大鼠脊髓背角的GABA能神经末梢来源及其突触联系——HRP追踪与…

本文用ＨＲＰ追踪与免疫细胞化学结合法和免疫电镜技术研究了脊髓背角的ＧＡＢＡ神经元的分布、ＧＡＢＡ能末梢的来源及其超微结构联系。结果表明：在脊髓背角Ｉ－Ⅵ层内均有ＧＡ－ＢＡ神经元胞体和纤维分布，其中Ｉ～Ⅲ层较为密集，在后外侧束内也存在ＧＡＢＡ能纤维及胞体。脊髓背角的ＧＡＢＡ能神经末梢有３个来源：①延髓的大缝核、隐缝核、苍白缝及腹侧网状结构的ＧＡＢＡ能神经元；②脊髓固有的ＧＡＢＡ能神经元；③脊神经节的     

脊髓背角5-羟色胺纤维的来源和超微结构分布——HRP与免疫细胞化学结合法研究和免疫电镜观察

本文用HRP与免疫细胞化学结合法研究和免疫电镜观察进一步证实了脊髓背角内5-羟色胺(5-HT)能末梢的来源及其超微结构特征。结果表明:脊髓背角内5-HT能轴突末梢主要来自延髓中缝大核及腹侧网状结构。脊髓背角内5-HT免疫反应阳性结构见于Ⅰ层及Ⅱ层外带,为细的无髓纤维和有髓纤维。标记末梢与未标记末梢之间主要形成轴-轴突触(标记末梢可为突触前成分,也可是突触后成分),偶尔可见轴-树突触,未见非突触释放的形态学图象。根据其超微结构特征,我们推测脊髓背角内5-HT能系统不是以弥散的非突触方式影响有关结构,而是以突触方式直接或间接影响背角中间神经元的兴奋性,和直接抑制一级传入冲动而发挥其镇痛作用。     

延髓缝核SP神经元至脊髓背角的下行投射—HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合法研究

将HRP分别注入18只大鼠的颈、胸、腰段脊髓背角内,应用HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合法,对大鼠延髓缝核至脊髓背角的SP能下行投射进行了观察。至脊髓背角的SP能下行纤维主要来自大缝核(无明显定位关系),其次是隐缝核及苍白缝核。各缝核双标细胞占整个延髓缝核HRP标记细胞总数的百分比分别为:大缝核7.5％,隐缝核2.9％,苍白缝核1.4％。本文还讨论了延髓缝核SP能神经元至脊髓背角下行投射的机能意义。     

大鼠海马内谷氨酸神经元与GABA神经元之间突触联系的免疫电镜双标研究

为了探讨神经递质在癫痫发病机理中的作用，用包埋前免疫电镜双标法研究了正常太鼠海马ＣＡ１区谷氨酸（Ｇｌｕ）神经元与ＧＡＢＡ神经元之间的突触联系，先用ＤＡＢ为呈色剂显示ＧＡ－ＢＡ免疫反应，然后以钼酸铵－ＴＭＢ法显示Ｇｌｕ免疫反应，再进行免疫电镜包埋。观察发现，在海马ＣＡ１区锥体细胞层有许多Ｇｌｕ免疫反应性神经元；在锥体细胞层，多形层和辐状层可见一些ＧＡＢＡ免疫反应性神经元，胞体为锥体或多角形。在多形层     

舌肌的GABA能神经支配-HRP逆行追踪和免疫组织化学结合法研究

用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪与免疫组织化学结合的方法研究大白鼠舌下神经核至舌肌的投射.结果在舌下神经核内观察到三种标记细胞:(1)HRP单标细胞;(2)GABA单标细胞;(3)HRP和GABA双标细胞.首次证实了舌下神经核中有GABA能神经元,并可投射至舌肌.     

γ-氨基丁酸和钙结合小蛋白在鸡脊髓运动神经元内共存的免疫组化和电镜免疫细胞化学的研究

雏鸡12只,用免疫组织化学方法显示在脊髓前角分别出现γ-氨基丁酸和钙结合小蛋白抗体阳性反应的运动神经元。并在前者的免疫组化反应阳性神经元的基础上进行了胶体金标记钙结合小蛋白的电镜免疫细胞化学反应。证明了γ-氨基丁酸免疫组化反应阳性的运动神经元的胞浆内又出现标志钙结合小蛋白的金颗粒。因此推测:脊髓运动神经元除γ-氨基丁酸的突触前抑制外,在神经元内大量的γ-氨基丁酸可能不是单纯抑制性神经递质。根据神经元的退行性变时出现包括γ-氨基丁酸在内的某些氨基酸的功能障碍和钙调节失控的假说,γ-氨基丁酸有可能通过钙结合蛋白共同起到参与防止神经元退行性变的类似神经营养因子的作用。     

妊娠期糖尿病胎盘SHBG的免疫细胞化学与酶标免疫电镜观察

目的探讨GDM时胎盘滋养细胞存在SHBG及其变化与GDM发病机制的关系。方法应用免疫细胞化学染色以及包埋前免疫电镜技术,检测GDM胎盘组织中SHBG的表达和观察SHBG在GDM胎盘组织细胞内的分布特征。结果电镜下GDM组胎盘合体滋养细胞表面微绒毛排列紊乱、肿胀、数目减少,绒毛间隙变窄、断裂。胞质内粗面内质网扩张,线粒体肿胀,细胞核形状不规则,染色质分布异常,未见高电子密度的颗粒。光镜下GDM组免疫阳性染色分布于整个胎盘合体滋养细胞,主要位于细胞膜和细胞浆,但是微绒毛侧和基底膜侧着色都不甚均匀,表达弱。GDM组胎盘SHBG免疫染色阳性表达率(25/30,83.3%)较对照组胎盘SHBG免疫染色阳性表达率(28/30,93.3%)减低(P0.01)。结论 GDM时胎盘滋养细胞存在着SHBG,但其合成和分泌减少,在GDM发病过程中的发挥着重要作用。     

中脑导水管周围灰质和E-W核中SP和CCK样神经元至脊髓的投射——HRP与免疫细胞化学结合法研究

本研究用HRP逆行追踪和免疫细胞化学结合法,研究了大白鼠中脑导水管周围灰质(PAG)以及Edinger-Westphal(E-W)核至脊髓的SP能和CCK能神经投射。结果表明,PAG腹外侧区至脊髓颈、胸、腰段双侧均有少量投射,但以同侧为主。在这些下行投射神经元中,约有48％为SP样免疫反应阳性。E-W核至脊髓的颈、胸、腰段均有广泛投射,其中约有70％为SP样免疫反应阳性,73％为CCK样免疫反应阳性。提示至少有一部分E-W核的脊髓投射神经元含有SP和CCK两种神经递质。     

大鼠脊髓背角内吗啡肽阳性终末与μ阿片受体阳性神经元的突触联系

目的观察大鼠脊髓背角内吗啡肽阳性终末与μ阿片受体阳性神经元的突触联系.方法包埋前内吗啡肽免疫组织化学方法结合包埋前μ阿片受体免疫金颗粒标记的免疫电镜双标技术.结果内吗啡肽阳性终末以及μ阿片受体阳性胞体、纤维和终末主要分布于脊髓背角浅层（Ⅰ、Ⅱ层）;在电镜下可见二氨基联苯胺（DAB）反应产物标记的内吗啡肽阳性终末与免疫金颗粒标记的μ阿片受体阳性神经元胞体及其树突之间形成以非对称性为主的突触联系,其中的轴-树突触明显多于轴-体突触. 结论脊髓背角浅层内内吗啡肽与μ阿片受体阳性结构在分布方式上互相匹配,这种分布方式为其在外周痛信息传递的过程中发挥镇痛效应提供了形态学基础.     

含P物质的红核神经元至脊髓的投射——HRP逆行追踪和免疫组化结合法研究

用辣根过氧化物酶(HRP)逆行标记与免疫细胞化学相结合方法,在大鼠红核内观察到HRP阳性与P物质反应阳性的双重标记神经元。双标细胞以对侧为主,同侧较少。首次证实了红核脊髓束中有部分纤维是SP能的,并可投射至颈、胸、腰段脊髓。     

大鼠延髓背角内GABA或甘氨酸免疫阳性终末与Fos阳极投射神经元的联系

目的：观察大鼠延髓背角（MDH）内向丘脑或臂旁核投射的Fos阳性神经元与γ-氨基丁酸（GABA）或甘氨酸（Gly）阳性终末的联系。方法：四甲基罗达明（TMR）逆行追踪结合TMR、Fos、GABA或Gly的免疫荧光三重染色技术。结果：GABA或Gly阳性终末主要分布于延髓背角浅层（Ⅰ、Ⅱ层）；给予面口部痛刺激后，Fos阳性神经元也主要分布于浅层；TMR注入一侧丘脑或臂旁核，逆标神经元分别主要见于对侧或同侧MDH的浅层；部分逆标神经元呈Fos阳性；GABA或Gly阳性终末与Fos阳性投射神经元形成密切接触。结论：MDH内感受面口部伤害性刺激信息的部分神经元向丘脑或臂旁核投射，GABA或Gly可能对这些伤害性感受神经元发挥抑制作用。     

大鼠延髓背角内GABA或甘氨酸免疫阳性终末与Fos阳性投射神经元的联系

目的　观察大鼠延髓背角 (MDH)内向丘脑或臂旁核投射的Fos阳性神经元与γ 氨基丁酸 (GABA)或甘氨酸 (Gly)阳性终末的联系。　方法　四甲基罗达明 (TMR)逆行追踪结合TMR、Fos、GABA或Gly的免疫荧光三重染色技术。　结果　GABA或Gly阳性终末主要分布于延髓背角浅层 (Ⅰ、Ⅱ层 ) ;给予面口部痛刺激后 ,Fos阳性神经元也主要分布于浅层 ;TMR注入一侧丘脑或臂旁核 ,逆标神经元分别主要见于对侧或同侧MDH的浅层 ;部分逆标神经元呈Fos阳性 ;GABA或Gly阳性终末与Fos阳性投射神经元形成密切接触。　结论　MDH内感受面口部伤害性刺激信息的部分神经元向丘脑或臂旁核投射 ,GABA或Gly可能对这些伤害性感受神经元发挥抑制作用。     

家兔脊髓下橄榄投射的突触特点——HRP顺行标记法电镜研究

将HRP注入家兔脊髓腰膨大灰质,在对侧下橄榄背侧副核内显示出大量HRP顺行标记的脊髓纤维终末。并用电子显微镜观察这些标记终末构成的突触。标记终末主要含圆形清亮囊泡,少数含扁形或多形清亮囊泡,清亮囊泡间常夹有散在的大致密芯囊泡。在下橄榄背侧副核内,大部分标记终末形成轴树突触,少数形成轴体突触。有一标记终末同时含圆形及扁形两种清亮囊泡,各与一树突及一胞体构成突触。特别是标记终末还参与构成轴轴突触及突触球。本文还对这些特殊结构的机能意义进行了初步探讨。     

大鼠脊髓背角内FOS和NDP阳性神经元的分布与联系(英文)

本文应用还原性尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（NDP）组织化学和原癌即刻早期基因c-fos表达产物Fos免疫细 胞化学方法，观察了大鼠脊髓背角内 NDP和 Fos阳性神经元的分布与联系。一侧足跖部皮下注射福尔马林后，同侧背角内可见大量Fos阳性细胞，而对侧背角内未见或偶见Fos阳性细胞。在背角各层中，大多数Fos阳性细胞分布于Ⅰ层及Ⅱ层外带的内侧部．背角内也可见大量NDP阳性胞体，纤维和终末，密集分布于Ⅱ层内带。双标结果说明部分背用内的Fos阳性细胞也是NDP阳性，双标神经元主要分布于区层的内侧部。在Ⅱ层内，Fos阳性细胞周围常有NDP阳性纤维和终末分布，部分NDP阳性终未直接附着干Fos阳性细胞膜上。本文结果为NO参与脊髓内伤害性刺激信息传递过程提供了形态学证据。     

大鼠红核脊髓束与脊髓小脑束起始细胞突触联系的电镜研究

采用神经元溃变和ＨＲＰ神经元逆行追踪结合的方法。电镜观察红核脊髓束终末与脊髓小脑束起始细胞的突触联系。结果表明红核脊髓束溃变终末与ＨＲＰ标记的脊髓小脑束起始神经元（脊髓边缘细胞和Ｃｌａｒｋｅ柱细胞）胞体及树突形成突触,但大部分溃变终扣则与非标记神经元构成突触。以轴－树触居多。溃变终扣主要呈电子致密型和清亮型两种。以致密型为主,内多含圆形小泡。实验提示红核脊髓束与脊髓小脑束起始细胞存在直接或间接的突     

大鼠神经垂体内后叶加压素神经分泌末梢的GABA能神经支配的免疫电镜证实

为了探讨神经垂体内后叶加压素（ＶＰ）释放的γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）能神经调控，本研究用包埋前ＡＢＣ法结合免疫电镜双标技术，研究了大鼠神经垂体内ＶＰ能神经和ＧＡＢＡ能神经的超微结构分布及其相互联系。先用ＤＡＢ法显示ＧＡＢＡ免疫反应，然后用钼酸铵－ＴＭＢ法显示ＶＰ免疫反应，再用ＤＡＢ－氯化钴稳定后作免疫电镜包埋。电镜观察发现：在神经垂体内ＧＡＢＡ样免疫反应产物呈电子密度高的颗粒状沉淀，定位于神经末梢内的小清亮羹泡周围和线粒体膜上；ＶＰ样免疫反应产物呈电子密度高的不规则形块状或针状散在于神经分泌末梢内。ＧＡＢＡ样神经末梢分布于神经分泌末梢之间或紧贴毛细血管和垂体细胞，可与神经分泌末梢紧密接触甚至形成突触。ＶＰ样神经分泌末梢内含小透亮囊泡和大颗粒囊泡，并可与ＧＡＢＡ样轴突末梢形成突触。在这种情况下，ＧＡＢＡ样轴突为突触前成分，突触前、后膜呈对称性，突触间隙宽度小于２０ｎｍ，内含电子致密物质。以上结果证实，在大鼠神经垂体内ＶＰ释放受到ＧＡＢＡ神经的直接突触调控。     

大鼠脊髓小脑前束起始细胞——脊髓边缘细胞突触形态学的电镜研究

将辣根过氧化物酶注入大鼠小脑后,在脊髓L_1～L_3节段中的脊髓边缘细胞(SBC)得到逆行标记。对标记的SBC的突触联系进行电镜观察,并根据突触前区小泡形状及终扣形态,将这些终扣大致可分为6型,即S、F、Cf、T、G和P型。其中S和F型终扣根据其形态,各自又分为两个亚型,即细长型和圆型。S和F型分别含有球形及扁平型小泡;Cf型终扣含扁形小泡,突触前、后膜无明显特征,在突触后膜下有亚突触间隙;T型终扣含有清亮球形小泡,也可见大颗粒小泡,在突触后膜下可见致密体;G型终扣在突触前区内含有大颗粒小泡;P型是指附着在大S型终扣上的含有多样形小泡的终扣。S型、T型和G型突触后膜均比前膜明显增厚,呈不对称性。有关上述SBC突触终扣来源问题,还需进一步研究。     

大鼠脊髓背角CGRP、IB4阳性终末与GABA能神经元之间的联系及GABABR1阳性终末的超微结构观察

背根神经节小型神经元初级传入末梢上的GABAB受体在脊髓背角接受中间神经元的突触前抑制,是脊髓水平痛觉调节的途径之一。为研究大鼠脊髓背角胶状质中背根神经节神经元传入纤维末梢同脊髓背角GABA能中间神经元之间的联系,本实验用免疫组织化学法,通过激光共聚焦显微镜观察了正常大鼠CGRP阳性和IB4阳性背根节神经元的中枢突同脊髓背角GA-BA能中间神经元之间的联系。同时,用免疫电镜(IEM)技术研究了脊髓背角GABABR1阳性的背根神经节神经元中枢突末梢形成突触的特点。结果显示:CGRP阳性和IB4阳性背根节神经元的中枢突和脊髓背角GABA能中间神经元之间形成密切联系;电镜下许多脊髓背角胶状质中突触小球的中央末梢为GABABR1免疫阳性,并作为突触前或突触后成分与周围末梢之间形成对称性和非对称性突触。提示脊髓背角GABA能中间神经元可能通过分布在背根节神经元初级传入末梢上的GABAB受体产生突触前抑制,参与脊髓水平的痛觉调制。