一氧化氮合成酶阳性神经元在大鼠下丘脑的分布及其衰老性变化

实验用青年（２－３个月），中年（１５－１８个月）和老年（２６－３０个月）三组Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠，采用ＮＡＤＰＨ－Ｄ酶组织化学技术及计算机图像分析，研究了一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）阳性神经元在大鼠下丘脑的分布及其衰老性变化，结果发现，ＮＯＳ阳性神经元分布于室旁核，视上核，下丘脑外侧区，穹窿周核及乳头体核；在正中隆起我侧带发现一些小阳性神经元，第三脑室室管膜上皮层内也含有阳性神经元，我们是     

电针可增强大鼠脑内前脑啡肽原mRNA的表达：原位杂交组织化学研究

本文采用原位杂交组织化学技术，结合计算机图象处理系统，对电针后大鼠脑内前脑啡肽原（ＰＰＥ）ｍＲＮＡ的表达进行半定量的观察。ＰＰＥｍＲＮＡ探针以半抗原的地高辛标记。电针１０小时之后，ＰＰＥｍＲＮＡ阳性信号的强度和神经元内合ＰＰＥｍＲＮＡ的面积在许多与痛和镇痛有关的核团明显增加，如尾核，伏核，视前区，中脑的脚间核，导水管周围灰质，黑质，红核等。表明电针促进了ＰＰＥｍＲＮＡ在大鼠脑内的表达。这可能是针刺具有累积和长期效应的机制之一。     

鼠尾伤害性刺激与颧Liao穴电针后弓状核—导水管周围灰质—延髓头端腹？…

成年ＳＤ大鼠分成对照，尾部电流所致伤害性刺激，面部颧Ｌｉａｏ穴电针三组，分别观察弓状核，中脑中央灰质和延髓头端腹内侧区原位杂交后在神经元中前脑啡肽原（ＰＰＥ）ｍＲＮＡ的表达与Ｆｏｓ免疫阳性神经元的分布，痛刺激后上述各部位的ＰＰＥｍＲＮＡ在神经元内均有不同程度表达，但当颧Ｌｉａｏ穴电针时表达更明显，细胞数也较多。尤其在延髓头端腹内侧区更显著，而在对照动物仅有面神经核等与运动有关核闭出现表面，在ＰＰＥ     

烫伤对大鼠视上核催产素神经元的影响

为研究催产素（ＯＴ）与应激过程的关系，本实验采用免疫细胞化学（ＰＡＰ）法，微机图像分析仪相对定量测定，观察了烫伤后即刻、１、２、３、４小时大鼠下丘脑视上核ＯＴ阳性细胞的变化。备鼠取ＯＴ阳性细胞面积最大的８张切片作为总面积。结果显示烫伤后２小时视上核ＯＴ阳性细胞的总面积比烫伤前增大了８２％（Ｐ＜０．０５）。提示ＯＴ与受伤应激有关。     

AVP_(4-8)增加海马组织内NGF mRNA和蛋白含量

本文采用了Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和ＥＬＩＳＡ法，观察了神经肽ＡＶＰ４－８对大鼠海马组织中神经生长因子（ＮＧＦ）ｍＲＮＡ和蛋白水平的影响，结果显示：给大鼠皮下注射ＡＶＰ４－８１２ｈ后，海马组织中ＮＧＦｍＲＮＡ的水平明显高于生理盐水对照组。而给大鼠皮下注射精氨酸加压素（ＡＶＰ）和催产素（ＯＴ）对ＮＧＦｍＲＮＡ的水平均无显著影响。另外，用ＡＶＰ４－８孵育离体大鼠海马组织切片，能使ＮＧＦ蛋白表达量升高，且在４．５ｈ左右达到高峰。     

在慢性不可预见性温和应激下大鼠下丘脑和杏仁核中促肾上腺皮质素释放激素表达增高(英文)

目的观察在慢性不可预见性温和应激(chironic unpredictable mild stress,CUMS)下,大鼠下丘脑及杏仁核中促肾上腺皮质素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)神经元的激活状态,揭示抑郁症的部分发病机制。方法应用慢性不可预见性的温和刺激建立大鼠抑郁模型。用免疫组化技术观察与应激密切相关的下丘脑室旁核和杏仁核中神经元CRH的表达。结果CUMS大鼠的下丘脑室旁核和杏仁核均有大量的CRH阳性细胞及神经纤维,而对照组CRH阳性神经元很少。结论在抑郁的发生、发展过程中,不仅下丘脑室旁核的CRH神经元起着重要作用,杏仁核的CRH神经元也与应激反应及抑郁症发病机制密切相关。     

LPS激发大鼠前脑神经元Fos和小胶质细胞OX42表达改变

目的 探讨单次腹腔注射LPS后前脑神经元和小胶质细胞的可塑性变化和相互关系。方法 应用抗Fos、抗TH或抗OX42单一、以及抗Fos／抗TH／抗OX42三重免疫组化标记方法，观察大鼠单次腹腔注射LPS后，Fos阳性神经元、Fos／TH阳性神经元、OX42阳性小胶质细胞在脑内的表达分布及时程变化，以及Fos阳性神经元或Fos／TH阳性神经元与OX42阳性小胶质细胞之间的关系。结果：Fos阳性神经元分布在额、顶皮质，扣带回和梨状皮质，外侧隔核腹侧部，杏仁中央核，海马CA2区、CA3区、齿状回，下丘脑室旁核、视上核、下丘脑外侧区和第三脑室周围灰质等。Fos阳性神经元在注射后30min出现表达，注射后1～3h为表达高峰。反应阳性小胶质细胞首先于脑室周围灰质出现，注射后6h达到高峰，胞体变大，突起变粗，OX42呈阳性深染，密集分布于Fos阳性神经元的表达区域。下丘脑Fos／TH／OX42三重染色切片显示：由LPS激活的Fos／TH阳性神经元周围被OX42阳性细胞包绕并接触，表明神经元和小胶质细胞在对LPS刺激的反应中关系密切。结论 在外周免疫刺激下，下丘脑、扣带回、梨状皮质和海马内的神经元和小胶质细胞可能参与免疫调节。     

TGF—β高调在鼻腔给予AChR抑制EAMG中起重要作用

用放射标记的ｃＤＮＡ寡核苷酸探针，使用原位杂交技术检测表达子γ干扰素（ＩＦＮ－γ）白细胞介素４（ＩＬ－４）和转移生长因子β（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ的单个核细胞（ＭＮＣ）。结果表明，实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）对照组大鼠Ｇｕｏ窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ）的ＭＮＣ乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）诱导的ＩＦＮ－γ，ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数明显增高，与给予ＰＢＳＣＦＡ注射组比较差异显著。鼻腔耐受组与Ｅ     

疼痛及针刺镇痛时孤啡呔受体mRNA的变化

目的：观察大鼠在福尔马林致痛及针刺镇痛时孤啡肽受体ｍＲＮＡ在一些与镇痛有关核团的变化情况。方法：采用原位杂交组织化学技术。结果：电针后１０ｈ，导水管周围腹侧区、中缝背核及中缝大核内孤啡肽受体ｍＲＮＡ阳性神经元数增多；而在大鼠脚掌注射福尔马林后，上述核团内孤啡肽受体ｍＲＮＡ阳性神经元数却明显减少；电针并注射福尔马林，脑内孤啡肽受体ｍＲＮＡ水平介于单用电针和福尔马林之间。结论：电针能促进孤啡肽受体的合成而伤害性刺激抑制孤啡肽受体的合成。     

TGF－β高调在鼻腔给予AChR抑制EAMG中起重要作用

用放射标记的ｃＤＮＡ寡核苷酸探针，使用原位杂交技术检测表达γ干扰素（ＩＦＮ－γ）、白细胞介素４（ＩＬ－４）和转移生长因子β（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ的单个核细胞（ＭＮＣ）。结果表明，实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）对照组大鼠窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ）的ＭＮＣ乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）诱导的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数明显增高，与给予ＰＢＳＣＦＡ注射组比较差异显著。鼻腔耐受组与ＥＡＭＧ对照组相比，某些淋巴器官中ＡＣｈＲ诱导的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４数降低，ＡＣｈＲ诱导的ＴＧＦ－β细胞明显上调。提示ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４和ＴＧＦ－β与ＥＡＭＧ的发病有关，而ＴＧＦ－β高调在鼻腔ＡＣｈＲ耐受ＥＡＭＧ中起重要作用。     

Mg2+对脑缺血大鼠血浆及脑组织ET-1含量的影响

研究Ｍｇ２＋对脑缺血大鼠血浆及脑组织ＥＴ－１含量的影响,进一步探讨Ｍｇ２＋保护缺血神经元的机制。方法用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠脑缺血模型,用ＲＩＡ法测定注射Ｍｇ２＋前后脑缺血大鼠血浆及脑组织中ＥＴ－１含量。结果Ｍｇ２＋可降低脑缺血时血浆及脑组织中ＥＴ－１的含量。结论Ｍｇ２＋通过降低脑缺血时增高的ＥＴ－１,起到保护缺血神经元的作用。     

癫痫状态大鼠海马GAD67mRNA,GABA—TmRNA表达水平的动态观察

为了研究癫痫状态下大鼠海马区ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ、ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ的表达水平，采用马桑内酯（ｃｏｒｉａｒｉａｌａｃｔｏｎｅ，ＣＬ）侧脑室注射所致大鼠癫痫状态模型，动态观察ＣＬ致痫前后大鼠海马ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ、ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达水平的变化，同时观察了动物行为学改变及脑电图变化。实验结果显示，侧脑室注射ＣＬ后约１５分钟，大鼠海马及皮质ＥＥＧ出现阵发性棘慢波及高波幅慢波；ＣＬ注射后１５～３０分钟，实验鼠均出现明显的连续发作性四肢抽动、尖叫等症状，且持续６～８小时。ＣＬ侧脑室注射后３０分钟、１小时、２小时、４小时或８小时各时限点组大鼠海马ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ表达水平均低于正常对照组。ＣＬ注射后３０分钟组大鼠海马ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达水平高于正常对照组，但３０分钟后各时限组ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达水平与正常对照组比较增加不明显。提示ＣＬ所致癫痫持续状态的后期，大鼠海马ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ、ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达信号的减弱，可能与致痫因素及癫痫持续后期合并的缺血、缺氧性脑损害致使海马区ＧＡＤ、ＧＨＢＡ－Ｔ免疫反应阳性细胞死亡有关。     

新生期注射谷氨酸单钠对刺激下丘脑弓状核镇痛作用的影响

下丘脑弓状核（ＡＲＣ）是脑内β－内啡肽（β－ＥＮＤ）能神经元胞体集中的一个主要核团。新生期注射谷氨酸单钠（ＭＳＧ）能选择性地损毁ＡＲＣ中的神经元胞体而不累及路过纤维，是研究ＡＲＣ中神经元生理功能的一个良好模型。本实验利用这个实验模型研究刺激ＡＲＣ的镇痛效应。结果发现在这种ＭＳＧ处理的大鼠，刺激ＡＲＣ不再出现明显的镇痛效应（用电刺激鼠尾－嘶叫法测定）。这时脑室内注射β－ＥＮＤ（５μｇ／１０μｌ）能使刺激ＡＲＣ的镇痛效应恢复；若脑室注射多巴胺（ＤＡ，５μｇ／１０μｌ）不仅没有恢复作用，反而能削弱正常大鼠刺激ＡＲＣ的镇痛效应。实验结果提示，经ＭＳＧ处理的大鼠之所以不出现明显的镇痛效应，可能是由于ＡＲＣ中丧失了β－ＥＮＤ能神经元的结果，ＤＡ能神经元在其中不起重要作用。     

脑出血患者血浆及脑脊液内皮素－1含量对照研究

本文对照研究了脑出血患者血浆及脑脊液（ＣＳＦ）内皮素－１（ＥＴ－１）含量改变及其临床意义。发现脑出血患者血浆与ＣＳＦ、ＥＴ－１含量均增高；单纯脑血肿者以血浆含量增高为主；脑实质出血伴有脑室系统或蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）者血浆及ＣＳＦ含量均显著升高；小量出血与中大量出血比较血浆含量无显著性，而大量出血者ＣＳＦ、ＥＴ－１含量增高。提示脑出血者血浆ＥＴ－１增高可能与机体应激有关，而ＣＳＦ、ＥＴ－１升高可能与血脑屏障（ＢＢＢ）被破坏及损害或刺激室周组织、下丘脑、脉络丛脑膜，引起分泌释放增加有关。ＣＳＦ、ＥＴ－１增高者应警惕迟发性脑血管痉挛。     

万拉法新对强迫游泳大鼠下丘脑c—fos和c—jun蛋白表达的影响

目的：探索急慢性给予新一代抗抑郁药万拉法新对大鼠下丘脑ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ蛋白表达的影响。方法 采用特性抗体的原位免疫细胞化学方法，在强迫游泳大鼠抑郁模型上，观察万拉法新急慢性给药对大鼠游泳不动时间和在脑核团ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ表达的影响；用图像分析技术对大鼠下丘脑室旁核和视上核内的ｆｏｓ和ｊｕｎ阳性细胞的相对切面面积比和平均目标灰度进行分析。     

幼年大鼠皮质5—HT1A和5—HT2受体中介的膜电位变化

５－ＨＴ灌流幼年大鼠皮质脑片，２１．５％额叶后部ＩＶ层神经元出现慢超极化，膜电阻减小和ＥＰＳＰ抑制。此效应为５－ＨＴ１Ａ激动剂８－ＯＨ－ＤＰＡＴ模拟，为５－ＨＴ，拮抗剂ＮＡＮ－１９０阻抑，但ＥＰＳＰ抑制仍存在，超极化幅度随膜电位增大及胞外钾浓度增高而是减少，表明超极化由激活５－ＨＴ１Ａ受体导致钾外流增加所致，另有１１．８％神经元出现去极化伴膜电阻减小和ＥＰＳＰ抑制，５－ＨＴ２／５－ＨＴＩＣ拮抗剂Ｋ     

大鼠Calbindin—D28K样阳性脊髓投射神经元亚？…

目的 研究大鼠红核－脊髓投射神经元Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８Ｋ样免疫反应（ＣａＢＰ－ＬＩ）表现形式及其分布特点。方法 采用霍乱毒素Ｂ亚单位结合胶体金（ＣＢ－Ａｕ）逆行标认神经元复合免疫细胞化学反应的非荧光双标方法。结果 红核－脊髓投射神经元表现为两种亚型：一种为ＣａＢＰ－ＬＩ阴性神经元；另一种为ＣａＢＰ－ＬＩ阳性神经元，两种神经元在红核具有特殊的分布方式，头侧水平ＣＢ－Ａｕ标认的红核－脊髓投射神经     

大鼠下丘脑生长抑素样神经元对食管前运动神经元的支配

用ＰＲＶ和ＳＯＭ免疫荧光双标记研究了下丘脑ＳＯＭ样神经元对大鼠孤束核中食管前运动神经元的支配，ＰＲＶ注射于大鼠颈部食管后，在下丘脑室旁核及弓状体周围可见密集的ＰＲＶ和ＳＯＭ双标记细胞，在视交叉上核，视交叉后区，下丘脑室周核，下丘脑前区，外侧区及后区，乳头体外侧核，乳头体前侧腹侧部，下丘脑尾侧大细胞核以及连合前核等部位也可见到数量不等的双标记细胞，首次证明了下丘脑的ＳＯＭ样神经元和孤束核的食管前运动     

电针后大鼠中枢多巴胺D1和D5受体mRNA的变化

应用原位杂交，放射自显影结合计算机图像处理技术检测电针（ＥＡ）后１０ｈ及２４ｈ时大鼠中枢多巴胺（ＤＡ）Ｄ１和Ｄ５受体信使ＲＮＡ（ｍＲＮＡ）的变化。结果显示，ＥＡ后１０ｈ脊髓Ｄ１和Ｄ５受体ｍＲＮＡ有明产高，２４ｈ时进一上不增高；而脑内Ｄ１和Ｄ５受体ｍＲＮＡ需至２４ｈ时才有显著增高，结果提示，在转录水平，ＥＡ可加强大鼠中枢Ｄ１和Ｄ５受体基因的表达，使这些受体合成增加。     

神经─体液ET_1启动、调控与CNS超微结构应变效应综合研究

为了深入探讨远离大脑局部致伤后ＣＮＳ总体应变效应，阐明其与神经─体液ＥＴ１启动、调控的作用与关系，本研究用放免法和斑点杂交监测了犬双后肢低、高速投射物致伤后血浆、ＣＳＦ、海马、下丘脑和颞叶灰、白质ＥＴ１含量动态变化。结果：高、低速组伤后血浆、ＣＳＦ、各脑区ＥＴ１含量和ＥＴ１─ｍＲＮＡ表达水平均显著高于伤前和对照组。血浆、ＣＳＦ、各脑区ＥＴ值相互间均呈显著正相关关系。提示：远离大脑局部致伤后神经─体液ＥＴ１含量变化有其自身规律和内在联系，在ＣＮＳ应变效应的发生、发展病理生理过程中可能起持续而重要的作用。