酸性成纤维细胞生长因子及表皮生长因子对兔韧带细胞增殖的影响

目的：观察酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和表皮生长因子(EGF)对内侧副韧带(MCL)和前十字韧带(ACL)细胞增殖行为的影响。方法：培养10周龄新西兰白兔内侧副韧带和前十字韧带细胞，在培养液中分别加入aFGF和EGF，以XTT方法测定细胞的增殖行为。结果：aFGF在1ng／ml时即对两种细胞具有显著的促进增殖作用，其浓度达50ng／ml时，对MCL细胞的促进作用最大，达100ng／ml时对ACL细胞的促进作用最大。EGF在0．78ng／ml时即对MCL细胞有显著的促增殖作用，在1．56ng／ml时始对ACL细胞有显著的促增殖作用，其浓度达3．125ng／ml时对2种细胞的促进作用最大。aFGF和EGF在超过其最佳浓度后，随浓度升高促进作用均下降。结论：aFGF和EGF可以促进韧带成纤维细胞增殖。     

健脾益气法对严重创伤软组织损伤创面组织中碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子的影响

目的:采用眼眶静脉放血结合刀割法制备严重创伤的动物模型,观察创面修复过程中创面组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)以及表皮生长因子(EGF)表达,研究健脾益气法促进严重创伤大鼠软组织修复可能的作用机制.方法:40只SD健康成年大鼠,采用眼眶静脉放血结合刀割法制备严重创伤软组织损伤模型,然后将存活大鼠(33只)随机分为健脾益气组、活血化瘀组、模型组.各组大鼠均在第3、7、14天取部分创面及少许周围的正常皮肤,采用免疫组织化学染色后观察创面肉芽组织中bFGF和EGF表达.结果:造模后3、7、14 d,健脾益气组、活血化瘀组大鼠创面组织中bFGF和EGF表达均较模型组大鼠创面组织中的含量明显增强.与活血化瘀组相比较,造模后3、7 d,健脾益气组大鼠创面组织中bFGF和EGF含量较高(P＜0.05);但造模后14 d,两组大鼠创面组织中bFGF和EGF的含量无明显差异(P＞0.05).结论:健脾益气法具有增强严重创伤软组织损伤创面组织中bFGF和EGF表达的作用.     

人表皮生长因子与碱性成纤维细胞生长因子纳米缓释剂对成纤维细胞的影响

目的:制备碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、人表皮生长因子(EGF)可降解缓释微球,考察其生物活性的保存情况,以及它们对成纤维细胞的作用。方法:采用改良的乳化冷凝法交联制备复合bFGF、EGF的明胶缓释微球,将它们加入成纤维细胞的培养液中,用细胞计数法、四甲基偶氮唑盐微量反应比色法(MTT法)测定细胞增殖情况。结果:复合bFGF、EGF的缓释微球平均粒径(11.32±3.64)μm;培养1天后各组细胞计数、吸光度(A)值差异均无显著性;5天后,两种生长因子缓释微球组细胞计数、吸光度(A)值明显高于对照组;7天后,两种生长因子缓释微球组值仍高于其它组,但差异无显著性。结论:复合bFGF、EGF的缓释微球制备工艺简便,成球性好;能较长时间地持续释放活性bFGF、EGF,可促进成纤维细胞的增殖。     

部分创面外用抗菌药物与成纤维细胞生长因子2、表皮生长因子、重组人生长激素对成纤维细胞生物学特性影响的实验研究

目的观察部分创面外用抗菌药物与成纤维细胞生长因子(FGF)2、表皮生长因子 (EGF)、重组人生长激素(rhGH)对成纤维细胞生物学特性的影响。方法体外培养成纤维细胞, 按所加药物不同分为对照组(常规培养)、丁胺卡那霉素(0．021、0．210、2．100 mg/L)组、庆大霉素(5、 50、500 mg/L)组、氯霉素(0．01、0．10、1．00 mg/L)组、磺胺米隆(5、10 g/L)组、FGF2(2 400 U/ml)组、 EGF(2 000 U/ml)组及rhGH(0．016、0．160、1．600 g/L)组。用噻唑蓝(MTT)法测定各组成纤维细胞增殖活性[吸光度(A)值],用流式细胞仪检测细胞周期,并于显微镜下观察细胞形态的变化。结果 (1)MTT法检测:与对照组A值0．455 3±0．021 7比较,各种剂量丁胺卡那霉素组、庆大霉素组、氯霉素组、磺胺米隆组成纤维细胞A值均明显降低(P<0．05或0．01),其中磺胺米隆(5、10 g/L)组降低最明显,分别为0．101 3±0．001 1、0．095 0±0．004 1(P<0．01)。FGF2组及0．016 g/L rhGH 组细胞A值明显高于对照组(P<0．05),而EGF组及0.160、1．600 g/L rhGH组A值与对照组接近 (P>0．05)。(2)细胞周期检测:对照组细胞增殖指数(PI)为(9．63±0．45)％,与之比较,0．210 mg/L丁胺卡那霉素组细胞PI值无明显变化(P>0．05),FGF2组、EGF组及0．016 g/L rhGH组PI值均明显升高,分别为(46．76±2．33)％、(42．30±1．41)％、(13．29±0．47)％(P<0．05或0．01)。 (3)形态学观察:对照组、EGF组及0．160、1．600 g/L rhGH组成纤维细胞数目较多,呈长条形或梭形, 轮廓不清,透明度高;丁胺卡那霉素组、庆大霉素组、氯霉素组、磺胺米隆组细胞数目较少,形态不规则,轮廓清晰,透明度低,细胞内多有颗粒样物质及空泡;FGF2组、0．016 g/L rhGH组细胞分布均匀、密集,呈长条形或梭形,核分裂相多见,轮廓不清,透明度高。结论不同创面外用药物对成纤维细胞生物学特性的影响各异,在创面修复过程中应选择合适的创面外用药物,以促进愈合并抑制瘢痕增生。     

碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子对骨骼肌源性干细胞的促增殖效应

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）和表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）单独及联合应用对骨骼肌源性干细胞（muscle derived stem cells，MDSCs）生长的影响。方法取出生24h内的昆明小鼠15只，采用连续预贴壁法从小鼠后肢肌分离培养MDSCs，用含2％胎牛血清的DMEM培养基促进其向骨骼肌细胞分化。取原代MDSCs及MDSCs分化细胞，采用免疫细胞化学染色检测干细胞标志Sca-1和骨骼肌细胞标志α-Sarcomeric肌动蛋白的表达。HE染色观察细胞肌管形成。MTT比色法检测不同浓度（6．25、12．50、25．00、50．00、100．00ng／ml）的bFGF和EGF单独应用96h对MDSCs增殖的影响以及二者（100．00ng／ml）联合作用24、48、72和96h对MDSCs增殖的影响。结果从新生小鼠后肢肌成功分离培养MDSCs，免疫细胞化学染色90％以上的MDSCs呈Sca-1阳性，分化形成的肌管呈α—Sarcomeric肌动蛋白阳性。HE染色可见肌管形成。bFGF、EGF对MDSCs的促增殖效应随浓度的增加而增加。与阴性对照组比较，bFGF于12．50ng／ml出现促增殖效应（P〈0．05）；25．00ng／ml组与12．50ng／ml组比较，作用提高（P〈0．01）；50．00、100．00ng／ml组较25．00ng／ml组无明显提升（P〉0．05）；EGF的作用与bFGF类似，但于50．00ng／ml时趋于饱和。与阴性对照组比较，EGF于72h、bFGF于96h表现促增殖效应（P〈0．01），而二者联合应用于24h即表现促增殖效应（P〈0．01），并于48、72和96h增殖效应均较单独应用显著提高（P〈0．05）。结论bFGF和EGF都能促进MDSCs的增殖，联合作用更快、更强。     

膝关节韧带成纤维细胞的培养及其生物学特性分析

目的为韧带细胞的病理、生理及组织工程学等研究提供方法及体外模型。方法采用胶原酶分离新西兰白兔的膝关节前十字韧带(anteriorcruciateligament,ACL)、内侧副韧带(medialcol-lateralligament,MCL)及人膝关节ACL和后十字韧带(posteriorcruciateligament,PCL)细胞,选择合适的条件进行体外培养,分析细胞的生物学特性。结果在含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液中细胞生长良好、增殖快,但RPMI1640及F12培养液不适宜这些细胞的生长。在体外培养条件下兔ACL和MCL细胞形态相似,但MCL较ACL生长快,两种细胞合成胶原的总量相同。相对MCL细胞,ACL合成的Ⅰ型胶原较多而Ⅲ型胶原较少。人ACL和PCL细胞形态及生长特性基本相似,免疫细胞学方法检测表明两种细胞均有Ⅰ、Ⅲ型胶原及纤维连接蛋白表达。结论体外培养的人ACL和PCL细胞生物学特性相似。兔ACL和MCL细胞形态相似,但生物学特性存在差异。本实验为韧带成纤维细胞的培养及相关研究提供了简单、有效的方法。     

ACL重建、半腱肌转位悬吊治疗急性ACL合并MCL损伤疗效分析

目的 探讨前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建、半腱肌转位悬吊治疗急性ACL合并膝内侧副韧带(medial collateral ligament,MCL)损伤的疗效.方法 对2013年1月至2018年1月我院手术治疗的急性ACL断裂并MCL损伤的45例患者进行前瞻性研究,按入...     

表皮细胞、成纤维细胞和几丁质-胶原蛋白复合人工皮的体外构建

目的 探讨几丁质—胶原蛋白膜作为表皮细胞、成纤维细胞培养支架的可能性，体外构建包含双层细胞的复合皮。方法 取健康成人环切包皮，分离成纤维细胞、表皮细胞，分别制成单细胞悬液，将几丁质-胶原蛋白膜(有孔面向上)平铺于60mm培养皿中，首先接种成纤维细胞，培养2d后，将含10％小牛血清的DMEM更换成完全型DMEM，翻转膜，使光滑面朝上，再种植表皮细胞，每日换液。定期观察细胞与材料的粘附、细胞贴壁及其生长增殖情况。结果 几丁质—胶原蛋白膜对成纤维细胞、表皮细胞无明显毒性作用，成纤维细胞培养1d后，细胞贴附于材料支架，细胞胞体较大，呈典型的梭形。加入表皮细胞复合培养2d示表皮细胞贴壁生长，并分化、增殖。复合皮构建2周，网格支架及孔内均有大量细胞生长，膜表面细胞融合成片，表皮细胞分化形成复层。结论 几丁质—胶原蛋白膜对细胞无毒性，有利于培养细胞的粘附、生长。在体外可以构建成功类似生理性皮肤的人工皮肤。     

表皮生长因子与碱性成纤维细胞生长因子促进创面修复的比较研究

目的　比较重组人表皮生长因子 (rhEGF)与重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)促进创面修复的效应及其作用机制。　方法　选用 12只大耳白兔 2 4只耳上的 72个创面 ,随机分为rhEGF(10 μg/cm2 )治疗组、rhbFGF(10 0AU/cm2 )治疗组和对照组 (涂以 1%磺胺嘧啶银霜 )。观察创面的愈合情况 ,分别取不同时段的标本进行病理学、电镜检查 ,并通过原位杂交检测标本中整合素 β1mRNA的表达情况。　结果　两治疗组整合素 β1mRNA的表达明显高于对照组 ;创面修复的时间明显比对照组快 ,且修复质量较对照组高 (P <0 .0 5 ) ;成纤维细胞数和毛细血管胚芽数与对照组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。　结论　rhEGF、rhbFGF均能提高创面修复质量 ,在修复早、中期使用rhbFGF能促进肉芽组织生长 ;中、晚期使用rhEGF能加速创面的再上皮化。根据时效 ,联合应用rhEGF、rhbFGF可获得最佳效价比。     

碱性成纤维细胞生长因子基因转染人表皮细胞及其表达

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达载体(pEGFP-C3-bFGF)能否转染体外培养的人表皮细胞并表达.方法 采用脂质体(LipofectamineTM 2000)转染法,将pEGFP-C3-bFGF转染至人表皮细胞系(HEKa细胞)中,在荧光显微镜下观察其瞬时表达及细胞形态.以同期培养的表皮细胞作为阴性对照,免疫细胞化学染色和免疫荧光标记法检测实验组及对照组中β1整合素、CKl9、CK14及CK10在表皮细胞中表达的差异.结果 荧光显微镜下观察基因转染率为31.6%,转染的细胞体积小,呈圆形或圆梭形,核质比大.免疫细胞化学染色结果显示,实验组细胞中CK19、CK14表达增强,CK10表达减弱.免疫荧光染色结果显示,转染阳性细胞β1整合素弱表达分布在胞膜上,CK19、CK14在胞膜和胞质中表达,CK10表达为阴性.结论 pEGFP-C3-bFGF能够转染至人表皮细胞并表达,为探讨bFGF调控表皮细胞去分化的分子机制提供实验参考.     

肘关节内侧副韧带前束重建的生物力学研究

目的通过测量肘关节内侧副韧带(medial collateral ligament,MCL)前束生物力学指标,探讨前束完整及重建后对肘关节外翻稳定性的影响,评价采用人工肌腱、界面螺钉重建MCL前束疗效。方法成人完整上肢标本12具,男8具,女4具;左、右侧各6具;制成肘关节"骨-韧带"标本。采用生物力学及压敏胶片测量方法,分别测量MCL前束完整(对照组)及使用人工肌腱、界面螺钉重建后(实验组)肘关节屈曲0、30、60、90°时关节外翻松弛度、肱尺关节受力面积及肘关节内压强。结果两组在肘关节不同屈曲角度下,组内及组间关节松弛度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。除肘关节屈曲0°时两组肘关节压强小于其余屈曲角度(P<0.05),及对照组小于实验组(P<0.05)外,两组其余各角度组内及组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。除对照组内肘关节屈曲0°时肱尺关节受力面积大于其余屈曲角度(P<0.05)外,两组其余各角度组内及组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 MCL前束对维持肘关节外翻稳定性具有重要意义,金属界面螺钉加人工肌腱重建后可即刻恢复内侧稳定。     

血小板源性生长因子对大鼠内侧侧副韧带愈合的影响

目的观察局部应用血小板源性生长因子B链(plateledderivedgrowthfactorBB,PDGF-BB)对韧带愈合质量的影响。方法成年雄性Wistar大鼠48只,随机分为实验组(A组)与对照组(B组),每组24只。制备右膝关节内侧侧副韧带(medicalcollateralligament,MCL)断裂模型,A组每只大鼠在伤口局部注入5μgPDGF-BB,然后用9-0可吸收缝线行褥式缝合;B组伤口直接缝合。术后2周,切取韧带行组织学、苦味酸-天狼猩红染色和免疫组织化学观察。结果A组韧带成纤维细胞数量为213.44±15.32,B组为180.42±12.78,二者差异有统计学意义(P<0.01),且A组细胞较B组更成熟,排列更规则。A组胶原类型、含量及其交联程度均较B组有改善(P<0.01)。结论PDGF-BB对韧带的愈合具有促进作用。     

关节镜下膝前交叉韧带重建术疗效分析

目的：探讨自体中1／3骨－髌腱－骨（B－PT－B）重建前交叉韧带（ACL）的临床效果。方法：1996年9月－2000年10月对13例膝ACL损伤，其中男9例，女4例，年龄23－45岁。均采用关节镜下自体中1／3B－PT－B重建ACL，挤压螺钉固定，治疗CAL损伤后关节不稳定，术前抽屉试验13例均为阳性，轴移试验4例阳性，Lachman试验7例阳性，术后获随访5－25个月，平均15个月。结果：术后屉试验，轴移试验和Lachman试验均转阴性。按照Bosaotta的术后临床指标评价方法，优9例，良3例，可1例，所有患者均感膝关节稳定性明显改善。结论：关节镜下自体中1／3B－PT－B重建ACL损伤疗效显著。     

膝关节内侧副韧带急性损伤诊治方法的探讨

目的探讨膝关节内侧副韧带急性损伤的诊治方法. 方法 1998年8月～2003年8月,对收治的87例膝关节内侧副韧带急性损伤均进行膝关节功能及MRI检查.其中35例Ⅰ、Ⅱ度损伤者行保守治疗;52例Ⅲ度损伤者行关节镜探查术,修复内侧副韧带,其中有21例应用前半部的股薄肌肌腱加强. 结果 32例Ⅰ、Ⅱ度损伤患者获6～24个月随访,平均13个月,按Lysholm评分标准,优良率达93.7%;50例Ⅲ度损伤患者术后获随访7～72个月,平均16个月,优良率达90%. 结论 MRI是确诊内侧副韧带Ⅰ、Ⅱ度损伤的重要手段,膝伸直位外翻应力时的直向不稳定是确诊Ⅲ度损伤的主要方法.Ⅰ、Ⅱ度损伤以保守治疗效果好,Ⅲ度损伤宜选择手术治疗.     

关节镜下同种异体骨-前交叉韧带-骨移植重建前交叉韧带的疗效分析

目的前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)是膝关节重要的稳定结构,探讨关节镜下应用深低温冻存同种异体骨-ACL-骨移植重建ACL的方法及疗效。方法 2007年10月-2010年2月,对22例ACL损伤患者于关节镜下采用深低温冻存的同种异体骨-ACL-骨移植重建ACL。男15例,女7例;年龄19～55岁,平均27.6岁。损伤原因:运动伤12例,摔伤1例,重物压伤2例,交通事故伤7例。左膝14例,右膝8例。病程7 d～12个月,中位病程65 d。前抽屉试验阳性19例,轴移试验阳性19例,Lachman试验阳性21例。术前根据国际膝关节评分委员会(IKDC)分级评定标准,异常5例,严重异常17例;IKDC主观评分为(49.6±6.9)分,Lysholm评分为(48.5±5.3)分,Tegner膝关节运动功能评分受伤前为(6.8±1.2)分,受伤后术前为(2.1±0.5)分。20例行MRI检查,其中18例提示ACL损伤。结果手术时间65～85 min,平均75 min;出血量80～150 mL,平均110 mL。术后切口均Ⅰ期愈合,均无免疫排斥反应及下肢深静脉血栓形成等并发症发生。患者术后均获随访,随访时间7～34个月,平均18个月。末次随访时无伸膝受限;屈膝活动度为125～135°,平均130.5°。前抽屉试验阳性2例,轴移试验阳性1例,Lachman试验阳性3例。根据IKDC分级评定标准:正常10例,接近正常11例,异常1例;IKDC主观评分为(90.0±5.8)分,与术前比较差异有统计学意义(t=4.653,P=0.021)。Lysholm评分为(91.6±7.1)分,与术前比较差异有统计学意义(t=4.231,P=0.028)。Tegner评分为(6.1±1.5)分,与受伤前比较差异无统计学意义(t=1.321,P=0.070),与受伤后术前比较差异有统计学意义(t=3.815,P=0.033)。术后6个月19例关节镜复查示无移植韧带断裂,17例移植物张力正常,2例稍松弛。结论关节镜下应用深低温冻存的同种异体骨-ACL-骨移植重建ACL,可达到ACL解剖重建,术后膝关节功能恢复良好。     

关节镜下不同移植物重建前交叉韧带68例

目的总结关节镜下不同移植物重建前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)的疗效。方法回顾性分析1999年5月～2005年5月收治的68例ACL损伤患者治疗方法。其中应用自体中1/3骨-髌韧带-骨移植物和界面螺钉固定26例(A组),男16例,女10例;年龄16～45岁,平均26.4岁;左膝14例,右膝12例;损伤至手术时间1周～15个月,平均3.1个月;术前Lysholm评分65.3±4.8分,IKDC主观评分43.5±5.2分。应用4股半腱肌腱内扣式钮扣钢板悬吊固定38例(B组),男24例,女14例;年龄13～48岁,平均24.6岁;左膝27例,右膝11例;损伤至手术时间1周～16个月,平均4.3个月;术前Lysholm评分68.4±5.6分,IKDC主观评分41.4±6.2分。异体中1/3髌韧带界面螺钉固定4例(C组),男3例,女1例;年龄55～65岁;左膝3例,右膝1例;损伤至手术时间2周～28个月,平均7.3个月;术前Lysholm评分60.3±6.7分,IKDC主观评分40.5±3.8分。结果患者获随访12～36个月,其中A组平均随访17.5个月,B组18.5个月,C组16.5个月。均未发现关节内感染、下肢深静脉血栓形成和血管、神经损伤等并发症。A组23例术后膝关节恢复至损伤前运动水平,未发生髌骨骨折;Lysholm评分95.1±4.3分,优18例,良5例,一般3例,优良率88.5%;IKDC评分93.7±3.8分,膝关节功能正常19例(73.1%),一般5例(19.2%),较差2例(7.7%)。B组33例术后膝关节恢复至损伤前运动水平;Lysholm评分93.0±5.9分,优28例,良5例,一般5例,优良率86.8%。IKDC评分95.7±4.7分,膝关节功能正常30例(78.9%),一般5例(13.2%),较差3例(7.9%)。C组4例术后膝关节均基本恢复至损伤前运动水平;Lysholm评分92.4±4.3分,优3例,良1例;IKDC评分94.8±3.6分,膝关节功能正常3例,一般1例,均未见明显关节积液。3组患者手术前后Lysholm评分及IKDC评分差异均有统计学意义(P<0.01),术后评分优于术前;组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论骨-髌腱-骨和股薄肌-半腱肌腱,是修复ACL的良好移植物。青少年骨骺未闭患者,半腱肌腱移植是较好的方式;老年患者为减少取移植物的并发症,深低温保存的同种异体髌韧带移植也是一个可以选择的途径。     

骨相关生长因子对兔骨髓基质干细胞生长及分化的量效作用

目的研究地塞米松、重组人成纤维细胞生长因子（recombinant human fibroblast growth factor，rhFGF）及重组人骨形成蛋白2（recombinant human bone morphogenetic protein 2，rhBMP-2）对兔骨髓基质干细胞（marrow slromal stem cells，MSCs）生长及分化的量效作用，为其在骨组织上程中的应用提供实验基础。方法体外分离培养免MSCs，分为1个空白对照组及9个实验组。实验组分别与终浓度为10^-8、10^-7、10^-6mol／L地塞米松；终浓度为50、200、500ngng/ml FGF；终浓度为50、500、1000ng／ml rhBMP-2培养。于4、7d终止培养并测定细胞总蛋白及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase。ALP）活性。结果与空白对照组比较，10mol／L地塞米松显著抑制细胞蛋白合成（P〈0．05），而10^-8、10^-7mol／L地塞米松对细胞蛋白合成无明显影响；10^-6,10^-7mol／L地塞米松刺激MSCs高度表达ALP（P〈0．05）。rhFGF各浓度组显著促进细胞蛋白合成量差异有统计学意义（P〈0．05），表现ALP活性抑制。rhBMP-2符浓度组对细胞蛋白合成九明显影响；50ng／ml rhBMP2不影响MSCs的ALP活性；当浓度增至500ng／ml与1000ng／ml时，ALP活性显苦增加（P〈0．05）。结论10^-7mol／L地塞米松及500、1000ng／ml rhBMP-2在不影响MSCs增殖的前提下，适当浓度能显著促进MSCs向成骨细胞转化，在骨组织工程的研究中有重要的应用价值。     

LARS与自体骨-髌腱-骨重建膝关节前交叉韧带急性损伤的疗效比较

目的比较LARS(ligament advanced reinforcement system)与自体骨-髌腱-骨(bone-patellar tendon-bone,BPTB)移植重建膝关节前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)的疗效。方法将2007年7月-2011年7月收治并符合选择标准的50例单膝ACL损伤患者,根据重建韧带材料不同随机分为两组。关节镜下24例采用LARS重建(LARS组),26例采用BPTB重建(BPTB组)。两组患者性别、年龄、受伤至手术时间及致伤原因等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。术后两组采用相同方法行膝关节功能锻炼。结果术后两组患者切口均Ⅰ期愈合。患者均获随访,随访时间2～3年。Lachman试验、前抽屉试验和轴移试验均为阴性。两组各1例发生股骨、胫骨螺钉松动;BPTB组2例、LARS组1例发生膝关节疼痛。LARS组术后2、6个月时Lysholm评分及Tegner评分均显著高于BPTB组(P<0.05),术后12、24个月时差异无统计学意义(P>0.05)。两组术后各时间点国际膝关节评分委员会(IKDC)评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。KT-1000测定两组术后各时间点胫骨前移距离比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论与自体BPTB相比,LARS重建ACL手术创伤小、术后早期膝关节功能恢复快,但远期疗效相似。     

钒酸盐对内侧副韧带成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的 探讨钒酸盐对大鼠内侧副韧带(medial collateral ligament,MCL)成纤维细胞增殖和I型胶原合成的影响. 方法 选取成年雄性SD大鼠12只,体重350～375 g,无菌切取MCL,以眼科剪剪成1 mill×l mm×1 mm大小后置于培养瓶中,0.25%胰蛋白酶消化传代制备MCL成纤维细胞.取第3代MCL成纤维细胞,分别加入不同浓度(O、1.0、2.5、5.0 ng/mL)的钒酸盐,采用MTT法测定细胞增殖,ELISA法及RT-PCR测定各浓度组细胞I型胶原的合成和I型胶原基因的表达,每浓度组样本量均为12. 结果 MTT法测得0～5 ng/mL4个浓度组细胞增殖的吸光度(A)值分别为0.213±0.016、0.327 4±0.023、0.449 4±0.137和0.561±4-0.028,1.0、2.5、5.0 ng/mL浓度组钒酸盐对MCL成纤维细胞有明显促增殖作用,与0 ng/mL浓度组比较差异均有统计学意义(P<0.05).ELISA法测得0～5 ng/mL各浓度组I型胶原的A值分别为0.47 4±0.02、0.51 4±0.03、0.60 4±0.01和0.72 4±0.02,1.0、2.5、5.0 ng/mL浓度组钒酸盐能明显促进I型胶原的合成,与0 ng/mL浓度组比较差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR测得0～5 rig/mL各浓度组I型胶原条带密度比值分别为1.37 4±0.76、1.97 4±0.53、2.41 4±0.94和2.73 4±0.82,1.0、2.5、5.0 ng/mL浓度组的I型胶原基因表达显著高于0 rig/mL浓度组,比较差异有统计学意义(P<0.05).以上每项指标1.0、2.5、5.0 rig/mE三浓度组间比较差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 钒酸盐具有促进MCL成纤维细胞的增殖和I型胶原合成的能力,可能为治疗MCL损伤提供一种新的途径.     

雌激素和碱性成纤维细胞生长因子促进血管瘤增殖的体外实验研究

目的研究雌二醇（estradiol，E2）和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）在促进血管瘤血管内皮细胞（hemangioma vascular endothelial cell，HVEC）增殖中的作用和相互关系，以及他莫昔芬（tamoxifen，TAM）对其促进作用的影响。方法取2例皮肤增生期草莓状血管瘤标本进行HVEC培养。传至第3代时采用无雌激素培养液IMEM进行干预实验，实验分5组：1组为对照组，仅IMEM培养；2组加入17-β-E2；3组加入bFGF；4组加入17-β-E2和bFGF；5组加入17-β-E2、bFGF和4-羟基-他莫昔芬（4-OH—tamoxifen，4-OH—TAM）。药物浓度分别为：17-β-E2 100pg／ml，bFGF 10ng／ml，4-OH—TAM 1×10^-6mol／L。分别在培养第0、3、6和9天进行细胞计数（cell count，CC）和DNA增殖指数（proliferation index，PI）检测。结果2例血管瘤HVEC体外成功培养，细胞呈鹅卵石样，Ⅶ因子相关抗原（factor Ⅷ—relatedantigen，又称von Willebrand factor，vWF）染色阳性。例1在第9天，1组示HVEC增殖不明显，2组CC及PI为1组的1．4倍和1．6倍（P〈0．05）；3组CC及PI为1组的2．6倍和2．3倍（P〈0．01）；4组CC及PI为1组的3．7倍和2．9倍（P〈0．01）；5组的CC和PI与1组相似（P〉0．05）。例2的实验结果与例1相似。结论体外实验显示，bFGF可显著促进血管瘤增殖；而雌激素和bFGF的共同存在对血管瘤的促增殖作用更加明显，二者存在协同作用；TAM则能明显抑制其协同促增殖作用。