慢性肾脏病中脂联素及脂联素受体的变化及其意义

脂联素是脂肪细胞分泌的一种特异性蛋白质,具有改善胰岛素抵抗、抗炎、抗动脉粥样硬化等作用。研究发现脂联素与肾脏疾病关系密切,脂联素在肾脏中具有抗炎、抗纤维化、抗氧化及改善血管内皮细胞功能等作用。有研究显示尿脂联素可能具有一定的肾脏保护作用。脂联素是通过其受体发挥作用的,人脂联素受体AdipoR1/R2在组织中广泛表达,AdipoR1/R2在肾脏疾病的发生发展中具有重要作用。研究脂联素及脂联素受体在肾脏疾病病中的作用,有助于慢性肾脏疾病的防治。     

脂联素对小鼠主动脉平滑肌细胞体外钙化作用机制的研究

[目的]探讨脂联素对主动脉平滑肌细胞(ASMCs)体外钙化的作用机制.[方法]体外培养脂联素基因敲除小鼠ASMCs,以α-磷酸奈酚法检测钙化指标碱性磷酸酶(ALP),Western Blot检测脂联素受体(AdipoR)表达及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活.siRNA-AdipoR或加用MAPK信号转导阻断剂,观察脂联素对ASMCs钙化作用的变化.[结果]在小鼠ASMCs检测出AdipoR 1表达.脂联素干预后激活p38MAPK.若抑制AdipoR 1表达或使用p38 MAPK信号转导阻断剂SB203580,脂联素抑制ALP活性的作用消失.[结论]脂联素通过AdipoRl/p38信号转导途径抑制小鼠ASMCs体外钙化.     

替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠心肌细胞脂联素受体的作用

目的观察替米沙坦对心肌细胞脂联素(APN)受体的影响,从而探讨胰岛素抵抗中心肌脂联素受体表达可能的调控机制。方法应用高果糖饮食造模成功的胰岛素抵抗(IR)大鼠,采用酶解法分离出心室肌细胞,进行原代细胞培养,将心室肌细胞分为两组:对照组予二甲基亚砜(DMSO)刺激24 h,替米沙坦组予DMSO+替米沙坦10μM/L刺激24 h。培养心肌细胞24 h后采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组心室肌细胞培养液中APN的生成。采用Western Blot法测定不同处理后心肌细胞脂联素受体1(AdipoR1)、受体2(AdipoR2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达。结果与对照组相比,替米沙坦组心室肌细胞培养液中脂联素的浓度增高(P<0.05)。与对照组相比,替米沙坦组心肌细胞AdipoR1蛋白的表达增高(P<0.05),而心肌细胞AdipoR2蛋白的表达无明显变化(P>0.05);心肌细胞PPARγ蛋白的表达增高(P<0.05),心肌细胞TNF-α蛋白的表达降低(P<0.05)。结论替米沙坦可以通过激活PPARγ提高胰岛素抵抗大鼠心肌细胞脂联素受体表达,减轻炎症,改善心肌代谢。脂联素及AdipoR1可能是其发挥作用的目标蛋白之一。     

脂联素与2型糖尿病合并冠心病的关系研究进展

脂联素（adiponectin,APN）是一种由脂肪组织合成和分泌的激素,其在血液循环中以三聚体、六聚体、高分子量化合物等形式存在,不同形式的APN对体内能量的平衡起着不同的作用.APN是一种可以增强胰岛素敏感性的激素,它通过与脂联素受体1 （AdipoR1）或脂联素受体2（AdipoR2）结合而发挥生物学作用.APN与肥胖、糖尿病和动脉粥样硬化的发生、发展均相关,同时还具有改善胰岛素抵抗、改善糖代谢和抗动脉粥样硬化等生理作用,其作用机制可能与激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）和过氧化物酶体增殖物激活型受体（PPAR）α通路相关.近年来,关于APN与2型糖尿病合并冠心病的研究报告较少,本文对其研究进展进行综述.     

高脂血症模型大鼠主动脉血管脂联素受体mRNA的表达

目的:观察高脂血症大鼠主动脉脂联素受体(adiponectin receptors1/2,AdipoR1/2)表达的改变,探讨高脂血症诱导形成动脉粥样硬化早期变化的机制。方法:SD大鼠随机分为2组。对照组9只给予基础饲料喂养,高脂组8只给予高脂饲料配方喂养。喂养前后通过酶法检测2组大鼠血脂(甘油三酯、总胆固醇,高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇)及ELASA法检测血清脂联素浓度;主动脉病理通过苏木素伊红(HE)染色,荧光定量PCR法检测主动脉脂联素受体AdipoR1和AdipoR2 mRNA的表达。结果:喂养12及16周时,与对照组比较,高脂组血脂明显升高(P0.05,0.01);主动脉血管内皮连续性破坏,内膜及内皮下平滑肌增厚;AdipoR1/2mRNA表达明显下降(P0.05,0.01)。结论:高脂饮食喂养16周大鼠可形成动脉粥样硬化早期内皮损失改变,且这种改变可能与主动脉AdipoR1/2mRNA表达下降有关。     

脂联素球状结构域研究进展

脂联素球状结构域(gAd)与脂联素受体1(AdipoR1)有很高的亲和力,本文概述了其增加胰岛素的敏感性、抑制胰腺β细胞的凋亡、促进脂肪酸的氧化、抑制粥样硬化性疾病的生理学功能。     

脂联素受体激动剂AdipoRon通过AMPK/自噬途径抗骨髓瘤细胞增殖

目的:探讨脂联素受体激动剂AdipoRon对骨髓瘤细胞系的增殖抑制作用及其可能的机制。方法:将不同浓度AdipoRon作用于骨髓瘤细胞系Sp2/0-Ag14和MPC-11,采用CCK-8法检测细胞增殖,Western blot检测信号通路蛋白表达水平,采用RT-PCR方法检测脂联素受体AdipoR1和AdipoR2在23例正常对照和21例多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞中的表达情况。结果:AdipoRon能显著抑制小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0-Ag14和MPC-11的增殖,且呈浓度依赖性和时间依赖性(r=-0.951/-0.950,r=-0.993/-0.969);AdipoRon可诱导凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleaved PARP的表达水平升高;AdipoRon可上调MPC-11的p-AMPK及其下游的p-ACC磷酸化水平,且可上调LC3-II/LC3-I的水平,下调p62的蛋白水平。脂联素受体AdipoR1在MM细胞中的表达水平显著高于正常对照,而AdipoR2在MM细胞中的表达水平显著低于正常对照。结论:脂联素受体在MM患者和正常人之间存在差异性表达。脂联素受体激动剂AdipoRon能够抑制骨髓瘤细胞增殖及诱导细胞凋亡,AMPK/自噬途径可能是其作用机制之一。     

追赶生长大鼠脂联素及其受体与胰岛素抵抗的相关性研究

目的:探讨脂联素及其受体与胰岛素抵抗的相关性。方法:5周龄雄性Wistar大鼠适应性喂养1周后随机分为对照组(NC)和追赶生长组(RN),NC组持续开放饮食12周,RN组先限制饮食(NC组食量的50%)4周,随后给予自由开放普通饮食8周。分别于实验第0、4、6、8、12周进行检测,测定胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMAIR)、内脏脂肪/体重比(VFW/BW)、血清甘油三酯(TG)及脂联素水平。用免疫组织化学染色法检测骨骼肌AdipoR1的表达。结果:实验第4周末,RN组的体重无明显变化,而VFW/BW、HOMAIR明显下降,血清脂联素和骨骼肌AdipoR1的表达显著上升(P<0.01)。开放饮食后VFW/BW及HOMAIR逐渐增高,而血清脂联素和AdipoR1的表达逐渐降低。相关分析表明血清脂联素和AdipoR1的表达水平与VFW/BW、HOMAIR均呈负相关。结论:脂联素及骨骼肌AdipoR1表达变化可能与追赶生长所致的胰岛素抵抗、向心性肥胖密切相关。     

脂联素球状结构域研究进展

脂联素球状结构域（gAd）与脂联素受体1（AdipoR1）有很高的亲和力,本文概述了其增加胰岛素的敏感性、抑制胰腺β细胞的凋亡、促进脂肪酸的氧化、抑制粥样硬化性疾病的生理学功能.     

替米沙坦对体外培养脂肪细胞脂联素表达的影响

背景:脂联素对胰岛素抵抗、代谢综合征有着重要的调节作用,其合成受过氧化物酶体增殖物活化受体γ活性的调节,研究表明部分血管紧张素受体拮抗剂可通过激活过氧化物酶体增殖物活化受体γ影响脂联素代谢,但具体机制尚不清楚.目的:探讨替米沙坦对脂肪细胞脂联素表达和分泌的影响,并与坎地沙坦进行比较.方法:体外培养、诱导分化3T3-L1脂肪细胞,分别用空白培养液、坎地沙坦(10 μmol/L)和替米沙坦(10 μmol/L)干预3T3-L1脂肪细胞,采用RT-PCR法、Western blot法和ELISA法检测脂肪细胞脂联素mRNA和蛋白表达及培养液中脂联素的分泌水平.结果与结论:与空白组和坎地沙坦组相比,替米沙坦组脂肪细胞脂联素的mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.05或P<0.01),但各组间脂肪细胞培养液中脂联素的分泌水平差异无显著性意义(P>0.05).说明替米沙坦可以明显增加脂肪细胞脂联素的表达,但并不增加脂联素的分泌水平,其促进脂联素表达的作用优于坎地沙坦.     

脂联素受体(Adipo R)介导小檗碱改善糖尿病肾病的肾脏脂毒性

目的：明确脂联素受体（Adipo R）是否介导小檗碱改善糖尿病肾病的肾脏脂毒性。方法：以C57BLKS/J db/db小鼠为研究对象,以db/m小鼠为正常对照,小檗碱(150mg/kg/d)灌胃,连续 12周。试验结束时采血测定血糖、血脂、尿微量白蛋白/肌酐、24h尿蛋白,取肾脏组织作病理形态学检查、油红O染色、免疫组化、ELISA测定脂质含量、Western blotting测定蛋白水平。进一步在人肾小球内皮细胞系（HGEC）上进行验证。结果：小檗碱可以显著降低db/db小鼠的体重,改善血糖、血脂、蛋白尿、肾脏的脂质沉积、以及肾脏病理改变。小檗碱可以增加db/db小鼠肾脏组织脂联素受体（AdipoR1和AdipoR2）的表达水平,同时下调肾脏组织纤维化指标TGF-β1及Col-IV的表达水平,及上调PPAR-α及p-AMPK表达水平。用小檗碱干预的db/db小鼠的血清去干预高脂培养的HGEC细胞发现TGF-β1及Col-IV的表达显著下调,而PPAR-α及p-AMPK表达显著上调;当沉默掉HGEC细胞上的脂联素受体后,TGF-β1及Col-IV的表达显著上调,而PPAR-α及p-AMPK表达显著下调。结论：小檗碱可以改善糖尿病肾病的肾脏脂毒性,脂联素受体介导小檗碱改善糖尿病肾病的肾脏脂毒性。     

脂联素受体表达与大肠癌发生发展的相关性研究

目的研究脂联素（adiponectin,ADP）受体（AdipoR1、AdipoR2）表达与大肠癌发生发展的相关性。方法应用免疫组织化学SP法检测55例大肠癌组织中ADP受体的表达,并结合大肠癌临床病理因素进行分析。结果AdipoR1在大肠癌组织中的阳性表达率为85．45％（47／55）,AdipoR2在大肠癌组织中的阳性表达率为78．18％（43／55）。AdipoR1和AdipoR2的表达与患者的年龄和性别无关（P均〉0．05）,与大肠癌浸润深度、淋巴结转移以及肿瘤分化程度均有关（P均〈0．05）。AdipoR1阳性表达与癌组织浸润深度呈负相关关系（r=-0．423,P〈0．01）。结论ADP受体的表达水平与大肠癌的发生发展相关。     

运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂联素受体的影响

目的观察运动对高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠血清脂联素（APN）及骨骼肌APN受体（AdipoR）的影响。 方法将30只Wistar大鼠分为对照组及高脂组,分别给予基础饲料和高脂饲料喂养;经喂养18周后再将高脂组大鼠随机分为静息组和运动组,继续给予高脂饲料喂养,运动组同时进行游泳训练,共持续6周。于实验进行24周后测量各组大鼠体重,检测空腹胰岛素(FINS)及空腹血糖(FBG)水平,计算胰岛素敏感指数（ISI）;采用酶联免疫吸附法检测血清APN含量;选用实时荧光定量聚合酶链反应检测骨骼肌APN受体1（AdipoR1）及APN受体2（AdipoR2）mRNA的表达。 结果高脂组大鼠经高脂饲料喂养18周后,其ISI较对照组明显降低,提示胰岛素抵抗模型制作成功。实验进行24周后,与对照组比较,静息组大鼠ISI显著降低,血清APN含量及骨骼肌AdipoR1、AdipoR2 mRNA表达分别降低至对照组71.9%、59.9%及69.2%水平（均P<0.05）;与静息组比较,运动组大鼠ISI明显提高（P<0.05）;骨骼肌中AdipoR1 mRNA表达亦显示提高,约是静息组的1.33倍（P<0.01）,但血清APN含量及骨骼肌AdipoR2 mRNA表达组间差异均无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论运动干预可提高大鼠胰岛素敏感性,其机制可能与上调大鼠骨骼肌AdipoR1表达有关。     

低强度脉冲超声促进C2C12成肌细胞分化的作用机制研究

目的观察不同功率密度低强度脉冲超声(LIPUS)对骨骼肌C2C12成肌细胞脂联素(Adiponectin)及其受体的影响,探讨LIPUS促进C2C12成肌细胞分化的潜在机制。方法将体外培养的C2C12成肌细胞根据有无超声干预或超声干预的功率密度随机分为对照组、U_0.1组、U_0.3组和U_0.5组,对照组接受假LIPUS干预,U_0.1组、U_0.3组、U_0.5组分别接受功率密度为0.1 W/cm²、0.3 W/cm²、0.5 W/cm²的LIPUS干预。干预5 d后,分别采用CCK-8法检测细胞活力,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测脂联素、脂联素受体1(AdipoR1)和T-钙黏蛋白(T-Cadherin)mRNA水平,采用Western blot法检测脂联素、AdipoR1、T-Cadherin、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、活化型-磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(P-AMPK)、肌细胞生成蛋白(MYOG)和胚胎肌球蛋白重链(eMHC)的蛋白水平,并对4组细胞肌管的分化能力进行免疫荧光化学检测。结果LIPUS干预5 d后,U_0.1、U_0.3和U_0.5组细胞相对活力明显高于对照组(P<0.01)。U_0.3组和U_0.5组脂联素、受体AdipoR1和T-Cadherin mRNA水平均显著上调,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。U_0.3组和U_0.5组脂联素、AdipoR1、T-Cadherin蛋白和AMPK磷酸化水平与对照组比较,均显著增加(P<0.05),且U_0.1组和U_0.5组均显著低于U_0.3组,差异均有统计学意义(P<0.01)。U_0.3组和U_0.5组C2C12成肌细胞分化指标eMHC、MYOG蛋白水平和C2C12成肌细胞融合指数与对照组比较,均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论LIPUS可促进C2C12成肌细胞的分化,并以0.3 W/cm²、5 min/d、1 MHz,占空比为20%的LIPUS干预作用最明显,其调控机制可能与C2C12成肌细胞脂联素、受体AdipoR1和T-Cadherin的表达上调和下游AMPK磷酸化水平活化有关。     

脂联素受体在正常结直肠上皮和结直肠癌的表达及其意义

目的:探讨脂联素受体的表达与结直肠癌间的关系及对结直肠癌的影响.方法:应用免疫组织化学SP法检测46例结直肠腺癌组织和46例结直肠正常黏膜组织中脂联素受体的表达情况,以图像分析软件进行半定量测定.结果:脂联素受体在正常结直肠上皮组织的腺管上皮细胞膜和细胞浆均匀表达,呈棕黄色-棕褐色表达;在结直肠癌细胞的细胞膜和细胞浆中呈浅黄色-棕黄色表达.腺癌组、正常对照组的脂联素受体1阳性率分别为78.3%、96.7%,脂联素受体2阳性率则分别为76.1%、96.7%.脂联素受体在结直肠腺癌组的阳性表达率明显低于正常对照组(P＜0.05或0.01).结论:脂联素可能通过脂联素受体的表达对结直肠癌产生影响,从而促进结直肠癌的发生、发展.     

姜黄素对兔皮下脂肪细胞脂联素分泌的影响

[目的]观察姜黄素对脂肪细胞脂联素表达和分泌的影响.[方法]新西兰大白兔腹股沟皮下脂肪细胞以不同浓度姜黄素(5,10,20 μg/mL)孵育24 h,用ELISA试剂盒检测细胞培养上清液脂联素水平,并用RT-PCR方法检测脂联素及其上游因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达.[结果]5,10,20 μg/mL姜黄素分别使兔皮下脂肪细胞脂联素分泌水平较对照组(3.13±0.21μmol/L)增加(3.93±0.26, 4.49±0.34, 5.21±0.39μmol/L).脂联素mRNA表达也较对照组(0.40±0.10)增加(0.55±0.09, 0.66±0.11, 0.80±0.13).姜黄素促进过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的作用与脂联素表达的改变一致,并在20 μg/mL时达到最大(1.01±0.15 vs 0.48±0.12).[结论]姜黄素可促进兔皮下脂肪细胞脂联素的表达和分泌,这种作用与其上调脂肪细胞PPARγ表达有关.     

脂联素及其受体表达的调节因素

脂联素(adiponectin)是一种与胰岛素抵抗密切相关的细胞因子,主要由脂肪细胞分泌,近来还发现人造骨细胞也有其表达。脂联素与受体结合后具有增强胰岛素敏感性,抗高血糖,抗动脉粥样硬化等生物学效应,任何增加或减少脂联素及其受体表达的方法都影响这些疾病的发生和发展。本文对有关脂联素及其受体调节因素的研究进展综述报道如下。     

残粒脂蛋白激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ诱导人脂肪间充质干细胞的成脂分化

背景：残粒脂蛋白可诱导大鼠脂肪间充质干细胞分化为成熟的脂肪细胞。目的：观察残粒脂蛋白对人脂肪间充质干细胞成脂分化和氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂联素基因表达的影响。方法：采用成脂诱导剂刺激人脂肪间充质干细胞,油红O染色鉴定脂肪细胞。分离高三酰甘油血症患者高脂餐后4h抗凝血浆中的残粒脂蛋白,分别将0,50,100,150,200mg/L残粒脂蛋白与10mg/L胰岛素联合刺激脂肪间充质干细胞。结果与结论：油红O染色发现0,50mg/L残粒脂蛋白组有微量脂滴形成。100～200mg/L残粒脂蛋白组红色脂滴逐渐增加,以200mg/L组红色脂滴最多。在50～200mg/L质量浓度范围内,细胞氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA与脂联素mRNA表达随残粒脂蛋白浓度增加而逐渐增强（P〈0.05）。200mg/L残粒脂蛋白组脂联素mRNA表达量显著低于150mg/组（P〈0.05）,但与100mg/L残粒脂蛋白组差异未达到显著性意义。表明残粒脂蛋白通过激活氧化物酶体增殖物激活受体γ诱导人脂肪间充质干细胞的成脂分化,并上调脂联素mRNA的表达。     

残粒脂蛋白激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ诱导人脂肪间充质干细胞的成脂分化

背景:残粒脂蛋白可诱导大鼠脂肪间充质干细胞分化为成熟的脂肪细胞。目的:观察残粒脂蛋白对人脂肪间充质干细胞成脂分化和氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂联素基因表达的影响。方法:采用成脂诱导剂刺激人脂肪间充质干细胞,油红O染色鉴定脂肪细胞。分离高三酰甘油血症患者高脂餐后4h抗凝血浆中的残粒脂蛋白,分别将0,50,100,150,200mg/L残粒脂蛋白与10mg/L胰岛素联合刺激脂肪间充质干细胞。结果与结论:油红O染色发现0,50mg/L残粒脂蛋白组有微量脂滴形成。100～200mg/L残粒脂蛋白组红色脂滴逐渐增加,以200mg/L组红色脂滴最多。在50～200mg/L质量浓度范围内,细胞氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA与脂联素mRNA表达随残粒脂蛋白浓度增加而逐渐增强(P<0.05)。200mg/L残粒脂蛋白组脂联素mRNA表达量显著低于150mg/组(P<0.05),但与100mg/L残粒脂蛋白组差异未达到显著性意义。表明残粒脂蛋白通过激活氧化物酶体增殖物激活受体γ诱导人脂肪间充质干细胞的成脂分化,并上调脂联素mRNA的表达。     

水飞蓟宾治疗非酒精性脂肪性肝病的实验研究

目的：观察水飞蓟宾干预对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARs）基因及其下游基因表达、线粒体膜流动性的影响,探讨水飞蓟宾防治NAFLD的可能机制。方法：采用高脂饮食建立NAFLD大鼠模型,分为模型组、罗格列酮组、水飞蓟宾组,并以正常大鼠为空白对照组。6周后用荧光偏振法检测肝脏线粒体膜流动性的变化,RT—PCR法检测大鼠血清PPAR-α、PPAR—γ及其下游基因包括长链酰基辅酶A脱氢酶（LCAD）、脂酰辅酶A氧化酶（AOX）和细胞色素P450A1酶（CYP450A1）、脂联素、脂联素受体（AdipoR）、抵抗素mRNA水平的表达,观察各组上述指标的差异。结果：模型组大鼠肝组织可见弥漫性肝细胞大泡或小泡性的脂肪变性,部分伴肝细胞坏死和炎性细胞浸润,罗格列酮组与水飞蓟宾组肝组织可见少量小泡性脂肪变性,未见明显肝细胞坏死和炎性细胞浸润。模型组大鼠肝细胞线粒体微黏度明显高于空白对照组（P〈0．01）;罗格列酮组及水飞蓟宾组大鼠肝细胞线粒体微黏度低于模型组（P〈0．05或0．01）,水飞蓟宾组明显低于罗格列酮组（P〈0．05）。与空白对照组比较,模型组PPAR-γ、AOX、CYP450A1、PPAR-γ、脂联素、AdipoR mRNA表达水平明显下降,抵抗素表达水平升高。罗格列酮组PPAR-γ、PPAR-α、脂联素mRNA表达水平明显高于模型组（P均〈0．01或0．05）;水飞蓟宾组PPAR-α、AOX、CYP450A1,PPAR-γ、脂联素mRNA表达水平均比模型组上升（P〈0．05）,且抵抗素mRNA表达水平比模型组下降（P〈0．05）。结论：水飞蓟宾可以有效防治NAFLD,其机制可能与稳定并维持适当的肝脏线粒体膜流动性,减轻肝脏脂质过氧化以及改善胰岛素抵抗有关。