VDR的表达与乳腺病变的进展呈负相关,进一步佐证VDR的表达对于乳腺有一定保护作用。     

尘螨抗原对P815肥大细胞维生素D受体和炎症介质分泌的影响及1,25（OH）2D3的免疫调节作用

目的探讨1,25（OH）2D3对尘螨抗原（Derp）直接作用的P815肥大细胞维生素D受体（VDR）表达及IL-4、IL-10分泌的影响及其免疫调节作用。方法用不同浓度Derp、1,25（OH）2D3单独或联合作用P815细胞,收集细胞和上清液。采用Westernblot、RT-PCR法分别检测P815肥大细胞VDR蛋白及mRNA表达,ELISA法检测细胞悬液上清液中IL-4、IL-10浓度。结果P815肥大细胞表达VDR。不同浓度Derp对P815肥大细胞VDR表达有调节作用,作用12、24h组VDRmRNA表达呈明显浓度依赖性下调（P＜0.05）。不同浓度Derp作用P815肥大细胞36h后,VDR蛋白表达呈浓度依赖性下调。高浓度1,25（OH）2D3单独作用对VDR表达有上调作用（P＜0.05）。不同浓度1,25（OH）2D3单独作用P815肥大细胞可促进IL-10的释放（P＜0.05）,但对P815肥大细胞IL-4分泌无明显影响（P＞0.05）。1,25（OH）2D3可抑制Derp引起的IL-4分泌（P＜0.05）,且1,25（OH）2D3浓度越高,抑制作用越强。Derp、1,25（OH）2D3联合处理P815肥大细胞36h后,上清液中IL-10浓度无明显变化（P＞0.05）。结论1,25（OH）2D3可通过上调肥大细胞上VDR表达,促进IL-10分泌,从而发挥抗炎作用。1,25（OH）2D3对Derp引起的肥大细胞免疫反应的干预作用可能是通过抑制IL-4的合成和分泌,从而抑制Th2型免疫应答的。     

Graves病患者外周血淋巴细胞维生素D受体表达改变及意义

目的：研究Graves病患者外周血淋巴细胞维生素D受体(VDR)mRNA表达，探讨其免疫系统VDR mRNA的变化及意义。方法：常规方法提取并分离淋巴细胞，采用异硫氰酸胍-苯酚氯仿一步法抽提总RNA，定量逆转录一聚合酶链反应(RTPCR)检测淋巴细胞的VDRmRNA。结果：正常人和Graves病患者外周血淋巴细胞均有VDRmRNA表达存在，密度扫描定量分析显示，与正常人相比Graves病患者VDRmRNA表达量无明显增加。结论：自身免疫性疾病Graves病患者起病时外周血淋巴细胞计数明显增高，而VDRmRNA表达无明显变化，提示发病人群可能存在VDR表达调节的缺陷，在该病的发病中可能具有重要意义。     

泰山地区回民糖耐量异常群体VDR受体基因多态性分析

目的探讨泰山地区回民群体糖耐量异常与维生素D受体基因多态性相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性长度多态性技术,对回民糖耐量异常者和糖耐量正常回民检测VDR基因(Apa-I和Fok-I)多态性及等位基因分布频率,并检测VDR蛋白血液含量。结果糖耐量异常组Apal-I多态性AA、Aa和aa基因型分布率为10%、34.6%和55.4%,正常对照组相应为13.8%、42.5%和43.7%:糖耐量异常组Fok-I酶切多态性FF、Ff和ff基因型分布率为23.2%、41.1%和35.7%,正常对照组相应为13.8%、42.5%和43.7%;结论泰山地区回民群体糖耐量异常与维生素D受体基因多态性相关;VDR蛋白血液浓度和胰岛素抵抗在各型间显示差异性。     

我国哈萨克族与汉族维生素D受体基因多态性的分布

目的　为研究我国哈萨克族与汉族维生素 D受体基因多态性分布与骨质疏松的关系 .方法　采用聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性技术 ,对哈萨克族 (年龄 5 0± 2岁 )的健康妇女 93例 ,和汉族 (年龄 5 9± 3岁 )健康妇女 179例进行 VDR基因检测 .结果　在中国哈萨克族 93例中 ,bb型 44例 (4 7% ) ,Bb型 45例 (4 8% ) ,BB型 4例 (4 % ) ;在汉族179例中 ,bb型 16 2例 (90 % ) ,Bb型 17例 (10 % ) ,未见 BB型 .结论　中国哈萨克族 VDR基因多态性分布与汉族相比存在非常显著性差异 (P<0 .0 0 5 ) .     

维生素D3,9—顺式维甲酸及其相应核受体对hsp90β基因？…

目的 研究维生素Ｄ３（ＶＤ３）、９－顺式维甲酸（９－ｓｉｃ－ＲＡ）及其相应核受体对ｈｓｐ９０β基因表达的调控作用。方法 采用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ方法将人ｈｓｐ９０β基因调控片段（－１ ０３９ ｂｐ／＋１ ５３１ ｂｐ）介导的荧光素酶（Ｌｕｃ）报告基因质粒β１．１１转染Ｊｕｒｋａｔ细胞,并用ＶＤ３和９－ｃｉｓ－ＲＡ分别或同时刺激细胞,或将质粒β１．１１及野生型维生素Ｄ３受体（ＶＤＲ）或／和维甲酸     

Enhanced Response of Acute Monocytic Leukemia Cells to Low-dose Cytarabine by 1,25-dihydroxyvitamin D3

Low-dose cytarabine combined with differentiating or DNA hypomethylating agents, such as vitamin D compounds, is a potential regimen to treat acute myeloid leukemia (AML) patients who are unfit for high-intensity chemotherapy. The present study aimed to determine which subset of AML would be most responsive to low-dose cytarabine with the differentiating agent 1,25-dihydroxyvitamin D3 (1,25-D3). Here, firstly, cBioPortal database was used and we found out that vitamin D receptor (VDR) was highly expressed in acute monocytic leukemia (M5) and high VDR expression was associated with a poor survival of AML patients. Then, we confirmed that 1,25-D3 at clinical available concentration could induce more significant differentiation in acute monocytic leukemia cell lines (U937, MOLM-13, THP-1) and blasts from M5 patients than in non-monocytic cell lines (KGla and K562) and blasts from M2 patient. Finally, it was shown that the combination of 1,25-D3 and low-dose cytarabine further increased the differentiating rate, growth inhibition and G0/G1 arrest, while mild changes were found in the apoptosis in acute monocytic leukemia cell lines. Our study demonstrates that the enhanced response of acute monocytic leukemia cells to low-dose cytarabine by 1,25-D3 might indicate a novel therapeutic direction for patients with acute monocytic leukemia, especially for elderly and frail ones.     

稳定转染维生素D受体反义cDNA的人骨肉瘤细胞系的建立

目的：建立稳定转染维生素D受体（VDR）反义cDNA的人骨肉瘤细胞系,方法：构建VDR反义cDNA的真核表达载体,用Lipofectamine法转染人骨肉瘤细胞系HOS－8603,经G418筛选后获得稳定转染细胞株,并用免疫组化技术检测内源性VDR蛋白折表达情况,采用瞬时转染报告基因技术从靶基因水平检测VDRas3细胞内VDR的转录激活功能,结果“筛选出6株抗G418细胞克隆（VDRas1-6),其中VDRas3细胞内源性VDR蛋白的表达量低于对照细胞,激素作用72h后,对照组细胞的报告基因氯霉素乙酰转移酶（CAT）转录活性增加约3．5倍,而VDRas3细胞CAT的转录基本不受激素诱导。结论：获得了稳定转染VDR反义cDNA的细胞系,为今后进一步研究1,25（OH）2D3及其类似物调节细胞增殖分化的分子机制提供了一个良的细胞模型。     

Forskolin对1，25－二羟维生素D_3受体mRNA表达的调节及其生物学意义

目的：研究腺苷酸环化酶激活剂ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（Ｆ）对１，２５－二羟维生素Ｄ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ表达的调节作用及其可能的生物学意义。方法：以人原始巨核白血病细胞系（ＨＩＭｅｇ）为模型，ＶＤＲｍＲＮＡ的检测采用定量逆转录－聚合酶链反应；细胞增殖实验采用悬浮培养系统及甲基纤维素培养系统。结果：Ｆ对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ的表达具有向上调节作用，且有明显的时间依赖性特点；Ｆ本身虽然对ＨＩＭｅｇ细胞的增殖及分化过程无明显影响，但却可以显著地加强１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对该细胞系的作用，具体表现在：当Ｆ同时存在时，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＨＩＭｅｇ细胞的增殖过程和克隆形成率的抑制作用更为明显，对ＨＩＭｅｇ细胞分化过程的诱导作用亦更为显著；同时，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＨＩＭｅｇ细胞周期分布的影响也更加突出。结论：Ｆ对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ具有向上调节作用，并伴有１，２５（ＯＨ）２Ｄ３生物学效应的提高，说明下对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ的向上调节作用具有生物学意义。     

维生素D与胎儿生长受限关联的研究进展

胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)是常见的妊娠并发症,与围产儿死亡率高和青少年健康成长问题及成年后心血管及代谢性疾病密切相关。尽管FGR的发病率高达5%~10%,但目前仍没有很好的预防和治疗方法。维生素D是人体必需的一种脂溶性激素,在人体中有多种存在形式,1,25(OH)₂D为其活性形式,能与维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)结合并发挥广泛的生物学功能,对正常妊娠的维持以及胎儿的生长发育具有重要作用。VDR属核受体超家族成员,是维生素D代谢途径中的一个重要组成部分,参与激活调节和启动众多涉及到细胞增殖和分化的基因的表达与调控。VDR基因存在多态性并影响VDR的转录活性,改变VDR蛋白功能,并直接或间接地影响维生素D的功能,与多种疾病的遗传易感性相关。人体和动物实验研究表明:子宫内膜基质以及妊娠早期蜕膜组织细胞中均有VDR表达,VDR蛋白参与早期胚胎植入过程的免疫调节,FGR患者胎盘VDR表达下降。因此,孕期维生素D状态以及VDR基因多态性可能与胎儿生长发育迟缓以及新生儿低出生体重有关。本文就维生素D、维生素D受体基因多态性与FGR的关系作一综述。      

代谢综合征与维生素D受体基因多态性研究进展

代谢综合征是一种由遗传因素和环境因素共同介导的,以中心性肥胖、血脂异常、高血糖、高血压为主要表现的临床综合征。维生素D受体基因在人体组织细胞中广泛表达,可通过影响脂质代谢、胰岛素抵抗等对代谢综合征(MS)发病率产生影响。近来在MS发病机制研究中维生素受体基因受到关注,现就MS以及维生素D受体基因多态性研究进展进行综述。     

维生素D受体与维生素D抵抗研究进展

维生素D（VitD）是一组具有广泛生理作用的类固醇衍生物,其作用是通过VitD受体（VDR）介导的。体内大多数组织和细胞都有VDR。VitD抵抗是指机体对正常甚至大剂量VitD或1,25（OH）2D的低反应或无反应现象,VDR基因点突变是主要原因之一,对机体有着多方面影响。     

维生素D受体及维生素D受体激动剂的研究进展

维生素D受体为亲核蛋白,属于类固醇激素/甲状腺激素受体超家族成员,在体内主要介导维生素D的细胞作用.维生素D的主要代谢产物——活性维生素D3在体内作用广泛,与维生素D受体结合后,不仅发挥经典的钙磷调节作用,还具有调节细胞增殖、调节免疫及抑制细胞坏死、诱导肿瘤细胞分化、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤浸润和转移等非钙调作用.文章就维生素D受体的生物学特征、信号转导通路和活性维生素D3及其衍生物——维生素D受体激动剂的有关研究进展做一综述.