SARS疫苗的研究进展

SARS疫苗是控制预防SARS的最有力的武器,本文综述了SARS疫苗的研究基础、各种SARS疫苗及其可用性、疫苗研究中可能出现的问题和疫苗研制的前景.     

SARS疫苗研究进展

目前急需开发安全有效的疫苗来预防SARS相关冠状病毒(SARS-CoV)引起的感染.SARS-CoV灭活疫苗因易于生产可能首先用于临床;但安全性是主要问题.SARS-CoV纤突(S)蛋白是中和抗体的主要诱导物.S蛋白S1亚单位中的受体结合区(RBD)含有多个构象中和表位.这表明含RBD的重组蛋白和编码RBD序列的载体能用于研制安全有效的SARS疫苗.     

正在开发的抗SARS病毒抗体

美国马萨诸塞大学医学院马萨诸塞生物实验室(MBL)和Medarex公司的研究者能用抗体中和非人组织培养中的SARS病毒。     

SARS冠状病毒未知功能小蛋白大肠杆菌表达及条件优化

将人工合成的SARS-CoV三个未知功能小蛋白X4、X5和ORF10的编码基因克隆到载体pET32a中，构建其表达载体。再将这些表达载体转入大肠杆菌中进行表达，SDS-PAGE和Western blotting结果证明，X4、X5和ORF10三个基因在大肠杆菌中均获得表达。分别研究了温度、IPTG浓度、IPTG加入时间和诱导时间对重组蛋白表达的影响。通过正交分析，得到了上述三种重组蛋白的优化表达条件。根据最佳条件表达重组蛋白，获得重组蛋白占总蛋白的百分比分别是：X4，20%；X5，27.8%；ORF10，68.5%。     

借鉴HIV疫苗研制经验——加速SARS疫苗研制步伐

严重急性呼吸道综合征(SARS)是一种高度致死性疾病。加速研制安全有效的SARS疫苗的步伐是当今世界公共卫生领域迫切需要解决的问题。作者对人类免疫缺陷病毒与SARS-冠状病毒(CoV)之间的相似性以及加速研制SARS疫苗的方案作了综述。     

甘草酸对SARS冠状病毒的抗病毒活性

德国的研究者报道 ,在体外甘草酸可抑制SARS(严重急性呼吸综合症 )冠状病毒的复制 ,该研究小组研究了利巴韦林、6 -氮尿苷、吡唑呋林、麦考酚酸及甘草酸对从SARS患者中分离出的 2株冠状病毒 (FFM -1和FFM - 2 )的抗病毒活性 ,尤其研究者分析了非洲绿猴肾细胞株系细胞致细胞病性的诱导病毒 ,甘草酸具很大的抑制病毒复制的能力 ,在病毒吸附中或之后应用甘草酸的选择指数 >6 7,6 -氮尿苷和吡唑呋林的选择指数分别是 6和 1 2 ,而利巴韦林和麦考酚酸对病毒的复制没有影响。甘草酸不仅可抑制病毒的复制 ,还可抑制病毒的吸附并渗入病毒 ,在病…     

SARS疫苗:不可急于求成

在SARS病毒迅速蔓延之际,有几家国内的研究机构宣称可以在数月内研制出SARS疫苗。然而这些“豪言壮语”在现实面前只能化成泡沫。疫苗的研制是一项复杂而艰巨的任务。研制出成功的SARS疫苗的路究竟还有多长?有关专家提醒:由于疫苗的研制需要在大量的动物实验中进行疫苗的免疫原性、安全性等方面的一系列非常复杂的测试工作,需要足够的时间,不可急于求成。 在SARS疫苗开发中要注意哪些     

SARS疫苗研制问题

20 0 3年 5月 30日美国国立卫生研究院召开了 SARS研究会议 ,6月 17～ 18日世界卫生组织 (WHO)在马来西亚吉隆坡举行了全球 SARS会议 ,两个会议都讨论了 SARS疫苗研制问题。本文综合了有关疫苗研制的主要内容     

Discovery of Small Molecule Entry Inhibitors Targeting the Fusion Peptide of SARS-CoV-2 Spike Protein

SARS-CoV-2 entry into host cells relies on the spike (S) protein binding to the human ACE2 receptor. In this study, we investigated the structural dynamics of the viral S protein at the fusion peptide (FP) domain and small molecule binding for therapeutics development. Following comparative modeling analysis and docking studies of our previously identified fusion inhibitor chlorcyclizine, we performed a pharmacophore-based virtual screen and identified two novel chemotypes of entry inhibitors targeting the FP. The compounds were evaluated in the pseudoparticle viral entry assay and SARS-CoV-2 cytopathic effect assay and showed single-digital micromole inhibition against SARS-CoV-2 as well as SARS-CoV-1 and MERS. The characterization of the FP binding site of SARS-CoV-2 S protein provides a promising target for the structure-based development of small molecule entry inhibitors as drug candidates for the treatment of COVID-19.     

20条SARS病毒全基因组序列的突变分析：负选择作用于复制酶ORF1b和spike基因的证据

AIM: Recently, more SARS-CoV virus genome sequences are released to the GenBank database, The aim of thisstudy is to reveal the evolution forces of SARS-CoV virus by analyzing the nucleotide mutations in these sequences.METHODS: We obtained 20 SARS-CoV virus genome sequences from NCBI database, and calculated the ratio ofnon-synonymous nucleotide substitution per non-synonymous site (Ka) and synonymous nucleotide substitutionper synonymous site (Ks) for SARS-CoV virus genes. RESULTS: The Ka/Ks ratios for replicase polyprotein ORF1a,ORF1b, and spike protein gene are 1.09 (P=0.6501), 0.38 (P=0.0074), 0.65 (P=0.0685) respectively.CONCLUSION: SARS-CoV virus replicase polyprotein ORFlb is undergoing negative selection; negative selectionforce is also probably operating on spike protein gene. These results provide basis for future developing a new drugand vaccine against SARS.     

SARS冠状病毒半胱氨酸蛋白酶3CLpro的克隆表达及分离纯化

SARS（严重急性呼吸综合征）是由一种新型的人类冠状病毒引起的。由于SARS冠状病毒3CL蛋白酶在病毒的复制翻译中起关键作用，所以成为抗SARS药物设计的关键靶标之一。该研究中，利用以pET28a为载体的高效原核表达系统，克隆表达出SARS冠状病毒3CL蛋白酶，然后由NTA-Ni^2＋亲和层析柱对表达的蛋白进行分离纯化。3CL蛋白酶在大肠杆菌表达系统中的成功表达为今后进一步筛选抗SARS病毒药物奠定基础。     

Peptide Nanoparticles as Novel Immunogens: Design and Analysis of a Prototypic Severe Acute Respiratory Syndrome Vaccine

Severe acute respiratory syndrome (SARS) is an infectious disease caused by a novel coronavirus that cost nearly 800 lives. While there have been no recent outbreaks of the disease, the threat remains as SARS coronavirus (SARS‐CoV) like strains still exist in animal reservoirs. Therefore, the development of a vaccine against SARS is in grave need. Here, we have designed and produced a prototypic SARS vaccine: a self‐assembling polypeptide nanoparticle that repetitively displays a SARS B‐cell epitope from the C‐terminal heptad repeat of the virus’ spike protein. Biophysical analyses with circular dichroism, transmission electron microscopy and dynamic light scattering confirmed the computational design showing α‐helcial nanoparticles with sizes of about 25 nm. Immunization experiments with no adjuvants were performed with BALB/c mice. An investigation of the binding properties of the elicited antibodies showed that they were highly conformation specific for the coiled‐coil epitope because they specifically recognized the native trimeric conformation of C‐terminal heptad repeat region. Consequently, the antisera exhibited neutralization activity in an in vitro infection inhibition assay. We conclude that these peptide nanoparticles represent a promising platform for vaccine design, in particular for diseases that are characterized by neutralizing epitopes with coiled‐coil conformation such as SARS‐CoV or other enveloped viruses.     

大鼠耳蜗背核神经元第一动作电位延时的特性

目的:探讨大鼠耳蜗背核神经元第一动作电位延时的特性。方法:采用在体细胞外记录方法,通过给予单耳不同频率和声强的短纯音刺激,记录成年SD大鼠耳蜗背核神经元反应,并分别以动作电位发放数(spike counts,SC)和第一动作电位延时(first spike latency,FSL)为评价指标,分析比较它们对同一刺激的反应稳定性。结果:共记录到21个单单位(single-unit)神经元反应。这些神经元均以burst spikes这种多放电率的形式发放。以发放数为评价指标,这些神经元分别表现出单调(76%)、饱和(19%)和非单调(5%)三种声强反应。而第一动作电位延时展示出同一规律的FSL-声强反应曲线:FSL随着声强的增大而缩短。SC-频率曲线呈现多形性,而FSL-频率曲线呈"V"字型。结论:在大鼠耳蜗背核神经元,相比发放数,第一动作电位延时对同一刺激的反应稳定性更好。     

SARS抗体酶联诊断试剂盒比较

目的：对国内SARS抗体（IgG和／或总抗体）检测试剂盒的质量进行比较和评价。方法：本文选用4种国内SARS抗体ELISA检测试剂盒分别检测已知同样样品，并对结果进行比较。结果：4种试剂盒的阳性参考品符合率均为100％（18／18），阴性参考品符合率均为100％（20／20）；3批D试剂盒的精密性（10／10）试验的CV值均在3％以下，A试剂盒及3批B试剂盒的的CV值均在5％-10％之间，3批C试剂盒的CV值均在10％-15％之间；B、C、D3种试剂盒的灵敏度均达到5／7或以上，其中第1批C试剂盒及前2批D试剂盒灵敏度较高，均达到了7／7。结论：4种试剂盒均有较好的灵敏度、特异性及检出率。     

关于研究非典疫苗的思考

文章综述了SARS病毒研究的最新进展、病毒疫苗研究状况、概括了冠状病毒疫苗研究的最新进展，在此基础上，作者提出了针对SARS病毒疫苗研制的基本策略。     

中国SARS流行趋势分析及SARS用药ADR监测

SARS是由冠状病毒的新变种引起的一种新的呼吸道急性传染病,并已经在全球蔓延.本文综合了国内外相关资料,对SARS的流行趋势以及相关用药ADR监测做一简要综述.     

安徽省部分中学生对严重急性呼吸综合征知识了解的调查

目的 :了解含山县部分在校中学生对严重急性呼吸综合征 (SARS)的了解状况 ,为今后开展SARS的防治提供资料 ,提高中学生对SARS的认识水平。方法 :采用分层整群抽样的方法 ,对5所中学的10个班级的300名同学通过自设问卷进行调查。结果 :综合认识率3.7 % ,但隔离认识率98.0 % ,支持率97.7 % ,87 9 %的学生认为它和乙肝一样是一种传染病 ,75 8 %的学生认同口罩的层数应为12～24层 ,93 0 %的人知道SARS的潜伏期是4～5天 ,对于SARS ,93 3 %的学生保持警惕 ,坚持预防为主 ,89 6 %的学生相信科学最终可以战胜。SARS的早期症状、传播途径、SARS前后的卫生习惯和现阶段如何预防SARS的调查评分显示 ,城市评分高于农村。结论 :对SARS的综合认识率较低且存在城市和农村差异 ,宣传教育工作有待加强 ,应科学的看待和预防SARS。     

Fc融合蛋白在药学领域的研究进展

Fc融合蛋白是指利用基因工程等技术将某种具有生物活性的功能蛋白分子与Fc片段融合而产生的新型重组蛋白,其不仅保留了功能蛋白分子的生物学活性,还具有一些抗体的性质,如通过结合相关Fc受体延长半衰期和引发抗体依赖细胞介导的细胞毒性效应等。对Fc融合蛋白及其在药学领域的研究进展进行了综述。