缺氧对肝癌细胞HepG2中HIF-1α和HK11表达的影响

目的探讨缺氧对肿瘤细胞周期调控的机制及乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）、己糖激酶Ⅱ（HKⅡ）表达的影响。方法人肝癌细胞HepG2分成3组：缺氧12h组、缺氧24h组及对照组。缺氧组分别在缺氧条件下（37℃，5％CO2、2．0％O2饱和度）培养12h和24h，对照组置于正常氧浓度条件下（37℃。5％CO2、21．0％O2饱和度）培养24h。流式细胞仪检测细胞周期分布，免疫组织化学S2P法检测HIF-1α表达，荧光定量PCR法检测HKⅡ mRNA表达量。结果缺氧情况下细胞周期分析处于G0／G1期细胞百分比明显增多，处于G2／M期的细胞减少，并且可见到较明显的凋亡峰的形成，缺氧12h组、缺氧24h组的CO／G1期比例显著高于对照组（p〈0．05）；HIF-1α和HKⅡ在两组缺氧组与对照组比较，其表迭量明显增加（p〈0．05），缺氧24h组与缺氧12h组比较有显著性差异（p〈0．05）。结论HIF-1α可刺激人肝癌细胞HKⅡ表达的增加，细胞阻滞在Go／G1期，以HIF-1α为药物靶点可望成为治疗肝癌基因治疗的新途径。     

缺氧条件下电离辐射对鼻咽癌细胞HIF-1α及P53表达的影响

目的探讨缺氧条件下电离辐射对鼻咽癌细胞株CNE-1中缺氧诱导因子HIF—1α及P53表达的影响。方法将CNE-1鼻咽癌细胞分为空白对照组、单纯照射组和缺氧照射组。单纯照射组：按照照射率4Gy／min,共8Gy的剂量利用x射线照射细胞;缺氧照射组：氯化钴处理细胞模拟缺氧条件,缺氧一定时间后,按照与单纯照射组相同的剂量照射细胞。MTT法分析细胞存活分数,免疫荧光技术分析两组鼻咽癌细胞中的HIF-1α蛋白表达及分布情况,流式细胞仪定量检测HIF-1α和P53的蛋白表达。结果（1）MTT检测结果：细胞存活分数排列顺序为：对照组〉缺氧加照射组〉单纯照射组（P〈0．01）;（2）HIF-1α蛋白表达情况：免疫荧光显示鼻咽癌细胞HIF-1α蛋白的表达,在缺氧加照射组主要定位于细胞浆中,而另二组未见显示,流式细胞仪示缺氧加照射组HIF—1α明显高于单纯照射组（P〈0．01）,单纯照射组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）;（3）P53蛋白表达变化情况：缺氧加照射组〉单纯照射组〉对照组（P〈0．05）。结论鼻咽癌细胞缺氧条件下HIF-1α可能通过P53发挥重要的保护作用,从而降低实体瘤中内部癌细胞对辐射的敏感性。     

妊娠高血压疾病患者 HIF在胎盘滋养细胞中的表达与临床价值评价

目的 分析缺氧诱导因子（ HIF）在妊娠高血压疾病患者胎盘滋养细胞中的表达差异,评价其临床价值。方法 选取重庆市沙坪坝区人民医院2013年1月至2013年12月分娩孕妇170例,分为正常对照组50例,妊娠高血压疾病组85例,轻度子痫前期组22例,重度子痫前期组13例。应用免疫组织化学方法及Western blot法,比较各组胎盘组织HIF-1α的表达和HIF-1α／β-actin的相对吸光度比值;免疫组织化学方法比较各组胎盘组织中HIF-2蛋白的表达,采用RT-PCR方法检测HIF-2αmRNA水平。结果 妊娠高血压疾病组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组的HIF-1α和HIF-1α／β-actin的相对吸光度比值均显著高于正常组（ t值分别为11．776、17．216、21．168、9．979、13．171、21．406,均P＜0．01）。重度子痫前期组的HIF-1α和HIF-1α／β-actin的相对吸光度比值显著高于轻度子痫前期组和妊娠高血压疾病组（t值分别为7．372、7．449、11．623、23．338,均P＜0．01）。妊娠高血压疾病组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组的HIF-2αmRNA及蛋白均显著高于正常组（ t值分别为17．344、29．253、34．833、39．388、41．850、38．567,均P＜0．01）;重度子痫组的HIF-2αmRNA及蛋白显著高于轻度子痫前期组和妊娠高血压疾病组（ t值分别为6．557、6．348、30．263、19．314,均P＜0．01）。 HIF-1α在妊娠高血压疾病组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组中的表达率均显著高于正常组（χ^2分别为8．434、9．680、4．225,均P＜0．05）,HIF-1α在轻度子痫前期组的表达率显著高于妊娠高血压疾病组（χ^2=4．919,P＜0．05）,HIF-1α在轻度子痫前期组的表达率和重度子痫前期组无显著差异（χ^2=0．000,P＞0．05）。结论 缺氧诱导因子HIF-1α和HIF-2α在妊娠期高血压疾病中具有重要意义。     

HIF-1α在结肠癌中的表达与临床意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（ HIF-1α）结肠癌中的表达和临床意义。方法应用免疫组织化学方法，检测60例结肠癌及近端肠管距癌灶5cm、10cm的肠管组织中HIF-1α。结果结肠癌组中 HIF -1α阳性表达率为76．67％，距癌灶5cm、10cm 的肠管组织中 HIF -1α的表达率分别为21．67％、3．33％，前者与后二者相比较差异有统计学意义（P＜0．05），后二者相比较差异无统计学意义（P＞0．05）。 HIF-1α在结肠癌中不同临床分期、分化程度、淋巴结转移的阳性表达率差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论 HIF-1α的表达参与了结肠癌癌细胞分化及发展，可作为评估结肠癌发展、治疗及预后的重要参考指标。     

唑来膦酸对乏氧骨肉瘤细胞HIF-1α和VEGF表达的影响

目的研究唑来膦酸在乏氧的环境下对骨肉瘤LM8细胞株缺氧诱导因子1-α（HIF—1α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法建立骨肉瘤细胞体外乏氧培养模型,观察唑来膦酸对骨肉瘤LM8细胞HIF-1α和VEGF表达影响。RT-PCR法检测HIF-1α和VEGF mRNA转录水平;免疫组化和ELISA法分别检测HIF-1α和VEGF蛋白表达情况。结果与常氧组相比,单纯乏氧组和唑来膦酸乏氧组的HIF-1α mRNA转录水平无明显改变（P〉0．05）;但在乏氧条件下,唑来膦酸能明显抑制HIF-1α蛋白的表达。而唑来膦酸能剂量依赖性抑制乏氧条件下VEGF mRNA及其蛋白表达水平（P〈0．05）。结论在乏氧条件下唑来膦酸能够抑制骨肉瘤LM8细胞HIF-1α蛋白的表达,从而使VEGF mRNA及其蛋白表达水平明显下降。     

缺氧诱导因子-1α在大肠腺癌组织中的表达及与血管生成的关系

目的 探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达与大肠腺癌发生、发展的关系。方法用免疫组织化学方法检测61例大肠腺癌组织中HIF-1α的表达，并分析其与大肠腺癌生物学行为和微血管密度（MVD）的关系。结果HIF-1α在正常黏膜组织中无表达；腺瘤组织中阳性表达率为15．4％，且均为弱阳性表达，HIF—lq表达在正常黏膜与腺瘤组织中差异无统计学意义（P〉0．05）。癌组织中HIF-1α阳性表达率为65．6％，显著高于腺瘤组织（P〈0．01）。HIF-1α表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和Dukes分期密切相关（P〈0．01），而与肿瘤大小无关（P〉0．05）；HIF-1α 阳性表达程度与MVD呈正相关。给论 HIF-1α过表达可能与大肠腺癌的浸润、转移及新生血管形成密切相关。     

缺氧诱导因子-1对缺氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的调控作用

[目的]探讨细胞凋亡在缺氧肺损伤的作用及缺氧诱导因子-lα（hypoxia inducible factor-lα, HIF-lα）对细胞凋亡的调控作用。[方法]体外培养大鼠肺泡上皮细胞加入氯化钴（cobalt chloride, COC12 ）制作细胞缺氧模型，将小分子干扰缺氧诱导因子-l（ HIF-lαsmall interference RNA, HIF-lαsiRNA）有效的转染至细胞内，检测常氧、缺氧4、24h、小分子干扰后缺氧4、24h后HIF—lαmRNA的表达水平变化，同时应用荧光显微镜以及流式细胞术检测非转染以及转染组不同缺氧时间细胞凋亡率的变化。[结果]常氧下HIF-lαmRNA表达水平较低，随缺氧时间增加HIF-lαmRNA的表达水平明显升高（P〈0．05）；HIF-lαsiRNA可有效沉默HIF-lα，下调率为56％、57％（P〈0．01）。细胞凋亡率随着缺氧时间延长而增加（P〈0．05），48h细胞开始出现坏死现象；通过HIF—lα预处理细胞后，可降低缺氧诱导的细胞凋亡的发生率（P〈0．05）。[结论]缺氧引起肺泡上皮细胞的凋亡，随缺氧时间增加凋亡增加，HIF-lα在缺氧诱导细胞凋亡中起着重要的作用，HIF-lαsiRNA可以减少肺泡上皮细胞凋亡的发生。     

缺氧诱导因子HIF-1仅在妊娠高血压综合征中的作用

目的：探讨缺氧诱导因子HIF-1α在妊娠高血压综合征（PIH）中的作用。方法：采用免疫组化法检测40例PIH患者和40例正常妊娠孕妇胎盘组织中HIF-1α的表达。结果：PIH患者胎盘组织中HIF-1α高于正常妊娠对照组．中度、重度PIH组HIF-1α与正常对照组相比差异均有显著性（P〈0．01），中度组高于轻度组（P〈0．01），重度组高于中度组（P〈0．01）。结论：HIF-1α参与了PIH缺氧的病理生理改变，而且HIF-1α在PIH患者胎盘组织中的表达与PIH的严重程度有关。     

卵巢肿瘤组织中缺氧诱导因子1α与血管内皮生长因子C的相关性研究

目的探讨缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）和血管内皮生长因子C（VEGF—C）在卵巢癌组织中的表达及其相关性。方法2002年2月至2007年10月笔者所在医院312例卵巢上皮性肿瘤及正常卵巢的组织蜡块,应用免疫组化技术检测HIF-1α和VEGF—C的表达情况。结果卵巢癌、交界性卵巢肿瘤、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中HIF-1α的阳性表达率分别为78．4％、44．1％、16．2％和0。交界性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中HIF—1α的表达高于正常卵巢和良性卵巢肿瘤,卵巢癌高于交界性肿瘤,差异均有统计学意义（P〈0．01）。卵巢癌组织中HIF-1α的表达与手术病理分期和病理类型无关（P〉0．05）,而与病理分级呈正相关（r=0．356,P〈0．01）。卵巢癌组织中HIF-1α表达与YEGF—C表达呈显著正相关（r=0．140,P=0．055）。结论卵巢癌组织过度表达HIF-1α,并通过诱导VEGF—C促进肿瘤新生血管的形成。     

MMP-2、HIF-1α在良、恶性转归葡萄胎中表达的研究

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在葡萄胎恶变的作用机理。方法对32例良性转归葡萄胎及14例恶性转变葡萄胎采用免疫组化法检测MMP-2、HIF-1α的表达水平,并对两者的相关性进行研究。结果MMP-2及HIF-1α在葡萄胎组织均有表达,但在恶性转归组的表达强于良性转归组（χ2值分别为4．563、5．139,均P＜0．05）;相关性分析结果显示,MMP-2的表达与HIF-1α的表达呈正相关（rs ＝0．627,P＜0．05）。结论 MMP-2和HIF-1α在葡萄胎恶性转变中起一定作用,用来预测葡萄胎的恶变可能有重要意义。     

局部应用神经生长因子联合胰岛素对糖尿病大鼠烫伤创面愈合及HIF-1α和VEGF表达的影响

目的探讨局部应用神经生长因子（NGF）和胰岛素对1型糖尿病大鼠烫伤创面中缺氧诱导因子-1α（HIF—1α）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响及创面愈合机制。方法雄性wistar大鼠腹腔注射STZ建立糖尿病模型60只,1月后在大鼠背部造成深Ⅱ度烫伤创面,将大鼠随机分为无干预组（B）、胰岛素治疗组（C）、NGF治疗组（D）、NGF联合胰岛素治疗组（E）,并设立正常烫伤对照组（A）,每组15只。观察伤后3、7、11、15、21d各组创面愈合情况,检测创面组织HIF-1α和VEGF的表达。结果E组创面愈合率第7天为[（25．35±2．32）％,P〈0．05],与其他各组相比较显著增加;C、D组创面愈合率较B组显著增加分别为[（16．68±1．95）％,（18．29±1．70）％,P〈0．05];D组自第15天起较A组显著增加[（54．84±3．60）％,P〈0．05];自第7天起E组HIF-1α和VEGF的表达显著低于其他各组（P〈0．05）。结论局部应用NGF联合胰岛素可加速创面愈合,其机制可能通过促进创面微血管再生,纠正局部缺氧。     

缺氧诱导因子-1α和葡萄糖转运蛋白1在卵巢上皮癌中的表达及其意义

目的探讨卵巢上皮性肿瘤组织中缺氧诱导因子（HIF）-1α、葡萄糖转运蛋白1（Glut1）的表达水平及两者之间的关系。方法采用免疫组织化学法检测80例卵巢上皮性肿瘤组织和正常卵巢组织中HIF—1和Glut1的表达情况。结果在卵巢上皮癌、卵巢交界性肿瘤、良性卵巢上皮性肿瘤和正常卵巢组织中HIF-1α阳性表达率分别为75．5％、50．0％、13．3％、0；Glut1阳性表达率分别为80．O％、60．0％、0、0；在卵巢上皮癌和卵巢交界性肿瘤与良性卵巢上皮性肿瘤和正常卵巢中两者表达差异有统计学意义，而且HIF-1α和Glut1与肿瘤的组织学分级和FIGO临床分期有关（P〈0．05）。HIF-1α的表达与Glut1有相关性。结论HIF-1α和Glut1对卵巢上皮癌的发生、发展具有重要作用，两者存在着一定的协同作用。     

低氧诱导因子-1α和环氧合酶-2及血管生成素-2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床病理意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、环氧合酶-2（Cox-2）与血管生成素-2（Ang-2）蛋白表达的相关性及临床病理意义。方法免疫组化SP法检测NSCLC中HIF-1α、Cox-2、Ang-2表达情况。结果46例NSCLC组织中HIF-1α、COX-2、Ang-2的阳性表达率明显高于癌旁肺组织（P〈0．05），与患者的年龄、性别、吸烟史、分化程度及组织学类型无明显关系（P〉0．05）；HIF-1α和Ang-2表达与淋巴结转移无明显关系（P〉0．05），但COX-2的表达与淋巴结转移有关（P〈0．05）；HIF-1α的表达与COX-2、Ang-2的表达呈正相关。结论HIF-1α、Cox-2、Ang-2在NSCLC中呈过表达，HIF-1α的表达与COX-2、Ang-2的表达呈正相关，HIF-1α可能通过调控Cox-2、Ang-2的表达，与NSCLC肿瘤血管的生成及预后有关。     

COX-2、HIF-1α在乳腺癌组织中的表达及其与微血管生成的关系

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与微血管密度（MVD）的关系。方法应用免疫组织化学方法检测50例乳腺癌、20例癌旁组织中COX-2、HIF-1α蛋白的表达情况，用CD34抗体标记乳腺癌血管内皮细胞，计算MVD。结果乳腺癌组织中COX-2的阳性表达率为66％（33／50），HIF-1α的阳性表达率为60％（30／50），显著高于癌旁组织（P〈0．01），在乳腺癌组织中COX-2、HIF-1α蛋白表达之间存在显著正相关（r=0．630，P〈0．01）。COX-2、HIF-1α表达与淋巴结转移、临床分期显著相关（P〈0．05），与患者的年龄、肿瘤大小无明显相关性（P〉0．05），COX-2、HIF-1α阳性的乳腺癌组织MVD高于阴性者，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 乳腺癌组织中存在COX-2、HIF-1α的高表达。COX-2蛋白可通过诱导HIF-1α蛋白的表达上调，增强乳腺癌细胞的侵袭力，促进乳腺癌浸润、转移。     

大鼠慢性脑低灌注模型再灌注脑组织HIF-1α、VEGF表达的意义

目的观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）在大鼠慢性脑低灌注后再灌注脑组织中表达的意义。方法SPF级雄性SD大鼠24只,随机分为两组,假手术组（S组）和再灌注组（R组）,每组12只。建立大鼠慢性脑缺血模型,6周后恢复血流灌注,于再灌注前即刻（R0）、再灌注1h（R1）、24h（R2）及72h（R1）行激光多普勒血流探测仪（LDPI）,检测脑皮层血流灌注量;其后采用qRT—PCR法,检测HIF-1α—mRNA、VEGF—mRNA在脑组织中的表达。结果大鼠慢性脑缺血再灌注后1h,实验侧脑皮层血流灌注量较对侧下降（7312±26．75）％,再灌注后24h脑皮层血流灌注量有所恢复,72h仍未达到基线水平;与S组比较,各组大鼠再灌注后的不同时点HIF-1α—mRNA、VEGF—mRNA均表达增高（P〈0．05）。结论HIF-1α、VEGF在大鼠慢性脑低灌注再灌注后表达上调,参与大鼠脑血管增殖及活性增强的病理过程,改善脑血流动力学。     

胆囊癌中微淋巴管密度与HIF-1α表达的相关性

目的研究分析微淋巴管密度（micro—lymphatic vessel density,MLVD）和缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）在胆囊癌组织中的表达情况及相关性。方法用免疫组织化学方法检测胆囊癌组织MLVD和HIF-1α的表达情况,分析两者在胆囊癌组织中表达的相关性。结果胆囊癌组织中MLVD和HIF-1α的表达明显高于在慢性胆囊炎组织中的表达,差异均有统计学意义（t=4．033和χ^2=22．323,P〈0．01）。胆囊癌组织中MLVD和HIF-1α的表达呈正相关（r=0．573,P〈0．05）。结论胆囊癌组织中存在HIF-1α的高表达,H1F-1α与胆囊癌组织MLVD呈高度正相关。     

扛板归对肝纤维化大鼠肝组织缺氧诱导因子1α及血管内皮生长因子表达的影响

目的研究中药扛板归对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠肝组织缺氧诱导因子1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的影响。方法72只SD大鼠,按随机数字表法分为六组,每组12只,用二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,不同浓度扛板归干预后,肝脏常规制片并HE染色观察病理形态学改变,免疫组织化学方法检测各组大鼠肝组织HIF-1α及VEGF蛋白表达的情况。结果扛板归高剂量组中HIF-1α及VEGF蛋白表达情况从（-）～（3＋）分别为1只,9只,1只,0只和1只,8只,2只,0只、中剂量组大鼠肝组织HIF-1α及VEGF蛋白表达从（-）-（3＋）分别为1只,7只,2只,0只和1只,6只,3只,0只,与模型组比较均明显降低（P〈0．01）。结论扛板归具有显著的抗肝纤维化,其机制可能通过降低HIF—1α及VEGF蛋白的表达而调控细胞外基质的代谢有关。     

缺氧诱导因子对肝癌细胞生长和侵袭能力的影响

目的检测在缺氧条件下缺氧诱导因子2α对肝癌SMMC-7721细胞生长和侵袭能力的影响。方法缺氧培养条件下脂质体Lipofectamine介导缺氧诱导因子（HIF-20α）脱氧寡核苷酸转染SMMC-7721肝癌细胞，测转染前后HIF-2α mRNA量和蛋白量检验转染效果；MTY法测定细胞生长和黏附能力变化；Transwell小室测定细胞的体外侵袭能力。结果HIF-2αmRNA和蛋白表达在反义转染组显著低于正义组、随机组与对照组（P〈0．01）。HIF-2仪表达阻断对细胞生长和活力无显著性影响（P〉0．05），但显著抑制体外粘附能力（抑制率16．99％～31．07％）和侵袭能力（抑制率17．9％）（P〈0．01）。结论HIF-2α表达阻断可抑制SMMC-7721肝癌细胞的黏附和侵袭活性。对其生长无显著影响。     

缺氧对肝癌细胞HepG2中HIF-1α和HKⅡ表达的影响

目的探讨缺氧对肿瘤细胞周期调控的机制及乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、己糖激酶Ⅱ(HKⅡ)表达的影响。方法人肝癌细胞HepG2分成3组:缺氧12h组、缺氧24h组及对照组。缺氧组分别在缺氧条件下(37℃,5%CO2、2.0%O2饱和度)培养12h和24h,对照组置于正常氧浓度条件下(37℃,5%CO2、21.0%O2饱和度)培养24h。流式细胞仪检测细胞周期分布,免疫组织化学S2P法检测HIF-1α表达,荧光定量PCR法检测HKⅡmRNA表达量。结果缺氧情况下细胞周期分析处于G0/G1期细胞百分比明显增多,处于G2/M期的细胞减少,并且可见到较明显的凋亡峰的形成,缺氧12h组、缺氧24h组的G0/G1期比例显著高于对照组(p<0.05);HIF-1α和HKⅡ在两组缺氧组与对照组比较,其表达量明显增加(p<0.05),缺氧24h组与缺氧12h组比较有显著性差异(p<0.05)。结论HIF-1α可刺激人肝癌细胞HKⅡ表达的增加,细胞阻滞在G0/G1期,以HIF-1α为药物靶点可望成为治疗肝癌基因治疗的新途径。     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者肝功能、胎盘组织中HSP70、HIF-1α的表达变化及其意义

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者肝功能指标、胎盘组织中热休克蛋白70(HSP70)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达变化及其意义。方法选取陕西省核工业二一五医院2015年1月—2017年1月收治的ICP患者69例作为ICP组,同期正常妊娠妇女60例作为对照组,检测两组的肝功能指标、胎盘组织中HSP70、HIF-1α的表达,并按照病情将ICP组分为轻度组、重度组进行分层分析。结果 ICP组患者的血清甘胆酸(GC)、总胆汁酸(TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(Total bilirubin,TBIL)水平均显著高于对照组(P0.05),ICP组患者的HSP70、HIF-1α蛋白表达程度、阳性表达率均显著高于对照组(P0.05),重度ICP组患者的血清GC、TBA、ALT、AST、TBIL水平均显著高于轻度ICP组(P0.05),重度ICP组患者的HSP70、HIF-1α蛋白表达程度显著高于轻度ICP组(P0.05)。结论 ICP患者血清GC、TBA、ALT、AST、TBIL水平及胎盘组织中HSP70、HIF-1α蛋白表达均显著的升高,并且与病情程度密切相关。