糖尿病大鼠心肌钠钙交换蛋白与肌浆网钙泵mRNA表达水平的研究

目的探讨糖尿病大鼠心肌病变是否与钠钙交换蛋白Ⅰ亚型(NCX1)及肌浆网钙泵2a亚型(SERCA2a)表达水平变化有关。方法大鼠腹腔注射链佐霉素制备实验性糖尿病大鼠模型。将大鼠成模后分别于4w、6w和8w时取心肌组织,进行病理学检查及计算心脏相对重量观察心肌病变程度;应用RT-PCR方法扩增NCX1和SERCA2a两种产物,计算NCX1与SERCA2amRNA相对数量的变化,并与相应周数的正常对照组进行比较。结果糖尿病各组心脏湿重与体重的比值均明显高于对照组,病理检查显示心肌细胞呈不同程度变性坏死;4w,6w糖尿病组NCX1和SERCA2amRNA的量有所降低,但无统计学差别,而8w时,糖尿病组NCX1和SERCA2amRNA相对含量比对照组明显减少(P<0.05)。结论在糖尿病合并心肌病变时,大鼠心肌的NCX1与SERCA2a的mRNA水平降低,提示其心脏功能的减退与NCX1和SER-CA2a的mRNA水平降低有一定关系。     

缬沙坦对自发性高血压大鼠心肌抑癌基因PTEN表达的影响

目的 :观察缬沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)心肌肥厚的影响 ,以及对肿瘤抑制基因PTEN表达的影响。方法 :取 2 0只 12周龄自发性高血压大鼠 ,随机分为 2组 ,每组 10只 :缬沙坦干预组 ,给予缬沙坦 30mg·kg-1·d-1溶于饮水灌胃治疗 ;SHR阳性对照组给予正常饮水。另有 10只同龄同源雄性正常血压Wistar kyoto大鼠 (WKY组 )作为正常对照组。实验周期 8周 ,测量血压、左室重量 体重(LVW BW ) ,应用免疫组化方法检测各组大鼠左心室心肌PTEN的表达。结果 :SHR阳性对照组血压、LVW BW均高于正常对照组 ,但低于缬沙坦组 ,SHR阳性对照组PTEN的表达明显低于正常对照组 ,而缬沙坦组PTEN的表达显著高于SHR阳性对照组。结论 :缬沙坦能抑制自发性高血压大鼠心肌肥厚 ,并能提高PTEN的表达 ,提示PTEN可能在心肌肥厚发展过程中起了一定的作用。     

前胡丙素对大鼠缺血-再灌注心肌肌浆网钙泵功能及其蛋白水平的影响

目的研究前胡丙素对大鼠缺血-再灌注(I-R)心肌肌浆网钙泵(SERCA)的影响及机制。方法 24只雄性SD大鼠随机均分为正常对照组、I-R组、前胡丙素+I-R组和聚乙二醇400+I-R组。检测再灌注15min时冠状动脉流出量(CF)和冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,采用改良对硝基苯酚棕榈酸酯(p-NPP)法和Millipore过滤技术测定SERCA的活性和三磷酸腺苷依赖的SERCA45 Ca2+摄取率,Western blot法检测心肌细胞SERCA蛋白表达水平。结果与I-R组相比,前胡丙素+I-R组CF、SERCA蛋白表达量、SERCA的活性和45 Ca2+摄取率增高(P<0.01),LDH漏出量降低(P<0.01)。结论前胡丙素对离体大鼠心脏I-R损伤有保护作用,可能与其减轻I-R损伤引起的心肌SERCA功能和蛋白表达抑制有关。     

阿霉素中毒大鼠膈肌骨架蛋白和肌浆网钙泵的表达变化及意义

目的观察不同剂量阿霉素诱导大鼠膈肌急性损伤时膈肌收缩特性的变化与大鼠膈肌细胞骨架蛋白和肌浆网钙泵表达变化的关系。方法一次性腹腔注射阿霉素制备急性膈肌损伤动物模型,♂SD大鼠随机分成:阿霉素低剂量组(10mg·kg-1)、中剂量组(20mg·kg-1)和高剂量组(40mg·kg-1)及对照组,每组10只。对照组用生理盐水腹腔注射。3d后剖胸取膈肌,应用体外灌流大鼠膈肌肌条方法,分别测量其单收缩张力(Pt)、最大强直张力(Po)、峰值收缩时间(CT)、半舒张时间(1/2RT),张力最大上升速度(+dt/dtmax)及张力最大下降速度(-dt/dtmax)。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定膈肌骨架蛋白肌联蛋白(titin)、伴肌动蛋白(nebulin)和肌浆网钙泵(sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase,SERCA)mRNA的表达。结果与对照组相比,阿霉素中、高剂量模型组大鼠膈肌Pt,Po,±dt/dtmax下降(P<0.01),CT、1/2RT延长(P<0.01)。阿霉素中毒大鼠膈肌各基因表达较对照组相比分别降低(P<0.01)。结论阿霉素中毒大鼠膈肌细胞膈肌骨架蛋白titin、nebulin和SERCA mRNA表达下调,并可能与膈肌张力改变有关。     

钙蛋白酶抑制剂对缺血-再灌注心肌肌浆网钙泵功能及其蛋白水平的影响

目的研究钙蛋白酶抑制剂ALLN对缺血-再灌注(I-R)大鼠心肌肌浆网钙泵(SERCA)功能的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分为正常灌注组(对照组)、I-R组、ALLN+I-R组和二甲亚砜+I-R组(DMSO+I-R组),分别检测再灌注15min时冠状动脉流出量(CF)和冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;荧光分光光度计测定荧光强度来反映钙蛋白酶活性;分别采用改良p-NPP法和Millipore过滤技术测定SERCA的活性和ATP依赖的SERCA45Ca2+摄取率,免疫印迹法检测心肌细胞SERCA蛋白表达水平。结果与I-R组相比,ALLN+I-R组CF、SERCA蛋白表达水平、SERCA的活性和45Ca2+摄取率显著增高(P<0.01),而LDH漏出量和钙蛋白酶活性显著降低(P<0.01)。结论 ALLN对离体大鼠心脏I-R损伤有保护作用,与其抑制钙蛋白酶活性,一定程度减轻I-R损伤对SERCA功能及蛋白表达水平的影响有关。     

粉防己碱抑制自发性高血压大鼠心肌纤维化

目的：观察粉防己碱对自发性高血压大鼠心肌胶原和心肌僵硬度的作用。方法：测定羟脯氨酸表示胶原的量，胃酶抽提法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ方法测定胶原Ⅰ／Ⅲ型比例，离体灌注大鼠心脏测定左室心肌舒张僵硬度。结果：粉防己碱显著降低心肌胶原浓度和含量，降低胶原Ⅰ／Ⅲ型比例，改善心肌舒张僵硬度。结论：粉防己碱因其有效的抗纤维化作用，能逆转心肌舒张功能障碍。     

几种降压药对自发性高血压大鼠微循环的影响

在自发性高血压大鼠中进行实验，将动物分为三组，分别以氨酰心安，疏甲丙脯氨酸及吲达帕胺治疗。另取一组未经治疗的ＳＨＲ和一组正常血压的ＷＫＹ大鼠作对照。实验１２周后检查，所有降压药治疗的三组ＳＨＲ，血压均降到正常范围；但是睾２肌微循环却显示不高的变化。     

大蒜素对自发性高血压大鼠心肌Ito重构的影响

本研究旨在探讨大蒜素(All)对自发性高血压大鼠(SHR)肥厚心肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的作用。应用All注射液(7.5和15.0 mg·kg-1)对SHR腹腔注射8周。双酶法分离各组大鼠心室肌细胞,利用膜片钳技术观察All对心肌肥厚指标及Ito的作用。结果显示,All对SHR肥厚心肌有明显的逆转作用,使心室肌细胞的膜电容显著降低。高、低剂量组均使SHR重构的Ito电流得以恢复,在+50 m V电压下,分别使Ito从18.23±3.64升至36.47±5.42 p A/p F(P<0.01)和25.17±2.86 p A/p F(P<0.01),与WKY(Wistar Kyoto)大鼠对照组接近。此效应与All减少通道稳态和关闭态失活、加速失活后恢复有关。本文发现All可降低SHR肥厚心肌心室肌细胞Ito的重构。     

缬沙坦和苯那普利对自发性高血压大鼠心肌钠泵和钙泵的影响

目的 比较缬沙坦和苯那普利对自发性高血压大鼠(SHR)心肌Na+-K+- ATP酶和Ca2+- ATP酶活性的影响.方法将24只雄性14周龄SHR分为生理盐水组、苯那普利 1 mg·kg     

平肝胶囊对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响

目的 探讨平肝胶囊对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞外基质(ECM)内胶原蛋白的影响及其意义。方法50只14周龄雄性SHR随机分为5组,每组各10只,分别予以平肝胶囊高剂量、中剂量、低剂量、苯磺酸左旋氨氯地平片和生理盐水灌胃,同时选同周龄的雄性Wista-Kyoto大鼠(WKY)各10只作为对照。给药10周后采用Ma...     

缬沙坦对扩张型心肌病心衰大鼠肌浆网Ca2+-ATP酶及其调控蛋白的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体阻滞剂（ARB）缬沙坦对扩张型心肌病（DCM）心衰大鼠心肌肌浆网Ca^2＋-ATP酶（SER-CA2a）及其调控蛋白（PLB）的影响及意义。方法腹腔注射多柔比星建立SD大鼠DCM模型。随机分为DCM组（M组,n=11）、缬沙坦组（V组,n=10）、另设正常对照组（C组,n=10）,V组予以缬沙坦30mg·k^-1·d^-1,C组和M组予以生理盐水灌胃,8周后行血流动力学检测,采用RT—PCR和Western—blot法分别检测心肌组织SERCA2a、PLB的mRNA和蛋白含量。结果与正常对照组相比,DCM组左心室压峰值（LVSP）、左室最大压力上升及下降速度（±dp／dtmax）显著下降（均P〈0．05）,左室舒张末压（LVEDP）显著上升（P〈0．05）;缬沙坦组LVSP、±dp／dtmax显著高于DCM组（均P〈0．05）,LVEDP显著低于DCM组（P〈0．05）;DCM组SERCA2a的mRNA及蛋白含量显著低于正常对照组（均P〈0．05）,PLB的mRNA及蛋白含量显著高于正常对照组（均P〈0．05）。缬沙坦治疗后SERCA2a的mRNA及蛋白含量显著升高（均P〈0．05）,PLB的mRNA含量显著降低（P〈0．05）,而PLB蛋白含量无显著改变（P〉0．05）。结论缬沙坦改善DCM心功能可以与其部分纠正SERCA2a、PLB的异常有关。     

银杏内酯B对自发性高血压大鼠左室肥厚及心肌纤维化的影响

目的:观察银杏内酯B对自发性高血压大鼠模型左室肥厚心肌纤维化的影响。方法:选择12周龄雄性SHR大鼠(二级)40只,随机分成4组,每组10只,分别为银杏内酯B大剂量组(YH,120 mg.kg-1.d-1)、银杏内酯B小剂量组(YL,60mg.kg-1.d-1)、氯沙坦组(LOS,30 mg.kg-1.d-1)和SHR大鼠模型对照组(SHR),以及周龄、性别相匹配的Wistar Kyoto(WKY)大鼠10只作为空白对照。每日灌胃给药一次,对照组给等量CMCNa溶液。治疗12周后尾袖法测定动脉血压,称量后处死。计算左室质量与体质量比(LVM/BW)。天狼星红染色,计算机图像分析计算心肌胶原容积分数。结果:给药后,YH、YL组大鼠SBP均明显低于SHR组(P<0.01),YH、YL2组组间比较无显著性差异;YH组大鼠给药前后SBP比较有显著差异(P<0.01),给药后明显低于给药前,而YL组给药前后比较无统计学意义。YH、YL组大鼠心肌胶原纤维含量均明显低于SHR组(P<0.01),YH、YL2组间比较无显著性差异。结论:银杏内酯B可以抑制SHR大鼠的心肌纤维化,改善高血压所致的心肌重塑。     

肺心病肺性脑病患者血清烯醇化酶与红细胞内Na+K+-ATP的变化

目的探讨血清烯醇化酶(NSE)及红细胞内Na+K+-ATP酶对肺心病肺性脑病的影响.方法选取36名肺心病肺性脑病患者(A组)抽取6ml静脉血检测NSE及Na+K+-ATP酶的活性与34例无肺性脑病患者(B组)及29例正常老年人比较(C组).结果发现A组的NSE活性较B组患者及C组增加(P＜0.05,且其活性与动脉血氧分压呈负相关(r=-0.514,P=0.018),与二氧化碳分压呈正相关(r=0.482,P=0.035),而红细胞内Na+K+-ATP酶较B组患者及C组下降(P＜0.05),且其活性与动脉血氧分压呈正相关(r=0.431,P=0.014),与二氧化碳分压呈负相关(r=-0.6344,P=0.0041).结论血清NSE活性与红细胞内Na+K+-ATP活性可以反映肺性脑病患者缺氧、CO2潴留引起的脑损害程度.     

艾力沙坦钾单次给药对自发性高血压大鼠血压的影响

目的本实验通过观察艾力沙坦钾（allisartan potassium,ALS3K）对自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensirerats,SHR）单次给药前后血压变化的情况,研究艾力沙坦钾对SHR的降压作用及量效关系。方法SHR随机分为7个组,每组9只。SHR麻醉状态下行股动脉插管并造胃瘘管,恢复1d后,动物在清醒自由活动状态下,由计算机连续记录每搏收缩压（systolicblood pressure,SBP）,舒张压（diastolic blood pressure,DBP）和心动间期（heart period,HP）。记录给药前1h内血压和心动间期作为给药前基础值。然后每组SHR经胃瘘管分别给予0．5％的羧甲基纤维素钠（sodium carboxymathyl cellulose,CMC-Na）、艾力沙坦酯（allisartan,ALS-3）2．5mg／kg、氯沙坦钾（losartan potassium,Los）2．5mg／kg和受试药品ALS3K各1．0、2．5、5．0、10mg／kg;给药后连续记录6hSBP、DBP和HP的变化。结果ALS3K在2．5mg／kg剂量开始明显降压,与给药前比较,SBP和DBP分别下降15、16mmHg（P〈0．01）;ALS3K5．0和10mg／kg降压效果与2．5mg／kg相近;各剂量对HP没有明显的影响。ALS-3以及Los在2．5mg／kg给药剂量下无明显的降压作用。结论ALS3K单次给药能平稳持久地降低SHR的血压,在一定剂量范围内有较好的量效关系。经过结构改造,ALS3K可以通过更低的给药剂量而获得比ALS-3更好的降压疗效。     

Anticardiolipin antibodies in spontaneously hypertensive rats (SHR), stroke-prone SHR and normal Wistar rats

1. Anticardiolipin antibodies (ACA) can be detected in the serum of patients with autoimmune disturbances, ischaemic heart disease, myocardial infarction, neurological disorders and other medical conditions. Elevated values of these autoantibodies can be associated with recurrent fetal loss, arterial and venous thrombosis and thrombocytopenia. 2. In the present study, we investigated the presence of ACA in three rat strains, namely normal Wistar rats (WR), spontaneously hypertensive rats Okamoto-Aoki (SHR) and stroke-prone SHR (SHRSP). All animals were examined at four ages: 1, 4, 10 and 12 months of age. Anticardiolipin antibodies were determined by ELISA. 3. Anticardiolipin antibody levels in normal WR, which were used as controls, were lowest at 1 month and increased significantly from the 4th month on. At the prehypertensive age (1 month), ACA levels in SHR and SHRSP were significantly higher compared with control WR, decreased with age and were significantly lower at 4, 10 and 12 months compared with age-matched WR. 4. These differences may be a result of immunological disorders in SHR.     

盐酸埃他卡林对自发性高血压大鼠肾组织细胞外基质降解系统的影响

目的观察埃他卡林(iptakalim hydrochloride,Ipt)对自发性高血压大鼠(spontaneously hyper-tensiverats,SHR)肾组织细胞外基质降解系统的影响。方法SHR于第12周龄进入实验,实验分组如下Ipt1、3、9mg·kg-1·d-1剂量组,苯那普利(benazepril)3mg·kg-1·d-1治疗组及SHR空白对照组,另设同月龄同种属正常血压大鼠(Wistar Kyotorat,WKY)为正常对照组,灌胃给药每天1次,持续给药12周,应用免疫组织化学和RT-PCR技术,观察埃他卡林对高血压大鼠肾组织Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)表达的影响。结果埃他卡林长期降压治疗同时上调肾组织局部MMP-9mRNA和蛋白水平,同时一致性降低TIMP-1、TGF-β1及Ⅳ型胶原转录和蛋白水平。结论埃他卡林对肾脏靶器官的保护作用机制可能通过抑制肾脏局部TGF-β1表达,纠正MMP-9/TIMP-1失衡,从而促进细胞外基质的降解,减少细胞外基质的积聚。     

Effect of chronic treatment with trandolapril or enalapril on brain ACE activity in spontaneously hypertensive rats

The aim of the present study was to determine whether the new ACE inhibitor trandolapril was able to inhibit brain ACE activity in spontaneously hypertensive rats (SHRs). Therefore, we have measured ex vivo ACE activity in discrete brain areas of SHRs after a 2-week oral treatment with trandolapril (0.001, 0.01, 0.1 and 1 mg/kg/day). The effects of trandolapril were compared to those of enalapril (10 mg/kg/day), used as a reference compound. Enalapril induced a decrease in ACE activity in brain areas not protected by the blood brain barrier (subfornical organ and median eminence) and in cerebral cortex. Conversely, trandolapril at a dose of 0.01 mg/kg/day and above induced a dose-dependent inhibition of ACE activity in all brain areas assayed, including the supraoptic and paraventricular hypothalamic nuclei, septum, amygdala, hippocampus, cerebellar and cerebral cortex, nucleus of the tractus solitary and caudate nucleus. The inhibition was roughly similar in all brain areas studied. These data suggest that after chronic oral administration in SHRs, trandolapril or its metabolite, in contrast to enalapril or enalaprilat, was able to reach all brain areas of SHRs, including those protected by the blood brain barrier.     

伊贝沙坦对结缔组织生长因子在自发性高血压大鼠心室肌表达的影响

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)在自发性高血压大鼠(SHR)心脏中的表达及其与高血压心室重构和心肌纤维化的关系,并探讨血管紧张素II受体拮抗剂对其表达的影响以及改善高血压心室重构和心肌纤维可能的作用机制。方法:20只12周龄雄性自发性高血压大鼠随机分为SHR组(n=10)和伊贝沙坦组(n=10),伊贝沙坦组每只大鼠予以伊贝沙坦50mg·kg-1·d-1灌胃,给药12周,同时取10只12周龄雄性京都种Wistar(WKY)大鼠作为对照组,用免疫组化的方法对TGF-β1、CTGF在三组大鼠的左室心肌的分布及表达进行半定量分析;用RT-PCR的方法检测TGF-β1、CTGFmRNA在心肌表达水平;用MASSON染色法观察左室心肌胶原形态,图象分析测量胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA)。结果:(1)左室重量指数(LVI)、CVF、PVCA在SHR组大鼠明显高于WKY组大鼠(P<0.01);相比SHR组,伊贝沙坦组则显著降低(P<0.05)。(2)CTGF主要在血管平滑肌和心肌间质中表达,WKY组在心肌间质中呈弱表达。(3)相关分析表明,CTGF与TGF-β1(r=0.562,P<0.05)的表达呈正相关。(4)CTGF及其mRNA在SHR组左室心肌中的表达较WKY组明显增强(P<0.05),相比SHR组,伊贝沙坦组则明显减少。结论:高血压大鼠心室肌CTGF表达增加,伊贝沙坦对高血压大鼠心室肌CGTF表达具有抑制作用,且能够明显改善高血压心室重构和心肌纤维化,此种作用可能是血管紧张素II受体拮抗剂抑制左室重构改善心肌纤维化新的机制。     

左旋氨氯地平对自发性高血压大鼠胸主动脉重构及内皮功能的影响

目的 观察左旋氨氯地平(降压药)对自发性高血压大鼠胸主动脉结构及内皮依赖性舒张功能的影响.方法 20只自发性高血压大鼠,分为左旋氨氯地平治疗组和高血压对照组;同周龄WKY大鼠作为正常对照.治疗组,给予左旋氨氯地平(2 mg·kg-1·d-1),12周后,观察胸主动脉对乙酰胆碱和硝普钠的舒张反应,比较各组主动脉中膜厚度及中膜截面积,检测血清一氧化氮、内皮素的水平.结果 同高血压对照组相比,治疗组的胸主动脉对乙酰胆碱的最大舒张反应明显增强,(48.39±14.86)%vs(34.71±9.23)%,P=0.03;胸主动脉中膜厚度及截面积明显减小(P<0.05),血清一氧化氮浓度明显增加(P<0.05).结论 左旋氨氯地平能够改善自发性高血压大鼠血管内皮依赖性舒张功能,抑制血管重构,机制可能与增加一氧化氮的合成和释放有关.     

性激素对豚鼠心肌细胞膜Na~+,K~+-ATP酶活力的影响

采用Matsui and Schwartz方法制备Na~+,K~+—ATP酶液,Harry法测定无机磷含量,间接测定心肌细胞膜Na~+,K~+—ATP酶活力,实验结果表明,丙酸睾丸素、已烯雌酚对心肌细胞膜Na~+,K~+—ATP酶活性均有明显的抑制作用。但丙酸睾丸素呈正相关,已烯雌酚呈负相关,说明性腺激素可以使心肌细胞膜上的Na~+,K~+—ATP酶活性降低。