松郁安神方对失眠大鼠基底核多巴胺和腺苷含量的影响

目的:观察松郁安神方对失眠大鼠基底核组织中神经递质多巴胺和腺苷的调节作用。方法:利用失眠大鼠模型,造模成功后分别给予阿普唑仑、松郁安神方(SYF)低剂量和高剂量用药1w。实验过程中观察大鼠的一般情况变化,治疗结束后通过酶联免疫吸附测定(Elisa)方法检测大鼠基底核组织中多巴胺(Dopamine,DA)和腺苷的含量。结果:SYF能够明显改善实验大鼠由失眠引起的症状,作用优于阿普唑仑。同对照组比较,模型组大鼠基底核组织中DA含量显著升高(P<0.01),腺苷含量显著降低(P<0.01)。同模型组比较,阿普唑仑组、SYF高剂量组和SYF低剂量组大鼠基底核组织中DA含量均显著下降(P<0.01),同时腺苷含量显著升高(P<0.01)。结论:SYF能够显著改善实验大鼠由失眠引起的症状,其机制可能与SYF抑制失眠大鼠基底核组织中DA的释放,增加腺苷的释放相关。     

松郁安神方对对氯苯丙氨酸致失眠大鼠血浆中前列腺素D2的影响

目的:观察松郁安神方对对氯苯丙氨酸(Para-chlorophenylalanine,PCPA)致失眠模型大鼠血浆中内源性睡眠促进物质前列腺素D2(Prostaglandin D2,PGD2)的影响.方法:采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠大鼠模型,用高、中、低剂量松郁安神方进行治疗,通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血浆中前列腺素D2(PGD2)的含量.结果:中、高剂量松郁安神方可提高PCPA失眠模型大鼠血浆中PGD2含量(P<0.05或P<0.01).结论:松郁安神方改善睡眠的机制之一可能是通过调节内源性睡眠促进物质PGD2发挥作用.     

帕病1号方对帕金森病模型大鼠的神经保护作用

目的探讨帕病1号方颗粒对帕金森病(PD)模型大鼠发挥神经保护作用的机制。方法采用6-羟基多巴胺纹状体两点注射法造成左侧纹状体损毁模型大鼠,把造模成功的40只大鼠分为3组:模型组(n=12),高剂量组(n=14),低剂量组(n=14)。另加正常组(n=8)。高、低剂量组每天分别给予帕病1号方颗粒18 g/kg,9 g/kg,模型组、正常组均予等体积蒸馏水。32 d后,行旋转测试;测定大鼠左侧纹状体匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,免疫组化法检测中脑黑质P-Akt(ser 473)、Bcl-2、Bax表达。结果治疗后,与同期模型组相比,高、低剂量组旋转行为学明显改善(P<0.01),且存在量效关系(P<0.01)。与同期模型组相比,高剂量组SOD活性(P<0.01)和GSH含量明显提高(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01);低剂量组GSH含量提高(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01);与低剂量相比,高剂量组GSH含量提高(P<0.01),MDA含量降低了(P<0.01)。与模型组相比,高、低剂量组P-Akt(ser 473)、Bcl-2、Bax阳性细胞数及Bc1-2/Bax比值有显著性差异(P<0.05),且存在量效关系(P<0.05)。结论帕病1号方颗粒能提高大鼠抗氧化能力和清除自由基能力,同时激活Akt信号转导通路,发挥其神经保护作用。其神经保护作用呈一定的量效关系。     

运动对胰岛素抵抗大鼠瘦素及其受体表达的影响

目的观察运动对胰岛素抵抗大鼠血清瘦素水平及组织瘦素受体表达的影响。方法 9只SD大鼠普通饲料喂养作为对照组。将胰岛素抵抗造模成功的34只大鼠随机分为4组:模型组9只:高脂高糖喂养;二甲双胍组8只:高脂高糖喂养加用二甲双胍300 mg/kg.d;运动组9只:高脂高糖喂养加游泳运动;联合组8只:在运动组基础上加用二甲双胍300 mg/kg.d。6周后,测各组大鼠空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG),计算胰岛素抵抗指数(IRI);酶联免疫吸附法测定血清瘦素,免疫组化法检测肝脏、骨骼肌和脂肪组织中瘦素受体蛋白表达,RT-PCR法检测肝脏、骨骼肌和脂肪中瘦素受体mRNA表达。结果与模型组比较,二甲双胍组、运动组和联合组FPG、FINS水平降低,IRI升高(均P<0.05)。与对照组比较,模型组血清瘦素水平明显升高(P<0.01),肝脏、骨骼肌、脂肪组织中瘦素受体蛋白和mRNA表达均明显下调(均P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组、运动组和联合组血清瘦素水平降低(P<0.05),瘦素受体蛋白和mRNA表达均上调(P<0.05)。与二甲双胍组比较,运动组和联合组瘦素受体蛋白及mRNA表达上调(均P<0.05)。结论胰岛素抵抗大鼠存在血清瘦素水平升高,组织瘦素受体表达下调。运动可以改善胰岛素抵抗,可能与降低血清瘦素水平,上调组织瘦素受体蛋白及mRNA表达有关。     

温阳补肾方对兔激素性股骨头坏死组织中骨保护素和核因子-κB受体活化因子及其配体mRNA表达的影响

目的观察温阳补肾方对兔激素性股骨头坏死(SANFH)组织中破骨细胞抑制因子(OPG)、核因子-κB受体活化因子(RANK)和核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的mRNA表达的影响。方法普通级健康新西兰大白兔46只,分为正常组(n=10)和造模组(n=36)。应用改进马血清联合甲基强的松龙法制作SANFH模型。造模后随机选取正常组2只、造模组4只处死,用于模型鉴定。再将造模组剩余动物随机分为模型组(n=8),中药低(n=8)、中(n=8)和高(n=8)剂量组。正常组和模型组生理盐水10 ml/d灌胃。中药低、中、高剂量组分别为以6.44 g/(kg·d)、9.66 g/(kg·d)、12.88 g/(kg·d)灌胃温阳补肾方汤剂,连续8周。采用逆转录聚合酶链反应检测OPG、RANK和RANKL的mRNA表达。结果模型组空骨陷窝率显著高于正常组(t=17.085, P 0.001)。与模型组比较,中药各剂量组OPG mRNA表达均明显升高(P 0.01),RANK和RANKL的mRNA表达明显降低(P 0.01);与中药低剂量组比较,中药中、高剂量组OPG mRNA表达明显升高(P 0.01),RANK和RANKL的mRNA表达明显降低(P 0.01);中药中、高剂量组比较均无显著性差异(P 0.05)。结论温阳补肾方能提高兔SANFH股骨头组织中OPG的mRNA表达,抑制RANK和RANKL的mRNA表达。     

人参对老年大鼠脑组织β肾上腺素能受体含量的影响

目的:观察具有大补元气、生津止渴、安神益智功效的人参对老年大鼠不同脑区β肾上腺素能受体含量的影响,分析该作用是否有剂量依赖性。方法:实验于2003-05/2004-12在中山大学中山医学院人体解剖学教研室的脑研究室完成。①选用清洁级健康SD大鼠30只,雌雄不拘,体质量400～600g,18～20月龄。按随机数字表法将大鼠分为3组:对照组、高剂量人参水煎液组、低剂量人参水煎液组,每组10只。②高剂量人参水煎液组:灌胃含生药1.5g/(kg·d)人参水煎液(吉林生晒参,均购于广州药材公司。分别第1次用8倍水分煎2h,第2次6倍水分煎1.5h,浓缩至含生药2kg/L)3mL;低剂量人参水煎液组:灌胃含生药0.5g/(kg·d)人参水煎液3mL;对照组:灌胃蒸馏水3mL,连续3周。③3周后,麻醉大鼠,开颅分离前额皮质、海马、小脑皮质、丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段。用放射配基受体结合分析法测定各组大鼠前额皮质、海马、小脑皮质、丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段β肾上腺素能受体含量。④先行单因素方差分析,再用Student-Newman-keals方法对各组数据进行统计学处理。结果:老年大鼠30只均进入结果分析。①中枢皮质结构各脑区肾上腺素能受体含量:给药3周后,高、低剂量人参水煎剂组大鼠前额皮质、海马、小脑皮质的β肾上腺素能受体含量均明显高于对照组(t=2.71～4.21,P<0.05～0.01),其中高剂量人参水煎剂组作用更为明显。②中枢皮质下结构各脑区β肾上腺素能受体含量:给药3周后各组大鼠丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段β肾上腺素能受体含量比较,差异不明显(P>0.05)。结论:人参可选择性提高老年鼠前额皮质、海马、小脑皮质β肾上腺素能受体含量,且高剂量人参水煎液[含生药1.5g/(kg·d)]作用更为明显,但对丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段β肾上腺素能受体含量无明显影响。     

芬太尼对慢性吗啡耐受大鼠蓝斑核δ受体与β-arrestin 1 的作用

目的研究芬太尼对慢性吗啡耐受大鼠蓝斑核δ受体与β-arrestin 1 的作用。方法40 只成年雄性SD 大鼠随机分为5组,每组8 只。NS 组：注射生理盐水1 ml/kg 2 次;M组：分别注射吗啡10 mg/kg 与生理盐水1 ml/kg;MF₁、MF₂、MF₃组：吗啡用药同M组,30 min 后分别给予芬太尼3、6、12 μg/kg,连续9 d。取大鼠蓝斑核,测定δ受体、β-arrestin 1 的mRNA与蛋白表达。结果与NS 组比较,M组δ受体、β-arrestin 1 表达明显下调(P<0.01);与M组比较,MF₁、MF₂和MF₃组δ受体表达无显著性差异(P>0.05),但MF₂组和MF₃组β-arrestin 1 mRNA及其蛋白的表达增加(P<0.05)。结论芬太尼6 μg/kg、12 μg/kg 可上调慢性吗啡耐受大鼠蓝斑核β-arrestin 1 表达,但对δ受体表达无影响。     

大承气汤对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4表达的影响

目的 探讨不同剂量大承气汤对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 将50只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组及大承气汤低、高剂量组,每组10只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型.大承气汤低、高剂量组分别于术前2 h、术后每日2次灌胃5 ml/kg、10 ml/kg大承气汤;其他3组同时间点灌胃10 ml/kg生理盐水.各组于术后24 h处死5只动物取肝组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定TLR4 mRNA表达.另取5只大鼠于术后2、6、12、48 h取血,测定血浆白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果 与假手术组比较,模型组大鼠肝组织中TLR4 mRNA表达及血浆IL-6、TNF-α含量均较假手术组升高(均P<0.01).以大承气汤干预后,肝组织中TLR4 mRNA表达及血浆IL-6、TNF-α含量均较模型组下降,且高剂量组降低程度更为显著(P<0.05或P<0.01).结论 大承气汤对脓毒症大鼠肝脏TLR4表达有抑制作用,并存在一定的量效关系.     

脓毒症大鼠血小板受体CD62P的表达及替格瑞洛的心脏保护作用

目的探讨脓毒症大鼠血小板受体CD62P表达情况以及替格瑞洛的抗炎作用及其对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法采用SD雄性大鼠32只, 以随机数字表法将大鼠分为4组:假手术组(sham)、脓毒症组(cecal ligation and puncture, CLP)、低剂量给药组(low dose, LD):给药剂量为10 mg/kg、高剂量给药组(high dose, HD):给药剂量为50 mg/kg, 每组8只。假手术组大鼠仅进行开关腹并剥离盲肠处理, 脓毒症组、低剂量给药组和高剂量给药组的大鼠采用CLP法构建脓毒症大鼠模型, 给药组分别按照10 mg/kg及50 mg/kg用量进行替格瑞洛灌胃给药, 假手术组及脓毒症组则按照1 mL/kg进行生理盐水灌胃处理。分别于手术前12 h及手术后12 h两次对大鼠进行灌胃给药。各组大鼠造模后24 h经腹主动脉取血并采集病理标本。应用流式细胞术检测各组大鼠血小板表面受体CD62P的表达情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测IL-6、TNF-α水平;检测心肌损伤标志物:CKMB、LDH水平;并检测转氨酶、肌酐、白细胞水平;对心肌组织进行...     

n-3多不饱和脂肪酸对心脏移植物血管病变的影响

背景:鱼油中的大量n-3多不饱和脂肪酸能抑制心脏移植物血管病变,延长移植物存活时间,但机制尚不完全清楚.新近研究提示,在体外实验中n-3多不饱和脂肪酸可通过活化过氧化物酶增殖子活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ)抑制炎性递质释放.目的:拟证实活化PPARγ否为n-3多不饱和脂肪酸缓解心脏移植物血管病变的新机制之一.方法:随机选取6只Lewis大鼠及18只Fisher344作为心脏供体.抽签法将另外24只Lewis大鼠随机分为4组作为受体,每组6只:同系移植组:Lewis大鼠之间心脏移植,不给予任何药物:低剂量鱼油组:行F344→Lewis异系移植,术后第1天开始按0.03 mL/kg给予鱼油灌胃8周;高剂量鱼油组:行F344→Lewis异系移植,术后第1天开始按0.06 mL/kg给予鱼油灌胃8周:对照组:行F344→Lewis异系移植,给予等体积环孢素A灌胃8周.低、高剂量鱼油组均在移植后开始环孢素A1.5mg/(kg·d)肌注2周.组织学检查评价心脏移植物血管病变,组织匀浆测定核因子kB及PPARγ活性,ELISA测定单核趋化蛋白1、干扰素诱导蛋白10含量,实时定量PT-PCR检测趋化因子受体CCR2及CXCR3表达.结果与结论:所有24只受体Lewis大鼠术后均顺利存活,供心在移植后8周仍有规律搏动.与同系移植组相比,移植8周后对照组心脏移植物发生了严重心脏移植物血管病变.与对照组相比,高、低剂量鱼油组心脏移植物血管病变均显著缓解,PPARγ性显著提高,核因子KB活性显著下降,组织匀浆单核趋化蛋白1及干扰素诱导蛋白10含量显著降低,趋化因子受体CCR2表达亦显著下调(P<0.001,P<0.05),高剂量鱼油组作用更明显(P<0.05).高、低剂量鱼油组及对照组CXCR3表达差异无显著性意义.实验证实,n-3多不饱和脂肪酸可通过活化核蛋白PPARγ制核因子kB活性与趋化因子及其受体表达,呈剂量依赖性缓解近交系大鼠模型心脏移植物血管病变的发生及发展.     

酸性肽对阿尔茨海默病模型大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体、神经生长因子和β淀粉样蛋白水平的调节作用

背景:一些研究已经证实酸性肽对痴呆模型大鼠有良好的治疗作用,但其发挥作用的途径尚需探讨。目的:观察酸性肽能否抑制阿尔茨海默病大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体和淀粉样β蛋白的产生以及促进神经生长因子的产生和分泌。设计:随机对照动物实验。单位:郑州大学医学院生物化学与分子生物学教研室。材料:实验于2005-03/2006-05在郑州大学生物活性肽研究所第一实验室和郑州大学基础医学院细胞培养中心完成。选取10周龄的健康且经Y-迷宫测定无痴呆症状的雄性SD大鼠70只,单纯随机分为7组,正常对照组、模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组、酸性肽15,30,60mg/kg组,每组10只。方法:正常对照组不干预,其他6组用鹅膏蕈氨酸损毁大鼠双侧迈内特基底核,建立阿尔茨海默病病的动物模型,造模后谷氨酸0.3g/kg组灌胃谷氨酸0.3g/kg,酸性肽15,30,60mg/kg组灌胃相应剂量酸性肽(自制),生理盐水组灌胃等量生理盐水,1次/d,2mL/次,连续20d。主要观察指标:①灌胃期满后各组大鼠即做Y-迷宫实验以检测大鼠的学习记忆能力,以正确反应次数为指标。②学习记忆测试结束后,各组大鼠断头取脑,免疫组化染色,再用BiosensDigitalImagingSystem灰度扫描仪扫描以检测大鼠脑内神经生长因子、N-甲基-D-天冬氨酸受体、淀粉样β蛋白的水平。结果:70只大鼠全部进入结果分析。①Y-迷宫实验中正确反应次数:其他6组均低于正常组(P<0.01);酸性肽30,60mg/kg组高于模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组及酸性肽15mg/kg组(P<0.01)。②基底前脑神经生长因子灰度值:模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组及酸性肽15mg/kg组低于正常对照组(69.60±2.41,69.62±1.46,69.62±1.46,69.73±1.87,80.77±2.72,P<0.01),酸性肽30,60mg/kg组与正常对照组比较差异不显著(79.39±2.23,80.20±1.7,P>0.05),但高于其他几组。③大脑皮质N-甲基-D-天冬氨酸受体和淀粉样β蛋白表达的灰度值:模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组及酸性肽15mg/kg组高于正常对照组(N-甲基-D-天冬氨酸受体:81.01±1.38,81.31±2.06,81.37±1.39,79.38±1.23,69.50±1.04;淀粉样β蛋白:74.26±1.39,74.89±8.66,74.88±1.46,74.16±2.48,67.40±3.06,P<0.01),酸性肽30,60mg/kg组与正常对照组比较差异不显著(N-甲基-D-天冬氨酸受体:70.55±2.89,69.78±1.24;淀粉样β蛋白:67.66±2.25,67.58±2.21,P>0.05),但低于其他几组。结论:30,60mg/kg的酸性肽能明显改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力,其治疗作用途径可能是通过上调基底前脑中的神经生长因子水平,下调大脑皮质中N-甲基-D-天冬氨酸受体和β淀粉样蛋白的水平实现的。     

电针对神经病理性疼痛大鼠谷氨酸受体1表达的影响

目的观察电针对大鼠神经病理性疼痛及谷氨酸受体1(GluR1)表达的影响,探讨电针镇痛效应机制。方法将36只SD大鼠随机分为假模组、模型组、电针组,每组12只。前两组采用脊神经结扎(SNL)的方法建立大鼠神经痛模型,假模组仅分离脊神经不结扎。电针组在造模后7d电针干预大鼠患侧"足三里""环跳"穴,其他两组仅给予固定,不予治疗,每次30min,1次/d,连续7d。在造模前1d及造模后第3、5、7、10、12、14天分别测定大鼠机械缩足反射阈值(MWT)及热缩足反射潜伏期(TWL),术后15d处死大鼠,取大鼠L4～L6段腰膨大脊髓,用免疫组化及Western blot检测GluR1蛋白的表达,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GluR1-mRNA的表达。结果与假模组相比,模型组大鼠痛阈值明显降低,差异有统计学意义(P0.01),出现痛觉过敏;电针干预后,电针组较模型组痛阈值明显升高,差异有统计学意义(P0.01),与假模组相比,模型组与电针组GluR1蛋白及mRNA表达水平明显增高,差异有统计学意义(P0.01),与模型组相比,电针组GluR1阳性蛋白表达水平明显下调,差异有统计学意义(P0.01)。结论电针"足三里""环跳"穴可以缓解大鼠神经病理性疼痛,该作用可能与其下调大鼠脊髓背角AMPA受体GluR1的表达密切相关。     

饥饿大鼠脑杏仁核中瘦素受体的表达

背景饥饿是脂肪代谢的一个重要过程,可触发适应性反应,瘦素水平下降,但饥饿时脑中瘦素受体是否变化及变化情况尚不清楚.目的饥饿状态下瘦素受体表达的变化及杏仁基底外侧核和中央核的作用.设计随机对照的实验研究.地点和材料实验地点西安交通大学医学院.成年健康雄性SD大鼠20只,随机分为禁食24,48,72 h组和对照组,每组5只.干预措施各组大鼠禁食前后分别检测体质量,体长,尾长.采用放免法测定血清瘦素水平,免疫组化ABC法检测瘦素受体和神经细丝酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达情况.主要观察指标①各组大鼠体质量减少量,Lee指数,血清瘦素水平和血糖水平.②各组大鼠瘦素受体的表达.③各组大鼠星形胶质细胞GFAP的表达.结果禁食24 h血清瘦素由(2.49±0.60)μg/L下降至(1.26±0.97)μg/L,体质量减轻4.22%,48 h和72 h体质量分别减轻12.15%和19.70%,血清瘦素分别降至(0.78±0.19)μg/L和(0.62±0.16)μg/L.与正常大鼠相比,禁食24 h杏仁基底外侧核瘦素受体表达增强[LR-IR细胞数(131±8.9)个/mm2,(68±10.4)个/mm2],禁食48 h瘦素受体表达水平(82±12.6)个/mm2接近正常大鼠,禁食72 h瘦素受体阳性细胞明显减少(49.0±7.4)个/mm2.杏仁中央核瘦素受体表达在禁食前后差异无显著性意义.禁食24 h和48 h杏仁基底外侧核GFAP染色阳性细胞数目与对照组大鼠比较差异无显著性意义.结论饥饿时在血清瘦素水平下降时,杏仁基底外侧核瘦素受体表达上调.饥饿可能调节杏仁基底外侧核对瘦紊的敏感性.     

基底核中腺苷A_(2A)受体和多巴胺D_2受体调节睡眠-觉醒作用机制

越来越多的研究关注基底核(basal ganglia,BG)对睡眠-觉醒的调节作用,其中纹状体和苍白球可能是控制睡眠和觉醒的关键结构。腺苷A2A受体与多巴胺D2受体在基底核中均高度共表达,特别是在纹状体。腺苷是目前为止发现的最强的内源性促眠物质之一,可通过激活A1和A2A受体诱导睡眠。而多巴胺D2受体对于觉醒的维持有着重要作用。这些研究成果均提示基底核中A2A受体和D2受体调节睡眠-觉醒,腺苷作用于兴奋性的A2A受体,增加伏隔核中抑制性GABA能神经元活性,抑制主要觉醒系统,促进睡眠;抑制性多巴胺D2受体系统则发挥了相反的作用。本文综述基底核中腺苷A2A受体和多巴胺D2受体调节睡眠-觉醒机制。     

姜黄素对大鼠急性呼吸窘迫综合征致肾纤维化的影响

目的探讨姜黄素对通过气道内雾化脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导SD成年大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)引起肾纤维化的影响。方法 24只雄性SD大鼠按照随机数字法分为:对照组、ARDS组、低剂量组、高剂量组, 每组6只。对照组仅气道内雾化生理盐水2 mL/kg, ARDS组、低剂量组和高剂量组气道内雾化等容积的LPS 4 mg/kg, 低剂量组每天灌胃姜黄素100 mg/kg, 高剂量组每天灌胃姜黄素200 mg/kg。7 d后处死大鼠, 比色法检测肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde, MDA)及谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量, 蛋白印迹法(Western Blot)检测各组肾脏组织核因子κB p65(nuclear factor kappa-B p65, NF-κB p65)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)蛋白的表达,...     

功能性促甲状腺激素受体在人微血管内皮细胞的表达

目的探讨促甲状腺激素受体(TSHR)在人微血管内皮细胞(HMEC-1)的表达及其活性。 方法体外培养HMEC-1,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞TSHR mRNA的表达;将细胞接种在六孔板上,分空白对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,空白对照组给予不含促甲状腺激素(TSH)的基础培养基培养,低剂量组、中剂量组和高剂量组分别给予0.10 U/L,1.00 U/L,10.00 U/L的TSH干预。24 h后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平,研究HMEC-1细胞中的TSHR是否具有活性。显著性检验采用单因素方差分析,组间比较采用LSD-t法。 结果RT-PCR结果显示HMEC-1表达TSHR mRNA;ELISA结果显示TSH刺激HMEC-1后细胞内cAMP表达增加,低剂量组cAMP水平[(5.23±0.86)mmol/L]与空白对照组[(1.77±0.25)mmol/L]比较,差异有统计学意义(t＝3.47,P<0.01),并且此效应呈剂量依赖性(F＝92.36,P<0.01)。 结论HMEC-1细胞中存在TSHR,且该受体可与TSH特异性结合发挥作用。     

红花黄色素、阿魏酸对痛经模型大鼠催产素受体及加压素受体mRNA表达的影响

目的探讨红花黄色素、阿魏酸在抗痛经作用中的相关作用机制。方法 70只雌性SD大鼠按体重随机分为7组:正常组、模型组、田七痛经胶囊组(田七组)、红花黄色素高剂量组(红高组)、红花黄色素低剂量组(红低组)、阿魏酸高剂量组(阿高组)及阿魏酸低剂量组(阿低组),每组10只。除正常组外,大鼠股部皮下注射己烯雌酚复制大鼠痛经模型,田七组在皮下注射己烯雌酚开始时给予田七胶囊2 g·kg-1,红高组、红低组于注射第7天分别给予红花黄色素0.02 g·kg-1·d-1、0.01 g·kg-1·d-1,阿高组、阿低组于注射第7天分别给予阿魏酸0.12 g·kg-1·d-1、0.06 g·kg-1·d-1。共注射11 d。采用酶联免疫法(ELISA)检测各组大鼠子宫组织前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2a(PGF2a)、血浆血栓素B2(TXB2)、6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a),采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测子宫组织催产素受体(OTR)mRNA及加压素受体(VPR)mRNA的表达情况。结果与模型组比较,各药物处理组扭体反应均有所改善,但无统计学差异(P均>0.05)。与模型组比较,田七组、阿高组、阿低组PGE2含量均有不同程度升高(P<0.01或P<0.05);而田七组、阿高组、阿低组、红高组PGF2a含量及PGF2a/PGE2的比值均有不同程度降低(P<0.01或P<0.05);各药物处理组TXB2及TXB2/6-keto-PGF1a的比值均显著降低(P均<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠子宫OTRmRNA和VPRmRNA相对表达量显著增高(P均<0.01);与模型组比较,田七组OTRmRNA、VPRmRNA相对表达量均下降(P均<0.05),阿高组OTRmRNA相对表达量下降(P<0.05);其他组组间比较无统计学差异(P均>0.05)。结论阿魏酸抗痛经作用可能与调节前列腺素系统及调节痛经大鼠子宫OTR表达有关,红花黄色素可调节前列腺素系统但对OTR及VPR表达无明显影响。     

蒙药吉祥安坤丸对未成年雌性大鼠生殖发育及卵巢、子宫雌激素受体的影响

目的研究吉祥安坤丸对未成年雌性大鼠生殖发育及卵巢、子宫雌激素受体(ER)的影响。方法将未成年健康雌性SD大鼠,随机分为低、高剂量组和对照组,每组12只。低、高剂量组分别给予1.0、2.0 g/(kg·d)吉祥安坤丸混悬液灌胃,对照组给予等体积蒸馏水灌胃,连续给药21 d。阴道涂片法观察发情周期,酶联免疫吸附试验测定血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)、孕酮(PROG)、睾酮(T)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,免疫组织化学法观察卵巢、子宫组织ER的表达程度。结果与对照组比较,低、高剂量组发情周期紊乱率和血清TNF-α水平明显下降(P<0.05,P<0.01),高剂量组子宫系数、血清LH、E₂、PROG水平及子宫组织ER表达水平明显上升(P<0.05,P<0.01),低剂量组血清LH水平及卵巢和子宫组织ER表达水平也明显升高(P<0.05,P<0.01)。3组血清FSH、T、IGF-Ⅰ、VEGF、IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论吉祥安坤丸能改善未成年雌性大鼠发情周期,升高性激素水平,促进卵泡发育及排卵,还能抑制炎性因子水平。     

急性肺损伤时晚期糖基化终末产物受体变化的实验研究

目的 观察晚期糖基化终末产物受体(RAGE)在不同程度急性肺损伤(ALI)大鼠血浆和肺泡灌洗液(BALF)中的变化,探讨RAGE在判断ALI严重程度方面的价值.方法 30只SD大鼠随机分为3组:低剂量组、高剂量组和对照组.Western blot法检测BALF和血浆中RAGE相对含量,同时测定PaO2、肺组织湿干质量比值(W/D)、BALF蛋白含量、血浆和BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,结合病理改变评价各组肺损伤程度.结果致伤组均出现肺损伤,高剂量组损伤更明显;与对照组比较,两致伤组血浆和BALF中RAGE含量均有所上升(P﹤0.05),且高剂量组BALF中RAGE含量又高于低剂量组(P<0.05),而血浆中RAGE含量在低剂量组与高剂量组间差异无统计学意义.结论 ALI时,BALF和血浆中RAGE水平升高,BALF中RAGE水平升高的程度可反应肺损伤的程度,RAGE可作为ALI/ARDS的预警指标.     

“黑质/苍白球-丘脑-皮质”通路5-羟色胺_(1B)受体及多巴胺1型受体在大鼠运动疲劳调控中的作用

目的:通过观察运动大鼠力竭前后"黑质/苍白球-丘脑-皮质"通路各核团5-羟色胺1B受体(5-HT_(1B))及多巴胺1型受体(D_1DR)的蛋白表达水平,探讨"黑质/苍白球-丘脑-皮质"通路调控运动疲劳发生、发展的中枢机制。方法:24只雄性Wistar大鼠,随机分为安静对照组、力竭即刻组、恢复90min组,每组8只。采用免疫组织化学技术对不同组别5-HT_(1B)和D_1DR的蛋白表达水平进行检测。结果:与安静组对照组相比,力竭即刻组、恢复90min组大鼠黑质网状部及苍白球内侧部5-HT_(1B)受体阳性细胞R值及平均光密度(AOD)值均显著减少(P0.05),D_1DR受体阳性细胞R值及AOD值均显著增加(P0.05);力竭即刻组、恢复90min组大鼠丘脑腹外侧核5-HT_(1B)受体阳性细胞R值及AOD值均显著增加(P0.05,P0.01);在大鼠皮质辅助运动区,力竭即刻组、恢复90min组5-HT_(1B)受体阳性细胞R值及AOD值均显著增加(P0.05),D_1DR受体阳性细胞R值及AOD值均显著减少(P0.05)。结论:力竭运动过程中"黑质网状部/苍白球内侧部-丘脑-皮质"各核团5-HT_(1B)及D_1DR受体蛋白表达变化引起神经递质释放量改变,进而影响神经元电活动兴奋性,可能是"黑质网状部/苍白球内侧部-丘脑-皮质"通路调节运动疲劳及运动能力的重要途径之一。